曹慧慧，王帥，趙海濤，王雅靜，張亮，張賀鳳，劉會會，周彥成，湯思凝*，閆艷華*

（1.唐山市食品藥品綜合檢驗檢測中心，河北唐山 063000）（2.河北省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù)創(chuàng)新中心，河北唐山 063000）（3.唐山市功能性農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院，河北唐山 063000）

韭菜具有特殊辛香氣味，是我國北方人偏愛的鱗莖類蔬菜之一，其營養(yǎng)豐富且具有一定的藥用價值[1]。但由于連作栽培等導致其病蟲害逐年加重，嚴重影響韭菜的產(chǎn)量和質(zhì)量[2,3]。目前有超過1100種不同類別的農(nóng)藥以各種形式和組合使用在農(nóng)作物上，用來殺蟲、殺菌和除草以確保農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量和貯存安全[4]。農(nóng)藥使用不當，導致殘留在作物與環(huán)境中，通過食物鏈的富集在生物體內(nèi)不斷積累，對人體健康構(gòu)成了嚴重威脅[5]。

近年來農(nóng)藥殘留急性中毒事件時有發(fā)生，如2004年河北一地施用禁用劇毒農(nóng)藥甲拌磷灌根防治韭蛆，導致多人中毒[6]；2010年再次爆出青島毒韭菜事件，導致9人中毒[7]。針對韭菜病害長期使用農(nóng)藥，產(chǎn)生一定程度的抗藥性，導致過量使用農(nóng)藥才可獲得比較好的防治效果，加上部分農(nóng)戶未嚴格執(zhí)行蔬菜采收間隔期的規(guī)定，造成農(nóng)藥殘留超標問題[8]。開展韭菜中農(nóng)藥殘留檢測及膳食風險評估可以確定主要危害因子和具體來源，且能夠掌握潛在風險隱患，從而有效控制其質(zhì)量安全。Bolor等[9]對加納蔬菜中有機氯農(nóng)藥殘留進行了檢測及風險評價；劉淑梅等[10]對宿州市韭菜5種農(nóng)藥殘留進行監(jiān)測和風險評估；張旭昇等[11]對上海市售韭菜進行腐霉利殘留的膳食暴露風險評估。但對一地區(qū)全年不同時期生產(chǎn)流通的韭菜和多種農(nóng)藥同時監(jiān)測的研究文獻報道較少。

本研究在唐山地區(qū)農(nóng)貿(mào)市場、超市及生產(chǎn)基地等抽取韭菜樣品，利用氣相色譜儀（GC）和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）對415個韭菜樣品進行了68種農(nóng)藥殘留定性定量檢測，并對韭菜中農(nóng)藥殘留對居民經(jīng)膳食攝入的風險進行分析評估，旨在明確唐山地區(qū)農(nóng)藥殘留污染與膳食攝入風險情況，確保韭菜質(zhì)量安全受控，并為其安全生產(chǎn)和農(nóng)藥的規(guī)范合理使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集與制備

韭菜樣本的采集按照相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。2020年分批次隨機對包括荷花坑批發(fā)市場在內(nèi)的 20家批發(fā)零售市場進行抽樣；韭菜病害監(jiān)測期對樂亭縣、灤南縣、豐潤區(qū)、玉田縣、豐南區(qū)5個縣區(qū)韭菜生產(chǎn)基地上市產(chǎn)品進行抽樣；共采集韭菜樣品415批次，每個樣本重量約3 kg。

將采集的單個樣品用四分法取樣，縮分后將其切碎，充分混勻后放入粉碎機粉碎，將粉碎后的樣品置于待測樣品盒，標記編號后于-20～8 ℃條件下保存，待測。制樣工具每處理一個樣品后應(yīng)沖冼干凈，以防交叉污染。

1.2 試劑

農(nóng)藥標準溶液（1000 μg/mL），購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所；色譜級乙腈和甲醇，純度＞99.9%，均購自西格瑪奧德里奇（上海）貿(mào)易有限公司；色譜級甲酸，純度＞88.0%，購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司；色譜級乙酸銨，純度＞99.0%，購自天津市光復精細化工研究所；提取鹽包由5.5 g無水硫酸鎂、1.5 g氯化鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉及1 g檸檬酸鈉組成，購自北京本立科技有限公司；凈化劑內(nèi)含4 mm氧化鋯珠5粒、100 mg N-丙基乙二胺（PSA）、600 mg無水硫酸鎂及100 mg C18，氧化鋯珠（R104）和雙層提取凈化管（V03），均購自北京本立科技有限公司；純凈水購自廣州屈臣氏食品飲料有限公司。

1.3 儀器與設(shè)備

LCMS-8040液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有電噴霧離子源（ESI），日本島津公司；GC-2010plus氣相色譜儀，日本島津公司；SiO-6512全自動前處理設(shè)備，北京本立科技有限公司；SZ13022-NY 0.2 μm有機濾膜，天津市領(lǐng)航實驗設(shè)備股份有限公司；T-200電子天平，常熟雙杰儀器制造廠；色譜柱為Phenomenex C18（50 mm×3.00 mm，2.60 μm）和Rtx-5（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；T25型均質(zhì)機，德國IKA公司；Vortex-2漩渦混合儀，上海滬西分析儀器廠。

表1 本研究評估的農(nóng)藥Table 1 The pesticides evaluated by this study

表2 68種農(nóng)藥檢出限值Table 2 Detection limits of 68 pesticides

1.4 檢測項目及樣品前處理

參照國家或農(nóng)業(yè)標準方法測定韭菜中農(nóng)藥殘留[12,13]，利用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀和氣相色譜儀對 68種農(nóng)藥殘留進行檢測，主要包括45種殺蟲劑、20種殺菌劑和3種殺螨劑，詳細信息如表1所示。

樣品前處理采用QuEChERS方法，用乙腈溶液進行提取，放入QuEChERS前處理設(shè)備中凈化洗脫，從內(nèi)管中取凈化液過0.22 μm的有機微孔濾膜，濾液供LC-MS/MS測定用；分別取凈化液1 mL進行氮吹用正己烷轉(zhuǎn)溶后過0.22 μm的有機微孔濾膜，濾液供GC測定用。每處理20批樣品同時選取陰性韭菜樣品進行農(nóng)藥混合標準液的添加回收率質(zhì)控試驗，每組質(zhì)控樣品進行3平行處理，加標回收率、精密度（RSD）應(yīng)符合相應(yīng)檢測方法要求。

1.5 數(shù)據(jù)分析與判斷依據(jù)

1.5.1 殘留檢測結(jié)果判定與分析

對檢測結(jié)果進行判定及分析，統(tǒng)計檢出農(nóng)藥種類與殘留量，通過《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763-2019）[14]和《中國農(nóng)藥信息網(wǎng)》[15]，查詢韭菜和鱗莖類蔬菜的最大殘留限量（MRL）值及農(nóng)藥登記信息，并對殘留污染特征進行分析。檢測結(jié)果中農(nóng)藥殘留量低于檢出限的樣品，視為合格樣品，參數(shù)檢出限值如表2所示；檢測結(jié)果顯示有農(nóng)藥檢出，但殘留量低于GB 2763-2019規(guī)定的MRL即為未超標樣品，視為合格樣品；反之，檢測結(jié)果超過規(guī)定的MRL即為超標樣品，視為不合格樣品；部分農(nóng)藥在樣品中有檢出，但在GB 2763-2016中無對應(yīng)樣品的最大殘留限量值，其結(jié)果無法判定。韭菜樣品農(nóng)殘檢出率、合格率及不合格率分別按公式（1）、（2）、（3）計算。

1.5.2 膳食風險評估

膳食攝入風險按公式（4）計算[16,17]。

式中：

NEDI——某種農(nóng)藥估算的每日攝入量，mg/(kg bw·d)；

STMRi——農(nóng)藥在某農(nóng)產(chǎn)品中的規(guī)范殘留試驗中值，mg/kg；

Fi——一般人群對某農(nóng)產(chǎn)品的消費量，kg/d，韭菜是0.046 kg/d[10]；

bw——人均體重，kg，中國人一般按照63 kg計算[17]。

膳食攝入風險按NEDI/ADI比值判斷，其中ADI為每日允許攝入量[14]。當NEDI/ADI≤1時，表示其風險可接受，值越小，風險越低；當 NEDI/ADI＞1時，表示有不可接受的慢性風險，值越大，風險越高。

1.6 數(shù)據(jù)處理

MRL和ADI均為GB 2763-2019標準中給定數(shù)值。依據(jù)相關(guān)檢測標準規(guī)定，殘留含量＞1.00 mg/kg時，計算結(jié)果保留3位有效數(shù)字；殘留含量＜1.00 mg/kg時，計算結(jié)果保留2位有效數(shù)字。檢出率、合格率和不合格率統(tǒng)一保留兩位小數(shù)。

2 結(jié)果與討論

2.1 農(nóng)藥殘留的總體檢測情況分析

各農(nóng)藥的殘留結(jié)果如表3所示。2020年根據(jù)韭菜生產(chǎn)及上市情況按需抽檢415個韭菜樣品，其中共計288個樣品檢出農(nóng)藥殘留，檢出率為69.40%；共檢出 41種農(nóng)藥殘留，占檢測農(nóng)藥總數(shù)（68種）的60.29%，單項農(nóng)藥檢出率為0.24%～41.20%；其中，有171批次樣品檢出噻蟲胺，檢出率最高為41.20%，噻蟲胺被推薦用于防治韭蛆，但此農(nóng)藥在中國尚未制定韭菜或鱗莖類蔬菜中的限量標準，可能對人體健康存在潛在風險；韭菜樣品中腐霉利檢出率也較高，為35.42%，這與其他研究中檢出率為32.30%結(jié)果基本一致[10]。張旭晟等[11]報道 2016～2018年上海市市售157件韭菜樣品中腐霉利殘留總體檢出率也高達53.00%。

在檢出的41種農(nóng)藥中，有7種為禁用和限用農(nóng)藥，即甲胺磷、治螟磷、甲拌磷（甲拌磷砜、甲拌磷亞砜）和毒死蜱、克百威（3羥基克百威）乙酰甲胺磷、氟蟲腈（氟蟲腈砜、氟甲腈），涉及45批樣品，檢出率為10.84%。

其中27種農(nóng)藥按照國家標準[8]判定，有158個樣品涉及12種農(nóng)藥殘留超標，不合格率為38.07%，超標農(nóng)藥為腐霉利125批次、敵敵畏16批次、毒死蜱8批次、克百威（3-羥基克百威）5批次、啶蟲脒4批次、辛硫磷3批次、治螟磷2批次和甲拌磷、氟蟲腈、甲霜靈、腈菌唑、甲胺磷各1批次；超標農(nóng)藥的MRL值依次為0.2、0.2、0.05、0.1、0.02、0.02、0.02、0.01、0.05、0.2、0.01、0.06和0.02 mg/kg。腐霉利超標批次最多，樣品不合格率為30.12%，且最大檢出值為12.0 mg/kg，是MRL值的60倍，與呂冰峰等[18]對2018年蔬菜國家食品安全監(jiān)督抽檢結(jié)果進行分析得出韭菜不合格的原因主要為腐霉利超標研究結(jié)果一致；其次為敵敵畏，超標率為 3.86%，韭菜限用藥毒死蜱超標率也達1.93%。

表3 韭菜中農(nóng)藥殘留檢出結(jié)果Table 3 Determination result of pesticide residues in Chinese chives

2.2 不同采樣時間韭菜農(nóng)藥殘留狀況

由圖1可以看出，韭菜的農(nóng)藥殘留狀況隨季節(jié)和生產(chǎn)方式變換而有所波動，這與氣候情況、病蟲害發(fā)生類型以及種植戶噴施農(nóng)藥的習慣有關(guān)。冬季采收韭菜農(nóng)殘檢出率和不合格率均處于較高水平，4月至 8月期間韭菜合格率相對較高。

從表4統(tǒng)計結(jié)果可以看出，不同月份韭菜樣品農(nóng)殘檢出率均處于較高水平，尤其1～3月、12月檢出率均在80.00%以上。1月、2月、12月不合格率分別高達82.54%、83.33%、70.67%，3個月超標參數(shù)多為腐霉利。當前，韭菜種植主要分為露地和大棚兩種生產(chǎn)方式。“灰霉病”是韭菜種植過程中一種常見病害，尤其是大棚溫室種植的冬春季韭菜。腐霉利作為防治灰霉病的登記用藥被菜農(nóng)普遍使用。大棚溫室種植環(huán)境濕度大造成腐霉利自然降解能力下降，殘留時間延長導致冬春季韭菜腐霉利檢出和超標率較高。4月份樣品中敵敵畏的檢出和超標率較為突出，在當月不合格樣品中占比51.61%。分析認為種植戶使用了敵敵畏防治露地韭菜的主要蟲害韭蛆、薊馬等，由于農(nóng)藥使用不當或未嚴格執(zhí)行采收間隔期引發(fā)殘留超標現(xiàn)象。

表4 不同采收時期農(nóng)藥殘留結(jié)果統(tǒng)計Table 4 Statistical results of pesticide residue in different periods

2.3 膳食風險評估

食品中農(nóng)藥殘留結(jié)果評價通常按照《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763-2019）[14]來判定樣品是否合格，但此標準中涉及的農(nóng)藥殘留限量并沒有覆蓋所有蔬菜品種，而且產(chǎn)生的風險不僅與蔬菜本身農(nóng)殘含量有關(guān)，還與人的身體情況和膳食習慣有關(guān)[19]。對標準中沒有規(guī)定限量的農(nóng)藥，利用這個方法評判風險性有一定缺陷。因此，科學地評估蔬菜質(zhì)量是否安全以人體對蔬菜的實際攝入量和ADI來評價更為合理。

所采韭菜樣品中檢出的農(nóng)藥距末次施藥7 d的最終殘留試驗中值（STMRi）、NEDI及其對應(yīng)的NEDI/ADI如表5所示。從41種農(nóng)藥的檢出濃度平均值來看，各農(nóng)藥的 NEDI均小于相應(yīng)的 ADI，NEDI/ADI＜1；從NEDI/ADI值排序來看，檢出的殺蟲劑類農(nóng)藥敵敵畏、甲拌磷、氟蟲腈比值最大，風險較高需引起重視；腐霉利雖然檢出頻次和超標率均較高但其NEDI/ADI遠小于1。從此次檢測統(tǒng)計結(jié)果整體來看唐山地區(qū)韭菜中農(nóng)藥殘留風險可以接受。張旭晟等[11]對2016～2018年間上海市市售韭菜中腐霉利的殘留情況及居民膳食暴露風險進行評估，得出韭菜中腐霉利的膳食暴露風險較低，建議合理調(diào)整韭菜中腐霉利的限量標準。周勇等[20]研究得出按推薦的施藥時期、劑量和方法進行施藥以及安全間隔期進行采收，韭菜中腐霉利存在超標風險，但通過韭菜攝入的腐霉利不會對一般人群的健康造成不可接受的風險。

3 結(jié)論

3.1 本研究通過對唐山地區(qū)415批韭菜樣品中68種農(nóng)藥殘留進行檢測結(jié)果表明，樣本不合格率為38.07%，農(nóng)藥檢出率為69.40%。共計檢出42種農(nóng)藥殘留，殘留農(nóng)藥種類復雜且多個樣本存在多殘留檢出現(xiàn)像；噻蟲胺檢出率最高，建議進一步收集相關(guān)數(shù)據(jù)并開展風險評估制定出此農(nóng)藥在韭菜或鱗莖類蔬菜中的限量標準；有10.84%的樣本檢出7種在蔬菜生產(chǎn)中禁限用農(nóng)藥。有12種農(nóng)藥的殘留量超過了標準規(guī)定的最大殘留限量（MRL），腐霉利不合格率最高。

3.2 本研究對采集的韭菜樣品經(jīng)膳食暴露風險評估，NEDI/ADI值均遠小于1，風險較低，但檢測結(jié)果顯示部分樣本存在聯(lián)合用藥情況，多種農(nóng)藥合用毒性具有相加作用。一些國內(nèi)外學者和機構(gòu)已對農(nóng)藥多殘留和累積膳食風險的問題開展研究[21,22]，但是實際產(chǎn)生的風險不僅與被檢樣品本身農(nóng)殘含量的多少有關(guān)，還與人們的身體情況和膳食習慣有關(guān)，由于監(jiān)測數(shù)據(jù)和膳食數(shù)據(jù)的限制，本次研究未評估農(nóng)藥多殘留的累積風險，待基礎(chǔ)數(shù)據(jù)完善后進一步評估。