黃芪注射液輔助PHGF治療對病毒性肝炎患者肝功能及血清sST2、IL-33的影響

黃麗靜，鄧喜亮，覃金鳳，吳海松，潘大燁，梁英源，李錫芳

病毒性肝炎是由嗜肝病毒引起的法定乙類傳染病，以肝臟炎癥和壞死病變?yōu)橹饕±硖卣鱗1]。目前，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)多采用抗病毒、保肝護(hù)肝等方法對病毒性肝炎進(jìn)行治療，但長期臨床經(jīng)驗發(fā)現(xiàn)，部分患者治療效果穩(wěn)定性差，易出現(xiàn)反跳現(xiàn)象，成為臨床棘手問題之一。促肝細(xì)胞生長素(PHGF)提取自新鮮乳豬肝臟，是我國第一個一類生化新藥，凌順等[2]動物實驗研究發(fā)現(xiàn)，PHGF可通過抑制肝細(xì)胞凋亡，減輕肝組織損傷，改善肝功能。黃芪注射液提取自中藥黃芪，可益氣養(yǎng)元、扶正祛邪、養(yǎng)心通脈、健脾利濕[3]。胡雪原等[4]報道，黃芪注射液可下調(diào)乙型肝炎模型小鼠血清中炎性因子表達(dá)，并改善肝功能。但PHGF聯(lián)合黃芪注射液應(yīng)用于臨床是否能擴(kuò)大患者受益尚不明確?，F(xiàn)階段已證實病毒性肝炎可引起肝衰竭，但其機(jī)制仍未闡述清楚，有證據(jù)顯示與機(jī)體具有免疫功能的某些促炎細(xì)胞因子有關(guān)[5]。胡萍等[6]、侯建明和吳賀文[7]研究發(fā)現(xiàn)，Th1/Th2與病毒性肝炎的發(fā)生及肝功能損傷密切相關(guān)。而可溶性生長刺激表達(dá)基因2蛋白(sST2)、白細(xì)胞介素-33(IL-33)能通過輔助蛋白相互作用，參與Th1/Th2型免疫應(yīng)答，但在病毒性肝炎中具有何種作用仍有待探討[8]。鑒于此，本研究選取病毒性肝炎178例，從血清sST2、IL-33等角度，分析黃芪注射液輔助PHGF的應(yīng)用價值，報告如下。

1 資料和方法

1.1一般資料 選取2019年1月—2021年2月我院收治的病毒性肝炎178例為研究對象，根據(jù)治療方法不同分為研究組和對照組，每組89例。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)執(zhí)行。

表1 不同方法治療病毒性肝炎兩組一般資料比較

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) ①納入標(biāo)準(zhǔn)：均根據(jù)癥狀體征、病原學(xué)及肝功檢測等明確診斷為病毒性肝炎；中醫(yī)符合氣虛血瘀證診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]，主癥見脅肋刺痛、倦怠乏力、食欲減退、脘腹脹滿，次癥見便秘或腹瀉、脅下有痞塊、面部或手掌赤絲紅縷、面色灰暗，舌苔薄白或薄黃、舌質(zhì)暗淡、舌邊有瘀點，脈弦細(xì)或弦澀；入組前4周未接受相關(guān)治療；自愿簽署知情同意書；可配合隨訪與治療。②排除標(biāo)準(zhǔn)：藥物引起肝損傷者；代謝類疾病引起的肝損傷者；肝癌患者；存在相關(guān)藥物過敏史或過敏體質(zhì)者；妊娠期或哺乳期婦女；合并嚴(yán)重糖尿病、高血壓病患者；合并腎、腦、肺等嚴(yán)重疾病者；未按療程完成治療者。

1.3方法

1.3.1常規(guī)干預(yù)：①一般治療：囑患者戒煙戒酒，急性肝炎、慢性肝炎活動期者，需臥床休息，并給予飲食營養(yǎng)干預(yù)，保證維生素、蛋白質(zhì)、熱量供給，恢復(fù)期逐漸增加活動。②抗病毒治療：均給予重組人干擾素α-2b(海南通用同盟藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字S20040028)抗病毒治療，300萬單位隔日肌內(nèi)注射，連續(xù)給藥6個月，酌情選用利巴韋林、拉米夫定等治療。③護(hù)肝治療：甘草酸二胺注射液(江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20073957)150 mg靜脈滴注，1/d，連續(xù)給藥4周。

1.3.2對照組：在常規(guī)干預(yù)基礎(chǔ)上給予PHGF(安徽城市藥業(yè)股份有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字H22026703)80～100 mg靜脈滴注，1/d，療程4周。

1.3.3研究組：在對照組基礎(chǔ)上加用黃芪注射液(上海福達(dá)制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字Z31020084)2～4 ml肌內(nèi)注射，1/d，療程4周。

1.3.4臨床療效判定：根據(jù)治療前后中醫(yī)證候積分變化評估療效，次癥積分按重、中、輕、無依次取3、2、1、0分，主癥積分按重、中、輕、無依次取6、4、2、0分。中醫(yī)證候積分為次癥與主癥積分之和，治療4周后中醫(yī)證候積分降低>90%為顯效、降低40%～90%為有效、降低<40%為無效，總有效率=(顯效+有效)例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4觀察指標(biāo) ①比較兩組治療4周后的臨床療效。②比較兩組治療前、治療4周后肝功能指標(biāo),包括血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)，使用賴氏法試劑盒(長春迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司)檢測ALT，使用酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒(上海滬震實業(yè)有限公司)檢測AST，使用重氮法試劑盒(浙江東方基因生物制品有限公司)檢測TBIL。③比較兩組治療前、治療4周后血清sST2、IL-33水平，均應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測，sST2試劑盒購于酶聯(lián)(上海)生物試劑科技有限公司，IL-33試劑盒購于上海潤裕生物科技有限公司。④比較兩組治療前、治療4周后T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo),CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平使用流式細(xì)胞儀檢測。⑤統(tǒng)計兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況，包括惡心嘔吐、腹瀉、頭暈、皮疹等。

2 結(jié)果

2.1臨床療效比較 治療4周后，研究組臨床總有效率高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 不同方法治療病毒性肝炎兩組臨床療效比較[例(%)]

2.2治療前后肝功能指標(biāo)比較 治療前，兩組血清AST、ALT、TBIL水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療4周后，兩組血清AST、ALT、TBIL水平較治療前降低，且研究組低于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 不同方法治療病毒性肝炎兩組治療前后肝功能指標(biāo)比較

2.3治療前后血清sST2、IL-33水平比較 治療前，兩組血清sST2及IL-33水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療4周后，兩組血清sST2及IL-33水平較治療前降低，且研究組低于對照組(P<0.05)。見表4。

表4 不同方法治療病毒性肝炎兩組治療前后血清sST2、IL-33水平比較

2.4治療前后T淋巴細(xì)胞亞群比較 治療前，兩組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療4周后，兩組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較治療前增高，且研究組高于對照組(P<0.05)。見表5。

表5 不同方法治療病毒性肝炎兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群比較

2.5不良反應(yīng)比較 兩組不良反應(yīng)總發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表6。兩組不良反應(yīng)均為偶發(fā)，且程度較輕，未影響用藥，調(diào)整作息、飲食后逐漸消失。

表6 不同方法治療病毒性肝炎兩組不良反應(yīng)比較[例(%)]

3 討論

病毒性肝炎是導(dǎo)致慢性肝炎、肝硬化、肝衰竭、肝癌的重要誘因，對患者生命健康造成極大危害，因此研究其有效療法意義重大。以往應(yīng)用干擾素、核苷類藥物等抗病毒治療可抑制病毒復(fù)制，能一定程度上改善肝功能，但長期應(yīng)用可能產(chǎn)生耐藥性，部分患者不能取得預(yù)期效果[10]。PHGF是治療各種病毒性肝炎的重要藥物，具有以下作用：①降低血清轉(zhuǎn)氨酶、膽紅素水平；②改善肝臟細(xì)胞的吞噬功能，抑制炎性因子活性，促進(jìn)肝壞死后的修復(fù)；③能刺激新生肝細(xì)胞DNA合成，促進(jìn)肝細(xì)胞再生，有利于恢復(fù)肝功能[11]。但麥泳瑤等[12]進(jìn)行meta分析發(fā)現(xiàn)，單純應(yīng)用PHGF治療仍有患者未獲滿意效果，故需聯(lián)合其他療法。

祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)治療病毒性肝炎擁有獨(dú)特的理論基礎(chǔ)，近年來逐漸受到人們關(guān)注。中醫(yī)學(xué)中病毒性肝炎屬于“黃疸”“肝瘟”等，病機(jī)與“濕熱瘀毒”外侵有關(guān)，濕得熱而益深，熱因濕而愈熾，膠結(jié)難解，中阻日久，阻滯氣機(jī)，形成血瘀，肝絡(luò)阻塞，疏泄失常，濁不得泄，且濕熱交織，困遏脾陽，氣血生化不足，血行無力，正氣虧虛，正虛毒郁而發(fā)病，故治以扶正祛邪、補(bǔ)氣通絡(luò)。黃芪為補(bǔ)氣良藥，《本草匯言》載有：“黃芪，補(bǔ)肺健脾，實衛(wèi)斂汗，驅(qū)風(fēng)運(yùn)毒之藥也”，《本草正》載有：“因其味輕，故專于氣分而達(dá)表，所以能補(bǔ)元陽，充腠理”“補(bǔ)益中土，溫養(yǎng)脾胃”，《本經(jīng)疏證》載有：“黃芪一源三派，浚三焦之根，利營衛(wèi)之氣，故凡營衛(wèi)間阻滯，無不盡通”?？梢婞S芪具有補(bǔ)中益氣、通脈健脾、祛邪扶正之功效。黃芪注射液源于中藥黃芪，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，其含有皂苷、黃酮、多糖等多種成分，具有較強(qiáng)的抗病毒、抗菌、抗氧化應(yīng)激、強(qiáng)化機(jī)體免疫功能等作用[13]。本研究聯(lián)合應(yīng)用黃芪注射液和PHGF治療病毒性肝炎，結(jié)果顯示，治療4周后研究組總有效率高于對照組，AST、ALT、TBIL低于對照組，表明黃芪注射液輔助PHGF治療，可改善病毒性肝炎患者肝功能，療效顯著。一方面PHGF可促進(jìn)病毒引起肝壞死后的修復(fù)，并刺激肝細(xì)胞再生，改善肝功能；另一方面黃芪注射液可抑制病毒復(fù)制，減少氧化應(yīng)激對肝組織損傷，保護(hù)肝功能，二者能夠協(xié)同作用，故療效良好。

有研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體免疫系統(tǒng)在病毒性肝炎發(fā)病過程中扮演重要角色[14]。T淋巴細(xì)胞亞群參與機(jī)體細(xì)胞免疫，具有調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能和抗病毒的作用，其功能發(fā)揮依賴于CD3+、CD4+、CD8+水平，正常情況下，各T淋巴細(xì)胞亞群通過對立和協(xié)調(diào)保持免疫系統(tǒng)平衡[15-16]。BARAL等[17]研究指出，CD4+/CD8+平衡紊亂是病毒感染基礎(chǔ)。江若霞等[18]報道亦指出，病毒性肝炎患者存在明顯的免疫功能紊亂，表現(xiàn)為外周血T淋巴細(xì)胞亞群異常?？梢姴《拘愿窝谆颊叽嬖诩?xì)胞免疫功能異常，并與疾病的發(fā)生有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，治療4周后研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平高于對照組，表明黃芪注射液輔助PHGF可糾正病毒性肝炎患者T淋巴細(xì)胞亞群紊亂，改善細(xì)胞免疫功能，有助于病情的改善。

IL-33是具有雙重作用的細(xì)胞因子，不僅作為可溶性細(xì)胞因子調(diào)節(jié)Th2型免疫反應(yīng)，刺激前炎性因子合成分泌，又可作為核因子調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄，在炎癥性疾病、自身免疫疾病中均發(fā)揮重要作用，故研究IL-33對深入理解疾病發(fā)病機(jī)制及尋找新療法具有積極意義[19]。sST2是IL-33特異性受體，可與IL-33結(jié)合介導(dǎo)Th2型細(xì)胞因子產(chǎn)生[20]。姜紹文等[21]研究指出，急性肝衰竭小鼠肝內(nèi)及血清IL-33表達(dá)隨著肝損傷加重不斷增高，肝衰竭時上升至峰值，血清sST2水平在肝細(xì)胞損傷中期顯著升高，說明sST2、IL-33參與了急性肝衰竭的發(fā)生發(fā)展過程。因此，sST2、IL-33也可作為病毒型肝炎治療效果評估的重要指標(biāo)，但臨床關(guān)于其在疾病治療前后水平變化的相關(guān)研究較少。鄭紹同等[22]報道顯示，慢性乙型肝炎患者血清sST2、IL-33與AST呈正相關(guān)，提示sST2、IL-33可間接反映患者肝功能。本研究發(fā)現(xiàn)，治療4周后，研究組血清sST2及IL-33水平低于對照組，提示黃芪注射液輔助PHGF可改善病毒性肝炎患者炎癥反應(yīng)，這可能是二者發(fā)揮療效的機(jī)制之一。同時研究組不良反應(yīng)總發(fā)生率與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，表明二者聯(lián)合治療安全可靠。本研究不足之處在于，未對患者進(jìn)行長期隨訪，遠(yuǎn)期療效仍有待延長隨訪時間驗證。

綜上所述，黃芪注射液輔助PHGF治療病毒性肝炎，可減輕炎癥反應(yīng)，改善患者T淋巴細(xì)胞免疫功能和肝功能，且安全可靠，下調(diào)sST2及IL-33可能是二者發(fā)揮療效的機(jī)制之一。