陶云開(kāi)　高雪梅　袁宗偉　郭忠寶　陳詔　張旭　陳少翠　唐瞻楊　黃婷

摘要：【目的】明確枸杞多糖對(duì)羅非魚(yú)機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育及消化功能的影響，為羅非魚(yú)健康養(yǎng)殖提供理論參考，同時(shí)為促進(jìn)羅非魚(yú)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展提供新思路?！痉椒ā吭谀崃_羅非魚(yú)基礎(chǔ)飼料中添加5個(gè)不同劑量（0～2000 mg/kg）的枸杞多糖，進(jìn)行40 d的養(yǎng)殖試驗(yàn)后測(cè)量尼羅羅非魚(yú)的體重及全長(zhǎng)，計(jì)算相對(duì)增重率（WG）、相對(duì)增長(zhǎng)率（LG）、特定生長(zhǎng)率（SGR）和飼料系數(shù)（FCR），采用ELISA試劑盒分別檢測(cè)淀粉酶（Amylase）、蛋白酶（Protease）及脂肪酶（Lipase）活性，并采集前腸、中腸和后腸組織制作切片，通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察腸道組織形態(tài)的變化特征?！窘Y(jié)果】于基礎(chǔ)飼料中添加不同劑量枸杞多糖對(duì)尼羅羅非魚(yú)的生長(zhǎng)發(fā)育均起促進(jìn)作用，其中以添加1500 mg/kg處理組的促進(jìn)效果最佳，至養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)尼羅羅非魚(yú)的終末全長(zhǎng)、終末體重、WG、LG和SGR均達(dá)最高值，分別為13.45 cm、48.74 g、6.96%、0.94%和5.19%/d;而FCR最小，僅為1.88。尼羅羅非魚(yú)中腸組織的蛋白酶和淀粉酶活性在1500 mg/kg處理組中顯著升高（P<0.05，下同），胃組織的蛋白酶和淀粉酶活性、肝臟組織的脂肪酶活性也是以1500 mg/kg處理組最高，但與對(duì)照組（0 mg/kg）相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。腸絨毛長(zhǎng)度在尼羅羅非魚(yú)前腸組織中以1500 mg/kg處理組的最短（0.351 mm）、在后腸組織中則以1500 mg/kg處理組的最長(zhǎng)（0.320 mm），與對(duì)照組（0 mg/kg）相比差異顯著;肌層厚度在前腸和中腸組織中均以500 mg/kg處理組的最厚，分別為0.089和0.087 mm，在后腸組織中則以1000 mg/kg處理組的最?。?.065 mm）、2000 mg/kg處理組的最厚（0.099 mm）?！窘Y(jié)論】枸杞多糖可提高羅非魚(yú)的消化酶活性，改善其腸道組織形態(tài)，從而影響羅非魚(yú)的生長(zhǎng)發(fā)育，且以添加劑量為1500 mg/kg的效果最佳。

關(guān)鍵詞： 尼羅羅非魚(yú);枸杞多糖;生長(zhǎng)發(fā)育;消化酶;腸道組織形態(tài)

中圖分類號(hào)： S965.125? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：2095-1191（2022）02-0577-08

Effects of Lycium barbarum polysaccharides on growth， digestive enzyme activity and intestinal tissue morphology

of Nile tilapia （Oreochromis niloticus）

TAO Yun-kai GAO Xue-mei YUAN Zong-wei GUO Zhong-bao CHEN Zhao ZHANG Xu CHEN Shao-cui TANG Zhan-yang HUANG Ting

（1Guangxi Aquatic Products Breeding Center， Nanning? 530031， China; 2Guangxi Academy of

Fishery Sciences， Nanning? 530021， China）

Abstract：【Objective】This study clarified the effects of Lycium barbarum polysaccharide（LBP） on the growth， development and digestive function of tilapia. The research results provided theoretical reference for healthy tilapia aquaculture and new ideas for promoting the sustainable and healthy development of tilapia aquaculture industry. 【Method】Five different doses （0-2000 mg/kg） of LBP were added to the basic feed of Nile tilapia for a 40-day breeding experiment. After the experiment， the body weight and full length of Nile tilapia were measured to calculated the relative weight gain rate （WG）， relative growth rate （LG）， specific growth rate （SGR） and feed coefficient （FCR）. ELISA kits were used to detect the activities of amylase， protease and lipase. The foregut， midgut and hindgut tissue sections of the experimental fish were prepared to observe the changes of intestinal tissue morphology. 【Result】Adding different doses of LBP to the food could promote the growth and development of Nile tilapia. The group supplemented with 1500 mg/kg had the best promo-ting effect， and the final full length， final body weight， WG， LG and SGR reached the highest， which were 13.45 cm， 48.74 g， 6.96%， 0.94% and 5.19%/d， respectively. FCR was the smallest， only 1.88. The activities of protease and amylase in midgut tissue significantly increased in 1500 mg/kg treatment group （P<0.05， the same below）. The activities of protease and amylase in stomach tissue activities of lipase in liver tissue were also the highest in 1500 mg/kg treatment group. The However，there was no significant difference compared with the control group （0 mg/kg） （P>0.05）. The villus length of the foregut tissue was the shortest （0.351 mm） and the villus length of the hindgut tissue was the longest （0.320 mm） in the 1500 mg/kg treatment group， representing significante difference compared with the control group （0 mg/kg）. The muscle layer thickness in the foregut and midgut tissues were the thickest in the 500 mg/kg treatment group， at 0.089 and 0.087 mm， respectively. The muscle layer thickness of hindgut tissue was the thinnest （0.065 mm） in the 1000 mg/kg treatment group， and? was the thickest （0.099 mm） in the 2000 mg/kg treatment group. 【Conclusion】LBP can promote the growth and development of Nile tilapia by increasing the activity of digestive enzymes and improving the morphology of intestinal tissue. Adding 1500 mg/kg LBP to the feed has the best effect.

Key words：Nile tilapia; Lycium barbarum polysaccharide; growth and development; digestive enzyme; intestinal tissue morphology

Foundation items： National Modern Agriculture Industry Technology System Construction Project （CARS- 46）

0 引言

【研究意義】水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的蓬勃發(fā)展，不僅促進(jìn)了社會(huì)經(jīng)濟(jì)的增長(zhǎng)，還解決了大量的就業(yè)難題。據(jù)估計(jì)，未來(lái)30年全球人口總數(shù)將持續(xù)增加，水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)在解決蛋白食品需求量不斷增加等問(wèn)題中發(fā)揮著重要作用（Manage，2018）。尼羅羅非魚(yú)（Oreochromis niloticus）由于生長(zhǎng)速度快、出肉率高，已發(fā)展成為全世界養(yǎng)殖最多的魚(yú)類之一。近年來(lái)，羅非魚(yú)產(chǎn)量持續(xù)增加，預(yù)計(jì)到2030年世界范圍內(nèi)的羅非魚(yú)總產(chǎn)量將達(dá)730萬(wàn)t（Behera et al.，2018;Hien et al.，2018）?？股氐然瘜W(xué)藥物在羅非魚(yú)養(yǎng)殖過(guò)程中常用于改善其生長(zhǎng)性能，然而大量化學(xué)藥物的使用，極易造成嚴(yán)重的環(huán)境污染（Armstrong et al.，2005）。Mesalhy和Albutti（2014）研究認(rèn)為，過(guò)量使用抗生素養(yǎng)殖羅非魚(yú)會(huì)通過(guò)食物鏈對(duì)人體健康產(chǎn)生不良影響。Xin等（2019）研究報(bào)道，抗生素等新興污染物使用量的不斷增加，將嚴(yán)重威脅羅非魚(yú)產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。中藥富含生物堿及揮發(fā)油等活性物質(zhì)，在促進(jìn)水生動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育、提高消化水平和增強(qiáng)抗應(yīng)激能力等方面發(fā)揮重要作用，且具有來(lái)源廣、成本低、無(wú)藥物殘留、毒副作用小、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)。因此，探究中藥在羅非魚(yú)養(yǎng)殖中的使用效果，對(duì)推進(jìn)羅非魚(yú)產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】近年來(lái)，中藥在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中得到廣泛應(yīng)用且效果良好。Citarasu（2010）研究認(rèn)為，中藥在魚(yú)類的生長(zhǎng)發(fā)育和刺激消化等方面具有積極的作用;Radhakrishnan等（2014）研究發(fā)現(xiàn)，中藥可提高羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenbergii）的消化能力，提高其生長(zhǎng)性能;Elabd等（2016）研究證實(shí)，投喂甘草和黃芪能有效提高鱸魚(yú)（Perca flavescens）的生長(zhǎng)參數(shù);Huang等（2020）研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加適量中藥混合物劑可顯著改善歐洲鰻鱺（Anguilla anguilla）的生長(zhǎng)性能、消化酶活性及血清生化指標(biāo);He等（2020）研究表明，中藥可增強(qiáng)鯽魚(yú)（Carassius auratus auratus）的抗病能力。枸杞（Lycium barbarum）多糖是枸杞子中最重要的藥用成分，其主要成分為鼠李糖、葡萄糖及半乳糖等多種糖類，是一種糖—蛋白聚合物，因具有天然的抗氧化及促進(jìn)酶合成等生物活性，在改善機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育、提高消化水平等方面具有重要作用（劉英娟等，2015;孫甜甜等，2018;張琛等，2021）。王大會(huì)等（2020）指出，枸杞多糖可增強(qiáng)餌料誘食效果，提高水產(chǎn)動(dòng)物的生產(chǎn)性能，并改善其肉質(zhì)。袁增寶等（2020）研究表明，枸杞多糖可提高鯉魚(yú)（Cyprinus carpio）對(duì)飼料的利用率并促進(jìn)其生長(zhǎng)?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前，有關(guān)枸杞多糖在羅非魚(yú)機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育及消化等方面的研究鮮見(jiàn)報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】對(duì)比分析不同枸杞多糖添加劑量下羅非魚(yú)生長(zhǎng)性能、消化酶活性和腸道組織形態(tài)的差異，探討枸杞多糖對(duì)羅非魚(yú)機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育及消化功能的影響，為羅非魚(yú)健康養(yǎng)殖提供理論參考，同時(shí)為促進(jìn)羅非魚(yú)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展提供新思路。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

供試尼羅羅非魚(yú)由廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院特色淡水魚(yú)綜合試驗(yàn)基地提供，選取體表無(wú)傷痕、活力強(qiáng)、大小均一的個(gè)體進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。試驗(yàn)開(kāi)始前將尼羅羅非魚(yú)置于水溫（28.0±0.5）℃、pH 8.0的條件下暫養(yǎng)7 d。供試基礎(chǔ)飼料購(gòu)自百洋產(chǎn)業(yè)投資集團(tuán)股份有限公司，基礎(chǔ)飼料營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。枸杞多糖購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司，規(guī)格為50% UV，顏色呈棕色，粉狀，易吸潮。

1. 2 試驗(yàn)方法

參照Eman等（2014）的方法，設(shè)計(jì)5個(gè)枸杞多糖添加劑量（G1～G5），分別為0（G1，對(duì)照）、500（G2）、1000（G3）、1500（G4）和2000（G5）mg/kg。將枸杞多糖溶于水后均勻噴涂在基礎(chǔ)飼料表面，飼料混合均勻晾干后，置于干燥處低溫保存（Brum et al.，2018）。按枸杞多糖添加劑量共設(shè)5個(gè)處理組，每處理組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50尾尼羅羅非魚(yú)。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)將750尾尼羅羅非魚(yú)（體重6.12±2.75 g、全長(zhǎng)6.92±0.49 cm）隨機(jī)平均分到15個(gè)150 L的水箱中，保持養(yǎng)殖環(huán)境與暫養(yǎng)環(huán)境一致，進(jìn)行40 d的養(yǎng)殖試驗(yàn)。試驗(yàn)用水為曝曬自來(lái)水，養(yǎng)殖期間每3 d換水1次。每天9：00和17：00各飽食投喂1次，投食1 h后將剩余飼料撈出，曬干稱重并記錄。

1. 3 指標(biāo)測(cè)定

1. 3. 1 生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)量 養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，測(cè)量尼羅羅非魚(yú)的體重及全長(zhǎng)，計(jì)算相對(duì)增重率（WG）、相對(duì)增長(zhǎng)率（LG）、特定生長(zhǎng)率（SGR）和飼料系數(shù)（FCR）（馬釗等，2020;張宇航等，2020），計(jì)算公式如下：

WG（%）=（W-W）/W×100

LG（%）=（L-L）/L×100

SGR（%）=（lnW-lnW）/t×100

FCR=W/（W–W）

式中，W為初始體重（g），W為終末體重（g），W為飼料消耗量，L為初始全長(zhǎng)（cm），L為終末全長(zhǎng)（cm），t為養(yǎng)殖時(shí)間（d）。

1. 3. 2 消化酶活性檢測(cè) 養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)所有試驗(yàn)魚(yú)饑餓處理24 h，每處理組隨機(jī)取3尾尼羅羅非魚(yú)，采用MS-222進(jìn)行麻醉處理，然后迅速在冰盤(pán)上采集肝臟、胃和中腸組織，置于-80 ℃冰箱暫存以備消化酶活性檢測(cè)。按照ELISA試劑盒（江蘇澤雨生物科技有限公司）說(shuō)明檢測(cè)淀粉酶（Amylase）、蛋白酶（Protease）和脂肪酶（Lipase）活性。

1. 3. 3 腸道組織形態(tài)分析 尼羅羅非魚(yú)饑餓處理24 h后，每處理組隨機(jī)選取3尾進(jìn)行MS-222麻醉處理，迅速解剖采集前腸、中腸和后腸組織，各腸段長(zhǎng)度約1 cm，浸入pH 7.2～7.4的磷酸鹽緩沖液中清洗內(nèi)容物，使用4%多聚甲醛通用型組織固定液（Biosharp）固定24 h（王壇等，2019）。參照Z(yǔ)hang等（2017）制作組織切片的方法，將固定好的樣品經(jīng)脫水、浸蠟、包埋、切片、脫蠟、蘇木精—伊紅（H-E）染色等過(guò)程制作腸道組織橫斷面切片，每個(gè)組織制作5張石蠟切片。最后使用光學(xué)顯微鏡對(duì)每張腸道組織切片進(jìn)行觀察拍照，每個(gè)組織選取拍照效果較好的3張切片備用。在備用的每張腸道組織切片中，隨機(jī)選取3根完整絨毛以Image-Pro Plus 6.0分別測(cè)量絨毛高度（mm）和肌層厚度（mm），并求取平均值。

1. 4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA）及Duncan’s多重比較，并以GraphPad Prism 5.0進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果與分析

2. 1 枸杞多糖對(duì)尼羅羅非魚(yú)生長(zhǎng)發(fā)育的影響

由表2可知，于基礎(chǔ)飼料中添加不同劑量枸杞多糖對(duì)尼羅羅非魚(yú)的生長(zhǎng)發(fā)育均起促進(jìn)作用，其中以G4處理組的促進(jìn)效果最佳，至養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)尼羅羅非魚(yú)的終末全長(zhǎng)、終末體重、WG、LG和SGR均達(dá)最高值，分別為13.45 cm、48.74 g、6.96%、0.94%和5.19%/d，與G1、G2和G3處理組的差異達(dá)顯著水平（P<0.05，下同）。FCR以G4處理組的最?。?.88），其次是G5處理組（2.23），二者差異不顯著（P>0.05，下同）。

2. 2 枸杞多糖對(duì)尼羅羅非魚(yú)消化酶活性的影響

由圖1可知，經(jīng)過(guò)40 d的養(yǎng)殖各處理組尼羅羅非魚(yú)肝臟中的蛋白酶活性無(wú)顯著差異;G2～G5處理組的中腸組織蛋白酶活性均顯著高于對(duì)照組（G1），尤其以G4處理組最高，達(dá)524 U/L;在胃組織中，G4處理組的蛋白酶活性也最高，達(dá)532 U/L，但與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異，而G3和G5處理組顯著低于G4處理組。在尼羅羅非魚(yú)肝臟中，各處理組間的淀粉酶活性也無(wú)顯著差異;在中腸組織中，G2～G5處理組的淀粉酶活性均顯著高于對(duì)照組，尤其以G4處理組最高，達(dá)4139 mU/L;在胃組織中，G4處理組的淀粉酶活性也最高，達(dá)6303 mU/L，但與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異。在尼羅羅非魚(yú)肝臟中，脂肪酶活性以G4處理組最高，達(dá)8247 mU/L，與對(duì)照組間無(wú)顯著差異，但顯著高于G5處理組;在中腸和胃組織中，脂肪酶活性均以G3處理組的最高，分別為4457和4131 mU/L，但各處理組間的差異均不顯著。

2. 3 枸杞多糖對(duì)尼羅羅非魚(yú)腸道組織形態(tài)的影響

腸道是魚(yú)類消化和吸收營(yíng)養(yǎng)的主要場(chǎng)所，可分為黏膜層、黏膜下層、肌層和漿膜層。腸絨毛是腸道內(nèi)部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要部位，而肌層主要作用于腸道蠕動(dòng)，促進(jìn)食物的推進(jìn)及排放。因此，腸絨毛長(zhǎng)度及肌層厚度直接影響著營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收與運(yùn)輸。各處理組尼羅羅非魚(yú)前腸、中腸、后腸組織的形態(tài)特征如圖2所示。由尼羅羅非魚(yú)前腸、中腸、后腸組織切片的腸絨毛長(zhǎng)度和肌層厚度測(cè)量值繪制曲線（圖3）可知，與對(duì)照組相比，腸絨毛長(zhǎng)度在尼羅羅非魚(yú)前腸組織中以G4處理組的最短（0.351 mm）、G2處理組的最長(zhǎng)（0.526 mm），二者差異顯著;在中腸組織中，腸絨毛長(zhǎng)度排序?yàn)镚1處理組>G5處理組>G2處理組>G4處理組>G3處理組，即G3處理組的腸絨毛長(zhǎng)度最短，為0.298 mm;在后腸組織中，腸絨毛長(zhǎng)度排序?yàn)镚4處理>G5處理>G3處理>G1處理>G2處理，以G4處理組的腸絨毛長(zhǎng)度最長(zhǎng)，為0.320 mm，與對(duì)照組相比差異顯著。在肌層厚度方面，前腸的肌層厚度排序?yàn)镚2處理組>G4處理組>G5處理組>G3處理組>G1處理組，其中，G2～G5處理組肌層厚度均顯著高于對(duì)照組，以G2處理組的最厚（0.089 mm）;中腸的肌層厚度排序?yàn)镚2處理組>G5處理組>G4處理組>G1處理組>G3處理組，也是以G2處理組的最厚，為0.087 mm;在后腸組織中則以G3處理組的最?。▋H為0.065 mm），以G5處理組的最厚（0.099 mm），具體排序?yàn)镚5處理組>G4處理組>G1處理組>G2處理組>G3處理組。綜上所述，以G2處理組前腸的腸絨毛最長(zhǎng)，G4處理組后腸的腸絨毛最短，且各處理組的后腸腸絨毛均較前腸、中腸的腸絨毛短。在肌層厚度方面，以G5處理組的后腸肌層最厚，G1處理組的前腸肌層最薄，且各處理組的后腸肌層均較前腸、中腸的肌層厚。

3 討論

多糖是機(jī)體的主要成分之一，幾乎參與整個(gè)生命過(guò)程。枸杞多糖是一種由多種酸性雜多糖和多肽或蛋白構(gòu)成的復(fù)合多糖，因具有天然的抗氧化、抗病毒等生物活性，在畜牧業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用前景廣闊（譚連杰等，2019）。利用枸杞多糖提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能是多糖研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。已有研究表明，枸杞多糖可改善養(yǎng)殖動(dòng)物的生長(zhǎng)性能，在飼料中添加2 g/kg枸杞多糖對(duì)草魚(yú)（Ctenopharyngodon idella）的WG、FCR和SGR均有顯著促進(jìn)作用（Wing et al.，2016），添加10 g/kg枸杞多糖可顯著提高石斑魚(yú)的WG和SGR（Tan et al.，2019）。李宇敏等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加不同劑量的枸杞多糖可不同程度促進(jìn)獺兔的生長(zhǎng)發(fā)育。本研究結(jié)果顯示，在基礎(chǔ)飼料中添加1500 mg/kg枸杞多糖可顯著提高羅非魚(yú)的WG、LG和SGR，降低其FCR，與前人的研究結(jié)果（Wing et al.，2016;Tan et al.，2019）相似。

蛋白酶、脂肪酶及淀粉酶等內(nèi)源性消化酶在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化方面發(fā)揮重要作用，其活性嚴(yán)重影響著水產(chǎn)動(dòng)物的消化水平（Mohamed et al.，2019）。已有研究表明，在仿刺參（Apostichopus japonicas Selenka）體內(nèi)注射枸杞多糖可顯著提高其腸道消化酶活性和生長(zhǎng)性能（樊英等，2014）。類似研究結(jié)論在枸杞多糖對(duì)肉雞等其他動(dòng)物的研究中也得到證實(shí)（Long et al.，2020）。本研究結(jié)果表明，尼羅羅非魚(yú)中腸組織的蛋白酶和淀粉酶活性在1500 mg/kg處理組中顯著升高，表明飼料中添加1500 mg/kg枸杞多糖可提高羅非魚(yú)的消化能力。多糖的結(jié)構(gòu)組分與其生理功能密切相關(guān)，枸杞多糖復(fù)雜的結(jié)構(gòu)組分和構(gòu)象特征決定其生物學(xué)功能的多樣性（Talarico et al.，2005;孫甜甜等，2018）。故推測(cè)枸杞多糖在尼羅羅非魚(yú)中腸組織中利用不同組分間的結(jié)構(gòu)修飾，有效改善羅非魚(yú)腸道組織中的消化酶活性，從而提高對(duì)飼料的利用率，促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育。

腸道是魚(yú)類進(jìn)食后消化吸收的重要器官，腸絨毛作為腸道內(nèi)部消化吸收的主要部位，其長(zhǎng)度決定了腸道內(nèi)部消化吸收的表面積（朱傳忠等，2018）。Caspary（1992）研究認(rèn)為，腸絨毛長(zhǎng)度增加促使小腸接觸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的面積增大，從而增強(qiáng)小腸對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，即腸絨毛形態(tài)與機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)飼料中添加1500 mg/kg枸杞多糖后尼羅羅非魚(yú)后腸絨毛長(zhǎng)度最長(zhǎng)，表明羅非魚(yú)的消化吸收能力最強(qiáng)，生長(zhǎng)發(fā)育最快。此外，發(fā)現(xiàn)在基礎(chǔ)飼料中添加枸杞多糖對(duì)尼羅羅非魚(yú)前腸、中腸的絨毛長(zhǎng)度無(wú)顯著促進(jìn)作用。魚(yú)類進(jìn)食后營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在腸道內(nèi)的流動(dòng)速度和消化率與腸道肌層厚度密切相關(guān)（Smirnov et al.，2004）。肌層厚度影響腸道肌肉的蠕動(dòng)能力，肌層越厚蠕動(dòng)能力越強(qiáng)，越有利于腸道內(nèi)物質(zhì)的運(yùn)輸（麥浩彬等，2020），反之，較薄的肌層減少了腸道蠕動(dòng)速度，增加食物在腸道內(nèi)的停留時(shí)間，從而延長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)吸收的時(shí)間（Liu et al.，2018）。前人研究表明，枸杞多糖不同組分間的構(gòu)象可改善前腸組織細(xì)胞的增殖分化，促使其分泌更多分泌物以促進(jìn)消化吸收（樊英等，2014）。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)飼料中添加1500 mg/kg枸杞多糖能有效提高羅非魚(yú)前腸的肌層厚度，且此時(shí)生長(zhǎng)性能最佳。故推測(cè)飼料中添加的枸杞多糖促進(jìn)了前腸組織細(xì)胞的增殖分化，從而促使其前腸肌層厚度增加，提高食物在羅非魚(yú)前腸中的運(yùn)輸速度，同時(shí)促進(jìn)前腸組織分泌物的產(chǎn)生及食物在下游消化道的消化吸收，有效提高消化效率。由于枸杞多糖存在特殊的結(jié)構(gòu)組成和構(gòu)象差異，其含有的-COOH和-NH等基團(tuán)還會(huì)促進(jìn)腸道組織細(xì)胞發(fā)生凋亡（樊英等，2014）。本研究在基礎(chǔ)飼料中添加1000 mg/kg枸杞多糖后，尼羅羅非魚(yú)后腸組織肌層厚度顯著降低，推測(cè)是-COOH和 -NH等基團(tuán)的促凋亡作用致使羅非魚(yú)后腸肌層厚度變薄，從而延長(zhǎng)食物在腸道內(nèi)的停留時(shí)間，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率，最終促進(jìn)羅非魚(yú)的生長(zhǎng)發(fā)育。

4 結(jié)論

枸杞多糖可提高羅非魚(yú)的消化酶活性，改善其腸道組織形態(tài)，從而影響羅非魚(yú)的生長(zhǎng)發(fā)育，且以添加劑量為1500 mg/kg的效果最佳。

參考文獻(xiàn)：

樊英，于曉清，李樂(lè)，李天保，葉海斌，王勇強(qiáng). 2014. 不同免疫增強(qiáng)劑對(duì)仿刺參腸道消化酶活性及組織結(jié)構(gòu)的影響[J]. 水產(chǎn)學(xué)雜志，27（4）：46-51. [Fan Y，Yu X Q，Li L，Li T B，Ye H B，Wang Y Q. 2014. Effect of different immunostimulants on digestive enzyme activities and histological structure in intestine of sea cucumber，Apostichopus japonicus[J]. Chinese Journal of Fisheries， 27（4）：46-51.] doi：10.3969/j.issn.1005-3832.2014.04.010.

李宇敏，楊美璐，吳峰洋，陳寶江，谷子林，陳賽娟，劉亞娟. 2018. 枸杞多糖對(duì)生長(zhǎng)獺兔營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及氮代謝的影響[J]. 飼料工業(yè)，39（17）：61-64. [Li Y M，Yang M L，Wu F Y，Chen B J，Gu Z L，Chen S J，Liu Y J. 2018. Effects of lycium barbarum polysaccharides on apparent digestibility and nitrogen metabolism of nutrients in growing rex rabbits[J]. Feed Industry，39（17）：61-64.] doi：10.13302/j.cnki.fi.2018.17.014.

劉英娟，杜金梁，賈睿，曹麗萍，王佳豪，殷國(guó)俊. 2015. 枸杞多糖對(duì)四氯化碳致建鯉急性肝損傷的保護(hù)作用[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，27（1）：37-43. [Liu Y J，Du J L，Jia R，Cao L P，Wang J H，Yin G J. 2015. Protective effects of Lycium barbarum polysaccharides against carbon tertrachloride （CCl4）-induced liver accurate injury in Carprinus carpoivar Jian[J]. Acta Agriculturae Zhejiangensis，27（1）：37-43.] doi：10.3969/j.issn.1004-1524.2015.01.08.

馬釗，張藝杰，趙碩，何文娜，盧冰霞，胡庭俊，陳忠偉，何穎. 2020. 貞苓增免散對(duì)羅非魚(yú)生長(zhǎng)性能及免疫功能的影響[J]. 飼料研究，43（12）：46-50. [Ma Z，Zhang Y J，Zhao S，He W N，Lu B X，Hu T J，Chen Z W，He Y. 2020. Effect of Zhenlingzengmian powder on growth performance and immune function of tilapia[J]. Feed Research，43（12）：46-50.] doi：10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2020.12.013.

麥浩彬，郭鑫偉，王金港，遲淑艷，董曉慧，楊奇慧，劉泓宇，章雙. 2020. 攝食不同水平飼料蛋白質(zhì)對(duì)珍珠龍膽石斑魚(yú)幼魚(yú)腸道組織形態(tài)和菌群組成的影響[J]. 大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，35（1）：63-70. [Mai H B，Guo X W，Wang J G，Chi S Y，Dong X H，Yang Q H，Liu H Y，Zhang S. 2020. Effects of dietary protein levels on intestinal tract histomorphology and microflora composition in juvenile pearl gentian grouper （Epinephelus lanceolatu ♂×E. Fuscoguttatus ♀）[J]. Journal of Dalian Ocean University，35（1）：63-70.] doi：10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019-123.

孫甜甜，高云航，孫卓，婁玉杰，周海柱. 2018. 枸杞多糖研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)獸藥雜志，52（12）：75-80. [Sun T T，Gao Y H，Sun Z，Lou Y J，Zhou H Z. 2018. Research advan-ces of Lycium barbarum polysaccharides[J]. Chinese Journal of Veterinary Drug，52（12）：75-80.] doi：10.11751/ISSN.1002-1280.2018.12.12.

譚連杰，林黑著，黃忠，周傳朋，荀鵬偉，黃倩倩，于萬(wàn)峰，黃小林，虞為. 2019. 枸杞多糖對(duì)卵形鯧鲹生長(zhǎng)性能、抗氧化能力及血清免疫、生化指標(biāo)的影響[J]. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，31（1）：418-427. [Tan L J，Lin H Z，Huang Z，Zhou C P，Xun P W，Huang Q Q，Yu W F，Huang X L，Yu W. 2019. Effects of Lycium barbarum polysaccharide on growth performance，antioxidant capacity，serum immune and biochemical indexes of juvenile golden pompano （Trachinotus ovatus）[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition，31（1）：418-427.] doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2019.01. 049.

王大會(huì)，胡強(qiáng)，李泰君. 2020. 枸杞及枸杞多糖在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用分析[J]. 江西水產(chǎn)科技，（3）：43-45. [Wang D H，Hu Q，Li T J. 2020. Application of Lycium barbarum and Lycium barbarum polysaccharide in aquaculture[J]. Jiang-xi Fishery Science and Technology，（3）：43-45.] doi：10.3969/j.issn.1006-3188.2020.03.018.

王壇，趙金鑫，劉東來(lái)，孔純，華雪銘，吳釗，王剛，馮悅，楊景豐，劉韜. 2019. 飼用溶菌酶對(duì)吉富羅非魚(yú)消化道組織結(jié)構(gòu)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的影響[J]. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展，40（6）：76-87. [Wang T，Zhao J X，Liu D L，Kong C，Hua X M，Wu Z，Wang G，F(xiàn)eng Y，Yang J F，Liu T. 2019. Effects of dietary lysozyme on the digestive tract structure and nutrient digestibility of GIFT tilapia （Oreochromis niloticus）[J]. Progress in Fishery Sciences，40（6）：76-87.] doi：10.19663/j.issn2095-9869.20180918001.

袁增寶，姚瓊，王安香，向梟. 2020. 枸杞多糖對(duì)鯉生長(zhǎng)性能和肝胰臟抗氧化能力的影響[J]. 生物資源，42（3）：307-312. [Yuan Z B，Yao Q，Wang A X，Xiang X. 2020. Effects of Lycium barbarum polysaccharide on growth performance and hepatopancreatic antioxidant capacity of carp[J]. Biotic Resources，42（3）：307-312.] doi：10.14188/j.ajsh.2020.03.007.

張琛，楊建軍，王晨，馬潔，楊涓，劉根紅，鄭蕊，鄭國(guó)琦. 2021. 寧夏枸杞果實(shí)細(xì)胞壁蛋白適宜提取方法研究[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，52（9）：2534-2542. [Zhang C，Yang J J，Wang C，Ma J，Yang J，Liu G H，Zheng R，Zheng G Q. 2021.Optimization of extraction method of the cell wall protein of Lycium barbarum L.[J]. Journal of Southern Agriculture，52（9）：2534-2542.] doi：10.3969/j.issn.2095-1191.2021.09.024.

張宇航，高揚(yáng)，李文紅，楊卓，溫晴宇，徐鵬. 2020. 低溫停食和復(fù)溫后投喂頻率對(duì)奧尼羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)的影響[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 33（9）：2125-2131. [Zhang Y H，Gao Y，Li W H，Yang Z，Wen Q Y，Xu P. 2020. Effects of feeding frequency after food deprivation with low temperature and rewarming on growth of hybrid tilapia juvenile （Oreochromis niloticus×O. aureus）[J]. Southwest China Journal of Agricultural Sciences，33（9）：2125-2131.] doi：10.16213/j.cnki.scjas.2020.9.036.

朱傳忠，孫陸宇，解文麗，易敢峰. 2018. 3種飼料添加劑對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、消化酶活性和肝、腸組織結(jié)構(gòu)的影響[J]. 淡水漁業(yè)，48（2）：94-99. [Zhu C Z，Sun L Y，Xie W L，Yi G F. 2018. Effects of 3 feed additives on the growth performance，digestive enzyme activity，liver and intestine histological structure for the juvenile genetically improved farmed tilapia，Oreochromis niloticus[J]. Freshwater Fisheries，48（2）：94-99.] doi：10.3969/j.issn. 1000-6907.2018.02.014.

Armstrong S M，Hargrave B T，Haya K. 2005. Antibiotic use in finfish aquaculture： Modes of action， environmental fate，and microbial resistance[J]. Environmental Effects of Marine Finfish Aquaculture，（5）：341-357. doi：10.1007/b136017.

Behera B K，Pradhan P K，Swaminathan T R，Sood N，Paria P，Das A，Verma D K，Kumar R，Yadav M K，Dev A K. 2018. Emergence of tilapia lake virus associated with mortalities of farmed Nile tilapia Oreochromis niloticus （Linnaeus 1758） in India[J]. Aquaculture，484（1）：168-174. doi：10.1016/j.aquaculture.2017.11.025.

Brum A，Pereira S A，Cardoso L，Chagas E C，Chaves F C M，Mouri?o J L P，Martins M L. 2018. Blood biochemical parameters and melanomacrophage centers in Nile tilapia fed essential oils of clove basil and ginger[J]. Fish and Shellfish Immunology，74：444-449. doi：10.1016/j.fsi. 2018.01.021.

Caspary W F. 1992. Physiology and pathophysiology of intestinal absorption[J]. American Journal of Clinical Nutrition，55（1）：299S-308S. doi：10.1093/ajcn/55.1.299s.

Citarasu T. 2010. Herbal biomedicines：A new opportunity for aquaculture industry[J]. Aquaculture International，18（3）：403-414. doi：10.1007/s10499-009-9253-7.

Elabd H，Wang H P，Shaheen A，Yao H，Abbass A. 2016. Feeding Glycyrrhiza glabra（Liquorice） and Astragalus membranaceus（AM） alters innate immune and physiological responses in yellow perch （Perca flavescens）[J]. Fish and Shellfish Immunology，54：374-384. doi：10.1016/ j.fsi.2016.04.024.

Eman Z，Engy R，F(xiàn)atma A，Hebata A M，Tarek I. 2014. Effects of dietary Astragalus polysaccharides（APS） on growth performance，immunological parameters，digestive enzymes，and intestinal morphology of Nile tilapia （Oreochromis niloticus）[J]. Fish and Shellfish Immunology，38：149-157. doi：10.1016/j.fsi.2014.03.002.

He M S，Liu G Y，Liu Y H，Yang K C，Qi X Z，Huang A G，Liu T Q，Wang G X，Wang E L. 2020. Effects of geniposide as immunostimulant on the innate immune response and disease resistance in crucian carp[J]. Aquaculture，529（2）：735713. doi：10.1016/j.aquaculture.2020.735713.

Hien V D，Seyed H H，Preetham E，Sudaporn T，Chanagun C，Sanchai J，Sompong D. 2018. Effects of orange peels derived pectin on innate immune response，disease resistance and growth performance of Nile tilapia（Oreochromis niloticus） cultured under indoor biofloc system[J]. Fish and Shellfish Immunology，80：56-62. doi：10.1016/j.fsi.2018.05.049.

Huang Z F，Lu J，Ye Y L，Xu A L，Li Z B. 2020. Effects of dietary Chinese herbal medicines mixture on growth performance，digestive enzyme activity and serum biochemical parameters of European eel，Anguilla anguilla[J]. Aquaculture Reports，18：100510. doi：10.1016/j.aqrep. 2020.100510.

Liu W，Wu J P，Li Z，Duan Z Y，Wen H. 2018. Effects of dietary coated protease on growth performance，feed utilization，nutrient apparent digestibility，intestinal and hepatopancreas structure in juvenile Gibel carp （Carassius auratus gibelio）[J]. Aquaculture Nutrition，24（1）：47-55. doi：10.1111/anu.12531.

Long L N，Kang B J，Jiang Q，Chen J S. 2020. Effects of die-tary Lycium barbarum polysaccharides on growth performance， digestive enzyme activities，antioxidant status， and immunity of broiler chickens[J]. Poultry Science，99（2）：744-751. doi：10.1016/j.psj.2019.10.043.

Manage P M. 2018. Heavy use of antibiotics in aquaculture： Emerging human and animal health problems—A review[J]. Sri Lanka Journal of Aquatic Sciences，23：13-27. doi：10.4038/sljas.v23i1.7543.

Mesalhy A S，Albutti A. 2014. Antimicrobials use in aquaculture and their public health impact[J]. Journal of Aquaculture Research & Development，5（4）：1000247. doi：10.4172/2155-9546.1000247.

Mohamed S H，Eman Y M，Mohamed R S，Amina A S A R. 2019. Exogenous xylanase improves growth，protein digestibility and digestive enzymes activities in Nile tilapia，Oreochromis niloticus，fed different ratios of fish meal to sunflower meal[J]. Aquaculture Nutrition，25（4）：841-853. doi：10.1111/anu.12903.

Radhakrishnan S，Saravana P，Bhavan C，Seenivasan R，Shanthi R. 2014. Influence of medicinal herbs （Alteranthera sessilis，Eclipta alba and Cissus quadrangularis） on growth and biochemical parameters of the freshwater prawn Macrobrachium rosenbergii[J]. Aquaculture International，22（2）：551-572. doi：10.1007/s10499-013-9666-1.

Smirnov A，Sklan D，Uni Z. 2004. Mucin dynamics in the chick small intestine are altered by starvation[J]. The Journal of Nutrition，134（4）：736-742. doi：10.1111/j. 1365-277X.2004.00513.x.

Talarico L B，Pujol C A，Zibetti R，F(xiàn)aría P，Noseda M D，Duarte M，Damonte E B. 2005. The antiviral activity of sulfated polysaccharides against dengue virus is dependent on virus serotype and host cell[J]. Antiviral Research，66（2-3）：103-110. doi：10.1016/j.antiviral.2005.02.001.

Tan X H，Sun Z Z，Ye C X，Lin H Z. 2019. The effects of die-tary Lycium barbarum extract on growth performance，liver health and immune related genes expression in hybrid grouper （Epinephelus lanceolatus ♂×E. fuscoguttatus♀） fed high lipid diets[J]. Fish and Shellfish Immunology，87：847-852. doi：10.1016/j.fsi.2019.02.016.

Wing Y M，Clare H I L，Wai M C，Yu B M，Ming H W. 2016. Enhancing growth and non-specific immunity of grass carp and Nile tilapia by incorporating Chinese herbs （Astragalus membranaceus and Lycium barbarum） into food waste based pellets[J]. Environmental Pollution，219：475-482. doi：10.1016/j.envpol.2016.05.055.

Xin Y，Virender K S，Hui L. 2019. Environmental antibiotics and antibiotic resistance： from problems to solutions[J]. Frontiers of Environmental Science & Engineering，13（3）：47-47. doi：10.1007/s11783-019-1137-0.

Zhang L，Wu Y L，Xu H L，Yao Y F. 2017. Effects of oxidized konjac glucomannan on the intestinal microbial flora and intestinal morphology of Schizothorax prenanti[J]. Aquaculture International，25（1）：233-250. doi：10.1007/s10499-016-0025-x.

（責(zé)任編輯 蘭宗寶）