李國柱,王群霞,唐 月,王冉冉,徐 巖
(第一師阿拉爾市食品藥品檢驗(yàn)所,新疆 阿拉爾 843300)
我國明文規(guī)定劇毒、高毒農(nóng)藥不能用于防治衛(wèi)生害蟲,但在蔬菜、水果等農(nóng)作物種植過程中,很多農(nóng)戶對正確、合理地使用農(nóng)藥的意識不足,造成大量蔬菜水果農(nóng)藥殘留超標(biāo)[1]。殘留超標(biāo)的農(nóng)藥食用進(jìn)入人體后,會對其肝、腎及神經(jīng)系統(tǒng)等器官造成損害。過量農(nóng)藥在人體內(nèi)聚集,超出其承受極限還會引起一系列的慢性疾病,情況嚴(yán)重時還會導(dǎo)致糖尿病以及癌癥等重大疾病[2]。
目前,農(nóng)藥殘留的主要檢測方法有液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[3-4]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[5-6]、高效液相色譜法[7-8]、氣相色譜法[9-10]等。氣相色譜法具有靈敏度高、選擇性好等優(yōu)點(diǎn),已應(yīng)用于農(nóng)藥殘留分析。常用的前處理方法有固液萃取法、液液萃取法和分散固相萃取法等[11]。蔬菜水果中含有較多糖類、油脂、蛋白質(zhì)、色素、有機(jī)酸、氨基酸、蠟質(zhì)、維生素、生物堿及甾醇類化合物等,樣品處理不干凈會縮短色譜柱壽命且影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。這些檢測方法和前處理方法都有自己本身的優(yōu)點(diǎn),適用于不同樣品基質(zhì)的樣品檢測。近年來,在食品檢測領(lǐng)域發(fā)展起來的QuEChERs(quick、easy、cheap、effective and safe)前處理技術(shù)[12-13]操作簡單、高效穩(wěn)定。同傳統(tǒng)方法相比,該方法省時、省溶劑[14]。本文選取蔬菜水果中農(nóng)藥殘留檢出率較高的7種有機(jī)磷農(nóng)藥為研究對象,建立QuEChERS與氣相色譜法測定蔬菜水果中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的分析方法,可節(jié)省樣品前處理時間,提高檢測效率,為蔬菜水果品質(zhì)的監(jiān)控提供參考。
賽默飛Trace 1300(配PFD檢測器)(美國賽默飛世爾科技公司);Sorvall ST16臺式離心機(jī)(美國賽默飛世爾科技公司);HY-2調(diào)速多用振蕩器(金壇市精達(dá)儀器制造有限公司);N-EVAP氮吹儀(美國Organomation)。
丙酮(色譜純,德國默克公司);乙腈(分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);QuEChERS 樣品前處理試劑包(含萃取管、鹽包和凈化管)(島津技邇上海商貿(mào)有限公司);標(biāo)準(zhǔn)品:甲胺磷、磷胺、氧化樂果、倍硫磷、對硫磷、丙溴磷、三唑磷,濃度均為100 μg/mL(陜西標(biāo)普醫(yī)藥科技有限公司);實(shí)驗(yàn)用水為Millipore 純水系統(tǒng)制得的高純水(美國Millipore公司)。
7種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液的配置:將7種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品分別用丙酮配置成10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配置:精密量取適量的有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液,用丙酮稀釋,配置成0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.40 μg/mL、1.00 μg/mL的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。
準(zhǔn)確稱取均質(zhì)好的蔬菜或水果樣品10.00 g(精確至0.01 g)于50 mL離心管中,加入10 mL乙腈溶液提取,震蕩搖勻1 min,添加QuEChERs提取鹽試劑包,震蕩搖勻1 min,5 000 rmp離心5 min,將上清液轉(zhuǎn)移到QuEChERs凈化管中,渦旋混勻1 min,離心5 min,取4 mL上清液氮吹近干,丙酮定容至2 mL,過0.45 μm有機(jī)濾膜,裝瓶待測。
賽默飛DB-1701毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm);檢測器:火焰光度檢測器(FPD);檢測器溫度:220 ℃;氣體流速載氣:空氣105 mL/min,氮?dú)?0 mL/min,氫氣90 mL/min,尾吹10 mL/min;進(jìn)樣口溫度:200 ℃;流速:1.5 mL/min;進(jìn)樣量:1 μL;進(jìn)樣方式:不分流進(jìn)樣;程序升溫條件:初始溫度40 ℃保持1 min,10 ℃/min升至250 ℃,再以5 ℃/min升至280 ℃保持10 min。
按照上述優(yōu)化好的氣相色譜分析條件對7種有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測分析,在此條件下,均能較好的分離。將系列濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣測試,以各標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度(mg/L)為橫坐標(biāo)(C),峰面積為縱坐標(biāo)(A),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明,7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留在0.05~1.00 μg/mL的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)在0.999 35~0.999 75,見表1。
表1 7種有機(jī)磷農(nóng)藥的線性方程
以空白新鮮白菜、蘋果基質(zhì)為樣品,加入0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL7種有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行回收率試驗(yàn)(n=6),得到2種基質(zhì)樣品平均回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD),結(jié)果見表2。從表2可以看出,該方法回收率在86.4%~110.2%之間,RSD值小于7.1%,說明該方法回收率好,準(zhǔn)確度高,重復(fù)性好。
表2 7種有機(jī)磷農(nóng)藥的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差 %
對新疆阿拉爾市80批次蔬菜水果類樣品進(jìn)行測定,其中1批次丙溴磷超標(biāo),其余6種農(nóng)藥檢測未超標(biāo),QuEChERS-氣相色譜法測定蔬菜水果中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的分析方法,能夠滿足有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測要求。
本文建立了QuEChERS-氣相色譜法測定蔬菜水果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的分析方法。7種農(nóng)藥的質(zhì)量濃度和峰面積在線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)均大于0.999 3,7種農(nóng)藥在白菜、蘋果6個添加水平下的平均加標(biāo)回收率為86.4%~110.2%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差2.3%~7.1%(n=6),能夠滿足蔬菜水果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析的要求。該方法可節(jié)省樣品前處理時間,操作簡單、有效,可用于實(shí)際水果蔬菜樣品中農(nóng)藥殘留的檢測。