王 洋，杜 慧，張經(jīng)善，劉永年

(1.青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院，青海 西寧 810001；2.青海大學(xué)研究生院，青海 西寧 810016；3.青海省人民醫(yī)院，青海 西寧 810007；4.果洛州人民醫(yī)院，青海 果洛 814099)

不同海拔地區(qū)人群的皮質(zhì)類固醇激素水平及炎癥因子水平是否有所差異一直存在爭(zhēng)議，嚴(yán)重影響了相關(guān)臨床應(yīng)用學(xué)科的判斷和認(rèn)知。本課題就青海果洛和西寧地區(qū)健康人群及HAPC患者血液COR、ALD及相關(guān)炎癥因子水平開(kāi)展研究。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

選擇84名西寧地區(qū)(海拔2200m)和99名果洛地區(qū)(海拔3800m)的移居與世居居住者，分成2 200m世居組(10人)、2 200m移居組(74人)、3 800m世居組(77人)、3 800m移居組(22人)；選擇29名西寧移居人群中的HAPC患者組成HAPC病例組，74名西寧移居健康者組成對(duì)照組。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)

采集受試者晨起空腹靜脈血5 mL，置EDTA管抗凝、離心(4℃，3000r/min，10min)。血漿置-80 ℃冰箱保存。

用Elisa法檢測(cè)hs-CRP、IL-3、IL-6水平。檢測(cè)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)均大于0.99。 用CLIA法檢測(cè)COR、ALD水平。

1.2.2 主要試劑選擇

hs-CRP、IL-6 檢測(cè)試劑盒為武漢愛(ài)博泰克(ABclonal)公司產(chǎn)品，IL-3 檢測(cè)試劑盒為江蘇晶美生物科技公司產(chǎn)品。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，因數(shù)據(jù)不服從正態(tài)分布，采用中位數(shù)和四分位數(shù)間距法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行描述，采用非參數(shù)檢驗(yàn)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 海拔2200m、3800m地區(qū)世居與移居人群COR、ALD及炎性細(xì)胞因子水平的比較分析

對(duì)海拔2200m、3800m地區(qū)世居和移居人群的比較發(fā)現(xiàn)，除ALD和IL-6外，COR、hs-CRP、IL-3在3800m移居、2200m移居、3800m世居、2200m世居組中差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，表1)。對(duì)COR、hs-CRP、IL-3進(jìn)行組間兩兩比較發(fā)現(xiàn)，COR：3800m移居組明顯低于2200m移居組，其余各組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；IL-3：3800m移居組顯著小于2200m移居、3800m世居組。(表2)

表1 海拔2 200m、3 800m地區(qū)世居與移居人群COR、ALD及細(xì)胞因子水平檢測(cè)結(jié)果Table 1 COR，ALD and cytokines levels in the permanent resident group and immigrant groupat 2 200m and 3 800m altitudes

續(xù)表

表2 海拔2200m、3800m地區(qū)世居與移居人群COR、hs-CRP、IL-3水平檢測(cè)結(jié)果Table 2 COR，hs-CRP and IL-3 levels in the permanent resident group and immigrantgroup at 2200m and 3800m altitudes

2.2 病例組與對(duì)照組COR、ALD及炎性細(xì)胞因子的比較分析

將來(lái)自海拔2200m地區(qū)的29名HAPC患者與74名移居人群的健康對(duì)照者進(jìn)行比較，除ALD外，COR、IL-6、hs-CRP、IL-3均存在差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且均為病例組高于對(duì)照組。(表3)

表3 HAPC組與對(duì)照組人群COR、ALD及細(xì)胞因子水平檢測(cè)結(jié)果Table 3 COR，ALD and cytokines levels in HAPC group and control group

3 討論

高原環(huán)境對(duì)機(jī)體的影響因素包括氣壓、低氧、寒冷、干燥和紫外線等，在負(fù)性影響中影響最大的是低氧。人進(jìn)入高原后，受到低氧等諸多因素的影響，全身各系統(tǒng)從器官水平到分子水平，從功能到組織結(jié)構(gòu)，都發(fā)生了一系列改變。皮質(zhì)類固醇激素及炎癥因子水平改變是否與高原特殊環(huán)境相關(guān)需要研究，這對(duì)于深入了解高原低氧環(huán)境對(duì)機(jī)體的影響以及對(duì)急、慢性高原病的防治具有重要意義。本研究發(fā)現(xiàn)，西寧與果洛地區(qū)世居與移居人群之間的部分指標(biāo)變化差異不明顯，提示部分身體機(jī)能適應(yīng)或習(xí)服高原環(huán)境不需要更長(zhǎng)的時(shí)間，但COR、IL-3、CRP的含量存在顯著性差異，提示部分身體機(jī)能適應(yīng)或習(xí)服高原環(huán)境需要更長(zhǎng)的時(shí)間。

HAPC是一種由于人體長(zhǎng)期處于高原低氧環(huán)境而引發(fā)紅細(xì)胞過(guò)度增生的一種慢性高原病，是高海拔地區(qū)常見(jiàn)慢性高原病之一，其特點(diǎn)是機(jī)體的紅細(xì)胞過(guò)度增殖、血液黏稠度增大、血流阻力增加和紅細(xì)胞聚集。HAPC也是引發(fā)肺動(dòng)脈高壓等其他慢性高原病的基礎(chǔ)病因。我們比較HAPC病例組、對(duì)照組發(fā)現(xiàn)，病例組的IL-6水平明顯高于對(duì)照組，提示IL-6可能參與了HAPC 的發(fā)生。IL-6是至今發(fā)現(xiàn)的參與人體炎癥反應(yīng)最多的細(xì)胞因子，與機(jī)體炎癥反應(yīng)高度相關(guān)。學(xué)者基于人群和動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)都證實(shí)了高原低氧暴露條件下能夠使IL-6高表達(dá)。Hartmann等對(duì)登山志愿者研究發(fā)現(xiàn)，即使在非高原肺水腫患者中，高原低氧環(huán)境也會(huì)導(dǎo)致血漿中的IL-6升高，這提示在人體中存在比較明顯的炎癥反應(yīng)，體現(xiàn)了炎癥反應(yīng)是HAPE發(fā)病的原因之一[1]。Bailey等對(duì)49名受試者在平原地區(qū)和快速進(jìn)入高原低氧環(huán)境時(shí)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)HAPE患者IL-6水平顯著升高[2]。有研究顯示，在高原病患者支氣管肺泡灌洗液中發(fā)現(xiàn)，IL-1、IL-6、TNF-α、CRP等炎性標(biāo)志物較正常人有明顯上升的趨勢(shì)[3]。由于病例組與對(duì)照組IL-6水平存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示IL-6與慢性高原病的發(fā)生存在一定的聯(lián)系。

CRP為肝細(xì)胞分泌的急性非特異性反應(yīng)蛋白，在機(jī)體受到炎癥、創(chuàng)傷等損害時(shí)，其水平快速升高，是反映炎癥水平穩(wěn)定的生化指標(biāo)[4]。CRP可通過(guò)與受體的結(jié)合誘導(dǎo)致炎細(xì)胞因子，如IL-1β、IL-6、TNF-α的合成與分泌[5]。在本次實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組CRP水平與HAPC病例組水平有顯著性差異，它們之間是否存在聯(lián)系有待進(jìn)一步探究。

IL-3又稱多重集落刺激因子，主要由活化的T淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞產(chǎn)生。到目前為止，學(xué)者發(fā)現(xiàn)IL-3在炎癥反應(yīng)性相關(guān)疾病中也發(fā)揮了重要作用[6]。通過(guò)研究特異性單克隆抗體靶向IL-3受體發(fā)現(xiàn)，在急性髓系白血病患者中存在IL-3受體特異性α亞基高表達(dá)的現(xiàn)象[7，8]。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與臨床研究中發(fā)現(xiàn)，IL-3與其他炎癥因子(C反應(yīng)蛋白和降鈣素原)具有相關(guān)性[9]。在比較海拔3800m移居人群與其他三組人群時(shí)發(fā)現(xiàn)IL-3是存在差異的，移居人群較高，是否為偶發(fā)現(xiàn)象需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量去確認(rèn)。

COR是腎上腺在應(yīng)激反應(yīng)里產(chǎn)生的一種激素，COR受下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA)的負(fù)反饋調(diào)節(jié)，在嚴(yán)重缺氧的情況下，可以引起下丘腦促皮質(zhì)素的釋放，致COR分泌功能低下，使習(xí)服變慢并易致急、慢性高原病[10]。在本次實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)COR在病例組與對(duì)照組中的表達(dá)水平存在差異，病例組較高，但ALD無(wú)差異。本課題組在以往的研究中發(fā)現(xiàn)，COR與高原肺水腫的發(fā)生密切相關(guān)[11]，因此我們認(rèn)為，當(dāng)急性高原病發(fā)生時(shí)，由于應(yīng)激反應(yīng)所致，患者的COR水平會(huì)有明顯改變，而長(zhǎng)期生活在高海拔地區(qū)的人群及HAPC患者的應(yīng)激反應(yīng)不明顯，故ALD水平無(wú)顯著性變化。接下來(lái)我們還需開(kāi)展COR、ALD與急、慢性高原病相關(guān)性的研究。

綜上所述，果洛健康人群COR、IL-3水平低于西寧健康人群；HAPC人群COR、IL-3、IL-6、hs-CRP水平高于西寧健康人群。青海果洛、西寧地區(qū)健康人群及HAPC患者血液COR和IL-3、IL-6、hs-CRP水平存在差異。