方 仁，安振宇，堯金燕，龍 興，周雙云，張 繼，唐文忠，黃偉雄

(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所/農(nóng)業(yè)部南寧南亞熱帶果樹科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，南寧，530007)

鳳梨釋迦又稱蜜釋迦，為番荔枝科(Annonaceae)番荔枝屬(Annona)多年生半落葉喬木果樹，適合在熱帶及亞熱帶地區(qū)推廣種植[1-2]。因其早結(jié)豐產(chǎn)，栽培適應(yīng)性廣，果品優(yōu)，營(yíng)養(yǎng)成分豐富，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，近年來，我國(guó)華南地區(qū)的鳳梨釋迦種植面積得到迅速擴(kuò)增，僅廣西種植面積就已突破2 600 hm2，還有繼續(xù)擴(kuò)大的趨勢(shì)。早在20多年前，種植者就看好鳳梨釋迦產(chǎn)業(yè)的發(fā)展前景，相繼引入“吉夫納”等品種種植推廣。當(dāng)時(shí)番荔枝良種良法欠缺，種苗砧木普遍以普通番荔枝為主，雖然普通番荔枝砧木與鳳梨釋迦接穗表現(xiàn)嫁接親和性高、早花早結(jié)等特性，但嫁接種苗存在田間患病率高[3]、幼樹凍害嚴(yán)重[4-5]、冬季果品質(zhì)差等現(xiàn)象，嚴(yán)重限制產(chǎn)業(yè)進(jìn)一步發(fā)展。由此可見，砧木對(duì)于鳳梨釋迦的生產(chǎn)顯得尤為關(guān)鍵[6]。

全球番荔枝屬種質(zhì)資源較為豐富，研究團(tuán)隊(duì)通過多年的資源收集、保存與抗性鑒定，從中發(fā)掘出毛葉番荔枝、牛心番荔枝和山刺番荔枝等抗性優(yōu)良品系，這些品系與普通番荔枝相比，在田間能夠表現(xiàn)出生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、根系發(fā)達(dá)、抗寒性強(qiáng)、耐根腐病等優(yōu)點(diǎn)。為合理利用現(xiàn)有優(yōu)良砧木資源，探討番荔枝嫁接砧穗間的愈合情況及作用機(jī)制，本試驗(yàn)以牛心番荔枝等3種砧木與鳳梨釋迦開展嫁接，比較嫁接口解剖結(jié)構(gòu)特征、幼苗生長(zhǎng)特性及其生理特性等，以期掌握供試砧穗的嫁接愈合能力與速率，為廣西地區(qū)鳳梨釋迦優(yōu)良砧木選育與豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

牛心番荔枝AnnonareticulataL.、毛葉番荔枝A.cherimoliaM.和普通番荔枝A.squamosaL.，接穗為當(dāng)前廣西主推品種“吉夫納”鳳梨釋迦A.atemoyaH.。

1.2 方法

1.2.1 嫁接成活率及新梢生長(zhǎng)量測(cè)定 2019年3月，采用芽接法將“吉夫納”芽體嫁接至生長(zhǎng)發(fā)育基本一致的1年生供試番荔枝砧木上，嫁接高度距地面20 cm，每種砧木嫁接50株，重復(fù)3次；嫁接后150 d，統(tǒng)計(jì)各嫁接組合的成活率；從各組合中隨機(jī)抽取嫁接成活的植株6株，分別測(cè)量與統(tǒng)計(jì)接穗新梢葉片數(shù)、生長(zhǎng)長(zhǎng)度和粗度(距嫁接口2 cm處)，采用單株區(qū)組。

1.2.2 可溶性蛋白及可溶性糖含量測(cè)定 嫁接后50、150和300 d，分別選取各砧木嫁接苗接穗上的成熟功能葉片測(cè)定可溶性蛋白和可溶性糖含量，每處理重復(fù)3次?？扇苄缘鞍缀坎捎每捡R斯亮藍(lán)比色法，可溶性糖含量采用蒽酮比色法測(cè)定。

1.2.3 嫁接口解剖結(jié)構(gòu)觀察 嫁接后50、150和300 d，分別剪取不同嫁接組合接口，每個(gè)處理選取3個(gè)。新鮮組織固定于FAA液24 h以上，經(jīng)軟化脫水，浸蠟包埋，石蠟切片機(jī)上切片，片厚4～10 μm；依次將切片脫蠟至水，1%番紅染液染色1～2 h，固綠染液染色2 min，脫水封片，鏡檢與拍照，觀察嫁接口的愈合情況。

1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 采用Microsoft Excel 2007和SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，不同處理顯著性差異采用鄧肯氏新復(fù)極差法進(jìn)行比較(p<0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)嫁接成活率及接穗新梢生長(zhǎng)的影響

由表1可知，“吉夫納”鳳梨釋迦與供試砧木嫁接成活率差異不顯著，嫁接成活率均達(dá)到80.00%以上，嫁接成活率從高到低依次為普通番荔枝砧木>牛心番荔枝砧木>毛葉番荔枝砧木。砧木對(duì)“吉夫納”鳳梨釋迦的新梢生長(zhǎng)有一定的影響，嫁接后150 d，不同砧木嫁接的枝梢葉片數(shù)差異不顯著，毛葉番荔枝砧木的葉片數(shù)最多，普通番荔枝砧木的葉片數(shù)最少；不同砧木嫁接的接穗枝梢粗度與長(zhǎng)度存在差異，其中牛心番荔枝和毛葉番荔枝砧木的接穗枝梢粗度和長(zhǎng)度均顯著高于普通番荔枝砧木，牛心番荔枝砧木嫁接的枝梢粗度與長(zhǎng)度最高，分別為6.48 cm和88.52 cm。而引起“吉夫納”鳳梨釋迦接穗枝梢生長(zhǎng)差異的原因可能與供試砧木生長(zhǎng)勢(shì)有關(guān)。

2.2 對(duì)接穗葉片營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的影響

植株葉片中可溶性糖和可溶性蛋白等指標(biāo)含量與嫁接親和性有關(guān)，可作為植株砧穗嫁接親和性早期鑒定的指標(biāo)[7]。由表1可知，在嫁接愈合過程中，不同砧穗組合的葉片可溶性蛋白和可溶性糖含量變化趨勢(shì)接近，總體呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。嫁接后50 d，毛葉番荔枝砧木嫁接的葉片可溶性蛋白和可溶性糖含量均顯著高于其他處理，分別為4.55%和4.76%，而牛心番荔枝與普通番荔枝砧木嫁接的葉片可溶性蛋白和可溶性糖含量均無顯著性差異。嫁接后150 d，各處理的葉片可溶性蛋白和可溶性糖含量無顯著性差異，這可能在一定程度上說明嫁接150 d后的砧穗愈合程度已開始趨于穩(wěn)定。

表1 3種番荔枝砧木嫁接“吉夫納”鳳梨釋迦的成活率、接穗生長(zhǎng)、葉片可溶性蛋白與可溶性糖含量比較

2.3 砧木嫁接口解剖結(jié)構(gòu)

植物嫁接口的解剖結(jié)構(gòu)可以直觀地看出砧穗間的嫁接愈合程度，進(jìn)一步反映出接穗與不同砧木的嫁接親和性。從圖1可知，各砧木嫁接處理短時(shí)間內(nèi)的愈合情況存在差異，隨著嫁接時(shí)間延長(zhǎng)，接口愈合程度逐漸趨于牢固。嫁接后50 d，3種砧木與“吉夫納”鳳梨釋迦嫁接口處均已形成愈傷組織，其中與毛葉番荔枝的接口愈合程度相對(duì)較好，砧穗間韌皮部開始融合，且已有少量輸導(dǎo)組織形成，砧穗結(jié)構(gòu)的相似性較高；而與牛心番荔枝及普通番荔枝的接口處還存在明顯的分離層，嫁接口尚未完全愈合，石蠟切片時(shí)砧穗容易裂開。嫁接后150 d，砧穗接口的韌皮部融合處逐漸變小，韌皮部輸導(dǎo)組織已呈現(xiàn)連接，木質(zhì)部與新生部位韌皮部緊密連接；其中與毛葉番荔枝嫁接的愈合情況要優(yōu)于牛心番荔枝和普通番荔枝，其砧穗間木質(zhì)部已完全融合，木質(zhì)部已發(fā)現(xiàn)大量輸導(dǎo)組織連接。嫁接后300 d，嫁接口完全愈合，砧穗間輸導(dǎo)組織已連接通暢，雖然牛心番荔枝和普通番荔枝嫁接的砧穗連接部位尚存在少量染色較深的死細(xì)胞，但它們接口的愈合程度已很高。

注：毛葉、牛心、普通分別表示毛葉番荔枝、牛心番荔枝、普通番荔枝。

3 結(jié)論與討論

木本果樹砧穗間的親和性是嫁接成活最基本的條件，可以從嫁接成活率、生長(zhǎng)發(fā)育、嫁接口解剖結(jié)構(gòu)及植株生理等指標(biāo)來直接反映；如果能夠綜合各項(xiàng)指標(biāo)，則可對(duì)砧穗嫁接親和性給予更客觀地評(píng)價(jià)[8]。本試驗(yàn)中，“吉夫納”鳳梨釋迦與3種供試砧木在春季的嫁接成活率均能達(dá)到80.00%以上，說明這3種砧木與接穗均具備較好的嫁接親和性；牛心番荔枝與毛葉番荔枝為砧木的接穗新梢生長(zhǎng)粗度和長(zhǎng)度均顯著高于普通番荔枝處理；這與王曉玥等[9]對(duì)不同砧木的葡萄樹體生長(zhǎng)研究基本一致，嫁接體的發(fā)育與砧木生長(zhǎng)勢(shì)有很大關(guān)系?？扇苄蕴呛涂扇苄缘鞍缀孔兓瘎t與嫁接愈合過程的組織細(xì)胞學(xué)特征密切相關(guān)[10-12]，也可作為嫁接砧穗間親和性的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。本試驗(yàn)中，各砧穗組合的可溶性蛋白和可溶性糖含量變化趨勢(shì)總體一致，呈先升高后降低的變化趨勢(shì)；這與馮金玲等[13]在油茶芽苗上的研究結(jié)果較為一致，嫁接組合間的差異可能與砧穗嫁接親和性及其愈合能力不同相關(guān)。另外，嫁接解剖結(jié)構(gòu)也可從一定角度反映嫁接砧穗間的親和性，其嫁接愈合時(shí)間與植物種類及品種有較大關(guān)系[14-15]。本試驗(yàn)中，嫁接后50 d，嫁接口均初步形成愈傷組織，但接口尚未完全愈合，石蠟切片時(shí)砧穗容易裂開；嫁接后150 d，砧穗接口的韌皮部融合處逐漸變小，韌皮部輸導(dǎo)組織呈現(xiàn)連接，木質(zhì)部與新生部位韌皮部緊密連接；嫁接后300 d，嫁接口完全達(dá)到愈合，砧穗間輸導(dǎo)組織連接通暢；從砧穗的解剖結(jié)構(gòu)可以看出，毛葉番荔枝為砧木的嫁接愈合速度要快于牛心番荔枝和普通番荔枝處理。

鳳梨釋迦生產(chǎn)上，除了患病造成植株死亡，風(fēng)害引起嫁接口松動(dòng)而造成植株后續(xù)生長(zhǎng)衰弱、死亡的現(xiàn)象也較為普遍。當(dāng)前國(guó)內(nèi)鳳梨釋迦生產(chǎn)一直存在大量補(bǔ)苗的情況，導(dǎo)致生產(chǎn)總成本提高，并且植株種植時(shí)間不一致會(huì)加大田間管理難度，這些問題在很大程度上制約了鳳梨釋迦產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。因此，篩選適合鳳梨釋迦優(yōu)良砧木的前提下，熟悉與掌握砧穗間的愈合程度即能避免植株移栽后的諸多不利因素。趙登超等[16]研究發(fā)現(xiàn)，不同砧穗嫁接口的愈合時(shí)間存在一定差異，嫁接組合體的類型決定了愈合的能力和速度。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，供試砧木與鳳梨釋迦均有較好的嫁接親和性，但是它們愈合時(shí)間存在差異，毛葉番荔枝為砧木的愈合時(shí)間短于牛心番荔枝和普通番荔枝，嫁接150 d后完全愈合，而牛心番荔枝和普通番荔枝為砧木的完全愈合時(shí)間需要300 d；且牛心番荔枝和毛葉番荔枝為砧木的接穗新梢生長(zhǎng)量最大。因此，鳳梨釋迦在苗期移栽時(shí)，需根據(jù)種苗砧木選用或嫁接時(shí)間等因素開展必要的田間防護(hù)工作，生產(chǎn)上一般建議種植嫁接后150 d或嫁接后300 d的嫁接苗，嫁接未滿300 d的種苗在移栽時(shí)應(yīng)加強(qiáng)防風(fēng)措施處理。