禽傳染性支氣管炎的診斷

余榮珍/河南省南陽市鎮(zhèn)平縣農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊 474250

禽傳染性支氣管炎病毒(IBV)是一種高度傳染性的病原體，在雞體內(nèi)，病毒主要通過氣溶膠和攝入被糞便污染的水和飼料傳播。由此引起的疾病，傳染性支氣管炎主要表現(xiàn)出不同承兌呼吸道疾病.此外，病毒可以感染呼吸系統(tǒng)的另一部分，包括肺和氣囊。然后，根據(jù)病毒株的不同，病毒可以在其他上皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，如輸卵管和腎上皮細(xì)胞，并在其他組織中引起感染。

IBV 會引起呼吸道疾病，盡管該病毒的復(fù)制并不局限于呼吸道。IB 是雞(家禽)的主要呼吸道病毒，在所有飼養(yǎng)雞的國家都流行。IBV 的宿主范圍被認(rèn)為僅限于雞，盡管基因上非常相似的冠狀病毒會引起火雞的疾病。IBV在全球范圍內(nèi)發(fā)生，無論是在大規(guī)模飼養(yǎng)的雞還是在小規(guī)模飼養(yǎng)的雞。

IBV 可引起鼻和氣管纖毛上皮細(xì)胞的調(diào)節(jié)，臨床表現(xiàn)與第1 組和第2組人類冠狀病毒引起的普通感冒相似。尤其是幾天或幾周大的雞，會流鼻涕、咯咯作響(類似于打噴嚏)、流淚和昏昏欲睡。有些雞表現(xiàn)出呼吸道下部的癥狀，肺部可觀察到小面積的肺炎。肺部病毒的滴度可能與鼻腔和氣管相似，但支氣管炎不被認(rèn)為是引起肺炎的原因。

受害最嚴(yán)重的是幾天或幾周大的小雞。有些可能直接死于病毒感染，但更多的死于繼發(fā)性細(xì)菌感染。幼齡和成熟的鳥類較少受到IBV 感染，但在產(chǎn)蛋期感染該IBV 的經(jīng)濟后果可能是災(zāi)難性的，因為產(chǎn)蛋量急劇下降，而且通常不會在整個群體中恢復(fù)正常。

IBV 生長在呼吸道以外的許多上皮表面。雖然許多消化道組織對IBV易感，但腸道組織的感染通常不會在臨床上表現(xiàn)出來。腎炎在自然感染IBV的肉型禽類中所占比例并不少見，環(huán)境因素起著一定的作用。有些IBV 株具有腎致病性，也就是說，當(dāng)實驗將IBV接種到無病原體雞中時會引起腎炎。IBV 對輸卵管細(xì)胞也很敏感，這可能導(dǎo)致雞蛋產(chǎn)量減少。

1 發(fā)病機理

傳染性支氣管炎病毒主要感染呼吸系統(tǒng)。然而，一些變異體和幾個野生分離株會影響雞的生殖、腎臟和消化系統(tǒng)。疾病的發(fā)病機理因所涉及的系統(tǒng)以及病毒的毒株而異。

1.1 寄主敏感性雖然家禽(雞)和野雞被認(rèn)為是IBV 的天然宿主，其他IBV 類冠狀病毒已在其他鳥類中被鑒定，包括野雞、孔雀、火雞、鵝、鴿子、企鵝、鵪鶉、鴨子和亞馬遜鸚鵡?；痣u冠狀病毒(TCoV)與雞傳染性支氣管炎病毒(AIBV)的抗原性相似。已在與家禽有密切接觸的人身上發(fā)現(xiàn)了抗IBV的抗體，但還沒有報告說這種病毒會引起人類的臨床疾病。

1.2 年齡和品種傾向所有年齡和品種的雞對IBV 感染都很敏感，但與成年雞相比，這種疾病的程度和嚴(yán)重程度在雛雞中是明顯的。同樣，對感染的抵抗力也隨著年齡的增長而增加。實驗證據(jù)表明，與151 品系相比，C系白萊茵雞對M41 IBV 的抗性更強，盡管兩者的病毒脫落率相似?？赡苁茈u主要組織相容性復(fù)合體遺傳多態(tài)性的影響。

1.3 感染與傳播病毒通過呼吸道分泌物和受感染家禽的糞便傳播。受污染的物體和用具可能會幫助病毒從一群傳播到另一群。病毒在氣霧劑傳播后24h 出現(xiàn)在氣管、腎臟和法氏囊。IBV 持續(xù)存在的性質(zhì)尚待闡明；然而，在盲腸扁桃體(長達(dá)14 周)和糞便(20周)中檢測病毒可能表明糞便脫落在病毒傳播和持續(xù)中的作用。

1.4 潛伏期感染劑量和感染途徑不同，IBV 潛伏期較短。例如，雖然經(jīng)氣管途徑感染的時間可能短至18h，但眼內(nèi)接種可導(dǎo)致36h 的潛伏期。

2 臨床表現(xiàn)

在宿主中，最初的感染發(fā)生在腺、氣管、肺和氣囊的上皮。病毒然后轉(zhuǎn)移到腎臟和泌尿生殖道，以建立全身感染。在這方面，IBV 的嚴(yán)重程度和臨床特征取決于所涉及的器官或系統(tǒng)。呼吸系統(tǒng)感染可能導(dǎo)致臨床癥狀，如喘息，打噴嚏，氣管羅音，無精打采，流鼻液。受影響的鳥顯得無精打采，枯燥無味，羽毛蓬亂。其他跡象可能包括體重減輕。

3 診斷

傳統(tǒng)的和更先進(jìn)的方法已經(jīng)被用來診斷IBV 感染。檢測試驗的選擇取決于樣品類型、試驗材料和設(shè)施的可用性、試驗報告時間、試驗?zāi)康囊约霸囼炇窃诂F(xiàn)場進(jìn)行還是在實驗室進(jìn)行。

3.1 血清學(xué)在過去，病毒中和(VN)和血凝抑制等血清學(xué)檢測方法被廣泛應(yīng)用于IBV 毒株的檢測和血清學(xué)分型。這些測試也被用來測量接種疫苗后的保護。血清型特異性抗體通常是用HI檢測的，盡管HI 試驗不那么可靠。另一方面，ELISA 檢測更敏感，易于用于現(xiàn)場使用和監(jiān)測接種或暴露后的抗體反應(yīng)。然而，不同的IBV 血清型的出現(xiàn)并不會與常見的抗血清發(fā)生交叉反應(yīng)，這使得血清學(xué)試驗在分類新的或正在出現(xiàn)的IBV 分離物。

3.2 病毒分離鑒定病毒分離是診斷IBV 的金標(biāo)準(zhǔn)。在疾病早期采集樣本并確保正確的取樣技術(shù)是成功分離IBV 的重要關(guān)鍵。為了支持從拭子中成功分離病毒，建議在將樣本送到實驗室之前，將樣本放入PBS 緩沖溶液中。如果要收集組織樣本，推薦的組織是氣管、腎臟、前胃、扁桃體和輸卵管。組織樣本必須在雞死后立即無菌采集，放置在無菌、密封嚴(yán)密的塑料標(biāo)本袋中，然后運至實驗室進(jìn)行進(jìn)一步加工。由于病毒在卵或細(xì)胞培養(yǎng)中傳代所需的時間等嚴(yán)格的技術(shù)要求和因素，限制了將病毒分離作為IBV 感染診斷方法的選擇。盡管如此，不同的實驗室仍采用不同的隔離方法。

4 疫苗接種

肉型雛雞通常在孵化當(dāng)天通過噴霧在孵化室接種疫苗。這些禽類在這么小的日齡就接種了疫苗，部分原因是由于經(jīng)濟方面的原因。此外由于IBV在世界上許多家禽飼養(yǎng)地區(qū)都是地方病，因此需要盡早加以保護。IBV 感染對雛雞的影響較大?，F(xiàn)代肉雞只在6周大的時候就開始加工，所以疫苗接種必須要早。

一次減毒活疫苗接種后對呼吸道的保護被發(fā)現(xiàn)是短暫的；疫苗接種后6 周和9 周受保護雞的數(shù)量分別下降。在特定血清型IBV 疫苗始終無法提供可接受的保護以抵御野外挑戰(zhàn)的地區(qū)，首次應(yīng)用疫苗后2～3 周，可以對這些禽類進(jìn)行重復(fù)接種。

一些IBV 菌株具有明顯的腎致病性。例如，B 1648 腎致病株對商品肉雞的實驗性氣管感染，導(dǎo)致68 只雞中約有1/3 在9d 內(nèi)死亡。通過粗噴劑接種，并在4 周后的挑戰(zhàn)中完全防止死亡。用非同源的商業(yè)上可用的疫苗接種疫苗，雖然沒有完全接種，但降低了死亡率。病毒分離證實，同源疫苗阻止了病毒在氣管內(nèi)的可檢測生長，但異源疫苗不起作用。用同源疫苗接種可檢測到IBV 的雛雞的數(shù)量減少了84%，而異源疫苗則完全減少了84%。

滅活油乳劑IBV 疫苗是20 世紀(jì)60年代和70年代發(fā)展起來的。其目的是研制一種疫苗，使母雞具有持久的免疫力，防止蛋產(chǎn)量下降。然而，用一劑滅活的IBV M41 株對11 只雞進(jìn)行免疫，可使36%～45%的試驗雞被保護。1 0 0μg 的保護效果不如5μg，在第2 次實驗中，10μg 劑量后，對17 只雞的保護率為2 9%～76%，在第3 次實驗中，10 只雞中有4 0%的雞受到保護。這三個實驗中使用的病毒數(shù)量可能比以前的研究人員多，這也是部分成功的原因。

IBV 核衣殼蛋白(N) 在保護性免疫中的作用是研究的一部分，4 周齡用滅活I(lǐng)BV 免疫雛雞，6 周后再用滅活I(lǐng)BV 免疫雛雞。通過對兩組雞氣管纖毛活動的評估，分別對1/8 和8/8 雞進(jìn)行了保護。免疫熒光法檢測感染氣管細(xì)胞的保護程度稍低。10 只雞中有40% 和20% 的雞在氣管和腎臟有保護作用。這些百分比在四次劑量后沒有增加。用滅活的腎致病株對雞進(jìn)行三次免疫。8 只雞經(jīng)兩次接種后，腎臟和氣管的保護分別為50%和13%，三次接種后分別提高到88%和50%。

常用的方法是用活疫苗給雌性幼禽進(jìn)行2 次或2 次以上的疫苗接種，然后在禽類進(jìn)入產(chǎn)蛋期時注射一劑滅活疫苗。活疫苗對幼齡動物起到保護作用，并對后來的滅活疫苗的免疫應(yīng)答起主要作用。

應(yīng)用IBV 免疫血清對呼吸道感染無保護作用，但可是IB 發(fā)病延遲，發(fā)病持續(xù)時間較短。