◆作者：朱子昕 楊 博 杜紅方 王 敏 郭玉光

◆單位：1.廣東溢多利生物科技股份有限公司；2.華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院

飼用抗生素的使用促使肉雞養(yǎng)殖模式的升級。但抗生素的濫用造成食品安全和生態(tài)安全的隱患越來越受到社會的關(guān)注，為此2020 年國家實施全面禁用飼用抗生素政策。而禁抗后頻繁出現(xiàn)的雞群發(fā)病率提高，生長性能下降問題亟待解決。尋找緩解飼用抗生素禁用后帶來的一系列問題的方案成為整個行業(yè)關(guān)注的焦點。

博落回散屬于國家二類新中獸藥，其主要的功能成分為血根堿和白屈菜紅堿。研究表明，博落回散的主要功能成分（血根堿）通過抑制IkB 磷酸化和泛素化，阻斷NF-kB 炎癥通路，降低TNF-α和 NO 水平，抑制炎癥介質(zhì)的表達，進而達到抗炎的效果（Niu X 等，2012）；白屈菜紅堿通過調(diào)控促凋亡蛋白和抗凋亡蛋白的mRNA 表達水平，誘導(dǎo)凋亡，同樣具有抗炎的效果。據(jù)報道，博落回散對金黃色葡萄球菌和草分支桿菌具有明顯的抑菌作用（王朝元等，2015）；采食含有博落回散的日糧能夠顯著提高黃羽肉雞盲腸食糜中厚壁菌門細菌和梭菌XIVa 數(shù)量，降低盲腸大腸桿菌數(shù)量（柴毛毛，2020）。此外，博落回散對仔豬、肉雞均具有明顯的促生長效果（Boroojeni FG 等，2020；謝堃等，2016）。目前少見不同劑量的博落回散替代抗生素對白羽肉雞的影響研究。

本試驗旨在通過對比研究不同劑量的博落回散替代抗生素對白羽肉雞生長性能、腸道評分、營養(yǎng)物質(zhì)消化率三方面的影響，為禁抗后博落回散在白羽肉雞飼料中應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗材料

試驗用那西肽、金霉素均購自山東勝利生物工程有限公司；博落回散取自湖南美可達生物資源股份有限公司，商品名美佑壯（血根堿含量1.5%）。

1.2 試驗設(shè)計及試驗日糧

選用健壯、均勻1 日齡羅斯308 肉仔雞2000 羽，隨機分為5個處理組，每個處理8 個重復(fù)，每個重復(fù)50 羽。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧；抗生素組在基礎(chǔ)飼糧中前期添加那西肽1kg/t+金霉素50g/t，后期添加那西肽1kg/t（休藥期3 天）；試驗1 組在基礎(chǔ)飼糧中添加博落回散20g/t；試驗2組在基礎(chǔ)飼糧中添加博落回散40g/t；試驗3 組在基礎(chǔ)飼糧中添加博落回散80g/t。試驗分為前后兩個階段：前期（1-21 日齡）、后期（22-42 日齡）。每個試驗階段開始和結(jié)束后均以重復(fù)為單位稱量試驗雞只的空腹體重。

基礎(chǔ)飼糧配方見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)，%）

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗在廣東溢多利生物科技股份有限公司產(chǎn)學(xué)研基地進行。試驗全期采用3 層籠養(yǎng)，大生產(chǎn)方式管理，自由采食和飲水。進雛前1 周，將雞舍和舍內(nèi)養(yǎng)殖設(shè)備進行嚴格清洗和消毒。采用紅外燈控溫，進雛后前三天溫度控制在 34~36℃，4-7 日齡舍溫控制在31~33℃；第 2 周舍溫29.5℃，第3 周開始脫溫，舍內(nèi)相對濕度控制在60%~65%。光照制度為23h 光照和1h 黑暗。按常規(guī)免疫程序進行免疫接種。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能

試驗期間，每日觀察試驗雞只健康狀況，統(tǒng)計死亡率。分別在試驗開始、22 和43 日齡上午8:00 對提前禁食（禁食12 h，僅供飲水）的肉雞以重復(fù)為單位空腹稱重，并稱量剩余料重。

計算各個階段的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、耗料增重比（FCR）和死亡率，計算公式如下：

平均日增重（ADG）= 增重 /（試驗天數(shù)×試驗雞只數(shù)）；

平均日采食量（ADFI）= 耗料量/（試驗天數(shù)×試驗雞只數(shù)）；

耗料增重比（F/G）=耗料量/ 增重。

1.4.2 腸道評分

試驗第43d，于每個重復(fù)組選取1 只體重接近、健康的肉雞進行解剖取腸道樣本，進行腸道評分，具體評分方法如下：

取腸道觀察病變，根據(jù)腸道損傷的嚴重程度計分，計分標(biāo)準(zhǔn)為 0，1，2，3，4，5，6 七級。0= 無肉眼損傷；1=腸黏膜充血；2=小的局灶性壞死或潰瘍（1-5 個灶）；3= 局灶性壞死或潰瘍（6-15 個灶）；4= 局灶性壞死或潰瘍（16 個以上灶）；5=壞死斑（2-3 cm 長）；6=彌漫性壞死（典型）。病變分數(shù)2 及以上被列為（陽性）壞死性腸炎。

1.4.3 營養(yǎng)物質(zhì)消化率測定

試驗第43d，于每個重復(fù)組選取2 只體重接近、健康的肉雞置于肉雞代謝籠內(nèi)，進行全收糞法代謝試驗。預(yù)飼3d，正試4d，正試期第一天為禁食排空期，禁食期間正常飲水，第二天每只雞自由采食相應(yīng)的試驗日糧24h，自由飲水，記錄采食量，并收集糞便，連續(xù)收集3d。將每個重復(fù)試驗雞的糞便剔除羽毛、雜質(zhì)，按重量的10%加入濃度為10%的H2SO4，混勻后立即在65℃烘箱干燥至恒重，置室內(nèi)回潮24h后稱重，作為風(fēng)干重；粉碎過40目篩備用。

測定飼料與糞中水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、總鈣、總磷的含量以及總能。按以下公式計算消化率：

飼料養(yǎng)分表觀消化率（%）= l00×（（食入飼料干物質(zhì)重量×飼料中某養(yǎng)分含量%）- （糞干物質(zhì)重量×糞中某養(yǎng)分含量%））/ （食入飼料干物質(zhì)重量×飼料中某養(yǎng)分含量%）

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)經(jīng)過Excel 處理后，利用SPSS 統(tǒng)計軟件進行方差分析，差異顯著時采用Duncan氏方法進行多重比較，試驗結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 博落回散對試驗肉雞前期生長性能的影響

如表 2 所示，1-21 日齡階段，與對照組相比，抗生素組和試驗2 組末重分別提高5.91%（P<0.05） 和 4.17%（P<0.05）；日增重分別提高6.23%（P<0.05）和4.36%（P<0.05）?？股亟M耗料增重比顯著低于對照組（P<0.05）和試驗 1 組（P<0.05）。其他各組間生長性能差異不顯著。

表2 博落回散對試驗肉雞前期（1-21d）生長性能的影響

2.2 博落回散對試驗肉雞后期生長性能的影響

如表3 所示，試驗后期階段試驗組間的末重、日增重、日采食量、耗料增重比、成活率均無顯著差異。與對照組相比，抗生素組的生長性能最佳，試驗2 組僅次于抗生素組，抗生素組和試驗2 組末重分別提高2.34%和1.81%，耗料增重比分別降低1.26%和0.63%，均差異不顯著（P>0.05）。與試驗 2 組相比，試驗3 組末重、日增重分別降低1.46%、2.07%，耗料增重比提高1.27%，均差異不顯著（P>0.05）。

表3 博落回散對試驗肉雞后期（22-42d）生長性能的影響

2.3 博落回散對肉雞腸道評分的影響

如表4 所示，與對照組相比，抗生素組和試驗1 組十二指腸評分分別降低 46.15%（P<0.05）和 61.54%（P<0.05）。抗生素組和試驗1-3 組空腸評分均顯著下降，其中試驗2 組的空腸評分最低，較對照組的降低51.46%（P<0.05）。試驗 2 組回腸評分顯著低于對照組和試驗3組，較對照組的降低94.40%（P<0.05），其它各組間回腸評分差異不顯著。與對照組相比，抗生素組、試驗1 組和試驗2 組腸道平均分分別下降46.58%、50.68%和45.66%，均差異顯著（P<0.05）。

表4 博落回散對肉雞腸道評分的影響

2.4 博落回散對肉雞營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

如表5 所示，與對照組相比，試驗1 組和試驗2 組粗蛋白消化率分別提高7.38%（P<0.05）和6.85%（P<0.05）；試驗 1 組表觀能值消化率提高7.54%（P<0.05）。與抗生素組相比，試驗各組營養(yǎng)物質(zhì)消化率沒有顯著差異。

表5 博落回散對肉雞營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響（%）

3 討論

3.1 博落回散替代抗生素對肉雞生長性能的影響

本研究結(jié)果顯示，添加博落回散能夠有效提高肉雞末重和日增重，降低耗料增重比。過往研究表明，日糧中添加50g/t 博落回散（血根堿含量為1.5%）可以顯著降低白羽肉雞全期耗料增重比，并且在1-21 日齡期間具有提高日增重的趨勢，與本研究結(jié)果一致（周文等，2018）。博落回散的促生長效果可能與其提高肉雞采食量，降低炎癥能量損耗的功能有一定的關(guān)系。據(jù)報道，博落回散中的血根堿是一種芳香族氨基酸脫羧酶抑制劑（Jaroslav 等，1996），能夠有效提高飼料中色氨酸的利用率，進而通過5- 羥色胺的合成途徑來影響攝食。此外，博落回散具有明顯的抗炎效果（Niu X 等，2012；王朝元，2015）。研究表明，脂多糖誘導(dǎo)肉雞炎癥后，會大幅提高機體免疫能量損耗和免疫蛋白的合成，加快機體分解代謝，最終導(dǎo)致降低肉雞22.5%的生長性能（Jiang W，2014），而通過降低炎癥水平能夠有效緩解生長性能的下降（Moraes ML，2018）。

本研究中，不同劑量的博落回散促生長效果存在明顯差異，其中40g/t 劑量對肉雞生長性能的改善效果最佳；而更高劑量的博落回散并沒有進一步提高生長性能，反而在數(shù)值上有所降低。同類研究中，李長虹等（2016）研究發(fā)現(xiàn)，添加 60g/t 博落回散（血根堿含量為1.5%）對白羽肉鴨的生長性能的改善效果低于30g/t 劑量組，與本研究結(jié)果一致。上述結(jié)果可能與博落回散作為一種中獸藥，存在使用劑量限制，過高劑量使用具有一定的負面影響。

3.2 博落回散替代抗生素對肉雞腸道評分的影響

本研究結(jié)果顯示，添加博落回散能夠有效下調(diào)腸道病變數(shù)量和嚴重程度，其作用效果與抗生素沒有顯著差異。過往研究報告，博落回散中的血根堿能夠削弱DSS 誘導(dǎo)的COX-2 的表達，降低結(jié)腸組織中的髓過氧化物酶活性和紅細胞中還原型谷胱甘肽的水平，下調(diào)腸道氧化損傷，進而有效緩解腸黏膜的損傷（Vrublova E 等，2010）。此外有報道證實，博落回散能夠改善免疫系統(tǒng)，減少肉雞消化道的病原菌（Yakhkeshi S 等，2011），提高肉雞空腸食糜的乳酸桿菌數(shù), 抑制和減少回腸大腸桿菌和沙門菌的數(shù)量（Bavarsadi M，2021）。博落回散改善腸道健康狀況可能與血根堿下調(diào)腸道氧化損傷，改善腸道菌群結(jié)構(gòu)有關(guān)。而同類研究中，李朝霞等（2021）報道，添加30g/t 博落回散（血根堿含量為1.5%）對肉雞腸道評分沒有顯著影響，與本研究結(jié)果不一致。分析原因，可能與觀測位點不同有關(guān)。李朝霞等觀測目標(biāo)為腸道黏膜的完整性，取樣為小段腸道，而本研究中觀測整個腸道表面的病變情況。

3.3 博落回散替代抗生素對肉雞營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

本研究結(jié)果顯示，博落回散能夠顯著提高肉雞粗蛋白和總能消化率。研究證實，博落回通過介導(dǎo)腸組織黏膜相關(guān)信號通路，能夠促進腸上皮細胞的增殖和分化，提高腸道絨毛表面積（Kraitavin W，2015）；此外，博落回散的主要活性成分（血根堿）能夠與芳香族氨基酸脫羧酶上的巰基結(jié)合，致使酶失活，減少芳香族氨基酸的降解，提高飼料中芳香族氨基酸的有效含量。研究證實，添加血根堿后會增加門靜脈必需氨基酸和總氨基酸凈吸收量（賀喜，2015）。同類研究中，何夏陽等（2010）報道斷奶仔豬日糧中添加 0.5 mg/kg 血根堿，能夠明顯提高粗蛋白、干物質(zhì)和能量表觀消化率，與本文研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

在本試驗條件下，添加博落回散能夠有效下調(diào)肉雞腸道病變數(shù)量和嚴重程度，提高表觀能值和粗蛋白消化率，改善肉雞生長性能，其中40g/t 劑量效果最佳。

參考文獻：（略）