厚鱗柯果實(shí)不同濃度乙醇浸出物的探究

田甜 黃清泉 蔣明艷 曾祥林 文金華 黃月明

摘 要：為了對(duì)厚鱗柯果實(shí)不同濃度乙醇浸出物進(jìn)行探究，本試驗(yàn)測(cè)定了乙醇在不同的浸提濃度下醇浸出物含量。結(jié)果表明，通過(guò)單方向方差分析得出60%乙醇浸提效率顯著高于其他濃度水平，通過(guò)厚鱗柯果實(shí)醇浸出物含量對(duì)乙醇濃度的擬合函數(shù)分析，得出乙醇的最優(yōu)浸提濃度為67.60%。綜合考慮實(shí)驗(yàn)操作的便捷性和高效性，參照2020版《中國(guó)藥典》第四部通則2201中熱浸法對(duì)厚鱗柯果實(shí)醇浸出物含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)，用乙醇作為浸出溶劑，且乙醇的最優(yōu)浸提濃度為60%（V/V），為厚鱗柯果實(shí)醇浸出物的測(cè)定以及后續(xù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供了一定的基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：厚鱗柯;果實(shí);乙醇濃度;醇浸出物

Study on Different Concentration Ethanol Extracts from Fruit of Lithocarpus pachylepis

TIAN Tian1， HUANG Qingquan2， JIANG Mingyan2， ZENG Xianglin1， WEN Jinhua1， HUANG Yueming1

（1.Guangxi Minsheng Sino Assessment Group， Nanning 530007， China; 2.Guangxi Institute for Food and Drug Control， Nanning 530021， China）

Abstract： In order to explore the ethanol extract of different concentrations of Lithocarpus pachylepis fruit， the content of ethanol extract under different extraction concentrations was determined. The results showed that the extraction efficiency of 60% ethanol was significantly higher than that of other concentration levels by one-way ANOVA， and the optimal extraction concentration of ethanol was 67.60% by fitting function analysis of ethanol extract content to ethanol concentration. Comprehensive considering convenience and efficiency of the experimental operation， it was recommended to use ethanol as the extraction solvent for the determination of alcohol extract content of Lithocarpus pachylepis fruit by referring to the hot leaching method of general rule 2201， part IV of Chinese Pharmacopoeia， 2020 edition， and the optimal extraction concentration of ethanol was 60%（V/V）. The results provided a basis for the determination of alcohol extract and quality standard establishment of Lithocarpus pachylepis fruit. At the same time， it fills the research gap at home?and abroad.

Keywords： Lithocarpus pachylepis; fruit; ethanol concentration; alcohol extract

厚鱗柯（Lithocarpus pachylepis）屬于殼斗科柯屬的一種?！吨袊?guó)植物志》[1]記載“其種仁煮熟后可食用”，現(xiàn)在常見(jiàn)的是以果實(shí)泡酒或煲湯的方式食用。厚鱗柯果實(shí)在市場(chǎng)上經(jīng)常作為補(bǔ)腎壯陽(yáng)、治療腎虛疾病的民間中藥材或保健食品售賣(mài)，但目前對(duì)于其藥用價(jià)值并無(wú)任何書(shū)籍記載，也缺乏系統(tǒng)研究和報(bào)道，而且一些不法分子甚至以假亂真，欺騙消費(fèi)者，對(duì)人們的生命健康和財(cái)產(chǎn)造成損失，因此制定厚鱗柯果實(shí)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)很有意義[1-3]。有研究探究了木姜葉柯、多穂柯、煙斗柯等多數(shù)柯屬植物的葉片或種仁中各品質(zhì)指標(biāo)的含量，而對(duì)厚鱗柯果實(shí)品質(zhì)的探討尚處于空白[4-6]。

醇浸出物是評(píng)價(jià)中藥材質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)，而且不同的醇濃度下醇浸出物含量不同[7-9]。本試驗(yàn)對(duì)厚鱗柯果實(shí)不同濃度乙醇浸出物進(jìn)行了探究，為厚鱗柯果實(shí)醇浸出物的測(cè)定以及后續(xù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供一定的基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本試驗(yàn)中厚鱗柯果實(shí)是于2020年10月收集于廣西。將全果通過(guò)粉碎機(jī)粉碎后，過(guò)60目尼龍篩，自封袋封裝，冷藏（0～4 ℃）保存。無(wú)水乙醇（分析純，成都科龍）;純水。

1.2 儀器設(shè)備

BSA224S型電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）;DK-98-II型萬(wàn)用電爐（天津市泰斯特儀器有限公司）;ZKB-1A型真空泵（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司）;HH-S8型水浴鍋（江蘇金怡儀器科技有限公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)方法

本試驗(yàn)參照2020版《中國(guó)藥典》第四部通則0832烘干法[10]測(cè)得供試樣品中水分含量為10.38%，然后參照第四部通則2201熱浸法[10]測(cè)定厚鱗柯果實(shí)醇浸出物含量，其中采用的浸出溶劑為乙醇。具體測(cè)定步驟為精密稱(chēng)取樣品3 g，置于250 mL錐形瓶中，加入不同濃度的乙醇75 mL，密塞，稱(chēng)定重量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h;放置冷卻后，取下錐形瓶，密塞，再次稱(chēng)定重量。用不同濃度的乙醇，搖勻，用干燥濾器濾過(guò)，精密量取濾液25 mL，置于已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥 3 h，再置于干燥器中冷卻30 min，精密稱(chēng)定重量，以干燥樣品計(jì)算樣品中醇溶性浸出物的含量（%）。其中乙醇的濃度（V/V）共設(shè)置6個(gè)平行，分別為0%、25%、50%、60%、80%及95%，每個(gè)處理重復(fù)3次。

1.3.2 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 22.0進(jìn)行方差分析，多重比較方法為L(zhǎng)SD法;采用Origin 2018進(jìn)行函數(shù)擬合和制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 厚鱗柯果實(shí)不同濃度乙醇浸出物含量的差異

對(duì)于厚鱗柯果實(shí)，當(dāng)乙醇濃度由0%到95%時(shí)，醇浸出物含量首先由7.14%增加到9.03%，然后又減少到7.50%，表現(xiàn)為先增加后減少的趨勢(shì)，其中在乙醇濃度為60%時(shí)，醇浸出物含量達(dá)到最大。單方向方差分析表明，不同濃度乙醇浸出物含量差異極顯著，P（240.81，5，12）=1.34×10-11<0.01。由圖1可知，60%乙醇浸提效率最高，醇浸出物平均含量達(dá)到9.03%，而且顯著高于其他濃度水平，是其他濃度水平平均浸提效率的1.22倍;在其他濃度水平中，50%乙醇浸提效率顯著高于80%和95%乙醇，醇浸出物平均含量為7.75%;純水和25%乙醇的浸提效率最低，而且顯著低于其他濃度水平，醇浸出物平均含量?jī)H7.16%。

2.2 厚鱗柯果實(shí)醇浸出物含量對(duì)乙醇濃度的擬合函數(shù)曲線分析

將乙醇濃度作為自變量c，厚鱗柯果實(shí)醇浸出物含量作為因變量w，通過(guò)多項(xiàng)式擬合，得出最優(yōu)多項(xiàng)式擬合函數(shù)為w=7.10-0.017×c+0.0013×c2-1.16×10-5×c3（調(diào)整后R2=0.536），擬合曲線見(jiàn)圖2。方差分析表明，回歸效應(yīng)極顯著，P（158.49，4，2）=0.006 3<0.01。所以該函數(shù)模型能夠有效解釋原始數(shù)據(jù)，模型可靠。當(dāng)乙醇濃度在0～100%變化時(shí)，通過(guò)規(guī)劃求解，得出在乙醇濃度為67.60%時(shí)，醇浸出物含量最高，達(dá)到8.31%。所以通過(guò)曲線擬合，得出在厚鱗柯果實(shí)醇浸出物含量的測(cè)定過(guò)程中，乙醇的最優(yōu)浸提濃度為67.60%。綜合考慮實(shí)驗(yàn)操作的便捷性和高效性，推薦乙醇的最優(yōu)浸提濃度為60%或70%。

圖中小寫(xiě)字母（a、b、c、d）表示不同濃度乙醇浸出物含量的多重比較結(jié)果（P<0.05）。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)對(duì)厚鱗柯果實(shí)不同濃度乙醇浸出物進(jìn)行了探究。當(dāng)乙醇濃度逐漸增大時(shí)，醇浸出物含量表現(xiàn)為先增加后減少的趨勢(shì)，這與相關(guān)研究中所表明的變化一致[7-9]。本試驗(yàn)通過(guò)單向方差分析，表明60%乙醇浸提效率顯著高于其他濃度水平，通過(guò)厚鱗柯果實(shí)醇浸出物含量對(duì)乙醇濃度的擬合函數(shù)分析，得出乙醇的最優(yōu)浸提濃度為67.60%。綜合考慮實(shí)驗(yàn)操作的便捷性和高效性，參照2020版《中國(guó)藥典》第四部通則2201熱浸法[10]對(duì)厚鱗柯果實(shí)醇浸出物含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)，推薦用乙醇作為浸出溶劑，且乙醇的最優(yōu)浸提濃度為60%（V/V）。這為厚鱗柯果實(shí)醇浸出物的測(cè)定以及后續(xù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供了一定的基礎(chǔ)。

殼斗科柯屬植物的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值有很多，例如從殼斗科植物種子中提取的淀粉可供食用和釀酒[11];柯屬植物中鞣質(zhì)含量高，從柯屬植物中提取的鞣質(zhì)可用于制備栲膠等[4];具有藥用價(jià)值的柯屬植物也有很多，例如從木姜葉柯（Lithocarpus litseifolius）和多穗柯（Lithocarpus polystachyus）的葉片中提取的甜味素為黃酮苷類(lèi)物質(zhì)，屬低熱高甜度物質(zhì)，對(duì)糖尿病有一定療效[12]。廣西西部（那坡縣）是厚鱗柯的主產(chǎn)區(qū)之一，厚鱗柯果實(shí)在民間主要作為藥食同源的“補(bǔ)品”食用，而目前國(guó)內(nèi)外對(duì)厚鱗柯果實(shí)藥用價(jià)值的研究報(bào)道罕見(jiàn)，所以探究厚鱗柯果實(shí)的藥用價(jià)值、開(kāi)發(fā)利用新的壯藥資源很有意義。在后續(xù)研究中，可對(duì)厚鱗柯果實(shí)中各類(lèi)化合物進(jìn)行提取、分離、純化和鑒定，探討厚鱗柯果實(shí)有無(wú)藥用價(jià)值，為厚鱗柯果實(shí)的開(kāi)發(fā)利用提供參考。

參考文獻(xiàn)

[1]中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編寫(xiě)委員會(huì).中國(guó)植物志[M].北京：科學(xué)出版社，1998.

[2]ZHANG D Q， DUAN L Z， ZHOU N. Market survey on traditional medicine of the third month fair in Dali prefecture in Yunnan province， south west China[J].African Journal of Traditional Complementary and Alternative Medicines Ajtcam，2014，11（2）：377-401.

[3]田甜，文金華.殼斗科柯屬及厚鱗柯植物資源研究現(xiàn)狀及展望[J].食品工業(yè)，2020，41（4）：255-259.

[4]端木.中國(guó)石櫟屬資源綜合利用[J].林產(chǎn)化工通訊，1997（6）：33-35.

[5]劉燦明，王日為，劉富知，等.湖南甜茶成分分析與安全性評(píng)價(jià)[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2004，30（3）：261-263.

[6]周偉，吳寶成，宋春鳳，等.中國(guó)柯屬（殼斗科）植物資源與開(kāi)發(fā)利用[J].中國(guó)野生植物資源，2016，35（4）：60-62.

[7]黃文華，羅敏，張青，等.建昌幫姜天麻水分和浸出物測(cè)定[J].實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2021，21（19）：153-155.

[8]李文惠，翁德會(huì).厚樸飲片不同濃度乙醇浸出物的研究[J].山東化工，2018，47（1）：8-10.

[9]秦家安，張興國(guó)，李銅，等.天麻醇浸出物提取工藝優(yōu)化[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2015，26（10）：2369-2370.

[10]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（2020年版）[M].第四部.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2020.

[11]謝碧霞，謝濤.我國(guó)橡實(shí)資源的開(kāi)發(fā)利用[J].中南林學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，22（3）：37-41.

[12]周文華，水谷健二，田中治.湖南甜茶的甜味成分研究[J].食品科學(xué)，1992（3）：17-19.

基金項(xiàng)目：2020年廣西藥品監(jiān)督管理局藥品安全科研項(xiàng)目（桂藥監(jiān)科[2020]內(nèi)-01）。

作者簡(jiǎn)介：田甜（1989—），女，山西翼城人，碩士，農(nóng)藝師。研究方向：食品農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)及研究。