王冰洋，馬 瑩，湯冰潔，黃庭發(fā)，周 強(qiáng)*，張古忍

(1. 中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，有害生物控制與資源利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510275；2. 中山大學(xué)農(nóng)學(xué)院，廣州 510006)

稻虱纓小蜂AnagrusnilaparvataePangetWang廣泛分布于我國(guó)各水稻主產(chǎn)區(qū)，是飛虱的重要卵寄生性天敵，對(duì)遷飛性害蟲(chóng)褐飛虱NilaparvatalugensSt?l和白背飛虱SogatellafurciferaHorváth卵的寄生率可達(dá)10%～80%(毛潤(rùn)乾等，2002；林慶勝等，2009)。稻虱纓小蜂對(duì)生態(tài)因子如溫度(祝增榮等，1991；劉淑平等，2012；王冰洋等，2020)、營(yíng)養(yǎng)(鄭許松等，2003；汪庚偉等，2014)、水稻品種(婁永根和程家安，1996)、化學(xué)因子(李婷等，2018；Zhuetal.，2018)等的響應(yīng)方面的研究取得不少成果。目前，利用稻虱纓小蜂防控稻飛虱的工作主要是保護(hù)田間稻虱纓小蜂種群，利用天敵田間種群的自然控害能力。如，種植顯花植物和誘蟲(chóng)植物增加寄生蜂種群密度，調(diào)整殺蟲(chóng)劑使用時(shí)間和種類(lèi)提高天敵的存活率(朱平陽(yáng)等，2015；Zhuetal., 2020)。另外，以植物揮發(fā)物為中心的“植物-稻飛虱-稻虱纓小蜂”三級(jí)營(yíng)養(yǎng)關(guān)系也有較深入的研究，驗(yàn)證了多種水稻和田埂植物揮發(fā)物對(duì)稻虱纓小蜂的吸引或趨避作用，展現(xiàn)出巨大的生防應(yīng)用潛力(汪鵬和婁永根，2013；Maoetal.，2018；Huetal.，2020；Lietal.，2020)。

保護(hù)和利用田間稻虱纓小蜂種群能夠?yàn)楫?dāng)前稻飛虱治理工作提供重要的技術(shù)手段，但稻飛虱種群的爆發(fā)具有突然性和毀滅性，而田間稻虱纓小蜂的高峰期明顯滯后于稻飛虱的大發(fā)生時(shí)期，以致于在稻飛虱爆發(fā)時(shí)，寄生蜂無(wú)法對(duì)害蟲(chóng)進(jìn)行有效控制，從而造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在以生態(tài)系統(tǒng)控制理論為基礎(chǔ)的害蟲(chóng)治理策略中，當(dāng)生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定和平衡需要系統(tǒng)外力介入時(shí)，適當(dāng)?shù)慕槿胪饬删S持生態(tài)系統(tǒng)的平衡和穩(wěn)定。因此，規(guī)模化繁育稻虱纓小蜂，在稻飛虱種群發(fā)展的早期或爆發(fā)前釋放一定數(shù)量的稻虱纓小蜂，不僅可以加強(qiáng)其在野外種群的基數(shù)，還可以有效抑制稻飛虱的數(shù)量，達(dá)到持續(xù)控害的目的。

目前寄生蜂的主要擴(kuò)繁方式有3種，分別為替代寄主擴(kuò)繁、人工卵擴(kuò)繁和自然寄主擴(kuò)繁。替代寄主擴(kuò)繁指利用替代自然宿主的宿主進(jìn)行繁育，該法通常飼養(yǎng)成本低、繁殖過(guò)程簡(jiǎn)潔、易于規(guī)模繁殖。常見(jiàn)的有柞蠶卵擴(kuò)繁松毛蟲(chóng)赤眼蜂TrichogrammadendrolimiMatsumura，蓖麻蠶卵繁育擬澳洲赤眼蜂TrichogrammaconfunsumViggiani，米蛾卵擴(kuò)繁稻螟赤眼蜂TrichogrammajaponicumAshmead和玉米螟赤眼蜂TrichogrammaostriniaePangetChen(Zangetal.，2021)等。人工卵擴(kuò)繁指利用人工配制的卵液制成卵卡進(jìn)行寄生蜂繁育，與替代寄主擴(kuò)繁相比，使用更加靈活方便，目前已初步應(yīng)用人工卵繁殖松毛蟲(chóng)赤眼蜂、螟黃赤眼蜂TrichogrammachilonisIshii和平腹小蜂Anastatussp.(劉志誠(chéng)等，1986；李麗娟等，2008)等。自然寄主擴(kuò)繁指利用天敵的自然寄主進(jìn)行繁育，該法具有能保持天敵的生活力和對(duì)原寄主的寄生成功率的特點(diǎn)，目前利用自然寄主進(jìn)行繁育的寄生蜂有麗蚜小蜂EncarsiaformosaGahan、煙蚜繭蜂AphidiusgifuensisAshmead、白蠟窄吉丁柄腹繭蜂SpathiusagriliYang和椰心葉甲嚙小蜂TetrastichusbrontispaeFerrière等(Wangetal.，2008；Pan and Liu，2014；Liuetal.，2015；尹園園等，2018)。

用替代寄主或人工卵擴(kuò)繁寄生蜂的優(yōu)勢(shì)在于經(jīng)濟(jì)方便和可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量天敵。但寄生蜂的產(chǎn)卵選擇受其寄生期經(jīng)歷的影響，代寄主卵或人工卵繁育的寄生蜂，其防控效果常不如自然寄主擴(kuò)繁的寄生蜂(宋靜等，2015)。所以對(duì)食性專(zhuān)一的寄生蜂種類(lèi)，常應(yīng)用自然寄主進(jìn)行培養(yǎng)(任順祥和陳學(xué)新，2012)。為滿(mǎn)足水稻害蟲(chóng)防控的實(shí)際需求，本研究選擇褐飛虱卵作為稻虱纓小蜂的繁育寄主，為該蜂的大規(guī)模繁育摸索和積累經(jīng)驗(yàn)。

稻虱纓小蜂繁殖力受寄主卵齡、光照強(qiáng)度、接蜂雌雄比和溫度等生態(tài)因子的影響。寄主卵齡是影響寄主適合度的重要因子，寄生蜂在寄生前會(huì)對(duì)寄主的適合度進(jìn)行檢驗(yàn)，排除營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)不足以支撐子代稻虱纓小蜂發(fā)育成熟的寄主(Vinson and Iwantsch, 1980)。光照強(qiáng)度則會(huì)影響稻虱纓小蜂的飛行能力和交配行為，不適宜的光照條件會(huì)降低纓小蜂的最終產(chǎn)卵量(Liaoetal., 2017)。稻虱纓小蜂既可兩性生殖，又可孤雌生殖，雌蜂交配與否會(huì)影響子代性比，合適的接蜂雌雄比能夠使生產(chǎn)得到的雌性寄生蜂數(shù)量最大化。溫度影響稻虱纓小蜂的飛行能力、求偶和交配行為、壽命以及生殖力(Nguyenetal., 2013；劉莎等，2018；王冰洋等，2020)。針對(duì)上述影響稻虱纓小蜂繁殖力的關(guān)鍵因子，本研究采用不同溫度、光照強(qiáng)度、寄主卵齡和接蜂雌雄比等參數(shù)對(duì)稻虱纓小蜂規(guī)模繁育技術(shù)進(jìn)行研究，探索適合稻虱纓小蜂規(guī)模繁育的最優(yōu)化條件，研究結(jié)果可為今后大規(guī)模工業(yè)化天敵生產(chǎn)提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx(chóng)

褐飛虱蟲(chóng)源于2016年在廣東省華南農(nóng)業(yè)大學(xué)苗圃農(nóng)場(chǎng)采集，用水稻水培苗長(zhǎng)期室內(nèi)飼養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)液的配制參考Hoagland法(毛達(dá)如，1994)，飼養(yǎng)條件參照尤珂珂等(2018)。

稻虱纓小蜂蟲(chóng)源于2019年在廣東省華南農(nóng)業(yè)大學(xué)苗圃農(nóng)場(chǎng)用帶有新鮮褐飛虱卵的水稻苗誘集，經(jīng)純化和鑒定后，以水稻幼苗和褐飛虱混合蟲(chóng)態(tài)進(jìn)行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件參照王冰洋等(2020)。

1.2 帶卵苗生產(chǎn)條件優(yōu)化

1.2.1試驗(yàn)因子和水平

標(biāo)準(zhǔn)L8(27)正交設(shè)計(jì)表如表1所示。帶卵苗生產(chǎn)條件選擇水稻品種、水稻苗齡、溫度與光照強(qiáng)度4個(gè)因子2個(gè)水平(表2)，具體試驗(yàn)過(guò)程按照表1進(jìn)行。試驗(yàn)實(shí)施的順序按照隨機(jī)化的原則，依照隨機(jī)化處理后的正交表實(shí)施試驗(yàn)，記錄所得數(shù)據(jù)。

表1 L8(27)正交設(shè)計(jì)表Table 1 L8(27) orthogonal design table

表2 試驗(yàn)因素及水平Table 2 Experimental factors and experimental levels

1.2.2稻苗培育

育苗盆(長(zhǎng)20 cm×寬14 cm×高5 cm)中放入25 g水稻種子，浸泡洗凈，除去秕谷和雜物，用營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)，取第10天和第15天的水稻苗，根據(jù)種子的發(fā)芽率，平均每盆有600～1 000根可供褐飛虱產(chǎn)卵的水稻苗。

1.2.3褐飛虱產(chǎn)卵

將一盆長(zhǎng)勢(shì)良好的水稻苗轉(zhuǎn)移至養(yǎng)蟲(chóng)籠(長(zhǎng)25 cm×寬25 cm×高25 cm，100目尼龍網(wǎng))內(nèi)，接入新羽化2～3 d的雌、雄褐飛虱各50頭交配、產(chǎn)卵，置于人工氣候箱(GXZ-380D型，浙江寧波江南儀器廠)培養(yǎng)，根據(jù)表2設(shè)定溫度和光照，3 d后移除成蟲(chóng)。

1.2.4若蟲(chóng)計(jì)數(shù)

褐飛虱結(jié)束產(chǎn)卵10 d、13 d、16 d后，統(tǒng)計(jì)孵化出的若蟲(chóng)數(shù)，將3次計(jì)數(shù)結(jié)果的總和粗略定義為褐飛虱產(chǎn)卵量。

1.3 纓小蜂生產(chǎn)條件優(yōu)化

1.3.1試驗(yàn)因子和水平

根據(jù)1.2試驗(yàn)結(jié)果選擇水稻品種進(jìn)行此試驗(yàn)。纓小蜂生產(chǎn)條件選擇接蜂雌雄比、寄主卵齡、溫度與光照強(qiáng)度4個(gè)因子2個(gè)水平(表3)，具體試驗(yàn)過(guò)程按照表1進(jìn)行。試驗(yàn)實(shí)施的順序按照隨機(jī)化的原則，依照隨機(jī)化處理后的正交表實(shí)施試驗(yàn)，記錄所得數(shù)據(jù)。

1.3.2帶卵苗生產(chǎn)

利用1.2.1方法得到的優(yōu)化條件生產(chǎn)帶卵苗。

1.3.3纓小蜂產(chǎn)卵

移除褐飛虱成蟲(chóng)，將帶褐飛虱卵的苗轉(zhuǎn)移至養(yǎng)蜂籠(規(guī)格同1.2.3養(yǎng)蟲(chóng)籠)內(nèi)，用透明玻璃管(Φ1 cm×7 cm)收集50頭新羽化(<8 h)的稻虱纓小蜂雌蜂以及40頭雄蜂，接入養(yǎng)蜂籠，寄生蜂寄生時(shí)間為2 d，置于人工氣候箱培養(yǎng)，根據(jù)表3設(shè)定溫度和光照。移除飛虱當(dāng)天接蜂，寄主卵齡記為1 d；移除飛虱3 d后接蜂，寄主卵齡記為4 d。

表3 試驗(yàn)因素及水平Table 3 Experimental factors and experimental levels

1.3.4成蜂計(jì)數(shù)

出蜂后，連續(xù)3 d分別記錄羽化的雌、雄成蜂數(shù)，總和即為稻虱纓小蜂產(chǎn)卵量。

1.4 數(shù)據(jù)處理方法

利用極差法分析正交試驗(yàn)數(shù)據(jù)。通過(guò)原始數(shù)據(jù)計(jì)算K值和R值，K=因素所在列中相同數(shù)字所對(duì)應(yīng)的指標(biāo)值之和，R=max{K1，K2，K3}-min{K1，K2，K3}。極差直觀分析法中正交試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析表中R越大，表示因素越重要，K越大，表示產(chǎn)量越高。

2 結(jié)果與分析

2.1 帶卵苗生產(chǎn)條件的優(yōu)化

帶褐飛虱卵的苗是纓小蜂的寄主來(lái)源，褐飛虱卵的數(shù)量決定了最終生產(chǎn)纓小蜂的數(shù)量。根據(jù)正交試驗(yàn)的極差分析方法，比較極值R，發(fā)現(xiàn)影響褐飛虱繁殖力的因子作用效果由高到低分別為溫度、水稻品種、水稻苗齡和光照強(qiáng)度，水稻品種和苗齡之間存在相互作用；比較K值大小，可知生產(chǎn)帶卵苗時(shí)以25℃強(qiáng)光照的條件下用10日齡的HHZ植株為佳，此條件下，每盆帶卵苗上的褐飛虱卵數(shù)約為2 000頭(表4)。

表4 水稻品種、水稻苗齡、溫度和光照強(qiáng)度對(duì)褐飛虱產(chǎn)卵的影響Table 4 Effects of rice variety, rice seedling age, temperature and strength of illumination on the oviposition of Nilaparvata lugens

2.2 稻虱纓小蜂生產(chǎn)條件的優(yōu)化

根據(jù)正交試驗(yàn)的極差分析方法，比較極值R，發(fā)現(xiàn)影響稻虱纓小蜂繁殖力的因子作用效果由高到低分別為寄主卵齡、光照強(qiáng)度、接蜂雌雄比和溫度，接蜂雌雄比和寄主卵齡之間存在一定的相互作用；比較K值大小，可知擴(kuò)繁纓小蜂時(shí)采用30℃強(qiáng)光照的條件下用1日齡的褐飛虱卵接入雌雄比5 ∶3的纓小蜂為佳(表5)。

表5 接蜂雌雄比、寄主卵齡、溫度和光照強(qiáng)度對(duì)纓小蜂產(chǎn)卵的影響Table 5 Effects of inoculation female-male proportion, host egg age, temperature and strength of illumination on the oviposition of Anagrus nilaparvatae

根據(jù)正交試驗(yàn)獲得的最佳的因子和水平組合，采用30℃強(qiáng)光照的條件下用1日齡的褐飛虱卵接入雌雄比5 ∶3的纓小蜂進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，重復(fù)3次。結(jié)果分別為447、484和513頭蜂，平均產(chǎn)蜂量為481.30±19.10頭，雌性占比約0.75±0.02，預(yù)計(jì)在此條件下，1盆帶蜂苗至少可以生產(chǎn)450頭蜂，其中，雌蜂340頭，雄蜂110頭。

3 結(jié)論與討論

田間褐飛虱與稻虱纓小蜂種群的發(fā)生存在遲滯效應(yīng)，若能在稻飛虱遷入的第一代或發(fā)生早期及時(shí)補(bǔ)充天敵，將有助于田間天敵種群的建立，增強(qiáng)對(duì)飛虱種群的控制，盡可能減少害蟲(chóng)爆發(fā)造成的損失。本實(shí)驗(yàn)室曾用米蛾CorcyracephalonicaStainton、麥蛾SitotrogacerealellaOlivier、斜紋夜蛾SpodopteralituraFabricius和粉紋夜蛾TrichoplusianiHübner等昆蟲(chóng)卵進(jìn)行稻虱纓小蜂繁育的代寄主試驗(yàn)，均無(wú)法成功寄生。故本文初步研究了利用自然寄主褐飛虱規(guī)?；庇臼t小蜂的適宜條件與技術(shù)方法，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用稻虱纓小蜂的生防潛力提供一定的信息。

稻虱纓小蜂自然寄主褐飛虱卵的生產(chǎn)是規(guī)?；庇那疤岷突A(chǔ)。溫度顯著影響褐飛虱的繁殖，31℃時(shí)單頭雌性褐飛虱的產(chǎn)卵量分別為25℃的85.89%，28℃的71.53%(石保坤等，2014)。本研究選擇25℃作為帶褐飛虱卵苗的生產(chǎn)條件，產(chǎn)卵量和產(chǎn)卵高峰都比較適合規(guī)模化生產(chǎn)。與15日齡水稻苗相比，褐飛虱在10日齡的稻苗上產(chǎn)卵量更大，是帶卵苗生產(chǎn)的較優(yōu)選擇，除此以外，10日齡幼苗比大齡幼苗的生長(zhǎng)周期要短，使用更方便，成本更低。30℃下稻虱纓小蜂的壽命較25℃更短，產(chǎn)卵期短而集中，子代的羽化時(shí)間會(huì)更統(tǒng)一，便于收集。寄主卵齡代表寄主的營(yíng)養(yǎng)程度，越新鮮的卵內(nèi)含的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)越多，越適合于稻虱纓小蜂的寄生。一般雌性稻虱纓小蜂一生僅交尾1次，而雄性稻虱纓小蜂能交配3次以上，甚至能達(dá)到7次(徐國(guó)民等，1987)，若接入的雄蜂數(shù)量不夠，極有可能生產(chǎn)出大批量的雄蜂，無(wú)法及時(shí)用于控害。

根據(jù)上述正交試驗(yàn)獲得的帶卵苗和稻虱纓小蜂生產(chǎn)的最佳條件，本研究總結(jié)了規(guī)?；a(chǎn)稻虱纓小蜂的四室繁蜂法。四室分為水稻清潔苗培育室、褐飛虱接種與培養(yǎng)室、稻虱纓小蜂接種室和稻虱纓小蜂培養(yǎng)與收集室(圖1)，具體方法如下。

圖1 四室繁蜂法飼養(yǎng)稻虱纓小蜂的流程Fig.1 Process of mass rearing method of Anagrus nilaparvatae based on four culture rooms

水稻清潔苗培養(yǎng)室：用于生產(chǎn)供褐飛虱產(chǎn)卵的水稻苗。將感溫型常規(guī)稻品種黃華占種子用清水洗凈，除去秕谷、雜物，35℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)清水浸泡24 h，再用清水漂洗多次，瀝干水分后蓋濕毛巾繼續(xù)35℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h。選用長(zhǎng)方形的白色塑料盆作為育苗盆(長(zhǎng)20 cm×寬14 cm×高5 cm)，每盆播種約1 300粒露白種子(干質(zhì)量約為25 g)，裝盆原則是均勻一致，松緊適中，播種后每12 h添加營(yíng)養(yǎng)液，用量以基本沒(méi)過(guò)種子為宜，此時(shí)水稻幼苗的根系之間結(jié)合較松散，要避免將水稻苗沖散，第4天便可正常澆水，10 d后水稻苗生長(zhǎng)至8～9 cm的高度時(shí)即可進(jìn)行下一步褐飛虱接種工作。每批次培養(yǎng)水稻清潔苗972盆，其中810盆用于稻虱纓小蜂生產(chǎn)，另外162盆用于回收的褐飛虱若蟲(chóng)培養(yǎng)。水稻清潔苗培育室的環(huán)境條件控制在溫度28±3℃，光周期16 L ∶8 D，RH 80%±10%。

褐飛虱接種與培養(yǎng)室：用于生產(chǎn)帶褐飛虱卵的水稻苗。此房間面積為18 m2，放置81個(gè)養(yǎng)蟲(chóng)籠(長(zhǎng)55 cm×寬55 cm×高55 cm，100目尼龍網(wǎng))，將清潔苗移入養(yǎng)蟲(chóng)籠，一個(gè)養(yǎng)蟲(chóng)籠內(nèi)放置10盆清潔苗，每籠接種500頭褐飛虱雌蟲(chóng)和500頭雄蟲(chóng)，標(biāo)記日期。接蟲(chóng)3 d后，倒置帶有褐飛虱卵的水稻苗將褐飛虱成蟲(chóng)抖至清潔苗，檢查帶卵苗內(nèi)是否有褐飛虱成蟲(chóng)殘余，若有，則利用吸蟲(chóng)器或玻璃指形管(Φ1 cm×7 cm)轉(zhuǎn)移至養(yǎng)蟲(chóng)籠，每批褐飛虱成蟲(chóng)可生產(chǎn)2批帶有褐飛虱卵的水稻苗。褐飛虱數(shù)量不夠時(shí)，可用稻虱纓小蜂培養(yǎng)與收集室回收的若蟲(chóng)補(bǔ)充。褐飛虱接種與培養(yǎng)室的環(huán)境條件控制在溫度25±3℃，光周期16 L ∶8 D，RH 80%±10%。規(guī)?；a(chǎn)前需要準(zhǔn)備褐飛虱雌、雄成蟲(chóng)各4萬(wàn)頭(按照2.1試驗(yàn)結(jié)果估算，每盆水稻可飼養(yǎng)出褐飛虱雌、雄成蟲(chóng)各500頭，準(zhǔn)備81盆褐飛虱即可)，四室法正常運(yùn)行后回收的飛虱若蟲(chóng)足夠下一批次的生產(chǎn)。如果長(zhǎng)期繁育，用于產(chǎn)卵的褐飛虱需補(bǔ)充來(lái)自田間的種群進(jìn)行復(fù)壯。

稻虱纓小蜂接種室：用于生產(chǎn)帶纓小蜂卵的水稻苗。此房間共有81個(gè)養(yǎng)蜂籠(長(zhǎng)55 cm×寬55 cm×高55 cm，100目尼龍網(wǎng))，將帶有褐飛虱卵的水稻苗移入養(yǎng)蜂籠內(nèi)，每個(gè)養(yǎng)蜂籠內(nèi)放置10盆帶褐飛虱卵的苗，每籠接種500頭稻虱纓小蜂雌蜂和300頭雄蜂，標(biāo)記日期，每24 h添加營(yíng)養(yǎng)液，一般2～3 d后纓小蜂全部死亡，移入纓小蜂培養(yǎng)與收集室。稻虱纓小蜂接種與培養(yǎng)室的環(huán)境條件控制在溫度30±1℃，光周期14 L ∶10 D，RH 80%±10%。規(guī)模生產(chǎn)前需要準(zhǔn)備4萬(wàn)頭雌蜂和2.5萬(wàn)頭雄蜂，四室法正常運(yùn)行后，每次保留的12籠蜂足夠下一批次的生產(chǎn)。如果長(zhǎng)期繁育，用于產(chǎn)卵的稻虱纓小蜂需補(bǔ)充來(lái)自田間的種群進(jìn)行復(fù)壯。

稻虱纓小蜂培養(yǎng)與收集室：用于培養(yǎng)與收集稻虱纓小蜂，可根據(jù)放蜂計(jì)劃調(diào)整纓小蜂培養(yǎng)與收集室的溫度，溫度范圍以20～30℃為宜。這里提供兩種收集與釋放稻虱纓小蜂的方案，第一種為成蜂收集法，成蜂被收集至管內(nèi)再進(jìn)行統(tǒng)一釋放，以30℃為例，接蜂第8～9天后大部分纓小蜂發(fā)育至隱成蜂狀態(tài)，用黑色遮光布將養(yǎng)蜂籠罩住，上方留4個(gè)圓孔，由于稻虱纓小蜂趨光性很強(qiáng)，可利用透明玻璃管收集成蜂。每盆帶有寄生蜂卵的水稻苗可以收集至少450頭寄生蜂，有340頭雌蜂，一個(gè)養(yǎng)蜂籠可以收集3 400頭雌蜂，出蜂期將光周期由14 L ∶10 D調(diào)整為24 L ∶0 D，每4 h更換新管。收蜂結(jié)束后，需要保留部分纓小蜂用于下一批生產(chǎn)，保留和釋放的纓小蜂比例為4 ∶23，即保留12籠稻虱纓小蜂，另外69籠收集成蜂后可用于田間釋放。此法主要用于為四室繁蜂法提供穩(wěn)定和充足的蜂源，一般不建議用于田間釋放。水稻苗中未被寄生的褐飛虱卵陸續(xù)孵化，收蜂前將若蟲(chóng)轉(zhuǎn)移至褐飛虱接種與培養(yǎng)室，供下一批生產(chǎn)使用。每盆收集完成蜂的水稻苗能夠生產(chǎn)大留有約250頭褐飛虱雌成蟲(chóng)，故每?jī)膳枞粝x(chóng)集中移至一盆清潔苗內(nèi)培養(yǎng)，褐飛虱若蟲(chóng)發(fā)育至4齡時(shí)更換一次清潔苗，避免因營(yíng)養(yǎng)不良發(fā)育為繁殖力較低的長(zhǎng)翅型，羽化為成蟲(chóng)后可用來(lái)繼續(xù)繁殖褐飛虱或者補(bǔ)充帶卵苗生產(chǎn)過(guò)程中褐飛虱的損耗。第二種為蜂蛹收集法，在出蜂2～3 d前將水稻苗上的褐飛虱若蟲(chóng)回收再利用(后續(xù)操作參見(jiàn)成蜂收集法中對(duì)褐飛虱若蟲(chóng)的處理方式)，再將帶有纓小蜂卵的水稻苗置于4℃冰箱保存，接蜂4 d內(nèi)的稻苗保存時(shí)間最長(zhǎng)可達(dá)60 d左右，故可以根據(jù)害蟲(chóng)防控的需要決定儲(chǔ)存時(shí)間的長(zhǎng)度。使用時(shí)把冷藏后的帶蜂苗置于田間，纓小蜂可自行羽化。

采用上述飼養(yǎng)流程和方法進(jìn)行稻虱纓小蜂大規(guī)模飼養(yǎng)，一個(gè)18 m2的稻虱纓小蜂培養(yǎng)與收集室(長(zhǎng)6 m×寬3 m)(圖2)內(nèi)可放置三排置物架，置物架有三層，一個(gè)房間總共能放置(8+9+10)×3=81個(gè)養(yǎng)蜂籠，一個(gè)養(yǎng)蜂籠可放置10盆苗，每批次可以生產(chǎn)450×81×10=364 500頭稻虱纓小蜂。如果在每一個(gè)養(yǎng)蜂籠中增加兩個(gè)層架，每籠可以放置帶卵苗16盒，每批次可以生產(chǎn)450×81×16=583 200頭稻虱纓小蜂。若增加養(yǎng)蟲(chóng)籠的隔板，每個(gè)籠子放置帶卵苗的數(shù)量可以增加，生產(chǎn)寄生蜂的能力可以進(jìn)一步提高。

圖2 規(guī)模飼養(yǎng)稻虱纓小蜂的房間規(guī)劃圖Fig.2 Layout of mass rearing of Anagrus nilaparvatae 注：A，平面圖; B，三層置物架示意圖。Note：A, Planar graph; B, Sketch map of third floor shelf.

根據(jù)本研究建立的稻虱纓小蜂四室繁蜂法，纓小蜂培養(yǎng)與收集室在18 m2的規(guī)模下，每批次可以生產(chǎn)約58萬(wàn)頭纓小蜂，生產(chǎn)開(kāi)始后，可回收充足的褐飛虱若蟲(chóng)進(jìn)行循環(huán)使用，加上回收的成蜂，可以保證持續(xù)生產(chǎn)。生產(chǎn)活動(dòng)剛啟動(dòng)時(shí)較難一次性投入上文提及的4～6萬(wàn)頭寄生蜂，可先提前準(zhǔn)備兩籠成蜂，小規(guī)模擴(kuò)繁一批后，就能達(dá)到生產(chǎn)初始的需求，出蜂后每批次保留12籠寄生蜂作為蟲(chóng)源，便能進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)。因此，如果進(jìn)行大規(guī)模的持續(xù)生產(chǎn)和釋放，能夠及時(shí)補(bǔ)充田間稻虱纓小蜂種群的數(shù)量，達(dá)到控制稻飛虱早期遷入種群密度的目的。本研究?jī)H涉及到稻虱纓小蜂規(guī)?；a(chǎn)中的部分條件，關(guān)鍵因子的數(shù)量和水平仍需要進(jìn)一步增加；初步規(guī)劃了飼養(yǎng)稻虱纓小蜂的基本條件與流程，其中還有很多技術(shù)問(wèn)題和商品屬性問(wèn)題需要完善，尤其是儲(chǔ)存、包裝和田間應(yīng)用技術(shù)需要進(jìn)行更深入的研究。