延胡索配方顆粒多指標(biāo)成分的近紅外光譜快速檢測方法

周燕 張純 范曉良

[摘要]目的建立延胡索配方顆粒水分、醇溶性浸出物、延胡索乙素、去氫延胡索甲素多指標(biāo)的近紅外光譜快速檢測方法。方法以已知的延胡索配方顆粒水分、醇溶性浸出物、延胡索乙素、去氫延胡索甲素含量值為對照，運(yùn)用偏最小二乘法（PLS）選擇合適的光譜范圍及光譜預(yù)處理方法建立近紅外定量模型，并對驗證集樣品各指標(biāo)成分的含量進(jìn)行驗證。結(jié)果水分、醇溶性浸出物、延胡索乙素、去氫延胡索甲素預(yù)測值與實測值的平均相對偏差分別為1.18%、2.19%、3.14%、1.73%，預(yù)測相關(guān)系數(shù) R2分別為0.979、0.915、0.948、0.962，準(zhǔn)確度較高。結(jié)論研究建立的近紅外定量模型可應(yīng)用于延胡索配方顆粒中水分、醇溶性浸出物、延胡索乙素、去氫延胡索甲素含量4個指標(biāo)成分的快速檢測，并可為其他中藥配方顆粒的快速檢測提供參考。[關(guān)鍵詞]近紅外光譜;延胡索;配方顆粒;快速檢測

[中圖分類號] R286.0? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A?? [文章編號]2095-0616（2022）09-0079-04

A rapid determination method of multiple index components in rhizoma corydalis dispensing granules by near -infrared spectroscopy

ZHOU? Yan??? ZHANG? Chun??? FAN? Xiaoliang

1.Jiaxing Food， Drug and Product Quality Inspection and Testing Institute， Zhejiang， Jiaxing 314001， China;2.Jiaxing Hospital ofTraditional Chinese Medicine Affiliated to Zhejiang Chinese Medical University， Zhejiang， Jiaxing 314001， China

[Abstract] Objective To establish a rapid determination method of moisture， alcohol-soluble extract， tetrahydropalmatine and dehydrocorydaline in rhizoma corydalis dispensing granules by near-infrared （NIR） spectroscopy. Methods A quantitative NIR model was established by using appropriate spectral range and spectral pre-processing method selected with the partial least squares （PLS） method， taking the contents of known moisture， alcohol-soluble extract， tetrahydropalmatine and dehydrocorydaline in rhizoma corydalis dispensing granules as the reference. Results The relative mean deviations of the predicted and measured values of moisture， alcohol- soluble extract， tetrahydropalmatine and dehydrocorydaline were 1.18%， 2.19%， 3.14% and 1.73%， respectively， and the predicted correlation coefficients （R2） were 0.979， 0.915， 0.948 and 0.962， respectively， with high accuracy. Conclusion The established NIR quantitative model can be applied to the rapid determination of the contents of moisture， alcohol-soluble extract， tetrahydropalmatine and dehydrocorydaline in rhizoma corydalis dispensing granules， and can provide a reference for the rapid determination of other traditional Chinese medicine dispensing granules.

[Key words] Near-infrared spectroscopy; Rhizoma corydalis; Dispensing granules; Rapid determination

延胡索配方顆粒是以中藥飲片延胡索為原料，運(yùn)用現(xiàn)代制藥工藝，制備成供中醫(yī)臨床上可隨機(jī)組方、即沖即飲的顆粒劑型。醋延胡索配方顆粒國家藥品標(biāo)準(zhǔn)[1]中的檢測過程耗時耗力，無法滿足生產(chǎn)企業(yè)即時、快速分析的需要。

近紅外光譜技術(shù)是一種利用近紅外光譜區(qū)包含的有效信息，依靠計算機(jī)技術(shù)對物質(zhì)進(jìn)行快速定性或定量的分析技術(shù)，具有高效便捷、無破壞性、無污染、結(jié)果準(zhǔn)確的優(yōu)勢[2]，在藥物分析領(lǐng)域的應(yīng)用最早出現(xiàn)在20世紀(jì)60年代晚期[3]，在中國、美國、歐洲、日本藥典中均有收錄[4]。目前該技術(shù)已逐步應(yīng)用于中藥行業(yè)[5-6]，如品種的真?zhèn)舞b別[7-8]、不同產(chǎn)地藥材鑒別[9-10]、不同生產(chǎn)廠家鑒別[11]、炮制程度[12]、有效成分含量快速測定[13-15]等。

目前在中藥配方顆粒近紅外光譜快速檢測方面的研究不多。本研究建立延胡索配方顆粒多指標(biāo)成分的近紅外定量模型，為其質(zhì)量控制提供方法參考。

1儀器與試藥

1.1儀器

MATRIX-F 近紅外光譜儀（OPUS 5.0分析軟件，德國 Bruker 公司），光譜測樣裝置（北京晶品賽思科技有限公司），Waters E2695-2998高效液相色譜儀（美國 Waters 公司），XS-205DU 電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]。

1.2試藥

17批延胡索配方顆粒購自北京康仁堂藥業(yè)有限公司、廣東一方制藥有限公司、浙江惠松制藥有限公司、浙江景岳堂藥業(yè)有限公司、華潤三九醫(yī)藥股份有限公司、江陰天江藥業(yè)有限公司、浙江佐力藥業(yè)股份有限公司;延胡索乙素（批號：110726-201819）購于中國食品藥品檢定研究院;去氫延胡索甲素對照品（批號： AF200415-17， H P L C ≥97.5%）購于上海源葉生物科技有限公司。

2方法與結(jié)果

2.1延胡索配方顆粒4種指標(biāo)成分含量的測定

水分采用烘干法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則0832）測定;醇溶性浸出物采用熱浸法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則2201）測定;延胡索乙素、去氫延胡索甲素含量測定采用 HPLC 法， C18色譜柱，流動相乙腈-甲醇-0.1%磷酸溶液（含0.08%三乙胺）梯度洗脫，檢測波長280 nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量10μl。

2.2近紅外光譜的采集

取樣品均勻倒入光譜測樣裝置的顆粒劑附件內(nèi)，將光纖探頭插入，壓實，分別測定近紅外光譜。采集條件：以內(nèi)置背景為參照，掃描范圍4000～12000 cm-1，分辨率為8 cm-1，每批樣品重復(fù)測定6次，共得到102張原始光譜。求平均光譜（圖1）用于建模。

2.3模型方法和性能評價指標(biāo)

因樣本數(shù)目相對較少，采用內(nèi)部交叉驗證方法建立模型。采用偏最小二乘法（PLS），通過相關(guān)系數(shù)（R2）、交叉驗證均方差（RMSECV）來考察模型性能。相關(guān)系數(shù) R2趨近于1，殘差 RMSECV 越小，所建立模型評價性能越好。

2.44種指標(biāo)成分定量模型的建立

將所有平均光譜用于建模，應(yīng)用 Quant2模塊，選擇全部預(yù)處理方法進(jìn)行全譜段優(yōu)化，最大階數(shù)采用10。優(yōu)化結(jié)果根據(jù)殘差從小到大順序排列，選取殘差最小，線性回歸最好（R2趨近于1）的建模參數(shù)建立定量模型，建模參數(shù)見表1。預(yù)測值與實測值相關(guān)圖見圖2～5。

2.5近紅外定量模型的驗證

2.5.1水分定量模型的驗證使用表1所建水分定量模型，預(yù)測各批次樣品的水分含量，并與烘干法測定的實測值進(jìn)行比較，結(jié)果平均相對偏差為1.18%，平均預(yù)測回收率為101.20%，所建模型具有良好的預(yù)測能力。

2.5.2醇溶性浸出物定量模型的驗證使用表1所建醇溶性浸出物定量模型，預(yù)測各批次樣品的浸出物的含量，并與熱浸法測定的實測值進(jìn)行比較，結(jié)果平均相對偏差為2.19%，平均預(yù)測回收率為99.96%，所建模型具有良好的預(yù)測能力。

2.5.3延胡索乙素、去氫延胡索甲素定量模型的驗證使用表1所建延胡索乙素、去氫延胡索甲素定量模型，預(yù)測各批次樣品的延胡索乙素、去氫延胡索甲素的含量，并與 HPLC 法測定的實測值進(jìn)行比較。結(jié)果延胡索乙素平均相對偏差為3.14%，平均預(yù)測回收率為100.23%;去氫延胡索甲素平均相對偏差為1.73%，平均預(yù)測回收率為99.56%，所建模型具有良好的預(yù)測能力。

3結(jié)論

實驗結(jié)果表明運(yùn)用近紅外光譜技術(shù)建立的模型，可快速、準(zhǔn)確地測定延胡索配方顆粒中水分、醇溶性浸出物、延胡索乙素和去氫延胡索甲素含量。在實際生產(chǎn)過程中，只需掃描樣品的近紅外光譜，并將其代入所建立定量模型即可快速預(yù)測各組分的含量。該方法為延胡索配方顆粒多指標(biāo)成分快速檢測提供了準(zhǔn)確、可靠的檢測手段，大大縮短檢測周期，促進(jìn)產(chǎn)品質(zhì)量的實時監(jiān)測和生產(chǎn)效率的提高。

近紅外光譜技術(shù)也可應(yīng)用于其他中藥配方顆粒的質(zhì)量控制，實現(xiàn)企業(yè)生產(chǎn)過程中的在線檢測，提高中藥配方顆粒質(zhì)量的可控性。

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（收稿日期：2021-11-18）