鉤毛茜草蒽醌類化學(xué)成分的研究

李銀　黃鴻運　黃勇　何燕玲　 汪洋　李勇軍

摘要：為研究我國特有植物鉤毛茜草（Rubia oncotricha）的化學(xué)成分，該文將鉤毛茜草70%乙醇提取物采用硅膠、凝膠柱色譜等進行分離純化，并對所得化合物進行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果表明：從鉤毛茜草中共分離了15個蒽醌類化合物，分別是2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）αrhamnosyl（1→2）βglucoside（1）、2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3Oαrhamnosyl（1→2）βglucoside（2）、2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（3′Oacetyl）αrhamnosyl（1→2）βglucoside（3）、2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3Oβglucoside（4）、1，3，6trihydroxy2hydroxymethyl9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）βDglucopyranoside（5）、2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）βDglucopyranoside（6）、大黃素甲醚8OβD葡萄糖苷（7）、大黃素8OβD葡萄糖苷（8）、digiferruginol11Oβgentiobioside（9）、2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）βDxylopyranosyl（1→2）βDglucopyranoside（10）、6hydroxyrubiadin（11）、1，2二羥基蒽醌（12）、大黃酚（13）、6hydroxyxanthopurpurin（14）、1，3二羥基蒽醌（15）。化合物7、8、14為首次從茜草屬植物中分離得到，化合物1-6、9、10、12、13為首次從該藥材中分離得到。

關(guān)鍵詞： 鉤毛茜草， 化學(xué)成分， 蒽醌， 分離純化， 結(jié)構(gòu)鑒定

中圖分類號：Q946; R284.1

文獻標識碼：A

文章編號：10003142（2022）05086608

Chemical constituents of anthraquinone

from Rubia oncotricha

Abstract：To study the chemical constituents of China endemic plant Rubia oncotricha， the compounds were isolated with 70% ethyl alcohol and purified by silica gel， gel column chromatography， and their structures were elucidated by modern spectroscopic techniques. The results showed that fifteen anthraquinone compounds were isolated and identified from R. oncotricha， they were 2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）αrhamnosyl（1→2）βglucoside （1）， 2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3Oαrhamnosyl（1→2）βglucoside （2）， 2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（3′Oacetyl）αrhamnosyl（1→2）βglucoside （3）， 2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3Oβglucoside （4）， 1，3，6trihydroxy2hydroxymethyl9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）βDglucopyranoside （5）， 2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）βDglucopyranoside （6）， physcion8OβDglucopyranoside （7）， emodin8OβDglucopyranoside （8）， digiferruginol11Oβgentiobioside （9）， 2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）βDxylopyranosyl（1→2）βDglucopyranoside （10）， 6hydroxyrubiadin （11）， 1，2dihydroxyanthraquinone （12）， chrysophanol （13）， 6hydroxyxanthopurpurin （14）， 1，3dihydroxyanthraquinone （15）. Compounds 7， 8 and 14 are isolated from the genus of Rubia for the first time， compound 1-6， 9， 10， 12， 13 are isolated from R. oncotricha for the first time.

Key words： Rubia oncotricha， chemical constituents， anthraquinone， isolation and purification， structure identification918E1883-B60E-43F4-8D83-EE260E7F3EC7

茜草科（Rubiaceae） 茜草屬（Rubia L.） 植物在全世界有70余種，在我國有36種2變種，全國各地均有分布，本屬植物多以根入藥。目前，已從茜草屬不同植物中發(fā)現(xiàn)醌類、萜類、環(huán)己肽類等多種化學(xué)成分，其中絕大部分為蒽醌衍生物（劉路等，2015;陳毅等，2017）。茜草屬植物藥理活性主要表現(xiàn)在抗菌消炎、抗癌、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、保肝、鎮(zhèn)痛等方面（王曉建和黃勝陽，2012）。鉤毛茜草（Rubia oncotricha）為茜草屬植物之一，主要分布在廣西、四川、貴州、云南等地，用于吐血、衄血、崩漏、支氣管炎、跌撲損傷等癥的治療，收載于2003年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標準》（貴州省藥品監(jiān)督管理局，2003;何燕玲等，2019），是貴州省常用中藥材之一。此外，《中國植物志》中記載“本種的根在云南文山地區(qū)作茜草入藥，稱小茜草;廣西凌云民間作病后補藥”（羅獻瑞，1999），可見鉤毛茜草在民間具有較好的藥用價值。

目前，從鉤毛茜草中分離得到的蒽醌類化合物主要為蒽醌苷元（汪哲等，2018）。蒽醌是一種分子內(nèi)含有醌式結(jié)構(gòu)的多環(huán)化合物，其種類繁多并廣泛存在于多種植物中，此類成分表現(xiàn)出抗菌、抗病毒、抗氧化、抗腫瘤等較好的生物活性（王明明等，2019）。基于鉤毛茜草在貴州省少數(shù)民族地區(qū)的廣泛應(yīng)用和蒽醌類化合物良好的生物活性，為進一步了解鉤毛茜草的蒽醌類成分，為該植物后續(xù)研究開發(fā)提供實驗基礎(chǔ)，本課題組重點對鉤毛茜草中蒽醌類化合物進行研究，采用硅膠、葡聚糖凝膠Sephadex LH20等現(xiàn)代分離純化技術(shù)從中分離鑒定了15個蒽醌類化合物，其中化合物7、8、14為首次從茜草屬植物中分離得到，化合物1-6、9、10、12、13為首次從該藥材中分離得到。

1材料與儀器

鉤毛茜草藥材購于貴陽市南明區(qū)萬東大橋中藥材市場，由貴州醫(yī)科大學(xué)龍慶德副教授鑒定為茜草科植物鉤毛茜草（Rubia oncotricha）的干燥根及根莖，樣品存放在貴州省藥物制劑重點實驗室。

ACQUITYUPLCTQD超高液相色譜三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國Waters公司）;AgilentQTOF質(zhì)譜儀（美國Agilent公司）;JEOL ECS 400型核磁共振波譜儀（日本電子株式會社）;BUCHI R200旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士BUCHI公司）;ZF7三用紫外分析儀（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）;KZ20L超純水機（上海科治環(huán)保設(shè)備有限公司）;200～300目硅膠（青島海洋化工有限公司）;薄層層析硅膠板（青島海洋化工有限公司）;MCI CHP20/P120凝膠（日本三菱公司）;Sephadex LH20（瑞士Pharmacia Biotech公司）;Toyopearl HW40C、Toyopearl HW40F（日本東曹株式會社）;試劑均為分析純。

2提取與分離

取干燥的鉤毛茜草根及根莖5 kg，切碎成1～2 cm小段，加入70%乙醇，回流提取，共提取3次，合并濾液，減壓濃縮，得到浸膏。浸膏加水溶解，用有機溶劑萃取，分別得到石油醚部位（55 g）、乙酸乙酯部位（65 g）、正丁醇部位（215 g）和水部位（257 g）。

將正丁醇部位（215 g）過正相硅膠柱，以二氯甲烷-甲醇（50∶1～1∶1）梯度洗脫，得到7個組分：Fr.1～Fr.7。Fr.2經(jīng)硅膠柱層析（乙酸乙酯-甲醇）、Toyopearl HW40F柱色譜（甲醇）分離得化合物1（1.0 g）、2（1.4 g）、9（11.7 mg）。Fr.3經(jīng)硅膠柱層析（乙酸乙酯-甲醇、二氯甲烷-甲醇）、Sephadex LH20柱色譜（氯仿-甲醇）、Toyopearl HW40F柱色譜（甲醇）、Toyopearl HW40C柱色譜（氯仿-甲醇）、MCI柱色譜（甲醇-水）分離得化合物3（27.0 mg）、10（7.3 mg）。Fr.4經(jīng)Sephadex LH20柱色譜（甲醇）、Toyopearl HW40F柱色譜（甲醇）、MCI柱色譜（甲醇-水）分離、正相硅膠柱（二氯甲烷-甲醇）純化、反相ODS柱色譜（甲醇-水）分離得化合物4（5.5 mg）、5（16.0 mg）、8（7.7 mg）。Fr.6經(jīng)正相硅膠柱色譜（乙酸乙酯-甲醇）、Sephadex LH20柱色譜（氯仿-甲醇）分離得化合物6（8.7 mg）、7（85.0 mg）。

乙酸乙酯部位（65g）用硅膠柱進行分離，以二氯甲烷-甲醇（50∶1～0∶1）梯度洗脫，得到4個組分：Fr.1～ Fr.4。Fr.1經(jīng)多次硅膠柱層析（石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇、二氯甲烷-丙酮）、Sephadex LH20柱色譜（氯仿-甲醇）、Toyopearl HW40C柱色譜（甲醇）分離得化合物14（13.8 mg）。Fr.2經(jīng)多次硅膠柱層析（氯仿-乙酸乙酯、石油醚-乙酸乙酯、二氯甲烷-丙酮）、Sephadex LH20柱色譜（氯仿-甲醇）分離得化合物13（5.2 mg）。 Fr.3經(jīng)硅膠柱層析（二氯甲烷-丙酮、石油醚-乙酸乙酯）、Sephadex LH20柱色譜（氯仿-甲醇）分離得化合物15（8.3 mg）。Fr.3.6經(jīng)正相硅膠柱（二氯甲烷-丙酮）、Sephadex LH20柱色譜（氯仿-甲醇）、Toyopearl HW40F柱色譜（甲醇）分離、結(jié)晶、重結(jié)晶得化合物11（24.3 mg）、12（14.0 mg）。

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1黃色粉末。ESIMS m/z： 619[M-H]-， 分子式C29H32O15。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.10（1H， d， J = 8.6 Hz， H8）， 7.47（1H， d， J=2.5 Hz， H5）， 7.40（1H， s， H4）， 7.23（1H， dd， J=8.6， 2.6 Hz， H7）， 5.51（1H， d， J=5.5 Hz， H1′）， 5.28（1H， d， J = 1.7 Hz， H1″）， 2.15（3H， s， 2CH3）， 1.93（3H， s， H2）， 1.09（3H， d， J=6.1 Hz， 6″CH3）;918E1883-B60E-43F4-8D83-EE260E7F3EC7

13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 163.7（C1）， 120.6（C2）， 160.0（C3）， 105.3（C4）， 135.4（C4a）， 112.7（C5）， 161.3（C6）， 121.6（C7）， 129.8（C8）， 124.5（C8a）， 186.4（C9）， 110.7（C9a）， 181.7（C10）， 132.0（C10a）， 97.3（C1′）， 76.3（C2′）， 77.1（C3′）， 70.0（C4′）， 74.0（C5′）， 63.4（C6′）， 100.2（C1″）， 70.3（C2″）， 70.5（C3″）， 72.0（C4″）， 68.6（C5″）， 18.2（C6″）， 170.4（C1）， 20.4（C2）， 8.8（2CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻 （Bajpai et al.， 2018）基本一致，故鑒定為2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）αrhamnosyl（1→2）βglucoside。

化合物2黃色粉末。ESIMS m/z： 577[M-H]-， 分子式C27H30O14。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.09（1H， d， J = 8.6 Hz， H8）， 7.47（1H， d， J=2.5 Hz， H5）， 7.40（1H， s， H4）， 7.23（1H， dd， J=8.6， 2.6 Hz， H7）， 5.45（1H， d， J=7.0 Hz， H1′）， 5.38（1H， d， J = 1.7 Hz， H1″）， 2.15（3H， s， 2CH3）， 1.08（3H， d， J=6.2 Hz， 6″CH3）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 163.5（C1）， 120.6（C2）， 160.2（C3）， 105.0（C4）， 135.3（C4a）， 112.7（C5）， 161.4（C6）， 121.5（C7）， 129.7（C8）， 124.6（C8a）， 186.4（C9）， 110.5（C9a）， 181.7（C10）， 132.0（C10a）， 97.4（C1′）， 77.1（C2′）， 77.4（C3′）， 69.5（C4′）， 76.2（C5′）， 60.3（C6′）， 100.2（C1″）， 70.3（C2″）， 70.5（C3″）， 72.0（C4″）， 68.5（C5″）， 18.1（C2）， 8.8（2CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻 （Itokawa et al.， 1989）基本一致，故鑒定為2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3Oαrhamnosyl（1→2）β glucoside。

化合物3黃色粉末。ESIMS m/z： 619[M-H]-， 分子式C29H32O15。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.11（1H， d， J = 8.6 Hz， H8）， 7.49（1H， d， J=2.5 Hz， H5）， 7.46（1H， s， H4）， 7.24（1H， dd， J=8.6， 2.5 Hz， H7）， 5.69（1H， d， J=7.6 Hz， H1′）， 4.79（1H， d， J = 1.7 Hz， H1″）， 2.16（3H， s， 2CH3）， 2.10（3H， s，

H2）， 0.98（3H， d， J=6.4 Hz， 6″CH3）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 163.7（C1）， 120.8（C2）， 160.0（C3）， 105.2（C4）， 135.4（C4a）， 112.7（C5）， 161.4（C6）， 121.5（C7）， 129.7（C8）， 124.5（C8a）， 186.4（C9）， 110.7（C9a）， 181.7（C10）， 132.0（C10a）， 97.3（C1′）， 76.5（C2′）， 77.1（C3′）， 69.1（C4′）， 76.5（C5′）， 59.9（C6′）， 101.2（C1″）， 70.1（C2″）， 70.5（C3″）， 71.7（C4″）， 67.1（C5″）， 17.9（C6″）， 169.8（C1）， 21.1（C2）， 8.7（2CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻（Itokawa et al.， 1989）基本一致，故鑒定為2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（3′Oacetyl）αrhamnosyl（1→2）βglucoside。

化合物4黃色粉末。ESIMS m/z： 431[M-H]-， 分子式C21H20O10。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.07（1H， d， J = 8.6 Hz， H8）， 7.42（1H， d， J=2.4 Hz， H5）， 7.41（1H， s， H4）， 7.17（1H， dd， J=8.6， 2.6 Hz， H7）， 5.10（1H， d， J=7.3 Hz， H1′）， 2.16（3H， s， 2CH3）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 164.7（C1）， 120.7（C2）， 160.6（C3）， 105.5（C4）， 135.4（C4a）， 113.1（C5）， 161.3（C6）， 121.8（C7）， 129.7（C8）， 123.8（C8a）， 186.2（C9）， 110.7（C9a）， 181.9（C10）， 132.1（C10a）， 100.3（C1′）， 73.2（C2′）， 76.3（C3′）， 69.3（C4′）， 77.3（C5′）， 60.4（C6′）， 8.5（2CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻（Itokawa et al.， 1989）基本一致，故鑒定為2methyl 1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3Oβglucoside。918E1883-B60E-43F4-8D83-EE260E7F3EC7

化合物5黃色粉末。ESIMS m/z： 489[M-H]-， 分子式C23H22O12。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.10（1H， d， J = 8.8 Hz， H8）， 7.47（1H， d， J=2.4 Hz， H5）， 7.43（1H， s， H4）， 7.23（1H， dd， J=8.8， 2.4 Hz， H7）， 5.09（1H， d， J=7.6 Hz， H1′）， 4.63（1H， m， 2CH2OH）， 4.54（1H， m， 2CH2OH）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 161.7（C1）， 123.7（C2）， 161.5（C3）， 106.1（C4）， 133.8（C4a）， 112.6（C5）， 163.6（C6）， 121.6（C7）， 129.8（C8）， 124.5（C8a）， 186.4（C9）， 111.2（C9a）， 181.6（C10）， 135.3（C10a）， 100.6（C1′）， 73.2（C2′）， 75.8（C3′）， 70.0（C4′）， 74.2（C5′）， 63.5（C6′）， 170.5（C1″）， 20.5（C2″） ， 50.9（2CH2OH）。以上數(shù)據(jù)與文獻（Fan et al.， 2011）基本一致，故鑒定為1，3，6trihydroxy2hydroxymethyl9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）βDglucopyranoside。

化合物6黃色粉末。ESIMS m/z： 475[M+H]+， 分子式C23H22O11。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.10（1H， d， J = 8.6 Hz， H8）， 7.47（1H， d， J=2.6 Hz， H5）， 7.43（1H， s， H4）， 7.23（1H， dd， J=8.6， 2.6 Hz， H7）， 5.11（1H， d， J=7.6 Hz， H1′）， 2.17（3H， s， 2CH3）， 2.04（3H， s， H2″）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 163.7（C1）， 120.9（C2）， 160.6（C3）， 105.8（C4）， 135.4（C4a）， 112.6（C5）， 161.3（C6）， 121.5（C7）， 129.7（C8）， 124.5（C8a）， 186.5（C9）， 110.7（C9a）， 181.7（C10）， 132.0（C10a）， 100.2（C1′）， 73.2（C2′）， 76.0（C3′）， 69.9（C4′）， 74.2（C5′）， 63.5（C6′）， 170.5（C1"）， 20.5（C2″）， 8.5（2CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻（喬亞芳等，1990）基本一致，故鑒定為2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl） βDglucopyranoside。

化合物7黃色粉末。ESIMS m/z： 445[M-H]-， 分子式C22H22O10。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 7.48（1H， d， J = 1.7 Hz， H4）， 7.35（1H， d， J=2.5 Hz， H5）， 7.17（2H， d， J = 2.5 Hz， H2， 7）， 5.17（1H， d， J=6.4 Hz， H1′）， 3.94（3H， s， 3OCH3）， 2.41（3H， s， 6CH3）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 161.7（C1）， 124.3（C2）， 147.2（C3）， 119.4（C4）， 136.4（C4a）， 107.3（C5）， 164.7（C6）， 106.5（C7）， 160.7（C8）， 114.5（C8a）， 186.5（C9）， 114.4（C9a）， 181.9（C10）， 132.1（C10a）， 100.6（C1′）， 73.2（C2′）， 76.6（C3′）， 69.8（C4′）， 77.5（C5′）， 60.8（C6′）， 56.1（3OCH3）， 21.4（6CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻 （高淑紅等，2013） 基本一致，故鑒定為大黃素甲醚8OβD葡萄糖苷。

化合物8黃色粉末。ESIMS m/z： 431[M-H]-， 分子式C21H20O10。1HNMR（400 MHz， DMSOd6 ） δ： 7.45（1H， s， H4）， 7.27（1H， d， J=2.0 Hz， H5）， 7.15（1H， s， H2）， 6.98（1H， d， J=2.4 Hz， H7）， 5.12（1H， d， J=5.0 Hz， H1′）， 2.39（3H， s， 3CH3）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 161.1（C1）， 124.2（C2）， 146.9（C3）， 119.3（C4）， 132.1（C4a）， 108.3（C5）， 164.2（C6）， 108.3（C7）， 161.7（C8）， 114.5（C8a）， 186.4（C9）， 113.3（C9a）， 182.1（C10）， 136.5（C10a）， 100.7（C1′）， 73.3（C2′）， 77.3（C3′）， 69.4（C4′）， 76.4（C5′）， 60.6（C6′）， 21.4（3CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻 （高亮亮等，2011）基本一致，故鑒定為大黃素8OβD葡萄糖苷。

化合物9黃色粉末。ESIMS m/z： 577[M-H]-， 分子式C27H30O14。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.25（1H， m， H8）， 8.20（1H， m， H5）， 8.04（1H， d， J=8.0 Hz， H3）， 7.95（2H， m， H6， 7）， 7.74（1H， d， J=8.0 Hz， H4）， 4.94（1H， d， J = 14.8 Hz， H11a）， 4.77（1H， d， J = 18.0 Hz， H11b）， 4.35（1H， d， J = 7.6 Hz， H1″）， 4.29（1H， d， J = 8.0 Hz， H1′）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 158.8（C1）， 134.0（C2）， 133.2（C3）， 118.7（C4）， 134.7（C4a）， 126.9（C5）， 135.2（C6），135.3（C7）， 126.7（C8）， 131.9（C8a）， 188.6（C9）， 115.3（C9a）， 181.9（C10）， 132.8（C10a）， 64.2（C11）， 102.6（C1′）， 73.5（C2′）， 76.8（C3′）， 70.0（C4′）， 76.1（C5′）， 68.3（C6′）， 103.3（C1″）， 73.6（C2″）， 76.9（C3″）， 70.1（C4″）， 76.6（C5″）， 61.1（C6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻 （Yang et al.，2014）基本一致，故鑒定為digiferruginol11Oβgentiobioside。918E1883-B60E-43F4-8D83-EE260E7F3EC7

化合物10黃色粉末。分子式C28H30O15。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.09（1H， d， J = 8.4 Hz， H8）， 7.47（1H， d， J=2.0 Hz， H5）， 7.40（1H， s， H4）， 7.23（1H， dd， J=8.0， 2.0 Hz， H7）， 5.33（1H， d， J=7.2 Hz， H1″）， 4.49（1H， d， J = 7.2 Hz， H1′）， 2.15（3H， s， -OAc）， 2.03（3H， s， 2CH3）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 163.5（C1）， 120.7（C2）， 160.3（C3）， 105.6（C4）， 135.4（C4a）， 112.6（C5）， 161.3（C6）， 121.6（C7）， 129.7（C8）， 124.1（C8a）， 186.3（C9）， 110.7（C9a）， 181.7（C10）， 132.0（C10a）， 97.8（C1′）， 82.1（C2′）， 75.5（C3′）， 69.6（C4′）， 74.6（C5′）， 63.4（C6′）， 105.4（C1″）， 74.0（C2″）， 76.2（C3″）， 69.5（C4″）， 66.0（C5″）， 170.5（C1）， 20.4（C2）， 8.0（2CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻（王素賢等，1991）基本一致，故鑒定為2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）βDxylopyranosyl（1→2）βDglucopyranoside。

化合物11黃色晶體。ESIMS m/s： 271[M+H]+， 分子式C15H10O5。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 7.95（1H， d， J=8.4 Hz， H8）， 7.35（1H， dd， J=8.8， 2.4 Hz， H7）， 7.13（1H， d， J=2.8 Hz， H5）， 7.11（1H， s， H4）， 2.49（3H， s， 2CH3）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 162.2（C1）， 117.4（C2）， 163.2（C3）， 107.2（C4）， 135.1（C4a）， 112.5（C5）， 162.3（C6）， 121.2（C7）， 129.3（C8）， 124.6（C8a）， 185.6（C9）， 108.4（C9a）， 181.9（C10）， 131.7（C10a）， 8.1（2CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻 （康文藝等，2006）基本一致，故鑒定為6hydroxyrubiadin。

化合物12黃色粉末。ESIMS m/z： 241[M+H]+， 239[M-H]-， 分子式C14H8O4。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.31（1H， m， H8）， 8.25（1H， m， H7）， 7.85（2H， m， H6，7）， 7.75（1H， d， J=8.0 Hz， H4）， 7.18（1H， d， J=8.0 Hz， H3）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 150.7（C1）， 152.7（C2）， 120.8（C3）， 121.2（C4）， 123.8（C4a）， 126.7（C5）， 135.2（C6）， 134.1（C7）， 126.8（C8）， 132.9（C8a）， 188.8（C9）， 116.3（C9a）， 180.6（C10）， 133.6（C10a）。以上數(shù)據(jù)與文獻 （Itokawa et al.， 1983）基本一致，故鑒定為1，2二羥基蒽醌。

化合物13黃色粉末。分子式C15H10O4。1HNMR（400 MHz， CDCl3） δ： 12.1（1H， s， -OH）， 12.0（1H， s， OH）， 7.81（1H， dd， J=8.0， 0.8 Hz， H5）， 7.66（1H， d， J=8.0 Hz， H6）， 7.63（1H， d， J=2.4 Hz， H4）， 7.27（1H， dd， J=8.0， 0.8 Hz， H7）， 7.08（1H， d， J=0.8 Hz， H2）， 2.45（3H， s， CH3）;13CNMR（100 MHz， CDCl3） δ： 162.4（C1）， 124.6（C2）， 149.4（C3）， 121.3（C4）， 133.2（C4a）， 119.9（C5）， 136.9（C6）， 124.3（C7）， 162.7（C8）， 115.8（C8a）， 192.5（C9）， 113.7（C9a）， 182.1（C10）， 133.6（C10a）， 22.3（3CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻（李會等，2019）基本一致，故鑒定為大黃酚。

化合物14淡黃色無定形粉末。ESIMS m/z： 257[M+H]+， 分子式C14H8O5。1HNMR（400 MHz， CD3OD） δ： 8.12（1H， d， J=8.8 Hz， H8）， 7.50（1H， d， J=2.8 Hz， H5）， 7.16（1H， dd， J=8.8， 2.4 Hz， H7）， 7.15（1H， overlap d， J=2.4 Hz， H4）， 6.53（ 1H， d， J=2.0 Hz， H2）;13CNMR（100 MHz， CD3OD） δ： 166.5（C1）， 109.3（C2）， 166.4（C3）， 108.9（C4）， 137.0（C4a）， 113.8（C5）， 164.7（C6）， 122.2（C7）， 136.8 130.5（C8）， 126.8（C8a）， 187.2（C9）， 110.7（C9a）， 183.9（C10），（C10a）。以上數(shù)據(jù)與文獻（ElGamal et al.， 1995）分析比較，故鑒定為6hydroxyxanthopurpurin。918E1883-B60E-43F4-8D83-EE260E7F3EC7

化合物15黃色粉末。ESIMS m/z： 239[M-H]-， 分子式C14H8O4。1HNMR（400 MHz， DMSOd6） δ： 8.15（2H， dd， J = 6.8， 2.8 Hz， H5， H8）， 7.88（2H， m， H6， 7）， 7.10（1H， d， J =2.4， H4）， 6.57（1H， d， J=2.4 Hz， H2）;13CNMR（100 MHz， DMSOd6） δ： 164.8（C1）， 107.7（C2）， 165.5（C3）， 108.4（C4）， 135.0（C4a）， 126.9（C5）， 134.7（C6）， 134.5（C7）， 126.4（C8）， 132.9（C8a）， 185.9（C9）， 109.4（C9a）， 181.9（C10）， 132.8（C10a）。以上數(shù)據(jù)與文獻（桂利利等，2017）基本一致，故鑒定為1，3二羥基蒽醌。

4討論與結(jié)論

鉤毛茜草以根及根莖入藥，具有涼血止血、止咳祛痰之功效，但目前對鉤毛茜草物質(zhì)基礎(chǔ)的研究報道較少。茜草屬植物中富含蒽醌類化合物，其中多羥基蒽醌類成分的抗氧化作用對治療癌癥及其他病癥有較好療效，具有一定的臨床應(yīng)用價值（劉路等，2015），根據(jù)親緣同屬關(guān)系，推測鉤毛茜草也可能含有大量蒽醌類成分。汪哲等（2018）對鉤毛茜草的甲醇提取物進行化學(xué)成分研究，分離出的蒽醌類成分主要來源于較小極性組分，且均為蒽醌苷元。因此，為了從鉤毛茜草中發(fā)現(xiàn)更多的蒽醌類化合物，以期尋找活性成分，擴大鉤毛茜草的藥用價值，本研究通過多種分離純化技術(shù)研究鉤毛茜草的化學(xué)成分，分離得到15個蒽醌類化合物，包括蒽醌苷和蒽醌苷元，其中3個化合物首次從茜草屬植物中分離得到，10個化合物首次從該植物分離得到。對所得化合物進行文獻調(diào)研發(fā)現(xiàn)，部分化合物具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)血脂及抗炎等作用?；衔?能顯著降低3羥基3甲基戊二酰輔酶A還原酶活性起降血脂作用，并具有抗腫瘤作用（李登科等，2015）;化合物11可抑制脂多糖引起的炎癥，提示該化合物可能是治療炎癥的一種潛在候選藥物（Wu et al.， 2017）;化合物13具有抗癌、神經(jīng)保護及調(diào)節(jié)血脂等藥理作用（Xie et al.， 2019）。本研究分離得到的化合物1、2、7的量較大，可能是影響不同產(chǎn)地及批次藥材質(zhì)量的標志性成分;且課題組前期通過對鉤毛茜草進行指紋圖譜研究，并指認出2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3O（6′Oacetyl）αrhamnosyl（1→2）βglucoside（1）、2methyl1，3，6trihydroxy9，10anthraquinone3Oαrhamnosyl（1→2）βglucoside（2）兩個成分，后期考慮對其進行含量測定研究，從多角度較為全面地評價了鉤毛茜草質(zhì)量。

綜上，本研究結(jié)果與茜草屬植物富含蒽醌類化合物的報道相吻合，豐富了鉤毛茜草的蒽醌類成分，可為鉤毛茜草今后的開發(fā)利用提供一定的科學(xué)依據(jù)。

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（責(zé)任編輯李莉）

收稿日期：2021-01-11

基金項目：國家自然科學(xué)基金（U1812403）;貴州省大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項目（2018520363）;中央引導(dǎo)地方科技專項項目（黔科中引地 [2018]4006）;貴州省科學(xué)技術(shù)廳人才團隊項目（黔科合平臺人才 [2016]5677）

第一作者： 李銀（1997-），碩士研究生，主要從事藥效物質(zhì)基礎(chǔ)與質(zhì)量控制技術(shù)研究，

（Email）2681282643@qq.com。

通信作者：李勇軍，教授，主要從事中藥制劑工藝、質(zhì)量標準及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究，（Email）liyongjun026@126.com。918E1883-B60E-43F4-8D83-EE260E7F3EC7