氣相色譜法在蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)研究

◎ 蓋永紅

（甘肅省白銀市景泰縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)管理站，甘肅 白銀 730499）

農(nóng)藥是一種用于農(nóng)林業(yè)病蟲(chóng)草害預(yù)防與控制的制劑，包括有機(jī)磷類(lèi)、氨基甲酸酯類(lèi)、有機(jī)氯類(lèi)多種類(lèi)型。我國(guó)是農(nóng)藥生產(chǎn)、使用大國(guó)，年度農(nóng)藥供應(yīng)量占據(jù)全球總供應(yīng)量的70%。2020年，我國(guó)農(nóng)藥原藥產(chǎn)量達(dá)到214.8萬(wàn)t，成為世界第一大農(nóng)藥生產(chǎn)國(guó)。龐大的農(nóng)藥原料生產(chǎn)量、使用量，留下了嚴(yán)重的農(nóng)作物農(nóng)藥殘留隱患。因此，探究氣相色譜法在蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用具有非常重要的意義。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

從大型批發(fā)市場(chǎng)、大型超市、小型農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)中采集葉菜類(lèi)蔬菜（大白菜）、瓜果類(lèi)蔬菜（豆角、黃瓜）、根莖類(lèi)蔬菜（紅蘿卜、土豆）。

1.2 試劑

在試驗(yàn)前，應(yīng)準(zhǔn)備純度超出99.999%的氮?dú)馀c空氣、100 μg·mL-1農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（甲基對(duì)硫磷、氧化樂(lè)果、三唑磷、西維因、葉蟬散和異索威）、色譜純丙酮、色譜純乙腈、分析純無(wú)水硫酸鎂、分析純硫酸鈉和石墨化炭黑粉等。

1.3 儀器

在試驗(yàn)前，應(yīng)準(zhǔn)備CP-3800氣相色譜儀、電子天平、KS-2康氏振蕩儀、AgilentHP-5毛細(xì)管色譜柱、JYL-350食品料理機(jī)以及TDL-5C離心機(jī)[1]。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 樣品處理

稱(chēng)取500 g新鮮蔬菜樣品，取可食用部分初步切碎并將切碎后的蔬菜可食用部分混合均勻。稱(chēng)取初步切碎樣品5.0 g，將其放入50 mL具塞三角瓶?jī)?nèi)并加入6.0 g無(wú)水硫酸鈉，在550.0 ℃環(huán)境下烘烤4.0 h。進(jìn)而加入15 mL丙酮與二氯甲烷等份混合液、5.0 g氯化鈉，超聲提取20.0 min。超聲后，放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶?jī)?nèi)，加無(wú)水硫酸鈉，經(jīng)45.0 ℃水浴減壓濃縮[2]。進(jìn)而經(jīng)CRAB/NH2柱、Florisil柱（無(wú)水硫酸鈉+弗羅里硅土+活性炭+無(wú)水硫酸鈉）多次淋洗凈化。在測(cè)定有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥時(shí)，可以利用5.0 mL淋洗液進(jìn)行柱子活化，分次利用1.0 mL淋洗液洗滌蒸發(fā)瓶，連續(xù)洗滌3次，并將洗滌液倒入凈化柱內(nèi)。在液面到達(dá)固體表面后加入淋洗液，加入量為12.0 mL。在淋洗液收集完畢后，調(diào)整水浴溫度至40.0 ℃，減壓濃縮，吸取3.0 mL溶液到離心管內(nèi)，輸入氮?dú)?，吹干后加?.0 mL正己烷，溶解后，溶液可直接用于氣相色譜儀測(cè)定。

1.4.2 氣相色譜儀參數(shù)設(shè)定

設(shè)定氣相色譜儀進(jìn)樣器溫度為250.0 ℃，進(jìn)樣模式為分流，開(kāi)始時(shí)刻分流比為20，在啟動(dòng)后將分流比下降到10，在0.75 min后調(diào)整為50，在2.00 min后調(diào)整為20。單次進(jìn)樣量為1.0 μL，柱流量為1.0 mL·min-1。檢測(cè)器溫度為300.0 ℃，氫氣流動(dòng)速度為14.0 mL·min-1，空氣流動(dòng)速度為17.0 mL·min-1，門(mén)延遲4 s，觸發(fā)電位200 mV[3]。柱子初始溫度為40.0 ℃，保持2.0 min后，依據(jù)40.0 ℃·min-1的速度上升到220 ℃，進(jìn)而以7.0 ℃·min-1的速度上升到 260 ℃，保持 5.0 min。

1.4.3 標(biāo)準(zhǔn)液配制

（1）有機(jī)磷類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)液。利用微量注射器，取100 μL有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)混合液（甲基對(duì)硫磷、氧化樂(lè)果、三唑磷），將其放入氣相色譜進(jìn)樣瓶?jī)?nèi)混合均勻，獲得10.0 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。取10.0 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液200.0 μL，加入800.0 μL色譜純乙腈，獲得混合標(biāo)準(zhǔn)液，標(biāo)準(zhǔn)液濃度為2.0 μg·mL-1。同樣的方法可以制備 0.2 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)液。

（2）氨基甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)液。利用刻度吸管，精密量取每組氨基甲酸酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（西維因、葉蟬散、異索威）0 mL、0.05 mL、1.50 mL、2.50 mL、3.50 mL和5.00 mL移入50.0 mL容量瓶?jī)?nèi)，加入正己烷定容到刻度，得到 2.00 μg·mL-1、6.00 μg·mL-1、10.00 μg·mL-1、15.00 μg·mL-1和 20.00 μg·mL-1的混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)系列溶液[4]。

1.4.4 計(jì)算

取前處理后樣品，進(jìn)樣1.0 μL，在雙毛細(xì)管柱氣相色譜儀中進(jìn)行分析，在時(shí)間一定的情況下分析峰面積，根據(jù)峰面積中得到的農(nóng)藥濃度，計(jì)算蔬菜樣品中農(nóng)藥含量[5]。蔬菜中農(nóng)藥含量計(jì)算公式為：

式中：X為樣品蔬菜中農(nóng)藥殘留量，mg·kg-1；A1為樣品蔬菜中農(nóng)藥峰面積（積分單位）；V2為樣品蔬菜提取濃縮液體積，mL；V3為樣品蔬菜凈化后定容總體積，mL；C1為混合標(biāo)液內(nèi)農(nóng)藥濃度，μg·mL-1；A2為混合標(biāo)準(zhǔn)溶液內(nèi)農(nóng)藥峰面積（積分單位）；V1為凈化用樣品提取濃縮液體積，mL；m為樣品蔬菜質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性方程和相關(guān)系數(shù)

利 用 前 期 準(zhǔn) 備 的 2.00 μg·mL-1、6.00 μg·mL-1、10.00 μg·mL-1、15.00 μg·mL-1和 20.00 μg·mL-1的 氨基甲酸酯類(lèi)混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)系列溶液以及0.2 μg·mL-1、2.0 μg·mL-1、10.0 μg·mL-1的有機(jī)磷類(lèi)混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)行氣相色譜測(cè)試。結(jié)果如表1所示。

由表1可知，在0.01～1.00 μg·mL-1線性范圍內(nèi)，有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥質(zhì)量濃度、色譜峰線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為 0.999 0 ～ 0.999 7；在 0.01 ～ 0.30 μg·mL-1線性范圍內(nèi)，氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥質(zhì)量濃度、色譜峰線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 0～0.999 2，與《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）規(guī)定的農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求相符，表明氣相色譜法在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中準(zhǔn)確度、實(shí)用價(jià)值較高，可以滿足農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求。

表1 線性方程和相關(guān)系數(shù)結(jié)果表

2.2 回收率與精密度試驗(yàn)

利 用 前 期 配 制 的 0.2 μg·mL-1、2.0 μg·mL-1、10.0 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，加入到標(biāo)準(zhǔn)樣內(nèi)，在前述氣相色譜條件下進(jìn)行測(cè)量，得到回收率與精密度試驗(yàn)結(jié)果，見(jiàn)表2。

由表2可知，3種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥和3種氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥分別在3個(gè)加標(biāo)濃度下的平均加標(biāo)回收率分別為85.0%～100.0%、80.0%～95.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差最大值分別為4.9%、4.5%，均小于5%，精密度與準(zhǔn)確度較高。

表2 加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果表

2.3 樣品檢測(cè)結(jié)果

在上述設(shè)定的試驗(yàn)條件下，進(jìn)行樣品農(nóng)藥殘留檢測(cè)，結(jié)果如表3所示。

表3 樣品農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果表

由表3可知，瓜果類(lèi)蔬菜、葉菜類(lèi)蔬菜中農(nóng)藥殘留量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于根莖類(lèi)蔬菜，瓜果類(lèi)蔬菜中農(nóng)藥殘留最高，但均在我國(guó)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的限值內(nèi)。

3 結(jié)論

綜上所述，在蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)中，3種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥和3種氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥在3個(gè)加標(biāo)濃度下的平均加標(biāo)回收率分別為85.0%～100.0%、85.0%～95.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于5%，有機(jī)磷類(lèi)、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥質(zhì)量濃度、色譜峰線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 0～0.999 7，表明氣相色譜法具有加標(biāo)回收率高（最高為100.0%）、精準(zhǔn)度高（有機(jī)磷類(lèi)RSD為2.2%～4.9%，氨基甲酸酯類(lèi)RSD為3.2%～4.5%）的優(yōu)良特點(diǎn)。同時(shí)根據(jù)氣相色譜法檢測(cè)蔬菜農(nóng)藥殘留結(jié)果可知，在各種蔬菜中瓜果類(lèi)蔬菜農(nóng)藥殘留量最大，特別是黃瓜，異索威殘留量達(dá)到1.623 mg·kg-1，處于較高水平。表明樣品蔬菜農(nóng)藥總體污染水平偏高，后期需要加強(qiáng)蔬菜生產(chǎn)基地、蔬菜批發(fā)市場(chǎng)管理，控制農(nóng)藥殘留量，為居民飲食安全提供保障。