姜良珍,王 羅,楊 濤,鄭浩楠,趙江林,向達(dá)兵,鄒 亮,萬 燕,
(1.成都大學(xué)食品與生物工程學(xué)院, 四川成都 610106;2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部雜糧加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川成都 610106;3.中國科學(xué)院成都生物研究所環(huán)境治理與食品安全領(lǐng)域, 四川成都 610041)
茯磚茶是以黑毛茶為原料,經(jīng)過汽蒸、渥堆、發(fā)花、干燥等一系列復(fù)雜工藝制作而成的后發(fā)酵茶,其中發(fā)花是茯磚茶加工的關(guān)鍵步驟,決定著茶的品質(zhì)。發(fā)花階段,優(yōu)勢“金花菌”大量繁殖,茶葉在微生物作用下發(fā)生深度的生理生化變化,形成茯磚茶獨(dú)特的風(fēng)味[1-5]。通過形態(tài)學(xué)種群分析,DNA條形碼和多位點(diǎn)測序等方法分析“金花菌”的進(jìn)化關(guān)系,發(fā)現(xiàn)“金花”實(shí)際是冠突散囊菌的金黃色閉囊殼(圖1),而冠突散囊菌是茯磚茶的唯一優(yōu)勢真菌[5]。在國家標(biāo)準(zhǔn)中,茯磚茶是唯一要求冠突散囊菌這項(xiàng)指標(biāo)的黑茶類品種[6]。六堡茶等黑茶中也分離出冠突散囊菌[7]。本文主要討論黑茶冠突散囊菌的生物學(xué)特性、酶系、代謝產(chǎn)物和安全性等特性,以及其發(fā)酵應(yīng)用的研究進(jìn)展。
圖1 冠突散囊菌的菌落形態(tài)和顯微特征[10]Fig.1 Colonial morphology and microscopic characteristics of Eurotium cristatum[10]
冠突散囊菌(Eurotium cristatum)屬子囊菌綱,曲霉目,曲霉科,作為產(chǎn)有性型和無性型的全型真菌,其典型特征是具冠狀突起及表面明顯粗糙具小疣的子囊孢子和具小刺的分生孢子。根據(jù)其孢子的特征,將該菌有性型鑒定為冠突散囊菌(Eurotium cristatum),無性型鑒定為針刺曲霉菌(Aspergillus spiculosusBlaster),別名為冠突曲霉菌(Aspergillus cristatumBlaster)[8-9]。
冠突散囊菌好氧,耐干燥,最適pH為5,最適生長溫度為28~30 ℃。該菌適應(yīng)性較強(qiáng),在茶磚和低滲培養(yǎng)基(0.5 mol/L NaCl)上行有性繁殖,繁殖方式隨滲透壓升高逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o性繁殖,高滲透壓(≥3 mol/L NaCl)條件下僅行無性繁殖[10],其孢子在85 ℃沖泡5 min后仍可存活[11]。Ca2+信號途徑及VeA基因在其適應(yīng)高滲環(huán)境[12]和孢子形成[13]中發(fā)揮重要作用。碳源和氮源顯著影響菌絲生長和產(chǎn)孢過程[14-16],其中碳源為產(chǎn)孢所必需[14]。不同來源菌株對不同種類碳源的利用程度不同。固態(tài)發(fā)酵以D-果糖、葡萄糖、蔗糖、D-木糖、麥芽糖等為佳,而對山梨醇、瓊脂、單寧和淀粉等利用較差;液態(tài)發(fā)酵對碳源種類依賴性較低[14-16]。碳源濃度[15]和氮源種類[16]亦影響產(chǎn)孢的類型和數(shù)量。無機(jī)氮源促進(jìn)孢子萌發(fā)效果較好,而有機(jī)氮源對菌落生長的促進(jìn)作用較大[16],因此,在實(shí)際培養(yǎng)中往往采取兩者結(jié)合的方式。
冠突散囊菌能分泌多種胞外酶,如纖維素酶、蛋白酶和多酚氧化酶等。在茯磚茶“發(fā)花”過程中,冠突散囊菌通過分泌胞外酶促使茶葉中的茶多酚發(fā)生氧化、縮合,形成茶黃素、茶紅素、茶褐素等物質(zhì),淀粉和纖維素等不溶性多糖分解轉(zhuǎn)化為葡萄糖和果糖,蛋白質(zhì)分解為氨基酸等,且使氨基酸、糖類、咖啡堿等各成分之間發(fā)生聚合、縮合等一系列的復(fù)雜反應(yīng)[2,4,17],消除茶葉的粗青、苦澀味,使茶葉在口味上更加醇和爽口,甜滑回甘,湯顏色紅亮,形成茯磚茶特定的風(fēng)味、香氣、色澤,并且增加茶葉中的活性物質(zhì)。纖維素酶在茯磚茶渥堆過程中能軟化老葉,降解粗纖維為可溶性糖。高溫殺青使茶葉中內(nèi)源纖維素酶活性被急劇鈍化,渥堆和“發(fā)花”過程中微生物的代謝活動使纖維素酶活性明顯增強(qiáng)[18]。阿魏酸酯酶和木聚糖酶協(xié)同作用于曬青毛茶可顯著提高其阿魏酸和低聚木糖的含量,增加茶湯活性物質(zhì)[19]。胞外多酚氧化酶、漆酶等可將兒茶素氧化為茶黃素、茶紅素和茶褐素等水溶性的色素[17,20-22]。過氧化物酶、過氧化氫酶、多酚氧化酶和總超氧化物歧化酶是冠突散囊菌發(fā)酵茶抗氧化的物質(zhì)基礎(chǔ)[23]。其淀粉酶和蛋白酶等消化酶,可顯著提高人體腸道中蛋白酶、淀粉酶的活性[24-25],與茯磚茶的促消化作用密不可分。糖苷酶可將西洋參、高麗參的其他皂苷成分有效轉(zhuǎn)化為人參皂苷Rd及多種未知結(jié)構(gòu)的高保留性的皂苷產(chǎn)物[26]。酶是冠突散囊菌進(jìn)行發(fā)酵應(yīng)用的重要基礎(chǔ),其性質(zhì)尚需進(jìn)行深度研究。
冠突散囊菌在馬鈴薯等培養(yǎng)基上生長代謝通常會產(chǎn)生大量的色素物質(zhì),主要為黃色素和黑色素[27]。黃色素的含量與有性孢子數(shù)量正相關(guān),與“金花”的顏色有關(guān)[27]。以石油醚提取陜西茯磚茶冠突散囊菌液態(tài)發(fā)酵的黃色素,發(fā)現(xiàn)其為脂溶性色素,最大吸收波長為398 nm,不耐高溫,耐酸不耐堿,金屬離子(Fe3+、Fe2+、Cu2+)、太陽光等條件會使其降解[28]。光譜學(xué)分析推測黃色素含有-C-H、C-O、C=C等官能團(tuán)[28-29]。黑色素是一類結(jié)構(gòu)復(fù)雜多樣的酚類或吲哚類生物大分子色素的總稱,具有避免光傷害、強(qiáng)抗氧化性、抗輻射、免疫調(diào)節(jié)等作用。冠突散囊菌所產(chǎn)胞外黑色素的最大吸收波長298 nm,在70 ℃以下耐熱性強(qiáng),Mg2+、Zn2+、Fe3+對其的穩(wěn)定性有增強(qiáng)作用,遇光、氧化還原劑易分解[30-31]。冠突散囊菌色素的理化性質(zhì)研究尚有待深入。
冠突散囊菌含有多種生物活性代謝物,如黃酮、生物堿、哌嗪二酮衍生物和多糖[32-33]等。在脂多糖誘導(dǎo)的RAW264.7炎癥細(xì)胞模型中,苯甲醛衍生物通過抑制iNOS和COX-2的表達(dá)發(fā)揮抗炎作用[34]。水溶性二酮哌嗪二聚體生物堿eurocristatine在糖尿病老鼠模型中可通過調(diào)節(jié)PI3K/AKT信號通路達(dá)到與二甲雙胍相當(dāng)?shù)慕堤切Ч鸞32-33]。脂溶性組分包含異戊烯基吲哚二酮哌嗪生物堿cristatumin F以及echinulin、dehydroechinulin、 neoechinulin A和variecolorin O,其中cristatumin F有DPPH自由基清除活性和對3T3L1細(xì)胞的邊緣衰減作用[35]。真菌多糖是冠突散囊菌的重要的活性代謝物。菌株MK346334的粗糖提取液,尤其是EPS2組分,顯示出與腸道微生物群調(diào)節(jié)相關(guān)的免疫調(diào)節(jié)活性[36]。從菌絲體分離的多糖ECIP-1A,分子量為24.3 kD,主要由甘露糖、葡萄糖和半乳糖等單糖組成,體外對巨噬細(xì)胞RAW264.7有顯著的免疫調(diào)節(jié)活性[37]。發(fā)酵初期的冠突散囊菌菌絲能產(chǎn)生較高含量的洛伐他?。ń的懝檀妓幬铮14,38]?;炀才囵B(yǎng)可拓寬真菌次級代謝產(chǎn)物譜,冠突散囊菌與金黃色葡萄球菌固體混合發(fā)酵產(chǎn)生兩種新化合物(tetrahydroauroglaucine和epiheveadride),其混合代謝物對A549細(xì)胞等有較好的細(xì)胞毒活性[39]。
冠突散囊菌曾被認(rèn)為是有毒真菌。但急性毒理學(xué)試驗(yàn)顯示,大鼠經(jīng)口灌胃對冠突散囊菌的最大耐受劑量大于7.31×1010個/mL,對其發(fā)酵成的茯磚茶的LD50大于5001 mg/kg。喂養(yǎng)30 d后,各劑量組菌液和茶葉浸出液對大鼠在體重、血液學(xué)指標(biāo)、臟器系數(shù)及一般行為方面均無顯著性影響[11,40]。Ge等[10]通過系統(tǒng)分析比較轉(zhuǎn)錄組學(xué)和基因組學(xué)的數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)冠突散囊菌不含毒素生物合成相關(guān)的基因簇。進(jìn)一步檢測常見的6種毒素發(fā)現(xiàn),其僅產(chǎn)生低劑量的伏馬菌素B1(0.17 ppm),遠(yuǎn)低于美國食品與藥品監(jiān)督總局食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)的限量(2 ppm),而我國對此毒素尚無限量標(biāo)準(zhǔn)。以冠突散囊菌(CB10001)或其孢子飼喂高脂飲食的C57BL/6J小鼠,發(fā)現(xiàn)該菌可在小鼠腸道存活(超過2周時間),并可有效阻止小鼠增重,緩解炎癥,調(diào)節(jié)腸道菌群,恢復(fù)腸道穩(wěn)態(tài)[11]。冠突散囊菌可通過抑制NF-κB和MAPK信號通路的激活來抑制結(jié)腸炎癥反應(yīng),保護(hù)腸道屏障,從而改善潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的結(jié)腸縮短、體質(zhì)量下降和評定疾病活動指數(shù)評分等指標(biāo),修復(fù)葡萄糖硫酸鈉造成的病理組織學(xué)損害[41]。另外,茯磚茶在我國西北地區(qū)有悠久的飲用歷史,研究顯示其具有降脂減肥、增強(qiáng)免疫、調(diào)節(jié)糖代謝和調(diào)節(jié)腸道菌群等多種生物學(xué)功效[11,42-45]。因此,判定冠突散囊菌為實(shí)際無毒物,且為潛在的益生菌,為其推廣應(yīng)用提供了依據(jù)。
茶葉加工過程中人工接種冠突散囊菌可促進(jìn)茶品質(zhì)轉(zhuǎn)化,加速發(fā)酵進(jìn)程,縮短生產(chǎn)周期,利于全程清潔化生產(chǎn),保證品質(zhì)均一性。發(fā)酵過程以固態(tài)發(fā)酵為主,又可分為普通茶發(fā)酵和植物代茶發(fā)酵兩種。多數(shù)茶葉經(jīng)冠突散囊菌發(fā)酵后,苦澀味降低,散發(fā)獨(dú)特菌花香,茶褐素增多,口感和品質(zhì)得到提升。茶葉所含的化合物——香味物質(zhì)、呈味物質(zhì)、色澤和生物活性物質(zhì)等均發(fā)生顯著變化,進(jìn)一步影響了茶葉的感官性狀和功能活性(表1)。
表1 不同品種茶在冠突散囊菌發(fā)酵前后性狀對比Table 1 Comparison of characteristics of different tea varieties before/after fermentation by Eurotium cristatum
5.1.1 氣味物質(zhì)變化 經(jīng)冠突散囊菌適度發(fā)酵的茶葉,風(fēng)味差異明顯,香氣物質(zhì)含量與種類均有所增加,香氣協(xié)調(diào),兼具茶香和菌花香[17,46-48]。發(fā)酵可促進(jìn)萜醇類物質(zhì)的代謝,尤其是芳樟醇氧化物的含量顯著增加。發(fā)酵茶湯所含的醛類氣體減低,而酯類氣體含量顯著提高[17,46-48]。研究顯示,在以茶葉的碳水化合物為碳源時,冠突散囊菌一方面通過MEP途徑分解糖苷前體提供能量,產(chǎn)生大量的游離芳香化合物[47];另一方面積累了大量的苯丙酸/苯環(huán)類化合物途徑的中間代謝物,包括苯甲醇和苯乙醇,以及大量的甲酯化合物,如水楊酸甲酯、苯甲酸甲酯和苯乙酸甲酯[48]。這些化合物共同作用產(chǎn)生了特有的茶香和花香味。
5.1.2 呈味物質(zhì)變化 冠突散囊菌發(fā)酵的茶湯,滋味甘甜醇厚。茶葉中負(fù)責(zé)不同口感的各種氨基酸含量顯著減低,可能與美拉德反應(yīng)和菌的生長代謝相關(guān)[17]。研究表明,冠突散囊菌發(fā)酵后的茶葉中總酚,尤其是茶葉苦澀味形成的關(guān)鍵化合物兒茶素類含量顯著下降[17,46,48-49]。其中,表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、表沒食子兒茶素(EGC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)和表兒茶素(EC)等茶多酚含量下降最為顯著[17,46]。酯型兒茶素水解能產(chǎn)生非酯型兒茶素和沒食子酸(GA)[17,48]。EC、GA和EGC的含量隨著菌代謝進(jìn)一步降低[17]。另外,在影響茶葉苦味的生物堿(茶堿、咖啡堿、可可堿等)中,主要是咖啡堿的含量顯著下降[17]。
5.1.3 色澤變化 冠突散囊菌“發(fā)花”過程對茶湯顏色影響顯著,多數(shù)隨著發(fā)酵程度的加深,茶葉顏色變深。茶黃素、茶紅素等的含量先增加后減少,而茶褐素大幅增多[17,46-48]。過氧化物酶和漆酶能持續(xù)轉(zhuǎn)化茶多酚成茶紅素、茶黃素,而茶黃素、茶紅素能與兒茶素以及其他化合物進(jìn)一步通過聚合、縮合、偶聯(lián)和氧化等作用形成茶褐素[17,46]。通過分泌多種胞外酶可促進(jìn)了茶褐素的形成。茶褐素生物學(xué)活性較高,其含量的增加使茶湯顏色呈現(xiàn)棕紅色,且可能是發(fā)酵茶主要的呈味物質(zhì)[17,46]。另外,冠突散囊菌自身產(chǎn)生的黃色素、黑色素等色素,是否也對茶葉、茶湯的顏色產(chǎn)生了影響,目前尚無定論。
5.1.4 其他物質(zhì)變化 由于纖維素酶、淀粉酶等酶的活性以及發(fā)酵環(huán)境的差異,冠突散囊菌發(fā)酵對茶葉可溶性糖含量的影響不盡一致。桑葉茯茶、杜仲茯茶和MF800948發(fā)酵的秋季綠茶的水溶性碳水化合物皆降低[17,50-52],而“金花藤茶”的可溶性糖含量增加[53]?!敖鸹ā逼斩齕48]和“金花”甜茶[54]的總黃酮含量提高,而藤茶拼配紅茶發(fā)酵制作的“金花藤茶”多酚、二氫楊梅素的含量顯著減少[53]。
5.1.5 生物活性變化 茶葉內(nèi)含物的變化影響發(fā)酵茶的生物學(xué)活性[55]?!敖鸹ā逼斩偪寡趸钚院妥杂苫宄芰蕴嵘齕48],冠突散囊菌發(fā)酵的甜茶[54]和刺五加茶[56]的總抗氧化活性提升,而羥自由基與DPPH自由基清除活性卻顯著下降。以廣西六堡茶冠突曲霉(E6)發(fā)酵當(dāng)?shù)氐摹鞍缀撩狻盵7]和桑葉茶[50-52],其DPPH降解能力、總抗氧化能力均有變化。上述研究為冠突散囊菌發(fā)酵茶產(chǎn)品的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
冠突散囊菌可利用多種碳源生長,亦被用于谷類和豆類的加工過程,見表2。其發(fā)酵的燕麥面醬,色澤鮮艷,醬香濃郁,咸甜適宜,多酚含量為原料燕麥的6倍[61]。添加茯磚茶發(fā)酵糯米產(chǎn)生了35種特異性的香味物質(zhì),α-淀粉酶、蛋白酶和β-葡萄糖苷酶活性增強(qiáng),總酚含量提高[62-63]。冠突散囊菌固態(tài)發(fā)酵甜蕎,相比毛霉或根霉,對黃酮和總酚含量的促進(jìn)作用更強(qiáng)[64-65];發(fā)酵苦蕎,清蛋白、球蛋白、醇蛋白和總蛋白的含量增加[66]。以冠突散囊菌(YL-1)固態(tài)發(fā)酵黃豆[67]和黑豆[68],總酚、黃豆苷元、金雀異黃酮、大豆異黃酮和總苷元等的含量均顯著提高;揮發(fā)性物質(zhì)差異明顯,其中酯含量增加,若干醇和醛含量減少。冠突散囊菌發(fā)酵的豆渣產(chǎn)品Okara,以兩種蒽醌(大黃素和大黃素甲醚)為標(biāo)志性代謝物,其α-糖苷酶抑制活性更強(qiáng),能有效降低小鼠餐后血糖水平[69]。研究顯示,固態(tài)發(fā)酵能破壞植物細(xì)胞壁或水解細(xì)胞壁組分的共價鍵和不可溶的結(jié)合性多酚,導(dǎo)致酚類化合物的釋放[65]。上述加工食品中多酚和黃酮含量的升高,與發(fā)酵過程中酶的作用,尤其是冠突散囊菌水解酶活性密切相關(guān)[65,67]。多酚和黃酮含量的升高,使得冠突散囊菌的谷類和豆類食品體外抗氧化性、自由基清除能力以及糖脂代謝相關(guān)酶抑制率等生物學(xué)活性增強(qiáng)顯著[65-68]。因此,這類發(fā)酵制品可作為功能性食品或者天然食品添加劑而成為有效的抗氧化劑。
表2 谷類和豆類經(jīng)冠突散囊菌發(fā)酵前后性狀對比Table 2 Comparison of characteristics of different food varieties before/after fermentation by Eurotium cristatum
冠突散囊菌被用于中藥材的深加工過程,可以有效促進(jìn)中藥的解毒和新型天然產(chǎn)物的產(chǎn)生,提高藥效,見表3。人工接種冠突散囊菌發(fā)酵銀杏葉或種子,可有效脫除銀杏毒素和銀杏酸,增加總黃酮、聚戊烯乙酸酯和芳香物質(zhì)的含量[70-72];發(fā)酵茶“金花”茂盛,湯色橙黃明亮,滋味醇和,有金花香氣[70];發(fā)酵物抗氧化能力提高,淀粉酶和蛋白酶活性增強(qiáng)[71-72]。葛根經(jīng)冠突散囊菌固態(tài)發(fā)酵后,中藥味得到顯著改善,總黃酮和葛根素含量及抗氧化活性顯著增加[73-74]。Xiang等[75]通過靶向代謝組學(xué)技術(shù)比較了冠突散囊菌和紅曲霉發(fā)酵前后的姜黃素類化合物,共發(fā)現(xiàn)115種姜黃素類化合物,其中有48種結(jié)構(gòu)比較新穎,14種為姜黃中首次發(fā)現(xiàn),31種為發(fā)酵姜黃過程中新產(chǎn)生,其中的27種姜黃素類化合物為冠突散囊菌新發(fā)酵產(chǎn)生,23種為冠突散囊菌發(fā)酵特異性。為刺激其沉默的次級代謝產(chǎn)物合成基因簇的表達(dá),陸承云[76]將冠突散囊菌與桑黃共培養(yǎng)并分別固體發(fā)酵金銀花(葉)、葛根和黃芪。結(jié)果顯示,發(fā)酵金銀花(葉)的木犀草素含量增加,綠原酸、蘆丁的含量顯著降低,發(fā)酵黃芪的總黃酮含量顯著提高,藥效增加[76]。以保加利亞乳桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌、鼠李糖乳桿菌和冠突散囊菌等食品工業(yè)中常用的微生物菌種液態(tài)發(fā)酵含有皂苷的三七、人參和西洋參幾味中藥,結(jié)果發(fā)現(xiàn),僅冠突散囊菌能有效地將西洋參和高麗參中的其他皂苷成分轉(zhuǎn)化為稀有人參皂苷Rd以及多種未知結(jié)構(gòu)的高保留性皂苷產(chǎn)物[26]。冠突散囊菌發(fā)酵有效提高了枸杞[77]和白芷[78]的抗氧化活性以及自由基清除能力。以不同植物內(nèi)生菌固態(tài)發(fā)酵“化癥回生”口服液的殘留藥渣,發(fā)現(xiàn)來源于茯磚茶的冠突曲霉(CB10002)能有效回收利用藥渣中的營養(yǎng)成分,并轉(zhuǎn)化產(chǎn)生2.0 mg/g的羥基大黃素(citreorosein)和7.5 mg/g總蒽醌(anthraquinone)[79]。以冠突散囊菌轉(zhuǎn)化中草藥活性成分顯示出良好的應(yīng)用前景。
表3 冠突散囊菌發(fā)酵不同中藥材前后性狀對比Table 3 Comparison of characteristics of different Chinese herbs before/after fermentation by Eurotium cristatum
部分研究關(guān)注了對冠突散囊菌的活性代謝產(chǎn)物的開發(fā)。通過對液態(tài)發(fā)酵和提取的條件進(jìn)行優(yōu)化,胞外黑色素的產(chǎn)量可達(dá)4.27 g/L[29-30]。尹慧慧等考察以甜菜粉等為原料用冠突散囊菌發(fā)酵產(chǎn)洛伐他汀的最佳條件,得出最優(yōu)組合的產(chǎn)量為146.4 mg/kg[80]。此外,將冠突散囊菌制成銀納米微粒(AgNP),對銅綠假單胞菌等多種菌有抑制效果,且表現(xiàn)出與新霉素等的協(xié)同抗菌效應(yīng)[81],有潛力成為新型抗菌材料。茯磚茶來源的菌株ET1具有較強(qiáng)的降解β-氯氰菊酯和3-PBA的性能[82],可用于污染環(huán)境的生物修復(fù)。
基于其強(qiáng)適應(yīng)性、豐富的酶系、多樣的活性代謝物和安全性等特性,冠突散囊菌在茶葉、豆谷類及中藥材深加工等領(lǐng)域已得到較廣泛應(yīng)用。然而冠突散囊菌雖是潛在的益生菌,尚未被列入國家食品安全微生物名錄;發(fā)酵過程多以固態(tài)為主,液態(tài)形式較少[83]。因此,該菌仍有較大的開發(fā)空間。代謝物方面,研究多集中于真菌轉(zhuǎn)化基質(zhì)總化合物庫的變化分析,對僅來源于真菌菌絲或孢子的天然產(chǎn)物研究較少,對化合物轉(zhuǎn)化的原因挖掘亦不透徹,可能是未來重要的研究方向。另外,多數(shù)基質(zhì)經(jīng)冠突散囊菌發(fā)酵后,其抗氧化性等生理學(xué)活性提高,但具體產(chǎn)生了哪些活性物質(zhì)及如何發(fā)揮作用并不清楚。Zhou等通過在線HPLCPDA-三項(xiàng)-TOF-MS/MS-ABTS系統(tǒng),篩選并鑒定了冠突散囊菌發(fā)酵的白芷中發(fā)揮抗氧化作用的5種呋喃并香豆素、5種生物堿和2種聚酮[78],為此類研究提供了新的思路。綜上,未來為使冠突散囊菌在食品加工、中藥材加工等領(lǐng)域得到更好的應(yīng)用,需綜合運(yùn)用多種技術(shù)手段在檢測發(fā)酵過程,分析代謝物動態(tài)變化[46,74],鎖定關(guān)鍵酶或相關(guān)生物代謝途徑[16],探究菌體本身及其發(fā)酵制品的生理學(xué)活性及作用機(jī)制等方面展開深入細(xì)致地研究。