印度梨形孢對(duì)高丹草生長(zhǎng)及Cd吸收與積累的影響

先露露，董智，李紅麗，竇曉慧，劉超，劉冰倩，賈豐源

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院/泰山森林生態(tài)系統(tǒng)定位研究站，山東 泰安 271018）

據(jù)2014 年生態(tài)環(huán)境部發(fā)表的土壤污染狀況調(diào)查公報(bào)，全國(guó)土壤環(huán)境狀況不容樂(lè)觀，耕地、林地、草地和未利用土地土壤點(diǎn)位超標(biāo)率分別達(dá)到19.4%、10.0%、10.4%和11.4%，其中無(wú)機(jī)污染物中鎘（Cd）超標(biāo)率最高，達(dá)到7.0%。重金屬Cd 具有隱蔽性強(qiáng)、生物毒性高、毒性持久、不可逆活性強(qiáng)等特點(diǎn)。Cd 不僅會(huì)對(duì)植物造成毒害作用，且極易通過(guò)食物鏈和富集作用進(jìn)入人體，危害人體健康。

相關(guān)研究表明，低濃度Cd 對(duì)植物的生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用，但高濃度Cd 會(huì)對(duì)植物產(chǎn)生毒害，使得植物表現(xiàn)出生長(zhǎng)緩慢、植株矮小、葉片發(fā)黃卷曲、植物根系生長(zhǎng)受阻等現(xiàn)象，且在生理方面表現(xiàn)出光合作用受阻、抗氧化系統(tǒng)被破壞、保護(hù)酶活性受抑制等危害。印度梨形孢（）是于印度西北部塔爾沙漠中發(fā)現(xiàn)的一種植物根系內(nèi)生真菌，具有促進(jìn)植物地上部和根系的生長(zhǎng)、增強(qiáng)養(yǎng)分吸收、提高宿主抗病性、增強(qiáng)植物對(duì)生物和非生物脅迫的抗性和耐受性等優(yōu)點(diǎn)。印度梨形孢在形態(tài)與功能上均與傳統(tǒng)的叢枝菌根真菌極為相似，不同之處在于，印度梨形孢可以在人工培養(yǎng)基上進(jìn)行離體培養(yǎng)，而叢枝菌根真菌只能寄生于活體植物的根部。目前已有大量研究表明印度梨形孢通過(guò)強(qiáng)化植物對(duì)重金屬的轉(zhuǎn)運(yùn)、富集及根系穩(wěn)定化過(guò)程來(lái)降低土壤重金屬污染程度，并通過(guò)促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用、提高植物體內(nèi)的抗氧化水平、調(diào)控抗逆性相關(guān)基因的表達(dá)、根系排泄調(diào)控和改善根系微生物生態(tài)環(huán)境等方式提升寄主植物對(duì)重金屬的抗逆性。

高丹草（）具有生長(zhǎng)速度快、根系發(fā)達(dá)、地上生物量大的特點(diǎn)，高丹草不僅具有耐貧瘠、耐鹽堿等優(yōu)良抗性，還被用于Cd污染土壤的修復(fù)研究，是在環(huán)境修復(fù)和資源開(kāi)發(fā)利用方面具有廣闊應(yīng)用前景的生態(tài)修復(fù)植物。但對(duì)高丹草和菌根共生效應(yīng)的研究還較少，印度梨形孢對(duì)高丹草的作用機(jī)制尚不可知。

基于此，本研究擬通過(guò)水培實(shí)驗(yàn)，探究印度梨形孢在不同Cd濃度（0、5、10、30、50、100 mg·L）下對(duì)高丹草幼苗生長(zhǎng)和吸收積累重金屬的影響，分析印度梨形孢對(duì)重金屬Cd脅迫下高丹草生長(zhǎng)和生理特性以及重金屬Cd在高丹草植物體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)、富集和分布特征的影響，以期為印度梨形孢廣泛應(yīng)用于植物抗逆性的研究提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試草種高丹草為高粱與蘇丹草雜交的一年生草本植物。供試菌種印度梨形孢（，簡(jiǎn)稱P）由山東省林業(yè)科學(xué)研究院提供，后于山東農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步培育使用。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)實(shí)驗(yàn)站的溫室大棚內(nèi)進(jìn)行。挑選顆粒飽滿的高丹草種子，用3%的次氯酸鈉浸泡20 min 后，用去離子水沖洗3 遍，再用70%乙醇消毒20 min，去離子水沖洗3 遍之后均勻播種到鋪滿蛭石的種植槽內(nèi)，待種子萌發(fā)生長(zhǎng)一個(gè)月后進(jìn)行移苗，挑選生長(zhǎng)健壯和長(zhǎng)勢(shì)一致的幼苗放入水中，緩慢沖洗掉蛭石，用定植棉固定移栽到含有1/2 霍格蘭營(yíng)養(yǎng)液的水中，以5 株幼苗為一個(gè)樣，重復(fù)3 個(gè)樣，設(shè)置兩組處理，每組設(shè)置6 個(gè)Cd 濃度。水培生長(zhǎng)一周后，待植株完全適應(yīng)了水培環(huán)境，在接菌處理組（記作P+）的水培基質(zhì)中加入印度梨形孢懸浮液，每升水含3 g印度梨形孢菌絲，對(duì)照組（記作P-）不做處理，2～3 d更換一次水和補(bǔ)加菌液。待印度梨形孢在植株體內(nèi)定殖25 d后，將根部有印度梨形孢定殖與未定殖的植株苗轉(zhuǎn)移到清水中，以營(yíng)養(yǎng)液補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。而后加入重金屬標(biāo)樣，使兩組培養(yǎng)液中Cd 濃度分別為0、5、10、30、50、100 mg·L，以未加重金屬的植株作為空白對(duì)照。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

待印度梨形孢在高丹草體內(nèi)定殖25 d后，使用臺(tái)盼藍(lán)染色法觀察印度梨形孢在高丹草體內(nèi)的定殖情況。Cd 脅迫7 d 后，用直尺測(cè)量株高，記錄葉片數(shù)和黃葉數(shù)，采集新鮮葉片測(cè)定生理指標(biāo)。生理指標(biāo)的測(cè)定均以鮮質(zhì)量計(jì)，可溶性蛋白（Soluble protein，SP）含量采用考馬斯亮藍(lán)G-250 染色法測(cè)定；可溶性糖（Soluble sugar，SS）含量采用蒽酮法測(cè)定；丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量采用硫代巴比妥酸法測(cè)定；過(guò)氧化物酶（Peroxidase，POD）含量采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定；過(guò)氧化氫酶（Catalase，CAT）含量采用分光光度計(jì)法測(cè)定；超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）含量采用NBT 光還原法測(cè)定。同步采集根莖葉樣本在105 ℃殺青，75 ℃烘干后記錄生物量，最后將各組織樣品粉碎過(guò)篩后用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀（ICP）測(cè)定植物不同部位Cd含量，ICP分析條件參數(shù)設(shè)置為分譜線波長(zhǎng)214.3 nm、射頻功率1 150 W、霧化器流速1.00 L·min、輔助器流速1.50 L·min、等離子體流速15.0 L·min。分別計(jì)算轉(zhuǎn)移系數(shù)和富集系數(shù)，計(jì)算公式如下：

轉(zhuǎn)移系數(shù)（transport factor，TF）=地上部Cd 含量/根部Cd含量

富集系數(shù)（biological concentration factor，BCF）=植物Cd含量/營(yíng)養(yǎng)液Cd含量

1.4 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均為3 個(gè)重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，采用Excel 2010和SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，采用Origin 9.1軟件繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 印度梨形孢在高丹草根系的定殖

印度梨形孢與高丹草共培養(yǎng)25 d后，印度梨形孢與高丹草成功定殖，且印度梨形孢的厚垣孢子主要集中在高丹草側(cè)根兩側(cè)和主根根端部分，通過(guò)圖1 可以看出，印度梨形孢在高丹草根部大量定殖，數(shù)量多且分布密集，二者成功建立共生關(guān)系。

圖1 高丹草根系侵染狀況（100×）Figure 1 Root infection status of S.Hybrid Sudangrass（100×）

2.2 印度梨形孢對(duì)高丹草生長(zhǎng)的影響

不同Cd濃度下高丹草的生長(zhǎng)狀況存在差異，低濃度（5 mg·L）處理下與CK 相一致，100 mg·L濃度下生長(zhǎng)最差（圖2），而在同一Cd濃度處理下，接種印度梨形孢的高丹草生長(zhǎng)狀況優(yōu)于不接種處理的（圖3）。

圖2 不同Cd濃度下高丹草的生長(zhǎng)狀況Figure 2 The growth of S.Hybrid Sudangrass under different Cd concentrations

圖3 同一Cd濃度下高丹草不同處理的生長(zhǎng)狀況Figure 3 Growth conditions of S.Hybrid Sudangrass under different treatments at the same Cd concentration

由表1 可知，隨著Cd 濃度的增加，高丹草不接菌組與接菌組葉片數(shù)和生物量無(wú)顯著差異（＞0.05），但整體生物量接菌組高于不接菌組，0、5、10、30、50、100 mg·L的Cd 濃度處理分別比對(duì)照組高17.85%、19.51%、0%、29.7%、10.61%、9.65%。隨著Cd 濃度的增加，高丹草接菌與不接菌組株高、葉片數(shù)、干質(zhì)量降低，黃葉數(shù)增加。在0～30 mg·LCd 濃度下，兩組黃葉數(shù)差異不明顯（＞0.05），在高濃度50 mg·L和100 mg·L下，接菌組分別比對(duì)照組分別降低49.8%和42.2%，接菌顯著降低了高丹草的黃葉數(shù)。

表1 Cd脅迫與印度梨形孢接種對(duì)高丹草生長(zhǎng)的影響Table 1 Effects of Cd stress and Piriformospora indica on the growth of S.Hybrid Sudangrass

2.3 印度梨形孢對(duì)Cd 脅迫下高丹草地上部抗性生理指標(biāo)的影響

2.3.1 印度梨形孢對(duì)Cd 脅迫下高丹草滲透調(diào)劑物質(zhì)的影響

由圖4 可知，隨著Cd 濃度的增加，高丹草接菌組與對(duì)照組可溶性蛋白含量先增加后降低，且在不同Cd濃度下，接菌組與對(duì)照組可溶性蛋白含量存在極顯著差異（＜0.01）。接菌提高了高丹草可溶性蛋白含量，在0、5、10 mg·L下，含量 分別 提高 了22.74%、57.59%、5.37%，在中高濃度30、50、100 mg·L下提高顯著，分別增加了110%、52%、351%，說(shuō)明在高濃度下印度梨形孢通過(guò)調(diào)節(jié)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)來(lái)改善細(xì)胞膜受損的效果顯著。

圖4 Cd脅迫和接種印度梨形孢對(duì)可溶性蛋白含量的影響Figure 4 Effects of Cd stress and Piriformospora indica inoculation on soluble protein content

接菌組和未接菌組可溶性糖含量隨著Cd濃度的增加呈波動(dòng)上升趨勢(shì)（圖5），且兩組可溶性糖含量存在顯著差異（100 mg·L除外）。在0、5、10、30、50 mg·L的Cd 濃度下，接菌組比對(duì)照組分別提高了33%、14.7%、6.9%、15.7%、29.2%，但在100 mg·LCd濃度下無(wú)顯著差異（＞0.05）。

圖5 Cd脅迫和接種印度梨形孢對(duì)可溶性糖含量的影響Figure 5 Effects of Cd stress and Piriformospora indica inoculation on soluble sugar content

隨著Cd 濃度的增加，高丹草葉片丙二醛含量呈上升趨勢(shì)（圖6），在0、5、10、30、50 mg·LCd濃度下含量增加不顯著（＞0.05），在100 mg·LCd 脅迫下，丙二醛含量明顯上升，且接菌組植株含量低于未接菌組，在0、5、10、30 mg·L接菌組比未接菌組分別減少19.2%、15.8%、14%、21.7%。在50 mg·L接菌組比未接菌組增加14.2%，在100 mg·L又減少49.4%。說(shuō)明高丹草在高濃度Cd 脅迫下，植株細(xì)胞膜透性受到嚴(yán)重傷害，接種印度梨形孢后緩解了Cd 對(duì)植物的傷害，增強(qiáng)了細(xì)胞膜透性。

圖6 Cd脅迫和接種印度梨形孢對(duì)丙二醛含量的影響Figure 6 Effects of Cd stress and Piriformospora indica inoculation on malondialdehyde content

2.3.2 印度梨形孢對(duì)Cd脅迫下高丹草酶活性的影響

隨著Cd濃度的增加，兩組處理過(guò)氧化物酶活性呈遞減趨勢(shì)（圖7）。在無(wú)Cd脅迫處理（0 mg·L）下，接菌與不接菌組過(guò)氧化物酶活性無(wú)顯著差異（＞0.05），隨著Cd 濃度的增加，兩組之間存在極顯著差異（＜0.01），在5、10、30、50、100 mg·L濃度下，接菌后高丹草葉片過(guò)氧化物酶活性分別提高了1.51、0.24、1.21、0.42、1.6倍。

圖7 Cd脅迫和接種印度梨形孢對(duì)過(guò)氧化物酶活性的影響Figure 7 Effects of Cd stress and Piriformospora indica inoculation on peroxidase activity

不同Cd 濃度處理下，高丹草接菌組與不接菌組超氧化物歧化酶活性呈先增加后降低趨勢(shì)（圖8）。在不接菌處理下，5、10、30、50、100 mg·LCd 脅迫下高丹草超氧化物歧化酶活性比不加Cd 處理（0 mg·L）分別增加了13.5%、37.8%、44.6%、22.3%、1.09%。接菌提高了高丹草葉片超氧化物歧化酶活性，在0、5、10 mg·LCd 濃度下增加不顯著（＞0.05），在30、50、100 mg·LCd 濃度下增加顯著（＜0.05），分別提高了12.1%、27.7%、10.94%。

圖8 Cd脅迫和接種印度梨形孢對(duì)超氧化物歧化酶活性的影響Figure 8 Effects of Cd stress and Piriformospora indica inoculation on superoxide dismutase activity

隨著Cd濃度的增加，高丹草葉片過(guò)氧化氫酶活性先增加后降低（圖9）。在不同Cd濃度下，接菌組與不接菌組含量差異顯著（10、30 mg·L除外）。0、5、10、30、50、100 mg·LCd處理接菌組比不接菌組分別增加52.17%、30.3%、1.38%、17.7%、21.2%、47.05%。在Cd濃度為30 mg·L時(shí)含量達(dá)到最高，之后隨著濃度的增加過(guò)氧化氫酶活性降低，在100 mg·L時(shí)達(dá)到最低值。

圖9 Cd脅迫和接種印度梨形孢對(duì)過(guò)氧化氫酶活性的影響Figure 9 Effects of Cd stress and Piriformospora indica inoculation on catalase activity

2.4 印度梨形孢對(duì)高丹草體內(nèi)Cd 的轉(zhuǎn)運(yùn)、富集和分布特征的影響

由表2 可知，高丹草各組織對(duì)Cd 的積累和分配存在顯著差異（＜0.05）。高丹草體內(nèi)Cd 含量總體呈現(xiàn)出根＞葉＞莖的分布。在不接菌情況下，高丹草根、莖、葉中Cd 含量隨著濃度增加而增加，5、10、30、50、100 mg·L處理下高丹草根部Cd 含量比不加Cd分別增加15.25、54.5、105、328.25、560 倍。接菌后高丹草根部Cd 含量增加，在5 mg·L和30 mg·L濃度下，接菌組與不接菌組根部Cd 積累量差異明顯（＜0.05），接菌后分別增加了66.1%和75.11%，高Cd濃度（50、100 mg·L）下二者無(wú)明顯差異（＞0.05）。在5 mg·L和30 mg·LCd 濃度下接菌組和不接菌組莖部Cd 含量差異不顯著，在10、50、100 mg·LCd 濃度下，接菌組莖部Cd含量顯著低于不接菌組，分別減少了35.7%、42.2%、15.8%。在5、10、30、100 mg·LCd 濃度下，接菌顯著減少了葉片Cd 的積累，和不接菌相比，分別減少了16.7%、61.9%、42.1%、40.6%，在50 mg·LCd 時(shí)增加7.9%，可能是誤差引起。不同濃度和不同處理下高丹草富集系數(shù)呈波動(dòng)變化，在5 mg·LCd 濃度下，接菌組比不接菌增加了33.6%，10 mg·LCd 濃度下降低10%，30 mg·LCd 濃度下增加50%，50～100 mg·LCd 濃度下降低1%～4%。不同處理和不同Cd 濃度下高丹草的轉(zhuǎn)移系數(shù)存在差異，且在不同Cd 濃度下，接菌組轉(zhuǎn)移系數(shù)顯著（＜0.05）低于對(duì)照組（50 mg·LCd 除外），0、5、10、30、50、100 mg·L處理下分別降低了81.5%、61.2%、39.5%、63%、22.2%、27.3%，說(shuō)明隨著Cd 濃度的增加，高丹草由根部向地上部轉(zhuǎn)移Cd 的能力減弱，接菌后印度梨形孢將大部分Cd 聚集到植物根部，限制其向地上部轉(zhuǎn)移，從而減少Cd 在地上部的積累，減輕重金屬Cd對(duì)植物地上部的毒害。

表2 Cd脅迫和接種印度梨形孢對(duì)高丹草體內(nèi)Cd的轉(zhuǎn)運(yùn)、富集和分布特征的影響Table 2 Effects of Cd stress and Piriformospora indica inoculation on the transport，enrichment and distribution characteristics of Cd in S.Hybrid Sudangrass

3 討論

Cd 影響植物的生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)植物的生長(zhǎng)表現(xiàn)出低促高抑的效果，不同物種和品種表現(xiàn)出不同的效果。當(dāng)Cd 濃度超出植物所能承受的最大范圍時(shí)，植物則表現(xiàn)出植株矮小、生長(zhǎng)緩慢、生物量下降甚至死亡。本研究結(jié)果表明，在低Cd 濃度下，高丹草能夠正常生長(zhǎng)，葉片數(shù)和株高均有一定程度的增加，這與前人的研究結(jié)果相似。隨著Cd濃度的增加，高丹草的生長(zhǎng)狀況變差，葉片發(fā)黃，積累的生物量減少，說(shuō)明高濃度Cd 脅迫對(duì)高丹草產(chǎn)生明顯的毒害作用，這與前人的研究結(jié)果一致。接菌后高丹草黃葉數(shù)減少，生物量提高，葉片數(shù)增加，說(shuō)明接種印度梨形孢后其生長(zhǎng)狀況得到明顯改善，接菌緩解了Cd 對(duì)高丹草生長(zhǎng)的抑制作用。

印度梨形孢提高了Cd脅迫下高丹草的抗性生理指標(biāo)。植物在遭受Cd 脅迫時(shí)，積累的Cd 離子在植物體內(nèi)活動(dòng)，導(dǎo)致植物體內(nèi)產(chǎn)生大量活性氧，破壞了體內(nèi)活性氧平衡，導(dǎo)致細(xì)胞氧化受損，從而抑制植物的生長(zhǎng)，植物體內(nèi)的保護(hù)酶（過(guò)氧化氫酶、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化物酶等）通過(guò)改變自身活性來(lái)清除多余的活性氧，從而維護(hù)植株正常生長(zhǎng)。NANDA 等對(duì)銅脅迫下決明子的研究表明，印度梨形孢通過(guò)增強(qiáng)超氧化物歧化酶、抗壞血酸過(guò)氧化物酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和谷胱甘肽還原酶的酶活性顯著改善了抗氧化防御系統(tǒng)。此外，除了增強(qiáng)保護(hù)參數(shù)外，它還降低了過(guò)氧化氫含量、脂質(zhì)過(guò)氧化和DNA 損傷等破壞性參數(shù)。本研究結(jié)果表明，隨著Cd濃度增加，高丹草體內(nèi)超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶活性先增加后降低，而過(guò)氧化物酶活性隨著Cd 濃度的增加而降低，說(shuō)明高丹草主要通過(guò)調(diào)節(jié)超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶活性來(lái)抵抗Cd脅迫的傷害，在高濃度下，高丹草體內(nèi)的抗氧化酶的調(diào)節(jié)能力降低導(dǎo)致酶活性降低。接菌后過(guò)氧化氫酶、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化物酶活性均有所提高，說(shuō)明接種印度梨形孢能夠通過(guò)提高抗氧化酶活性來(lái)抵御不良環(huán)境。丙二醛、可溶性蛋白和可溶性糖含量的變化能反映植物在逆境環(huán)境下生物膜的受損程度，丙二醛含量越高說(shuō)明生物膜受損越嚴(yán)重。在本研究中，高丹草丙二醛和可溶性糖含量隨著Cd 濃度的增加而增加，可溶性蛋白先增加后降低，接菌降低了高丹草葉片中丙二醛含量，提高了可溶性糖和可溶性蛋白含量，說(shuō)明隨著Cd濃度的上升，植物生物膜受損嚴(yán)重，接菌通過(guò)降低丙二醛含量，提高滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)來(lái)減輕Cd 對(duì)植物生物膜的損傷，這與前人有關(guān)印度梨形孢接種和Cd脅迫下植物生理響應(yīng)的研究結(jié)果一致。

YAGHOUBIAN 等研究發(fā)現(xiàn)，印度梨形孢在0～100 mg·L的Cd溶液中具有較高的去除效率，且濃度的增加會(huì)抑制印度梨形孢對(duì)Cd的積累。印度梨形孢細(xì)胞壁能夠吸附重金屬，通過(guò)將重金屬固定在植物根系的表皮層和皮層，降低了對(duì)根系皮層細(xì)胞的損害，減少了重金屬進(jìn)入中柱細(xì)胞，從而減少了植物通過(guò)維管束將重金屬向地上部的運(yùn)輸。SALEH 等對(duì)向日葵的研究表明，在Cd 脅迫下接種印度梨形孢通過(guò)向根部積累更多的Cd以減少重金屬向植物地上部的移動(dòng)。也有對(duì)決明子的研究表明，印度梨形孢通過(guò)抑制銅從根部向地上部轉(zhuǎn)移，減輕了銅對(duì)決明子的毒害作用。本研究中，Cd 在高丹草不同部位的積累呈根＞葉＞莖的分布，在不同Cd 濃度下，高丹草接種印度梨形孢后和未接菌相比地下部Cd 含量增加，地上部Cd含量降低，轉(zhuǎn)移系數(shù)也降低，這說(shuō)明印度梨形孢通過(guò)將大部分Cd 離子固定在植物的根部，從而減少了向高丹草地上部的轉(zhuǎn)移，減輕了Cd對(duì)高丹草的毒害，提高了高丹草的耐性。

綜上，在Cd 脅迫下添加印度梨形孢菌劑通過(guò)促進(jìn)高丹草根系對(duì)Cd 的吸收和累積，抑制重金屬Cd 向地上部的轉(zhuǎn)移，減輕膜過(guò)氧化損傷，調(diào)節(jié)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和提高抗氧化酶活性來(lái)減輕Cd對(duì)高丹草生長(zhǎng)的抑制作用和毒性損傷。印度梨形孢具有環(huán)保、高效且容易在體外繁殖等優(yōu)點(diǎn)，具有巨大的應(yīng)用前景。在重金屬污染地區(qū)的生態(tài)恢復(fù)中可考慮采用印度梨形孢和植物共生的互作體系，但生長(zhǎng)條件與環(huán)境因子均會(huì)對(duì)印度梨形孢與植物互作產(chǎn)生影響。印度梨形孢與宿主植物的互作機(jī)制，印度梨形孢提高宿主植物抗逆性相關(guān)基因的表達(dá)，以及高質(zhì)量菌劑和生物菌肥的生產(chǎn)等均有待進(jìn)一步的研究。

4 結(jié)論

（1）低濃度（5 mg·L）Cd 對(duì)高丹草的生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用。隨著濃度的增加，高丹草株高、葉片數(shù)減小，生物量降低，黃葉數(shù)增加，生長(zhǎng)受到抑制，接種印度梨形孢后能夠促進(jìn)高丹草生物量的積累，緩解葉片發(fā)黃現(xiàn)象，改善生長(zhǎng)狀況。

（2）接種印度梨形孢提高了Cd 脅迫下高丹草的抗性生理指標(biāo)。隨著Cd 濃度的增加，高丹草未接菌組的可溶性糖、可溶性蛋白、丙二醛、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶活性總體上逐漸升高，過(guò)氧化物酶活性逐漸降低。接種印度梨形孢提高了可溶性蛋白、可溶性糖含量以及酶活性，降低了丙二醛含量。印度梨形孢通過(guò)調(diào)節(jié)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和提高抗氧化酶活性來(lái)抵御Cd脅迫對(duì)高丹草的傷害。

（3）不同Cd 濃度條件下，高丹草體內(nèi)Cd 含量分布呈根＞葉＞莖，且含量隨著Cd濃度增加而增加，接種印度梨形孢后高丹草地下部Cd 含量增加，地上部Cd含量降低，接種印度梨形孢減少了Cd 從地下部向地上部的轉(zhuǎn)移，減輕了Cd對(duì)高丹草地上部的毒害。