周孝瓊，周華林，俞 暉，張秋紅，郭水靈，張海燕，王 華*

（1.龍巖學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，福建龍巖 364012；2.襄陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院農(nóng)學(xué)院，湖北襄陽(yáng) 441100）

百香果，又名巴西果、雞蛋果，系西番蓮科西番蓮屬多年生木質(zhì)藤本植物，因果實(shí)具有上百種水果的香氣而得名。百香果原產(chǎn)于巴西，現(xiàn)在我國(guó)福建、廣東、廣西、海南等熱帶地區(qū)廣泛種植。百香果在福建省龍巖市種植面積超過(guò)3 333 hm，形成了一定的商業(yè)規(guī)模，是重要的“致富果”。據(jù)報(bào)道，百香果的果實(shí)、果皮中含有黃酮苷類、多糖類和多種維生素等生物活性物質(zhì)，具有防癌抗衰、消炎抑菌、抗氧化等保健功能。除新鮮食用外，絕大部分百香果被加工成果汁飲料，產(chǎn)生了大量百香果果殼副產(chǎn)品。果殼水分含量高（約85%）且營(yíng)養(yǎng)豐富，但易發(fā)霉腐爛變質(zhì)，難于保存，果殼除部分用作粗纖維飼料外，絕大部分當(dāng)作廢物丟棄，造成環(huán)境污染。百香果果殼生物活性物質(zhì)的提取方法有酸提法、生物酶法、乙醇提取法和水提法，其中，水提法以水為溶劑提取百香果果殼中多糖、維生素C 等生物活性物質(zhì)，然后蒸發(fā)濃縮，操作簡(jiǎn)單，易于在生產(chǎn)實(shí)踐中推廣。本試驗(yàn)旨在研究百香果果殼水提液對(duì)肉兔生長(zhǎng)性能、屠宰性能、肉品質(zhì)及血清抗氧化和免疫指標(biāo)的影響，為百香果果殼在肉兔養(yǎng)殖中的開(kāi)發(fā)利用提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 百香果果殼水提液 百香果果殼水提液由本實(shí)驗(yàn)室自制。將新鮮潔凈的百香果果殼破碎后于60℃恒溫干燥箱烘干12 h，自然冷卻4 h，制作成風(fēng)干果殼（含水量10%）。準(zhǔn)確稱取50 g 風(fēng)干果殼，加入600 mL 蒸餾水，沸水煎煮2 h，4 層紗布過(guò)濾，再加入500 mL 蒸餾水，繼續(xù)沸水煎煮2 h 后紗布過(guò)濾，收集合并2 次濾液。濾液通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在（65±2）℃濃縮至50 mL，冷卻、4 500 r/min 離心15 min，收集上層液用蒸餾水定容至50 mL，于4℃冷藏備用。該水提液送檢于福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，其粗多糖、黃酮、鉀、維生素B、維生素C 和維生素E 等測(cè)定方法分別參照《出口植物源食品中粗多糖的測(cè)定》（SN/T 4260-2015）、《出口食品中總黃酮的測(cè)定》（SN/T 4592-2016）、《食品中鉀、鈉的測(cè)定—火焰原子吸收光譜法》（GB 5009.91-2017）、《食品中維生素B的測(cè)定》（GB 5009.85-2016）、《食品中抗壞血酸的測(cè)定》（GB 5009.86-2016）和《食品中維生素A、D、E 的測(cè)定》（GB 5009.82-2016），結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 百香果果殼水提液指標(biāo)及其含量

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 從龍巖市某肉兔養(yǎng)殖場(chǎng)購(gòu)得32 只38 日齡、體重（755±35）g 的健康公伊拉肉兔，隨機(jī)分為4組，每組8 只，單籠飼養(yǎng)。對(duì)照組兔飲用自來(lái)水，低、中、高劑量組為兔提供適量自來(lái)水，并在飲水中分別添加3、6、9 g/（只·d）水提液。每天觀察兔飲水情況，確保每天有少量余水，讓試驗(yàn)組每只兔充分飲水、攝入水提液。預(yù)試期5 d，正試期 45 d。預(yù)試期間每天按水提液設(shè)計(jì)劑量的20% 在飲水中逐漸增加，直到水提液添加量達(dá)到設(shè)計(jì)的添加量。日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表2。

表2 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在龍巖學(xué)院動(dòng)物房進(jìn)行，通風(fēng)光照良好。預(yù)試期間對(duì)兔進(jìn)行體檢和驅(qū)蟲(chóng)。保持兔籠、飼槽和飲水器清潔衛(wèi)生，每日早、晚各飼喂1 次，每日按照體重的7%進(jìn)行飼喂，每日傍晚清除飲水器中的少量殘水，加入自來(lái)水后再添加水提液并混勻。記錄每日采食量和飲水量，觀察兔健康狀況。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能 在正試期的第1 天和第45 天早晨，空腹稱取初始體重和結(jié)束體重，計(jì)算肉兔的總增重、平均日增重（ADG）。根據(jù)正試期的總采食量，計(jì)算平均日采食量（ADFI）。依據(jù)ADG 和ADFI 計(jì)算耗料增重比（F/G）。ADG、ADFI 和F/G 的計(jì)算參考王華等的方法。

1.4.2 屠宰性能 試驗(yàn)第45 天稱重，每組選5 只體重相近試驗(yàn)兔，禁食12 h，自由飲水，心臟采血，每只采集2 mL 血液裝入促凝管中，靜置析出血清后，10 000 r/min離心5 min，取上清分裝，-20℃保存。隨后采用頸靜脈放血處死試驗(yàn)兔，參照張南斌等的方法測(cè)定屠宰性能。

1.4.3 肉品質(zhì) 兔肉的滴水損失、蒸煮損失、熟肉率和剪切力等指標(biāo)測(cè)定參照劉浪等的方法。

1.4.4 血清抗氧化指標(biāo) 將1.4.2 中分離的血清自然解凍后，使用BioTek 生化分析儀測(cè)定血清中過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、總抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）等指標(biāo)，試劑盒為睿信生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.4.5 血清免疫指標(biāo) 將1.4.4 中解凍的血清，使用Rayto RT-6100 酶標(biāo)分析儀檢測(cè)血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、白細(xì)胞介素-2（IL-2）、白細(xì)胞介素-4（IL-4）、補(bǔ)體蛋白-3（C3）和補(bǔ)體蛋白-4（C4）等指標(biāo)，試劑盒為睿信生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)先采用Excel 進(jìn)行初步統(tǒng)計(jì)處理，然后應(yīng)用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析。對(duì)存在差異的項(xiàng)目，使用Duncan's 多重比較法對(duì)各處理進(jìn)行差異顯著性分析，<0.05 表示差異顯著，0.05表示差異不顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 百香果果殼水提液對(duì)肉兔生長(zhǎng)性能的影響 由表3可知，各組間的末重、總增重、ADG 和F/G 差異不顯著，結(jié)果表明，水提液不影響肉兔的生長(zhǎng)性能。

表3 百香果果殼水提液對(duì)肉兔生長(zhǎng)性能的影響

2.2 百香果果殼水提液對(duì)肉兔屠宰性能的影響 由表4可知，與對(duì)照組相比，9 g/（只·d）組的半凈膛重、全凈膛重、半凈膛屠宰率和全凈膛屠宰分別提高7.05%（<0.05）、10.05%（<0.05）、4.25%（<0.05）和7.20%（<0.05）；6 g/（只·d）組分別提高3.21%（0.05）、6.08%（<0.05）、1.12%（0.05）和3.90%（<0.05）；3 g/（只·d）組半凈膛重、半凈膛屠宰率和全凈膛屠宰率無(wú)顯著變化，全凈膛重提高5.10%（<0.05）。結(jié)果表明，水提液可以改善肉兔的屠宰性能。

表4 百香果果殼水提液對(duì)肉兔屠宰性能的影響

2.3 百香果果殼水提液對(duì)肉兔肉品質(zhì)的影響 由表5 可知，與對(duì)照組相比，9 g/（只·d）組的滴水損失和蒸煮損失分別降低40.61%（<0.05）和7.57%（<0.05）；6 g/（只·d）組蒸煮損失降低5.32%（<0.05）；3 g/（只·d）組無(wú)顯著變化（0.05）。各組間的熟肉率和剪切力差異不顯著。結(jié)果表明，水提液可以降低滴水損失和蒸煮損失。

表5 百香果果殼水提液對(duì)肉兔肉品質(zhì)的影響

2.4 百香果果殼水提液對(duì)肉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響 由表6 可知，與對(duì)照組相比，各處理組CAT 和T-AOC 值均提高（<0.05），9 g/（只·d）組GSH-Px 提高（<0.05），6 g/（只·d）組和9 g/（只·d）組SOD 提高（<0.05）、MDA 降低（<0.05）。9 g/（只·d）組CAT、GSH-Px、SOD 和T-AOC 值最高，MDA 值最低。CAT、GSH-Px、SOD 和T-AOC 隨水提液用量增加而提高，而MDA 則相反。結(jié)果表明，水提液可以降低肉兔的氧化應(yīng)激。

表6 百香果果殼水提液對(duì)肉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.5 百香果果殼水提液對(duì)肉兔血清免疫指標(biāo)的影響 由表7 可知，與對(duì)照組相比，各處理組血清IL-4、C4、IgG 和IgM 含量均增加（<0.05），6 g/（只·d）組和9 g/（只·d）組IL-2、C3 和IgA 含量增加（<0.05），各免疫指標(biāo)含量隨水提液用量增加而提高。結(jié)果表明，水提液可以提高肉兔的免疫力。

表7 百香果果殼水提液對(duì)肉兔血清免疫指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 百香果果殼水提液對(duì)肉兔生長(zhǎng)性能和屠宰性能的影響 生長(zhǎng)性能和屠宰性能是衡量肉用動(dòng)物生產(chǎn)性能和經(jīng)濟(jì)效益的重要指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，水提液未顯著影響肉兔生長(zhǎng)性能。目前尚未有關(guān)于百香果果殼或水提液影響動(dòng)物生產(chǎn)性能的報(bào)道。而另報(bào)道，百香果籽可提高肉兔對(duì)飼料干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪的消化率，日糧中添加88.7 g/kg 百香果籽能改善肉兔的生長(zhǎng)性能，這與本研究的發(fā)現(xiàn)不一致，可能與百香果不同部位的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì)差異有關(guān)。屠宰率高說(shuō)明產(chǎn)肉性能好，反之，產(chǎn)肉性能較差，其中半凈膛率和全凈膛率是肉兔屠宰性能的兩項(xiàng)重要指標(biāo)。本研究結(jié)果表明，半凈膛率和全凈膛率隨著水提液用量的增加而增加，其變化趨勢(shì)與百香果果殼水提液用量變化一致，高劑量組能獲得更高的半凈膛率和全凈膛率。Sena 等研究也表明，公羊日糧中添加百香果皮能提高羊的屠宰率。水提液改善屠宰性能可能與其富含的多糖、維生素C、維生素E 等具有抗病、改善生長(zhǎng)有關(guān)。有關(guān)研究表明，百香果果殼多糖對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、毛霉、黑根霉和黃曲霉具有良好抑菌效果，維生素C 可增強(qiáng)機(jī)體抗病力和防御能力，提高抗應(yīng)激能力，維生素E 能提高糖和蛋白質(zhì)的利用率，這些生物活性物質(zhì)可能降低兔的應(yīng)激反應(yīng)，改善腸道健康狀態(tài)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝轉(zhuǎn)化，有利于改善肉兔的生長(zhǎng)。水提液中其他生物活性物質(zhì)也有可能改善屠宰性能，由于條件限制尚未檢測(cè)，有待進(jìn)一步研究。

3.2 百香果果殼水提液對(duì)肉兔肉品質(zhì)的影響 肉品質(zhì)的好壞影響消費(fèi)者對(duì)其喜好程度，對(duì)其評(píng)價(jià)常采用肌肉的嫩度、熟肉率、蒸煮損失和滴水損失等指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，水提液能降低兔肉滴水損失和蒸煮損失，說(shuō)明其能增加肌肉的系水力，這可能與水提液富含的維生素E 和維生素C 發(fā)揮了抗氧化作用有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，肌肉發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化會(huì)嚴(yán)重影響肉品質(zhì)，表現(xiàn)為肉中水分滲出，系水力下降，攝入維生素E 能降低肉仔雞肌肉的滴水損失和蒸煮損失，飲水中添加維生素C 能顯著降低應(yīng)激肉雞肌肉的滴水損失。另一研究報(bào)道，苜蓿多糖可顯著降低肉仔雞肌肉的滴水損失和蒸煮損失率。綜上，水提液中富含的多糖、維生素C 和維生素E 可能是降低兔肉滴水損失和蒸煮損失的重要因素。

3.3 百香果果殼水提液對(duì)肉兔血清抗氧化指標(biāo)的影響生物體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)包括酶防御系統(tǒng)（CAT、GSHPx 和SOD）和非酶防御系統(tǒng)（GSH、維生素E 和維生素C），其共同作用消除過(guò)量自由基，防止氧化損傷，從而保護(hù)機(jī)體健康。本研究發(fā)現(xiàn)，水提液可降低肉兔氧化應(yīng)激。另一研究發(fā)現(xiàn)，百香果果殼水提物可以有效清除 DPPH·和·OH，且隨水提物用量的增加其抗氧化活性不斷增強(qiáng)，水提液抗氧化作用可能與水提液富含的多糖、黃酮、維生素C 和維生素E 等生物活性物質(zhì)相關(guān)。林增學(xué)發(fā)現(xiàn)，飼喂百香果果皮多糖能增加小鼠肝臟中T-SOD 和GSH-Px 活力，降低肝臟MDA含量。滕浩等發(fā)現(xiàn)，百香果皮多糖對(duì) 4 種自由基（DPPH·、羥基自由基、超氧陰離子自由基和ABTS +自由基）具有不同程度的清除作用，且與提取物濃度呈一定量效關(guān)系。張會(huì)香等發(fā)現(xiàn)，0.44 mg/mL 百香果黃酮對(duì)羥基自由基、DPPH·和超氧陰離子自由基等清除率分別為58.66%、93.81% 和100%。在另一研究中，0.285 mg/mL 百香果果皮黃酮提取物對(duì)羥自由基和超氧負(fù)離子的清除率分別達(dá)到55%和58%。另外，維生素C 和維生素E 也是很好的抗氧化劑，能清除體內(nèi)自由基。張玲等還發(fā)現(xiàn)，百香果果皮多酚提取物能有效清除羥基自由基和超氧陰離子自由基。以上研究顯示，百香果或果皮中的活性物質(zhì)能消除氧化自由基。本研究顯示水提液能提高血清抗氧化指標(biāo)。綜上，百香果果殼水提液具有較強(qiáng)的體內(nèi)抗氧化活性，是一種理想的天然抗氧化劑，為百香果果殼的綜合開(kāi)發(fā)利用提供一定科學(xué)依據(jù)。

3.4 百香果果殼水提液對(duì)肉兔血清免疫指標(biāo)的影響 血清免疫球蛋白、補(bǔ)體和細(xì)胞因子參與體液免疫和細(xì)胞免疫，在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮了重要作用。本研究發(fā)現(xiàn)，水提液可以提高肉兔血清免疫球蛋白、補(bǔ)體和白細(xì)胞介素含量，改善機(jī)體免疫力，可能與其富含的多糖、維生素C 等生物活性物質(zhì)的免疫調(diào)節(jié)作用相關(guān)。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，百香果皮多糖組分PEC-1 能劑量依賴性促進(jìn)巨噬細(xì)胞釋放NO，促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌IL-1、TNF-和IL-6，以及促 進(jìn)iNOS、IL-6、IL-1和TNF-的mRNA 在RAW264.7 細(xì)胞中的表達(dá)。Silva 等研究發(fā)現(xiàn)，使用百香果多糖飼喂小鼠可增加淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞數(shù)量，具有免疫增強(qiáng)作用。Carmona-Hernandez 等報(bào)道，百香果提取物對(duì)炎癥誘導(dǎo)的Caco-2 細(xì)胞屏障功能障礙的保護(hù)作用，有助于改善腸道健康。另外，Duarte發(fā)現(xiàn)，百香果果汁對(duì)超重志愿者具有免疫調(diào)節(jié)作用，其中百香果酚類物質(zhì)能提高病原體和腫瘤細(xì)胞的吞噬率，緊急攝入百香果果汁有助于提高免疫力。這些研究表明百香果及其提取物具有增強(qiáng)免疫功能，但尚未有對(duì)本研究中相關(guān)免疫指標(biāo)影響的文獻(xiàn)報(bào)道，水提液增加肉兔免疫功能的機(jī)理有待研究。綜上，水提液可為基于百香果果殼開(kāi)發(fā)免疫增強(qiáng)劑提供新思路。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，通過(guò)飲水途徑補(bǔ)飼百香果果殼水提液能提高肉兔全凈膛率和半凈膛率，降低兔肉滴水損失和蒸煮損失，并能提高肉兔的抗氧化力和免疫力，但不影響生長(zhǎng)性能；水提液用量增加能改善屠宰性能、肉品質(zhì)、抗氧化和免疫力等指標(biāo)的表現(xiàn)趨勢(shì)與水提液用量變化一致，以添加9 g/（只·d）效果較好，更高添加量有待進(jìn)一步研究。