電麻醉對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)麻醉效應(yīng)與血液生化指標(biāo)的影響

白 貞，沈 建，徐文其，趙昕源，郭賽飛，馬田田

(1 廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院，廣東 湛江，524088；2 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院漁業(yè)機(jī)械儀器研究所，上海 200092)

石斑魚(yú)(Epinephelussp)滋味鮮美，肉質(zhì)嫩滑，逐漸成為中國(guó)東海南部和南海地區(qū)的重要經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖品種[1]。2020年，中國(guó)石斑魚(yú)捕撈與養(yǎng)殖總產(chǎn)量已經(jīng)達(dá)到28.3萬(wàn)t，已成為深受國(guó)內(nèi)消費(fèi)者喜愛(ài)的高端海鮮品種[2]。其中，廣東省與海南省為石斑魚(yú)的主產(chǎn)區(qū)，產(chǎn)量占全國(guó)總產(chǎn)量的78.2%[2]。石斑魚(yú)產(chǎn)量地域性特征明顯，為滿足內(nèi)陸消費(fèi)者對(duì)其的消費(fèi)需求，石斑魚(yú)的高效長(zhǎng)途運(yùn)輸十分重要。石斑魚(yú)對(duì)脅迫的應(yīng)激反應(yīng)十分劇烈，如果操作不當(dāng)，極易造成品質(zhì)惡化和死亡，嚴(yán)重影響了石斑魚(yú)的養(yǎng)殖生產(chǎn)與運(yùn)輸流通[3-4]。

目前，魚(yú)類麻醉主要有化學(xué)麻醉和物理麻醉兩種[5]。物理麻醉方法主要分為生態(tài)冰溫麻醉與電麻醉兩種，物理麻醉方法沒(méi)有禁藥期，也沒(méi)有藥物殘留風(fēng)險(xiǎn)[5-6]。電麻醉無(wú)須長(zhǎng)時(shí)間的低溫馴化，麻醉用時(shí)短，已經(jīng)成功地運(yùn)用在受精取卵、疫苗注射、標(biāo)志流放等魚(yú)類外科操作上[7]。但目前國(guó)內(nèi)外針對(duì)電麻醉的研究，主要局限在淡水魚(yú)，對(duì)海水養(yǎng)殖魚(yú)類涉及較少；并且由于不同品種、規(guī)格的魚(yú)對(duì)電擊的承受能力有較大差異，電麻醉參數(shù)、效果各有不同；總體而言，電麻醉技術(shù)還處于探索階段。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)原料

本試驗(yàn)選用人工養(yǎng)成后上市的鮮活珍珠龍膽石斑魚(yú)，采購(gòu)于上海江楊水產(chǎn)市場(chǎng)，體質(zhì)量500 ± 50 g。

采用充氣有水運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室，停食暫養(yǎng)24 h后進(jìn)行試驗(yàn)。暫養(yǎng)條件參考朱乾峰[3]研究結(jié)果，設(shè)置為：循環(huán)過(guò)濾人工海水，曝氣24 h，鹽度22～25，水溫26 ±1℃，溶氧6～8 mg/L。

1.2 儀器與設(shè)備

LR-24便攜式魚(yú)類電麻醉設(shè)備，美國(guó)SMITH-ROOT公司(輸出電壓50～990V ，輸出頻率1～120 Hz ，輸出功率25～400 W ，通電區(qū)域1 000 mm×400 mm可調(diào)節(jié))；SpectraMax i3多功能酶標(biāo)儀，美國(guó)美谷分子儀器公司；VS-15000CFNⅡ高速冷凍離心機(jī)(轉(zhuǎn)速0～15 000 r/min) ，上海民儀電子有限公司；LRH-70生化培養(yǎng)箱，上海齊欣科學(xué)儀器有限公司。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、乳酸脫氫酶(LDH)、葡萄糖(GLU)、乳酸(LD)試劑盒，魚(yú)皮質(zhì)醇酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒均來(lái)自南京建成生物科技有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 行為學(xué)試驗(yàn)

參考Chatakondi[8]的研究結(jié)果，采用標(biāo)準(zhǔn)脈沖直流電作為電源，占空比25%，頻率30 Hz。 根據(jù)石斑魚(yú)體質(zhì)量進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)篩選，設(shè)定試驗(yàn)電壓范圍為80～150 V，電擊時(shí)間3 s，每間隔10 V設(shè)置一個(gè)試驗(yàn)梯度。試驗(yàn)時(shí)，每次迅速將一尾魚(yú)撈起投入電麻醉水箱(500 mm ×400 mm)，電擊3 s后撈出投入暫養(yǎng)水箱，觀察并記錄試驗(yàn)魚(yú)行為狀態(tài)、休眠時(shí)間。每12尾魚(yú)為一個(gè)試驗(yàn)組，每尾魚(yú)僅實(shí)驗(yàn)1次。試驗(yàn)后統(tǒng)計(jì)不同試驗(yàn)組石斑魚(yú)的麻醉率以及72 h存活率。

1.3.2 血液生化指標(biāo)測(cè)定

根據(jù)行為學(xué)試驗(yàn)結(jié)果，優(yōu)選100 V、110 V、120 V 3個(gè)電壓梯度，將試驗(yàn)魚(yú)電擊后的即刻標(biāo)記為0 h,分別在電擊后的0 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h抽取血液，測(cè)定指標(biāo)。另取一對(duì)照組，不經(jīng)任何電擊處理，標(biāo)記為0 V。

每次抽血時(shí)隨機(jī)挑選3條試驗(yàn)魚(yú)，迅速?gòu)暮銣仞B(yǎng)殖箱中撈起，采用一次性注射器尾靜脈或尾動(dòng)脈取血，取血量約為2 mL，每尾魚(yú)僅抽取一次血液。取血后將血液室溫靜置40 min、 4℃條件下，4 000 r/min反復(fù)離心，吸取上層血清測(cè)定其谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、葡萄糖、乳酸以及皮質(zhì)醇含量。

1.4 指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 完全麻醉狀態(tài)

參照馮廣朋等[9]對(duì)西伯利亞幼鱘魚(yú)電麻醉的不同階段分類，當(dāng)試驗(yàn)魚(yú)身體僵直，鰓動(dòng)微弱，對(duì)外界刺激無(wú)條件反射能力時(shí)，認(rèn)為其進(jìn)入完全麻醉狀態(tài)。

1.4.2 休眠時(shí)間

電麻醉達(dá)到完全麻醉狀態(tài)的試驗(yàn)魚(yú)，認(rèn)為其從停止受到電擊刺激至可以自主直立游動(dòng)，且對(duì)外界刺激有條件反射能力的時(shí)間為休眠時(shí)間。

1.4.3 麻醉率

將試驗(yàn)魚(yú)在不同電壓下電擊3 s后，取達(dá)到完全麻醉狀態(tài)的試驗(yàn)魚(yú)統(tǒng)計(jì)麻醉率，計(jì)算公式為：

(1)

式中：A表示麻醉率%；n表示進(jìn)入完全麻醉狀態(tài)的試驗(yàn)魚(yú)；N表示每組試驗(yàn)中試驗(yàn)魚(yú)總數(shù)。

1.4.4 電麻醉階段分類

參考Henyey等[10]對(duì)鱘魚(yú)電麻醉效應(yīng)的描述，將珍珠龍膽石斑魚(yú)在電麻醉通電過(guò)程中的行為表現(xiàn)分為3個(gè)階段：電刺激期、電緊張期以及電麻醉期。電刺激期試驗(yàn)魚(yú)表現(xiàn)出快速游動(dòng)、逃竄、掙扎等劇烈應(yīng)激行為；電緊張期試驗(yàn)魚(yú)多數(shù)停止游動(dòng)，肌肉震顫，身體僵直，背鰭直立，側(cè)鰭張開(kāi)；電麻醉期試驗(yàn)魚(yú)魚(yú)體完全僵直，鰓蓋大張，側(cè)翻或者翻肚。

1.5 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0和Microsoft Excel 2016 處理分析，結(jié)果表示為(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)，采用單因素ANOVA檢驗(yàn)結(jié)合鄧肯檢驗(yàn)法進(jìn)行差異性分析，P<0.05表示差異顯著。采用Origin 2019軟件繪制相關(guān)圖表。

2 結(jié)果

2.1 珍珠龍膽石斑魚(yú)電麻醉行為學(xué)特征

2.1.1 電麻醉時(shí)珍珠龍膽石斑魚(yú)的行為特征

與鯰魚(yú)[11]、鱘魚(yú)[9]、銅魚(yú)[12]電麻醉時(shí)的行為類似，珍珠龍膽石斑魚(yú)在通電初始表現(xiàn)為快速游動(dòng)、逃逸等行為，隨著通電時(shí)間的增加，試驗(yàn)魚(yú)逐漸僵直，鰓蓋大張、背鰭豎直、側(cè)鰭遠(yuǎn)離軀干且肌肉震顫，直至試驗(yàn)魚(yú)出現(xiàn)側(cè)倒或翻肚，沉入池底，進(jìn)入完全麻醉狀態(tài)。當(dāng)麻醉電壓小于100 V時(shí)，試驗(yàn)魚(yú)幾乎無(wú)法進(jìn)入完全麻醉狀態(tài)，在通電時(shí)間內(nèi)，試驗(yàn)魚(yú)快速游動(dòng)、掙扎劇烈，電刺激期、電緊張期時(shí)間較長(zhǎng)，電麻醉期時(shí)間短暫甚至不表現(xiàn)出電麻醉期的行為特征；隨著電壓的增加，麻醉的前兩個(gè)階段時(shí)間不斷縮減，當(dāng)麻醉電壓為100 V左右時(shí)，絕大多數(shù)試驗(yàn)魚(yú)可以進(jìn)入電麻醉期進(jìn)而達(dá)到完全麻醉狀態(tài)，電刺激期與電緊張期的行為特征表現(xiàn)不明顯，通電過(guò)程中偶見(jiàn)逃竄現(xiàn)象；當(dāng)電壓增加到130 V左右時(shí)，試驗(yàn)魚(yú)大多通電初始便表現(xiàn)出電麻醉期的行為學(xué)特征，即鰓蓋大張、身體僵直，隨后直接進(jìn)入完全麻醉狀態(tài)。

結(jié)束通電后，在完全麻醉狀態(tài)期間，試驗(yàn)魚(yú)鰓蓋閉合微弱且緩慢，身體僵直，側(cè)倒于池底，對(duì)外界刺激無(wú)反應(yīng)。隨著時(shí)間增加，鰓動(dòng)速度逐漸加快，幅度加大，尾柄擺動(dòng)，對(duì)外界刺激有微弱反應(yīng)。隨后實(shí)驗(yàn)魚(yú)進(jìn)一步恢復(fù)，身體直立，鰓動(dòng)正常，可以沿池壁在魚(yú)池底部緩慢游動(dòng)。此時(shí)，試驗(yàn)魚(yú)在無(wú)干擾的情況下行為與未電擊前幾乎無(wú)差異，但相對(duì)于對(duì)照組，仍更易于捕撈，且對(duì)捕撈、采血等脅迫表現(xiàn)出更少的掙扎，這種表現(xiàn)持續(xù)12～24 h左右。

2.1.2 不同電壓麻醉珍珠龍膽石斑魚(yú)的休眠時(shí)間及存活率

在25 ℃的水溫下，不同電壓電擊珍珠龍膽石斑魚(yú)至完全麻醉狀態(tài)后，試驗(yàn)魚(yú)的休眠時(shí)間及72 h存活率如表1。從表1得，麻醉率、休眠時(shí)間與電壓成正相關(guān)，其中，當(dāng)電擊電壓為80 V時(shí)，試驗(yàn)魚(yú)休眠時(shí)間為0 min，即停止通電后的試驗(yàn)魚(yú)放回暫養(yǎng)水缸便立即恢復(fù)正常游動(dòng)狀態(tài)；當(dāng)電擊電壓為100 V時(shí)，麻醉率為92%，休眠時(shí)間為17.0±3.84 min，與80 V、90 V試驗(yàn)組差異顯著，(P<0.05)；電擊電壓為130 V時(shí)，試驗(yàn)魚(yú)72 h存活率僅為45%。

表1 不同電壓麻醉對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)的麻醉效果

2.2 不同電壓麻醉對(duì)珍珠龍石斑魚(yú)血清中酶類的影響

如圖1所示，電麻醉后試驗(yàn)魚(yú)血清中GOT活力呈先上升后下降的趨勢(shì)，100 V、110 V、120 V試驗(yàn)組電擊后即刻的GOT(谷草轉(zhuǎn)氨酶)活力分別是35.92 U/L、39.99 U/L、46.15 U/L，3組數(shù)值均與對(duì)照組有顯著性差異。相較于0 h，電麻醉后4 h各試驗(yàn)組珍珠龍膽石斑魚(yú)血清中GOT活力均上升達(dá)到最大值，其中120 V試驗(yàn)組GOT活力最大，達(dá)53.96 U/L，與其他組別差異顯著，100 V試驗(yàn)組血清 GOT 水平低于其他試驗(yàn)組；麻醉4 h之后，各試驗(yàn)組GOT活力均開(kāi)始持續(xù)下降。

圖1 不同電壓麻醉珍珠龍膽石斑魚(yú)血液中谷草轉(zhuǎn)氨酶濃度的變化

如圖2所示，120 V、110 V試驗(yàn)組的GPT(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)活力隨時(shí)間增加而下降，100 V試驗(yàn)組的血清GPT 活力則呈先下降后上升的趨勢(shì)。

圖2 不同電壓麻醉珍珠龍膽石斑魚(yú)血液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶濃度的變化

試驗(yàn)0 h時(shí)，100 V、110 V、120 V試驗(yàn)組均與對(duì)照組差異顯著；試驗(yàn)72 h時(shí)，110 V試驗(yàn)組的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力下降至185.78 U/L，與對(duì)照組差異不顯著。此時(shí)，100 V試驗(yàn)組 GPT 活力試驗(yàn)全程低于對(duì)照組，且差異顯著。

如圖3，各試驗(yàn)組的LDH(乳酸脫氫酶)活力隨時(shí)間變化呈先下降后平穩(wěn)變化的趨勢(shì)，并且表現(xiàn)出電壓越高，LDH活力越高的特點(diǎn)。0 h時(shí)，3個(gè)試驗(yàn)組均與對(duì)照組差異顯著，且三者之間，兩兩對(duì)比差異顯著；試驗(yàn)4 h時(shí)，100 V試驗(yàn)組LDH活力開(kāi)始降低并達(dá)到對(duì)照組水平以下；試驗(yàn)12 h時(shí)，110 V試驗(yàn)組LDH活力降低至72.96 U/L，低于對(duì)照組水平；試驗(yàn)48 h時(shí)，120 V試驗(yàn)LDH活力仍顯著高于對(duì)照組，110 V試驗(yàn)組LDH活力低于對(duì)照組且差異不顯著，100 V試驗(yàn)組LDH活力低于對(duì)照組且差異顯著。

圖3 不同電壓麻醉珍珠龍膽石斑魚(yú)血液中乳酸脫氫酶濃度的變化

2.3 不同電壓麻醉對(duì)珍珠龍石斑魚(yú)能量代謝的影響

如圖4所示，電麻醉后的珍珠龍膽石斑魚(yú)的血糖呈先上升后下降的趨勢(shì)，并在12 h后趨于平穩(wěn)。電麻醉后4 h試驗(yàn)組達(dá)到血糖最大值。其中，120 V試驗(yàn)組血糖值最高，達(dá)到1.95 mol/L；100 V試驗(yàn)組血糖最低，為0.69 mol/L，與對(duì)照組無(wú)顯著性差異。試驗(yàn)12 h時(shí)，110 V試驗(yàn)組血糖值與對(duì)照組無(wú)顯著性差異。

圖4 不同電壓麻醉珍珠龍膽石斑魚(yú)血糖的變化

電麻醉后血液中的乳酸含量變化趨勢(shì)與血糖變化相類似(圖5)。試驗(yàn)4 h時(shí)，試驗(yàn)組乳酸水平達(dá)到最大值，其中120 V試驗(yàn)組乳酸水平遠(yuǎn)高于其他組，為1.69 mol/L。隨著時(shí)間的增加，各試驗(yàn)組乳酸含量逐漸與對(duì)照組接近。試驗(yàn)12 h，3個(gè)試驗(yàn)組乳酸水平全部低于對(duì)照組，且兩兩差異顯著；在麻醉后的48 h，各試驗(yàn)組與對(duì)照組均沒(méi)有顯著性差異。

圖5 不同電壓麻醉珍珠龍膽石斑魚(yú)血液中乳酸的變化

2.4 不同電壓麻醉對(duì)珍珠龍石斑魚(yú)皮質(zhì)醇的影響

如圖6所示， 電麻醉后血液中皮質(zhì)醇含量與電擊電壓呈正相關(guān)，電壓越大，皮質(zhì)醇含量越高。麻醉后4 h時(shí)，皮質(zhì)醇含量達(dá)到最大值，然后逐漸與對(duì)照組接近。其中，120 V、110 V試驗(yàn)組皮質(zhì)醇水平在試驗(yàn)全程均高于對(duì)照且差異顯著；100 V試驗(yàn)組在試驗(yàn)進(jìn)行的4 h后與對(duì)照組沒(méi)有顯著性差異。

圖6 不同電壓麻醉珍珠龍膽石斑魚(yú)血液中皮質(zhì)醇的變化

3 討論

3.1 電麻醉對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)行為學(xué)與存活率的影響

通過(guò)對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)的電麻醉試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)魚(yú)在遭受電擊時(shí)表現(xiàn)出明顯的電刺激(快速游動(dòng))、電緊張(肌肉收縮)與電麻醉(肌肉放松)[10]。在其他條件一定時(shí)，電擊電壓越高，試驗(yàn)魚(yú)的麻醉率越高、休眠時(shí)間越長(zhǎng)。當(dāng)電壓小于100 V時(shí)，電擊對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)的脅迫效應(yīng)大于麻醉效應(yīng)，導(dǎo)致石斑魚(yú)在通電時(shí)快速竄動(dòng)、劇烈掙扎，不能進(jìn)入完全麻醉狀態(tài)，或者休眠時(shí)間極短，甚至斷電即蘇醒，馮廣朋等[13]對(duì)西伯利亞鱘魚(yú)(Acipenserbaerii)也有相似的研究結(jié)果；而當(dāng)電壓大于120 V，除了可能出現(xiàn)的臟器損傷、脊椎損傷與出血[11]，還會(huì)造成魚(yú)復(fù)蘇后的生理紊亂[5]，影響試驗(yàn)魚(yú)的存活率。電擊后復(fù)蘇的試驗(yàn)魚(yú)對(duì)脅迫仍會(huì)表現(xiàn)出一定遲緩，且這種行為持續(xù)12～24 h，這與Bowzer等[14]對(duì)草魚(yú)電麻醉后得到的結(jié)果相類似。

3.2 電麻醉對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

3.2.1 電麻醉對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)血清酶類的影響

谷丙轉(zhuǎn)氨酶與谷草轉(zhuǎn)氨酶主要富集在肝臟細(xì)胞中，當(dāng)肝臟細(xì)胞功能正常時(shí)，血液中的兩種轉(zhuǎn)氨酶活性較低且較穩(wěn)定[15]。因此，經(jīng)常通過(guò)對(duì)谷丙轉(zhuǎn)氨酶與谷草轉(zhuǎn)氨酶的活力大小判斷肝損傷情況。不同電壓電擊石斑魚(yú)至麻醉均會(huì)導(dǎo)致谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著升高，但麻醉12 h后，各試驗(yàn)組轉(zhuǎn)氨酶活性逐漸接近對(duì)照組，100 V試驗(yàn)組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在試驗(yàn)全程始終低于對(duì)照組，其他試驗(yàn)組在0 h時(shí)谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力顯著性高于對(duì)照組，并在隨后逐漸下降，表明過(guò)高的電壓電擊麻醉對(duì)魚(yú)體肝臟造成一定影響。適宜的麻醉對(duì)魚(yú)類?；钸^(guò)程中的心臟、肝臟損傷有減緩作用[16]，對(duì)比對(duì)照組，100 V的標(biāo)準(zhǔn)脈沖直流電電擊使試驗(yàn)魚(yú)在麻醉狀態(tài)下進(jìn)行采血操作，對(duì)魚(yú)體的肝臟有一定保護(hù)功能，隨著麻醉狀態(tài)的消失，100 V試驗(yàn)組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在8 h后隨時(shí)間推移逐漸上升也證明了這一點(diǎn)。

乳酸脫氫酶是糖代謝途徑中不可或缺的一種酶，廣泛存在于各個(gè)器官內(nèi)，當(dāng)魚(yú)體受到外界環(huán)境刺激或組織器官發(fā)生病變、損傷時(shí)，其相對(duì)應(yīng)的機(jī)體內(nèi)環(huán)境、組織器官中的 LDH 就會(huì)發(fā)生變化[17]，無(wú)氧呼吸、心肌損傷等均會(huì)引起體內(nèi)乳酸脫氫酶活力升高[16]。本研究中，0 h時(shí)各試驗(yàn)組LDH活性的升高也可能與電擊激活試驗(yàn)魚(yú)體內(nèi)糖的無(wú)氧酵解過(guò)程，導(dǎo)致參與代謝的LDH大量增多并被釋放至血液中有關(guān)。與直接捕撈采血的對(duì)照組相比較，隨著時(shí)間推移，除120 V試驗(yàn)組外，其他試驗(yàn)組的LDH活力均逐漸低于對(duì)照組，且100 V試驗(yàn)組顯著性低于其他試驗(yàn)組，這可能表明電麻醉對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)心肌的脅迫較小，且是可逆的。在對(duì)史氏鱘魚(yú)[18]與圓口銅魚(yú)幼魚(yú)[12]的電麻醉試驗(yàn)中也認(rèn)為適當(dāng)?shù)碾姄魧?duì)心肌幾乎沒(méi)有損傷。

3.2.2 電麻醉對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)能量代謝的影響

血液中的葡萄糖為魚(yú)的各種生命活動(dòng)供應(yīng)能量[19]。在應(yīng)激條件下，魚(yú)體能量消耗增加，糖原加速分解，皮質(zhì)醇等激素加大肝臟進(jìn)行糖異生反應(yīng)，使得血糖進(jìn)一步提高，這種現(xiàn)象稱為“應(yīng)激性高血糖癥”，廣泛地出現(xiàn)在各種魚(yú)類中[11,20-22]。Barcellos等[23]認(rèn)為應(yīng)激性高血糖反應(yīng)較為靈敏且一般在出現(xiàn)后的24 h左右消失，因此可以利用血糖濃度輔助判斷魚(yú)類的應(yīng)激大小。本研究中，110 V、120 V試驗(yàn)組在電擊后血糖升高，與對(duì)照組差異顯著，不適宜作為珍珠龍膽石斑魚(yú)的麻醉電壓。

機(jī)體血液中乳酸與血糖有著相應(yīng)的關(guān)系[24]。乳酸主要在機(jī)體供氧不足時(shí)，細(xì)胞供能轉(zhuǎn)變?yōu)樘墙徒猱a(chǎn)生，血液中乳酸的濃度可以用來(lái)判斷無(wú)氧呼吸的強(qiáng)度[25]。本試驗(yàn)中，環(huán)境溶氧充足的情況下，試驗(yàn)組珍珠龍膽石斑魚(yú)血液中的乳酸可能來(lái)自受到電擊產(chǎn)生的掙扎、肌肉緊張等短時(shí)劇烈的物理活動(dòng)以及電擊后，石斑魚(yú)處于麻醉狀態(tài)，緩慢微弱的呼吸。對(duì)照組試驗(yàn)魚(yú)體內(nèi)的乳酸則受到捕撈采血時(shí)的應(yīng)激性物理活動(dòng)影響。隨著電麻醉效應(yīng)的消失，試驗(yàn)組血液中乳酸水平逐漸接近對(duì)照組，這與Trushenski等[26]對(duì)鱸魚(yú)電擊后得到的血液中乳酸濃度水平變化趨勢(shì)相類似。通過(guò)對(duì)試驗(yàn)魚(yú)血糖水平、皮質(zhì)醇含量分析，100 V電擊麻醉對(duì)試驗(yàn)魚(yú)的脅迫不大于對(duì)照組，同時(shí)，電擊使試驗(yàn)魚(yú)迅速進(jìn)入完全麻醉狀態(tài)，減少了試驗(yàn)魚(yú)在隨后人工操作時(shí)的掙扎應(yīng)激，在乳酸水平上表現(xiàn)出較對(duì)照組的顯著性優(yōu)勢(shì)。在針對(duì)羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus)[27]的電麻醉試驗(yàn)中也出現(xiàn)類似情況，即在合適的電麻參數(shù)下，羅非魚(yú)體內(nèi)乳酸濃度低于直接捕撈采血的對(duì)照組。

3.2.3 電麻醉對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)血液中皮質(zhì)醇水平的影響

皮質(zhì)醇被認(rèn)為是魚(yú)類應(yīng)激最敏感的激素指標(biāo)，在應(yīng)激后的0.5～24 h內(nèi)，皮質(zhì)醇水平可以提升至應(yīng)激前的10～100倍[28-29]。本研究中，不同實(shí)驗(yàn)條件獲得的皮質(zhì)醇濃度變化曲線相類似，均在4 h時(shí)達(dá)到最高峰，隨后開(kāi)始下降，類似的變化也出現(xiàn)在鱸魚(yú)幼魚(yú)[30]的電麻醉實(shí)驗(yàn)中；100 V試驗(yàn)組皮質(zhì)醇濃度0 h低于對(duì)照組，4 h時(shí)略高于對(duì)照組，之后與對(duì)照組水平相當(dāng)，且變化平緩，表明100 V的脈沖標(biāo)準(zhǔn)直流電電擊麻醉對(duì)試驗(yàn)魚(yú)的脅迫略高于直接捕撈采血，但差異不顯著，更適于珍珠龍膽石斑魚(yú)的電麻醉。

4 結(jié)論

電麻醉用時(shí)短，休眠時(shí)間長(zhǎng)，有利于人工操作與提升運(yùn)輸?；钸^(guò)程中的品質(zhì)與效率。但國(guó)內(nèi)外對(duì)電麻醉的研究仍不夠深入。考慮到不同個(gè)體對(duì)電麻醉的敏感度不同，目前，國(guó)內(nèi)僅針對(duì)少數(shù)幾種魚(yú)進(jìn)行試驗(yàn)，且麻醉休眠時(shí)間較短，大部分處于“斷電即活”狀態(tài)，沒(méi)有真正進(jìn)入休眠狀態(tài)；美國(guó)史密斯公司研發(fā)的電麻醉設(shè)備，但未給出電麻醉具體參數(shù)，需要用戶根據(jù)經(jīng)驗(yàn)摸索，造成主觀影響。本研究針對(duì)高價(jià)值海洋魚(yú)類珍珠龍膽石斑魚(yú)進(jìn)行電麻醉，發(fā)現(xiàn)合理設(shè)置電麻醉的各項(xiàng)參數(shù)可以有效地減少電麻醉對(duì)魚(yú)體的傷害，并同時(shí)延長(zhǎng)休眠時(shí)間，有利于珍珠龍膽石斑魚(yú)在養(yǎng)殖運(yùn)輸過(guò)程中的各項(xiàng)人工操作的開(kāi)展，減少損耗。關(guān)于珍珠龍膽石斑魚(yú)的相關(guān)電麻醉技術(shù)還需進(jìn)一步研究，后續(xù)將深入開(kāi)展環(huán)境溫度等因素的研究試驗(yàn)工作，為提高珍珠龍膽石斑魚(yú)?；盍魍ㄟ^(guò)程的品質(zhì)與效率提供參考。

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