一種高效分離畜禽血清的方法

文│李紅艷（貴州省綏陽縣動物疫病預防控制中心）

蔣宗仁（貴州省綏陽縣畜牧漁業(yè)站）

在長期實踐中發(fā)現，畜禽血液采集后，如果畜禽血清分離期間所處的環(huán)境溫度過低，畜禽血清分離數量將會很少，溫度過低甚至會使紅細胞破裂并濕氣內容物釋放入血漿，使血清發(fā)生溶血現象，也會使血液中比紅細胞比重小的纖維蛋白原不能聚集，發(fā)生凝固不全，形成膠凍狀樣品。這些狀態(tài)和現象都會影響獸醫(yī)實驗室診斷、檢驗、檢測等分析結果的準確性，也會延誤畜禽疫病的即時防控、處置。而相關資料顯示，適宜的環(huán)境溫度（25～37℃）能增加畜禽血清的自然析出。但在畜牧獸醫(yī)工作中，畜禽血清分離時所處溫度環(huán)境多在自然環(huán)境中，或者在裝有試管架的疫苗冷藏箱內，或者在養(yǎng)殖場戶室內，這些溫度環(huán)境很可能達不到所需溫度要求。而且優(yōu)質畜禽血清分離的質量和數量除了溫度適宜外，也需要數小時的分離時間（Δt≥1.5小時），在上述溫度環(huán)境中，等待畜禽血清分離，然后再去采集其他養(yǎng)殖場戶的畜禽血液樣品或運輸到接樣地點極不現實，這會給畜牧獸醫(yī)工作者的采樣、送樣、檢測、監(jiān)測工作帶來諸多不便。

一、操作方法

1.當環(huán)境溫度t≤10℃時，如果不急需分離畜禽血清，可以在畜禽血液采集前選用2～4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，讓箱內溫度逐步升高，然后再將采集血液放入箱內。

（1）如果將2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時后，應重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內1.5～2小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（2）如果將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1.5～2小時后，應重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內的溫度已降到25℃左右。再重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內2～2.5小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（3）如果將4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2～2.5小時后，重新換4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（4）如果急需分離畜禽血清，如上級部門在短時間內需帶走血清，或者畜牧獸醫(yī)工作者在短時間內急需檢測血清樣品，則在畜禽血液采集前直接將4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，因為適度高溫能加快畜禽血清的分離，此時疫苗冷藏箱內溫度基本維持在37℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥1.5小時后用移液器提取血清即可。

2.當10℃≤環(huán)境溫度≤20℃時，如果不急需分離畜禽血清，可以在畜禽血液采集前將2～4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，讓箱內溫度逐步升高，然后再采集血液放入箱內。

（1）如果將2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1.5～2小時后，應重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。在重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內2～2.5小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（2）如果將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2～2.5小時后，應重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已經降到25℃左右。再重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內2～2.5小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（3）如果將4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2.5～3小時后，應重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（4）如果急需分離畜禽血清，在畜禽血液采集前直接用4瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1.5～2小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度基本維持在37℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥1.5小時后用移液器提取血清即可。

3.當20℃≤環(huán)境溫度≤25℃時，如果不急需分離畜禽血清，可以在畜禽血液采集前將2～3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，讓箱內溫度逐步升高，然后再采集血液放入箱內。

（1）如果將2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2～2.5小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內1.5～2小時后，疫苗冷藏箱內溫度又降到25℃左右，此時再重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（2）如果將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，則在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶2.5～3小時后，應重新更換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，此時疫苗冷藏箱內溫度已降到25℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。

（3）如果急需分離畜禽血清，在畜禽血液采集前，直接將3瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶放入帶泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，讓疫苗冷藏箱內溫度基本維持在37℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥1.5小時后用移液器提取血清即可。

4.當25℃≤環(huán)境溫度≤33℃時，如果不急需分離畜禽血清，直接將血液放在只有泡沫試管架的疫苗冷藏箱內，然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥4小時后用移液器提取血清即可。如果畜禽血液在疫苗冷藏箱內靜置過夜，第二天再用移液器提取，血清質量和數量更佳。如果急需分離畜禽血清，直接用2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶（500～600毫升）放入帶試管架的疫苗冷藏箱內，在放入裝有100℃開水的礦泉水瓶1～1.5小時后，重新換2瓶裝有100℃開水的礦泉水瓶到疫苗冷藏箱內，讓疫苗冷藏箱內溫度維持在37℃左右。然后等畜禽血液進入疫苗冷藏箱內Δt≥1.5小時后用移液器提取血清即可。

二、注意事項

（1）裝有畜禽血液的疫苗冷藏箱在運輸途中應輕拿輕放，盡量避免劇烈晃動，否則會使紅細胞內的化學物質釋放入血漿，并引發(fā)溶血現象，降低血清質量，影響畜禽血清學試驗分析結果的準確性。

（2）為避免燙壞血液、血清，裝有100℃開水的礦泉水瓶應和采集的血液樣品保持5厘米以上的距離。

（3）為了使析出的畜禽血清質量和數量更佳，如果不急需帶走血清或用于緊急血清學檢測，畜禽血液盡量放在疫苗冷藏箱內靜置過夜，第二天再用移液器提取血清。

三、小結

該畜禽血清分離方法簡單易行、使用靈活、能隨機應變所處環(huán)境溫度，為畜禽血液采樣人員隨時可以在不同采樣地點間移動，采集更多畜禽血液樣品提供方便，提高了工作效率。該方法幾乎無經濟成本卻能產生更高質量和數量的澄清、無溶血、無異物、稍黏稠的優(yōu)質畜禽血清，提高了畜禽血清析出效率，為畜禽血清學實驗室診斷、檢測、檢驗提供了更可靠的原料保證，加快了畜禽動物疫病檢測、監(jiān)測進程，使檢測、監(jiān)測結果更精準、更及時、更快速地應對和處置畜禽疫情。