新城疫的流行病學(xué)、臨床癥狀及診斷方法

張繼希/河南省濮陽市經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)畜牧局 457600

1 ND 的流行歷史及分布

鳥類可在全球范圍內(nèi)傳播大量的微生物，這些微生物中可能存在對圈養(yǎng)和散養(yǎng)鳥類（包括家禽）有害的病原微生物。在過去的幾年一發(fā)現(xiàn)NDV 和流感病毒可通過候鳥在全球范圍內(nèi)傳播，這表明野生鳥類物種可作為生物載體或天然宿將NDV 傳染至家養(yǎng)和野生鳥類種群中。ND 于1926年在英國泰恩湖畔紐卡斯?fàn)柺状伪挥涗?，同時在爪哇島也有相關(guān)報道，盡管在某些研究中表明ND 可能在更早的時間有暴發(fā)。之后，菲律賓、印度、日本、澳大利亞和肯尼亞也發(fā)現(xiàn)了新城疫。到1952年，在巴勒斯坦、敘利亞、法屬剛果（今加蓬、剛果共和國和中非共和國）、西西里島、歐洲和美國也有報道。在1960年代，夏威夷、加拿大、墨西哥、中美洲和南美洲、中國和整個歐洲都報告了ND。ND 的廣泛分布和每年暴發(fā)的大量報道表明，盡管在全球內(nèi)使用疫苗防控ND，但僅通過疫苗接種防控ND 在某些情況下仍無法控制該病。在2006～2009年間受ND 影響最嚴(yán)重國家分別是伊朗、南非、以色列、中國、越南、哥倫比亞、羅馬尼亞、韓國、科威特和瑞典。從2006年到2009年，平均每年有56個國家暴發(fā)ND，在報道的疾病中，ND僅在狂犬病之后排名第二。從2008年到2010年，77 個國家確定并輕重暴發(fā)了ND，隨后在2013年有68 個、2014年61 個和2015年56 個。但ND 在部分地區(qū)的報告不足，特別是NDV 流行比較強的地區(qū)，這也表明這些數(shù)字并不明明確當(dāng)?shù)匾呀?jīng)很糟糕的ND 流行情況。許多受ND 影響的國家也缺乏良好的生物安全措施，因此在疫苗和生物安全措施得到改進之前，ND 可能會在這些地區(qū)持續(xù)存在。在二十世紀(jì)70年代和90年代，NDV 在野生鳥類中分離出來，在美國發(fā)生了NDV 從野生鸚鵡/鸕鶿傳播到雞的事件。這些研究結(jié)果表明病毒傳播時應(yīng)對野生鳥類中的ND進行持續(xù)監(jiān)測。在印度，許多鳥類物種，包括雞、火雞、鵪鶉、鴯鹋、鴨、孔雀、鴿子、珍珠雞已發(fā)現(xiàn)作為NDV 的潛在感染宿主。

2 ND 的流行病學(xué)

NDV 除可感染雞外，還可感染其他鳥類，如鴿子、鸕鶿、鸚鵡、雉雞、孔雀、野生水禽。一般來說，火雞對NDV 的抵抗力略高于雞，但一些適應(yīng)火雞或其他野生鳥類的毒株更容易感染該物種。鵝和鴨對NDV 感染已表現(xiàn)出一定的抵抗力，鴨很少表現(xiàn)出臨床癥狀，而鵝則表現(xiàn)出略高于鴨的易感性，這取決于NDV 毒株。據(jù)報道，目前NDV 可感染的鳥類種類至少有236種，而NDV 可通過突變跨越獲得跨越種間屏障能力。此外，從野生鳥類中分離出的NDV 毒株可導(dǎo)致ND 在雞中的暴發(fā)。例如，在遷徙的鸕鶿身上分離出的NDV 被確定是家禽中流行ND 的可能來源。野生鳥類和家禽之間的ND 傳播經(jīng)常發(fā)生，而野生鳥類在NDV 進化和適應(yīng)環(huán)境中起關(guān)鍵作用。NDV 主要通過吸入或攝入受感染鳥類的糞便和呼吸道分泌物中排出的病毒傳播，傳播的時間可能不同。已發(fā)現(xiàn)一些病毒可通過雞蛋傳播給孵化的小雞。此外，發(fā)現(xiàn)NDV 可存在于鳥類所有部位，并且如果在冷藏溫度下保存，NDV 能夠在雞皮和骨髓存在數(shù)個月。NDV 在環(huán)境中相對穩(wěn)定，因此可能通過污染物傳播給家禽。已發(fā)現(xiàn)NDV 在被感染鳥類污染的禽舍中，在夏季可存活7d，在春季存活14d，冬天存活30d。一項研究證明在不同材料和溫度下NDV 可存在不同的時間，表明NDV 是一種在多種類型材料和不同溫度下高度穩(wěn)定的病毒，并證實了污染物作為NDV 引入和傳播過中的潛在載體。ND 的潛伏期通常為2～15d，雞類和鳥類（雞、火雞、松雞、野雞和鷓鴣）在感染后長達1～2 周內(nèi)會傳播NDV，然而鸚鵡類鳥類已被證明在感染后的數(shù)月至1年內(nèi)可傳播傳染性病毒，并主要通過呼吸道分泌物和糞便傳播。

3 ND 的臨床癥狀及病理變化

ND 的臨床表現(xiàn)和病理變化與許多病毒和細菌性疾病相似，并常出現(xiàn)混淆擾亂判斷。最常見與ND 區(qū)分的疾病有高致病性禽流感、傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎和禽痘，細菌病有禽霍亂、支原體病和鸚鵡熱。將ND 與這些疾病區(qū)分開是初步診斷的關(guān)鍵任務(wù)。根據(jù)臨床和病理表現(xiàn)，可出現(xiàn)五種形式的ND。最嚴(yán)重的的形式是速發(fā)型ND，其特征是死亡率和發(fā)病率均接近于100%。速發(fā)型ND 臨床表現(xiàn)有結(jié)膜炎、流鼻涕、呼吸困難、腹瀉、羽毛豎起、虛脫、震顫和癱瘓。剖檢時可見整個消化道都出現(xiàn)潰瘍性出血，尤其是兩胃交接處和盲腸扁桃體。在一些內(nèi)臟器官中也可觀察到壞死灶，如脾臟、肝臟和腸道相關(guān)淋巴組織。神經(jīng)系統(tǒng)中，出血管周圍出現(xiàn)套扎之外，在死于神經(jīng)癥狀的鳥類可以觀察到由NDV 引起的神經(jīng)損傷。另一種形式是速發(fā)型嗜中性型，其特征是出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)和一些呼吸道臨床癥狀，不涉及胃腸道病變。通常被感染的鳥類會表現(xiàn)出角弓反張、顫抖、頭部扭曲等。即使在表現(xiàn)出典型癥狀的死亡的鳥類中，肉眼眼觀病變常常不存在，然而在組織學(xué)上，浦肯野纖維壞死和血管夠味套疊發(fā)生率很高。中源性ND 還與神經(jīng)系統(tǒng)和呼吸道癥狀有關(guān)，死亡率非常低。在正常條件下臨床癥狀與產(chǎn)蛋率下降和中度呼吸系統(tǒng)疾病有關(guān)。大體的病理學(xué)變化也不明顯，由于繼發(fā)性細菌感染僅表現(xiàn)出輕微的脾臟腫大和其他病變。組織病理學(xué)變化包括神經(jīng)膠質(zhì)細胞增生和血管周圍套疊，可能會伴有胰腺壞死。ND 的其他兩種表現(xiàn)形式有緩慢型ND 和無癥狀腸道型ND，通常與臨床輕度病變或無臨床表現(xiàn)有關(guān)。

4 ND 的診斷方法

禽流感、傳染性支氣管炎和傳染性喉氣管炎病毒等禽呼吸道病原體都被認為是在ND 臨床表現(xiàn)鑒定常引起混淆的病原體。因此，在ND 的診斷中，快速找到其他病原體十分重要，并決定著ND 的正確的疾病治療與控制措施。

在ND 的診斷中，NDV 的分離是確診ND 的金標(biāo)準(zhǔn)，通常用于驗證其他檢測方法的準(zhǔn)確性。NDV 的分離所需的樣品取決于病毒的復(fù)制位點和病毒脫落途徑?jīng)Q定。在活禽中，所需的樣品包括在含或不含抗生素的生理鹽水或其他等滲溶液中收集的泄殖腔和口咽拭子。若家禽處于瀕死期或已死亡，除了泄殖腔和口鼻拭子外，樣品還包括肺、腎、肝、腸、脾和盲腸扁桃體，分別收集并合并收集。血清學(xué)檢測在NDV 監(jiān)測中應(yīng)無法區(qū)分是否接種疫苗動物和自然感染動物而被低估。盡管如此，血清學(xué)檢測仍是許多診斷實驗室來評估疫苗接種效果的最主要方法。ND 的最簡單和最便宜的血清學(xué)檢測方法是血凝抑制試驗。

NDV 血清學(xué)中使用另一種常用方法是ELSIA，許多夾心、競爭或間接ELISA 試劑盒已在市場上出售。該方法具有高度的敏感性，而結(jié)果與血凝抑制試驗結(jié)果相似。病毒中和試驗是另一種血清學(xué)檢測方法，特別適用于測定NDV 特異性中和抗體。

傳統(tǒng)診斷技術(shù)的缺點證明需要開發(fā)更快速和準(zhǔn)確的ND 診斷方法，其中，NDV 的RT-PCR 是最常用的分子診斷方法。該方法可以快速準(zhǔn)確的檢測臨床樣品中NDV 的基因組，靈敏度較高，然而由于NDV 的新型毒株的不斷出現(xiàn)以及變異，需要定期更新該方法中的引物，以解決由于引物為點突變而造成的無法檢測出的變異狀態(tài)。

熒光定量PCR 檢測方法速度更快準(zhǔn)確性更高，但其操作方法和所需的儀器設(shè)備是該方法普遍應(yīng)用的主要問題。最近，開發(fā)了一種環(huán)介導(dǎo)等溫擴增的檢測方法，該方法簡單、靈敏且價格低廉，使其十分有希望成為農(nóng)村地區(qū)快速診斷方法之一，然而該方法的引物序列設(shè)計的困難性是該方法研制中的一大難題?；诜肿拥脑\斷方法無疑徹底該病了傳染病診斷的世界，因為它在識別病原體方面具有簡單、快速、靈敏的特點。然而，這些檢測中大多數(shù)一次只能檢測出一種或幾種病原體。微陣列雜交技術(shù)能同時檢測出成百上千個目的病原而不會影響檢測的靈敏度和特異性。

NDA 微陣列是新興的診斷方法之一，在不久的未來可能會勝過傳統(tǒng)的NDV 分型技術(shù)。該方法具有高度敏感性、特異性，并同時檢測臨床樣品中多種病原的能力。新一代測序的出現(xiàn)徹底改變了傳染病的診斷，該方法不僅在追蹤疾病流行情況方面具有重要作用，還有助于快速、靈敏和特異性檢測和區(qū)分單個宿主的混合感染情況。

5 結(jié)語

在ND 流行的地區(qū)，該病的預(yù)防和控制應(yīng)包括撲殺染病動物、主動監(jiān)測、提高生物安全性和嚴(yán)格的疫苗接種計劃。任何策略都需要伴隨著嚴(yán)格的政策和程序措施，其中包括對疫病的記錄和病料保存，對于感染動物的處理等。而為了有效的控制家禽中NDV 的感染，必須快速、準(zhǔn)確的確定病原體。另一方面，當(dāng)前使用的NDV 的滅活或減毒疫苗均只能預(yù)防臨床疾病而不能防止病毒脫落，尤其是異源病毒攻擊后。而一種優(yōu)秀的疫苗不僅能預(yù)防臨床疾病還可減少和消除病毒脫落，從而增加引起感染所需病毒的數(shù)量。綜上所述，還需進一步對ND 的病原學(xué)和流行病學(xué)研究，并持續(xù)不斷更新研發(fā)新型的診斷試劑和疫苗。