骨疏寧片浸出物測定方法研究*

吳 越，吳勇梅，韋玉燕，梁國宇

(玉林市中西醫(yī)結(jié)合骨科醫(yī)院，廣西 玉林 537000)

浸出物含量測定從整體上反映中藥制劑中成分含量的高低，一定程度上反映著中藥制劑的內(nèi)在質(zhì)量，可以作為中藥制劑質(zhì)量控制的一種方法。骨疏寧片是我院用于治療骨質(zhì)疏松癥，療效確切，臨床應(yīng)用廣泛的院內(nèi)制劑，但目前還未有定量方法，生產(chǎn)工藝及不同產(chǎn)地、不同廠家的原料藥都可能對骨疏寧片的臨床療效產(chǎn)生影響，因此，對骨疏寧片浸出物含量測定方法進行研究，制定可控的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，可為該制劑的生產(chǎn)工藝和投料的監(jiān)控工作提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

AB204-S型電子分析天平，梅特勒-托利多公司；DHG-9006型9246A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海精宏。

乙腈(色譜純)，F(xiàn)isher； 95%乙醇(分析純)，國藥集團化學(xué)試劑有限公司；骨疏寧片，玉林市中西醫(yī)結(jié)合骨科醫(yī)院制劑室提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 水溶性冷浸法操作[1]

取供試品約4 g，精密稱定，置250～300 mL的錐形瓶中，精密加水100 mL，密塞，冷浸，前6 h內(nèi)時時振搖，再靜置 18 h，用干燥濾紙迅速濾過，精密量取續(xù)濾液20 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量。

2.2 水溶性熱浸法操作[1]

取供試品約2～4 g，精密稱定，置100～250 mL的錐形瓶中，精密加水50～100 mL，密塞，稱定重量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻 30 min，迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量。

2.3 醇溶性浸出物測定法[1]

照水溶性浸出物測定法測定。除另有規(guī)定外，以各品種項下規(guī)定濃度的乙醇代替水為溶劑。

2.4 浸出因素考察[2-5]

2.4.1 浸出方法的考察

取骨疏寧片數(shù)片，除去糖衣，研細(xì)，過二號篩，混勻，精密稱定藥粉4 g，分別按冷浸法、熱浸法操作，平行測定2份，計算浸出物含量，結(jié)果見表1。

表1 骨疏寧片浸出方法考察結(jié)果Table 1 Results of the extraction method of Gushuning tablets

從表1可知，熱浸法浸出物含量明顯比冷浸法的高，故選擇熱浸法作為浸出物的提取方法。

2.4.2 提取溶劑考察

分別取供試品5份，每份約4 g，精密稱定，置100～ 250 mL的錐形瓶中，分別精密加水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、95%乙醇各100 mL，按熱浸法操作，平行測定2份，計算浸出物含量，結(jié)果見表2。

表2 骨疏寧片提取溶劑考察結(jié)果Table 2 Results of solvent extraction of Gushuning tablets

從表2可知，以水作為提取溶劑浸出物含量最高，25%、50%、75%乙醇提取的浸出物含量相差不大，但是水提浸出液過濾相當(dāng)困難，綜合考慮最終選擇75%乙醇作為提取溶劑。

2.4.3 不同取樣量的考察

表3 骨疏寧片不同取樣量考察結(jié)果Table 3 Investigation results of different sample size of Gushuning tablets

分別取供試品份，每份分別為2 g、3 g、4 g，精密稱定，置100～250 mL的錐形瓶中，精密加入75%乙醇75 mL，按熱浸法操作，平行測定2份，計算浸出物含量。

從表3可知，取樣量為3 g時，浸出物含量最高，故選擇取樣量為3 g。

2.4.4 提取體積考察

分別取供試品5份，每份約3 g，精密稱定，置100～ 250 mL的錐形瓶中，分別精密加入75%乙醇50 mL、75 mL、100 mL，按熱浸法操作，平行測定2份，計算浸出物含量。

表4 骨疏寧片提取體積考察結(jié)果Table 4 The extraction volume of Gushuning tablets

從表4可知，提取體積為75 mL時，浸出物含量最高，故選擇提取體積為75 mL。綜上實驗結(jié)果，最終確定骨疏寧片浸出物最佳測定方法為：取樣量3 g，提取溶劑為75%乙醇，提取體積為75 mL。

2.4.5 最佳浸出物測定方法驗證

取6批不同批號的骨疏寧片數(shù)片，除去糖衣，研細(xì)，每批分別取樣2份，每份3 g，精密稱定，加75%乙醇75 mL，按熱浸法操作，平行測定2份，計算浸出物含量，結(jié)果見表5。

表5 6批骨疏寧片浸出物測定結(jié)果Table 5 6 batches of Gushuning tablets extract determination results

6批骨疏寧片的浸出物測定結(jié)果在29.1%～46.4%之間，考慮制劑的浸出物與使用的藥材質(zhì)量有關(guān)，為保證產(chǎn)品的質(zhì)量，根據(jù)實測數(shù)據(jù)并結(jié)合生產(chǎn)，規(guī)定骨疏寧片75%乙醇熱浸出量不得少于23%。

3 結(jié)果與討論

3.1 結(jié) 果

《中國藥典》2015版四部通則“2201浸出物測定法”項下有水溶性浸出物測定法、醇溶性浸出物測定法、揮發(fā)性醚浸出物測定法，其中水溶性浸出物測定法又包括冷浸法和熱浸法。不同的提取方法對浸出物含量的結(jié)果影響很大，本文對浸出方法、提取溶劑、取樣量、提取體積等浸出因素進行了考察，優(yōu)選出最佳的浸出物含量測定方法，并進行6批驗證，最終確定骨疏寧片浸出物含量測定方法為：取骨疏寧片數(shù)片，除去糖衣，研細(xì)， 過二號篩，取粉末3 g，精密稱定，置100～250 mL的錐形瓶中，精密加入75%乙醇75 mL，余按熱浸法操作。

3.2 討 論

(1)骨疏寧片為糖衣片，考慮到糖分過高對浸出物測定結(jié)果干擾較大，因此需除去糖衣，骨疏寧片在壓片前已嚴(yán)格控制顆粒的水分不超5%，不同批號間樣品的含水量差異不大，對浸出物測定結(jié)果影響不大，因此確定不以干燥品計算骨疏寧片浸出物的含量。

(2)目前中藥制劑多以單一成分或多成分的含量測定作為質(zhì)控手段，但筆者認(rèn)為中藥制劑是一個整體，應(yīng)是多組分協(xié)同起作用，用單一成分的高低來衡量中藥制劑的質(zhì)量有一定的局限性。浸出物含量能整體反映制劑的質(zhì)量，是中藥制劑質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一，尤其對于成分復(fù)雜，藥效成分不明確的中成藥，做浸出物含量的考察更具有實際意義。骨疏寧片為純中藥制劑，共含19味中藥，成分復(fù)雜，無確切的藥效成分，本實驗對骨疏寧片浸出物測定方法進行研究，建立其浸出物檢查法列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案，從整體上對骨疏寧片的質(zhì)量進行控制。

(3)浸出物測定法檢驗成本較少，對儀器設(shè)備要求低，但又能從整體上對中藥制劑的質(zhì)量進行控制，因此可作為固體中藥制劑的常規(guī)檢查項進行推廣應(yīng)用。特別是醫(yī)院制劑的檢驗條件較差，缺少高端的檢驗儀器設(shè)備，引進浸出物測定法，對院內(nèi)制劑的質(zhì)量控制有較強的可操作性，建議院內(nèi)制劑固體制劑增加浸出物測定法。