催乳素及血管抑制素對哺乳動物卵泡發(fā)育的調(diào)控作用研究進(jìn)展

謝社風(fēng)，高鳳磊，李 菊，韓貝貝，李承德，衛(wèi)恒習(xí),3*

（1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，國家生豬種業(yè)工程技術(shù)研究中心，廣東省農(nóng)業(yè)動物基因組學(xué)與分子育種重點實驗室，廣東廣州 510642；2.廣東農(nóng)工商職業(yè)技術(shù)學(xué)院熱帶農(nóng)林學(xué)院，廣東廣州 510507；3.嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實驗室茂名分中心，廣東茂名 525000）

催乳素（Prolactin，PRL）又稱促乳素，最初因其能夠刺激鴿子嗉囊上皮細(xì)胞增生，生成嗉囊乳而得名，與生長激素（Growth Hormone，GH）、胎盤催乳素（Placental Lactogen，PL）、催乳素樣蛋白（Prolactin-Like Proteins，PLP）和催乳素相關(guān)蛋白（Prolactin-Related Proteins，PRP）形成PRL 激素家族，PRL 家族在結(jié)構(gòu)上具有相似性，可能是從一個祖先基因進(jìn)化而來。PRL 具有300 多種已知的生理功能，在動物生殖、妊娠和哺乳、生長發(fā)育、內(nèi)分泌和代謝、免疫調(diào)節(jié)、水電解質(zhì)平衡、促進(jìn)血管生成、行為和癌癥等方面具有重要的調(diào)控作用。然而，由PRL 蛋白水解產(chǎn)生的一種非典型形式的N 末端催乳素片段具有抗血管生成、抗血管舒張和抗血管通透性作用，未水解的PRL 中不存在抗血管生成特性，這些抗血管生成片段被命名為血管抑制素（Vasoinhibin，Vi）。PRL 和Vi 作為血管生成的刺激劑和抑制劑構(gòu)成了一種有效且獨特的調(diào)節(jié)機(jī)制，二者可能涉及不同信號受體的利用。PRL 通過與催乳素受體（Prolactin Receptor，PRLR）結(jié)合后作用于靶細(xì)胞，發(fā)揮其生理功能；但Vi 似乎通過不同的受體發(fā)出信號，這些受體迄今為止尚未明確。

雌性動物處于妊娠期或哺乳期時，PRL 的循環(huán)水平顯著升高，高水平的PRL 會通過抑制下丘腦促性腺激素釋放激素（Gonadotrophin Releasing Hormone，GnRH）的分泌而降低垂體促性腺激素（Gonadotrophins，Gn）的分泌，進(jìn)而抑制卵泡發(fā)育。PRL 的分泌受到下丘腦分泌的多巴胺的強(qiáng)直抑制控制。在生產(chǎn)或臨床上，PRL 分泌過高比PRL 分泌不足更為常見，任何干擾下丘腦多巴胺合成分泌、多巴胺向垂體的運送過程或多巴胺作用于多巴胺受體的過程，均可引起PRL 抑制性調(diào)節(jié)的減弱而使PRL 濃度升高，發(fā)生高催乳素血癥（Hyperprolactinemia，HPRL）。HPRL 是因各種原因引起的外周血PRL 水平持續(xù)高于正常值的狀態(tài)，以下丘腦-垂體-性腺軸內(nèi)分泌紊亂為特征，多發(fā)于女性患者，可造成女性月經(jīng)不調(diào)甚至閉經(jīng)、不孕不育、乳房腫大、溢乳和男性性功能障礙等。母豬斷奶后PRL水平降低，卵泡才能得以繼續(xù)發(fā)育，在生產(chǎn)上通過調(diào)控母豬斷奶后的PRL 水平能夠?qū)崿F(xiàn)卵泡發(fā)育和發(fā)情的同步化，表明PRL 是經(jīng)產(chǎn)母豬卵巢卵泡功能的重要生理調(diào)控因子。母豬斷奶后不發(fā)情可能與PRL 水平異常有關(guān)。

本文對PRL 與Vi 的結(jié)構(gòu)與分泌調(diào)節(jié)、作用機(jī)制以及高水平PRL 在哺乳動物卵泡發(fā)育過程中的抑制調(diào)節(jié)作用的可能機(jī)制進(jìn)行了綜述，以期為探究動物卵泡發(fā)育調(diào)控機(jī)制提供參考。

1 PRL 與Vi 的結(jié)構(gòu)

PRL 是由垂體前葉嗜酸性細(xì)胞合成與分泌的一種蛋白激素，由單一多肽鏈組成，其相對分子質(zhì)量約為23 ku，廣泛分布于多種組織器官。人、牛和豬的PRL由199 個氨基酸組成，大鼠和小鼠的PRL 有197 個氨基酸。PRL 分子內(nèi)部含有3 個二硫鍵，位于氨基端、羧基端及中間區(qū)的三對半胱氨酸之間，使分子形成3 個環(huán)（L1-3），其三級結(jié)構(gòu)中有4 個-螺旋（“上-上-下-下”，H1-4）呈反向平行排列。PRL 經(jīng)過多種翻譯后修飾，可形成分子量不同的PRL 變體：單體、二聚體和多聚體，糖基化、磷酸化和硫酸化都可使PRL 的結(jié)構(gòu)和活性發(fā)生改變。成熟的PRL 蛋白分子有2 個結(jié)合位點，其氨基酸序列比較保守。

PRL 經(jīng)蛋白水解可以產(chǎn)生Vi，可抑制毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長。據(jù)報道，Vi 不存在特異的編碼基因，中樞及外周水平的組織蛋白酶D（Cathepsin D，CTSD）、骨形態(tài)發(fā)生蛋白1（Bone Morphogenetic Protein-1，BMP-1）和基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrix Metallo proteinases，MMPs）在連接第3 和第4 個-螺旋的長環(huán)附近或之內(nèi)的對應(yīng)位點切割全長PRL，去除C-端部分片段（第4 個-螺旋），產(chǎn)生分子量范圍在11～18 ku的血管抑制素（Vis）（圖1）。Vis 均共享全長PRL的NH末端區(qū)域，由PRL 蛋白水解產(chǎn)生的COOH 末端片段不具有血管抑制素樣活性，Vis 與全長PRL 的作用完全不同。未切割的PRL 沒有抗血管生成特性，表明構(gòu)象變化產(chǎn)生了新的生物活性域。分子動力學(xué)（Molecular Dynamic，MD）模擬表明，H4 的丟失暴露了PRL 的疏水核，通過環(huán)1（L1）的運動及其與-螺旋1（H1）的相互作用導(dǎo)致分子壓縮成三螺旋束，產(chǎn)生新的L1 構(gòu)象，具有不同于PRL 的靜電和疏水表面，可能對應(yīng)于Vi 的生物活性域。

圖1 PRL 經(jīng)組織蛋白酶裂解產(chǎn)生Vi 示意圖[5]

2 PRL 與Vi 的分泌調(diào)節(jié)

2.1 PRL 的分泌調(diào)節(jié) 腺垂體是PRL 的主要合成分泌部位，PRL 也在垂體外部位產(chǎn)生，包括下丘腦和不同的腦區(qū)、卵巢、乳腺、胸腺、子宮內(nèi)膜、子宮肌、胎盤、子宮蛻膜、淚腺、淋巴組織和免疫系統(tǒng)等許多部位都發(fā)現(xiàn)有PRL 合成和分泌，但有些部位（如子宮蛻膜、胎盤）分泌的PRL 結(jié)構(gòu)上與垂體PRL 相同，并與相同的受體結(jié)合，但其作用針對特定部位，與垂體PRL 的調(diào)節(jié)不同，在一定情況下可以補(bǔ)充垂體PRL 的不足。

垂體PRL 的分泌受下丘腦、神經(jīng)遞質(zhì)、激素、細(xì)胞因子等許多因素控制。其中，下丘腦對PRL 的分泌具有雙重調(diào)節(jié)作用，下丘腦既可分泌催乳素釋放抑制因子（Prolactin Release-Inhibiting Factors，PIFs），又可分泌催乳素釋放因子（Prolactin Releasing Factors，PRFs）；但在生理情況下，下丘腦主要以抑制PRL分泌為主。多巴胺（Dopamine，DA）是下丘腦分泌的最主要且作用最強(qiáng)的PIF，多巴胺釋放到垂體門靜脈毛細(xì)血管中，作用于垂體前葉嗜酸性細(xì)胞上的多巴胺D2 受體，下調(diào)PRL 基因表達(dá)而抑制PRL的分泌。參與抑制PRL 分泌的神經(jīng)內(nèi)分泌多巴胺（Neuroendocrine Dopamine，NEDA）神經(jīng)元主要包括結(jié)節(jié)垂體（Tuberohypophyseal，THDA）、腦室周圍垂體（Periventricular Hypophyseal，PHDA）和結(jié)節(jié)漏斗（Tuberoinfundibular，TIDA）神經(jīng)元，TIDA 神經(jīng)元在下丘腦調(diào)節(jié)PRL 分泌中起最突出的作用。同時，PRL 通過自分泌或/和旁分泌的途徑與腦室內(nèi)的PRLR結(jié)合，誘導(dǎo)多巴胺合成的限速酶酪氨酸羥化酶（Tyrosine Hydroxylase，TH）絲氨酸磷酸化引起酶活性增加，以及誘導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5（Signal Transducer and Activator of Transcription 5，STAT5）磷酸化增加酪氨酸羥化酶mRNA 的表達(dá)，促進(jìn)下丘腦多巴胺的合成，形成短循環(huán)負(fù)反饋機(jī)制調(diào)控自身的分泌。多巴胺受體有許多亞型，主要是D2 受體在影響PRL 的合成及分泌。利用多巴胺D2 受體抑制劑左舒必利、奮乃靜等藥物，可促進(jìn)PRL 分泌，利用多巴胺D2 受體激活劑溴隱亭、培高利特等，可降低PRL 分泌。除了多巴胺，促性腺激素聯(lián)合肽（GnRH-Associated Peptide，GAP）、促黑素細(xì)胞激素（alpha-Melanocyte-Stimulating Hormone，-MSH）、-氨基丁酸（Gamma-Aminobutyric Acid，GABA）等對PRL 的釋放也有抑制作用；催乳素釋放肽（Prolactin-Releasing Peptide，PrRP）、促甲狀腺素釋放激素（Thyrotrophin-Releasing Hormone，TRH）、膽囊收縮素（Cholecystokinin，CCK）、作用于血管的腸肽（Vasoactive Intestinal Peptide，VIP）、生長激素釋放激素（Growth Hormone Releasing Hormone，GHRH）、類阿片物（Opioids，OP）、神經(jīng)降壓素、P物質(zhì)、縮宮素、Galanin 和抗利尿激素都具有促進(jìn)PRL釋放的作用。PIFs 與PRFs 間存在一定的動態(tài)性平衡，從而維持PRL 的正常濃度水平。

垂體PRL 的分泌受生殖生理狀態(tài)、晝夜節(jié)律、應(yīng)激等多種因素影響，具有脈沖式波動的特點，正常PRL脈沖性釋放對泌乳和卵巢功能起到重要的調(diào)節(jié)作用。PRL 的分泌隨生殖周期改變而有所不同。在生殖周期的大部分時間里，PRL 分泌保持在較低的基礎(chǔ)水平，但排卵前階段PRL 水平升高，出現(xiàn)一個短暫而明顯的峰值，PRL 分泌峰的出現(xiàn)時間和發(fā)情前期LH 分泌峰相近；PRL 水平在卵泡后期顯著升高，并在黃體期持續(xù)升高，起到促黃體作用。在妊娠期的大部分時間，血清中的PRL 濃度維持在較低水平且緩慢上升，在妊娠晚期至分娩前達(dá)到峰值，并在哺乳期保持PRL 高水平，直至哺乳結(jié)束才下降（圖2）。在妊娠期間，雌激素可刺激催乳素細(xì)胞增生，垂體體積增大，出現(xiàn)PRL水平增高。鼠類在妊娠第1～9 天具有“妊娠PRL 依賴期”，孕鼠妊娠早期的PRL 水平顯著高于妊娠中后期。在哺乳期，幼崽對母體的吮吸刺激會引起母體神經(jīng)內(nèi)分泌反射分泌PRL，終止吮吸刺激催乳素的分泌也停止。哺乳結(jié)束后血液中PRL 下降的速率與激素新陳代謝的速率成正比。

圖2 PRL 周期變化規(guī)律[15]

2.2 Vi 的分泌調(diào)節(jié) PRL/Vi 軸是最近定義的內(nèi)分泌軸，是調(diào)控血管發(fā)生及其功能的重要系統(tǒng)，已成為人類癌癥、先兆子癇、視網(wǎng)膜黃斑變性等疾病研究的熱點。Vi是通過CTSD、MMPs、BMP-1 等酶對其直接前體PRL的蛋白水解切割生成的，Vi 的產(chǎn)生受到下丘腦、垂體和靶組織PRL 水平的調(diào)節(jié)，同時與相關(guān)蛋白酶的表達(dá)及其活性密切相關(guān)，PRL 水平越高，則Vi 水平越高，但并不呈線性關(guān)系。Vi/PRL 的比例隨著不同的生理狀態(tài)而變化，如雌性大鼠未懷孕時Vi/PRL 為0.22，在懷孕第9 天增加到0.37，在懷孕第12 天增加到0.77；通過藥物處理可調(diào)控Vi/PRL 的比例，如利用奮乃靜（多巴胺D2 受體拮抗劑）處理可使大鼠Vi/PRL 比例由0.22提高至0.99，雌激素也可提高該比例，而促甲狀腺釋放激素（TRH）可降低該比例。

3 PRL 與Vi 的作用機(jī)制

3.1 PRLR 及其功能 PRL 多效活性通過與PRLR 結(jié)合來介導(dǎo)，引起靶細(xì)胞的各種生理生化反應(yīng)。

PRLR 是一種單一膜結(jié)合蛋白受體，屬于細(xì)胞因子I 類受體超家族，在垂體和許多其他組織中表達(dá)，包括乳腺、子宮內(nèi)膜、卵巢、心臟、肺、胸腺、脾臟、肝臟、胰腺、腎臟、腎上腺、骨骼肌、大腦、皮膚和成骨細(xì)胞。PRLR 由細(xì)胞外配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域、單個跨膜域和胞內(nèi)域3 部分構(gòu)成。胞外域分為NH-末端D1 和膜-近端D22 個亞區(qū)，D1 結(jié)構(gòu)域中含有2 個二硫鍵（在CyS-Cys和Cys-Cys中）；D2 結(jié)構(gòu)域中有一段特殊序列（Tpr-Ser-x-Trp-Ser，x 為任意氨基酸殘基）稱為WS 基序（WS Motif），二硫鍵和WS 基序?qū)τ谑荏w的正確折疊和轉(zhuǎn)運必不可少。胞內(nèi)域在啟動與PRLR相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制中起著關(guān)鍵作用，胞內(nèi)域含有兩個相對保守的區(qū)域box1 和box2，近膜端的box1 由8 個氨基酸殘基構(gòu)成，多為脯氨酸與疏水性氨基酸殘基，呈P-x-P 方式排列，box1 特有的結(jié)構(gòu)特征能夠被信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子所識別，主要參與與酪氨酸激酶2（Janus Kinase 2，JAK2）結(jié)合以及JAK2 的磷酸化。PRLR 基因能通過可變剪切表達(dá)不同的亞型，其表達(dá)因物種和不同組織而異，根據(jù)胞內(nèi)域氨基酸數(shù)目的不同，PRLR 可以分為長型、中間型、短型受體3 種類型；box1 存在于所有PRLR亞型，但box2 不存在于短型受體中。在嚙齒動物中，小鼠中有1 種長型和3 種短型，大鼠中有短、中和長型；人類存在2 種短型、1 種中間型和1 種長型。不同的PRLR 亞型介導(dǎo)不同的生物學(xué)功能，PRL 只有結(jié)合長型受體同型二聚體引起細(xì)胞增殖和分化，而結(jié)合短型同型二聚體或雜合二聚體則會抑制PRL 的功能。PRL 長型受體和短型受體通常共表達(dá)于卵泡，長型受體在生長卵泡中的表達(dá)水平比短型受體高得多。

3.2 PRL 的主要信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路 PRL 結(jié)合并激活PRLR后，通過經(jīng)典的Janus 激酶2/ 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子（Janus Kinase 2/Signal Transducer and Activator of Transcription，JAK2/STAT）途徑將信息傳遞到細(xì)胞核，引起靶基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。首先，PRL 的結(jié)合位點1 與PRLR 的胞外域結(jié)合形成激素-受體二聚體，該初始激素受體復(fù)合物的形成是PRL 結(jié)合位點2 與第2 個PRLR的胞外域結(jié)合的先決條件，最后形成三聚體復(fù)合物（一分子PRL-兩分子PRLR）可使PRLR 活化；PRLR 激活可導(dǎo)致胞漿及近膜內(nèi)側(cè)的JAK2 與之結(jié)合并發(fā)生磷酸化，進(jìn)而使STAT5 與之結(jié)合并導(dǎo)致STAT5 磷酸化，隨即磷酸化的STAT5 形成二聚體并通過核孔轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核內(nèi)，與靶基因啟動子中的特定反應(yīng)元件結(jié)合，并啟動靶基因的轉(zhuǎn)錄。PRL 激活后的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑還存在促分裂原活化蛋白激酶級聯(lián)Ras-Raf-MAPK 途徑和磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）。

3.3 Vi 的作用機(jī)制 Vi 直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞，抑制血管的生長、通透性和擴(kuò)張。Vi 與由纖溶酶原激活劑抑制劑-1（Plasminogen Activator Inhibitor-1，PAI-1）、尿激酶纖溶酶原激活劑（Urokinase-Type Plasminogen Activator，u-PA）和內(nèi)皮細(xì)胞膜上的尿激酶纖溶酶原激活劑受體的多組分以及其他未明確的結(jié)合伴侶/ 受體結(jié)合，通過阻斷幾種促血管生成因子如血管內(nèi)皮生長因子（Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF）、堿性成纖維細(xì)胞生長因子（Basic Fibroblast Growth Factor，bFGF）、緩激肽（Bradykinin，BK）、白介素-1（interleukin-1beta，IL-1）導(dǎo)致信號通路（Ras-Raf-MAPK、Ras-Tiam1-Rac1-Pak1、PI3K-Akt和PLC-IP3-eNOS）的激活阻斷，進(jìn)而抑制血管生成、血管舒張和血管通透性。

4 PRL 對卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)

4.1 PRL 對腦部生殖激素分泌的影響 PRL 在發(fā)情周期參與下丘腦-垂體-卵巢軸的調(diào)節(jié)，在生殖系統(tǒng)中起著關(guān)鍵作用。生理性（如妊娠、哺乳）或病理性（如高催乳素血癥）PRL 濃度過高會抑制GnRH 的分泌，進(jìn)而抑制LH 和FSH，導(dǎo)致卵巢功能抑制。PRL 對GnRH 的抑制作用可能通過作用于表達(dá)基因的特定下丘腦弓狀核神經(jīng)元群體來間接調(diào)節(jié)生殖軸，這為PRL 和LH 分泌峰相近的可能機(jī)制提供了方向。基因編碼神經(jīng)肽，稱為kisspeptins，kisspeptin 是GnRH 神經(jīng)元的強(qiáng)大激活劑，是GnRH 釋放的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，在生殖中至關(guān)重要。在人類和動物模型中，編碼kisspeptins 或kisspeptin 受體的基因功能喪失性突變導(dǎo)致青春期中斷和不育。弓狀核中kisspeptin 神經(jīng)元的間歇性激活驅(qū)動正中隆起的GnRH 脈沖性釋放，進(jìn)而推動垂體的LH 脈沖；然而，kisspeptin 也可以通過抑制TIDA 多巴胺的釋放來急性刺激PRL 的分泌。因此，每次kisspeptin 釋放觸發(fā)LH 脈沖也可能導(dǎo)致TIDA 多巴胺水平的同步減少，導(dǎo)致PRL 分泌的暫時關(guān)聯(lián)脈沖。大多數(shù)表達(dá)的神經(jīng)元共同表達(dá)PRLRs，高水平PRL 直接抑制調(diào)控表達(dá)，從而抑制kisspeptin 的合成與分泌。此外，雌二醇（E）是刺激PRL 分泌的主要卵巢激素，E誘導(dǎo)PRL 分泌的功能與循環(huán)PRL水平相關(guān)，E在垂體調(diào)節(jié)基因表達(dá)，在下丘腦調(diào)節(jié)kisspeptin 神經(jīng)元活動進(jìn)而調(diào)節(jié)PRL 的分泌，表明表達(dá)的神經(jīng)元也可以負(fù)反饋調(diào)節(jié)PRL 分泌。

4.2 PRL 對卵巢生殖激素的影響 PRL 在卵巢上通過自分泌和旁分泌的途徑來調(diào)節(jié)卵巢功能，參與生殖功能調(diào)節(jié)。長型和短型PRLR 在卵巢顆粒細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞和黃體細(xì)胞上均有表達(dá)。在卵巢中，PRL 與促性腺激素協(xié)同作用，刺激黃體細(xì)胞產(chǎn)生孕酮，并誘導(dǎo)子宮中孕酮受體表達(dá)的增加。卵巢產(chǎn)生的孕酮是受精卵著床、維持妊娠和抑制排卵所必需的。PRL 信號傳導(dǎo)中斷導(dǎo)致小鼠的生殖缺陷。研究表明，或基因敲除雌性小鼠不孕。成年P(guān)RL-/-雌性小鼠有不規(guī)則的發(fā)情周期，在卵巢組織學(xué)上沒有明顯的缺陷，但突變體無法懷孕；PRLR-/-雌性小鼠PRLR 的缺乏使胚胎難以著床。盡管突變雌性小鼠表現(xiàn)出生殖缺陷，但PRL-/-雄性小鼠是完全可育的，而且大多數(shù)PRLR-/-雄性小鼠是可育的，這表明敲除雌性小鼠的不孕癥是由于缺乏催乳素的黃體化作用。

卵泡液中PRL 來源于外周血，卵泡細(xì)胞中也可以合成，與雌激素和孕激素呈負(fù)相關(guān)。正常水平的PRL與卵巢組織表達(dá)的PRLR 結(jié)合，可以上調(diào)顆粒細(xì)胞FSHR 和黃體細(xì)胞LHR 表達(dá)，促進(jìn)卵泡發(fā)育及排卵，促進(jìn)孕酮的合成，調(diào)節(jié)卵巢激素分泌；PRL 水平過高會造成卵泡中E水平降低，垂體LHR 水平降低以及其敏感性降低，雌激素正反饋機(jī)制障礙，LH 的脈沖分泌減弱，致使排卵障礙。何海迎等研究表明在體外培養(yǎng)的綿羊顆粒細(xì)胞中添加PRL 會抑制E分泌，促進(jìn)孕酮（P）分泌。

4.3 PRL 對卵泡血管發(fā)生和卵泡發(fā)育的影響 形態(tài)學(xué)研究表明，血管豐富的卵泡具有更好的發(fā)育能力，卵泡周圍的血管網(wǎng)越發(fā)達(dá)，則營養(yǎng)供給就越豐富，能夠獲得更多的促性腺激素及調(diào)控因子，卵泡發(fā)育良好；相反，卵泡周圍血管不足則引起卵泡閉鎖。卵泡血管發(fā)生開始于次級卵泡膜層形成時，隨著卵泡發(fā)育，逐漸形成兩個相互聯(lián)系的卵泡內(nèi)膜和卵泡外膜毛細(xì)血管網(wǎng)。

PRL 具有促進(jìn)血管發(fā)生的功能，血管生成對于卵泡的生長和成熟及其向黃體的過渡至關(guān)重要。卵泡內(nèi)膜細(xì)胞產(chǎn)生的PRL 通過JAK2-STAT5 通路促進(jìn)血管內(nèi)皮遷移和管的形成，并刺激非內(nèi)膜細(xì)胞產(chǎn)生FGF-2 和VEGF。VEGF 和FGF-2 是血管發(fā)生的關(guān)鍵信號分子，促進(jìn)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和血管通透性。卵泡顆粒細(xì)胞是VEGF 的主要來源，隨著卵泡的發(fā)育表達(dá)增加；卵泡膜細(xì)胞也能表達(dá)VEGF，但VEGF 受體（Vascular Endothelial Growth Factor Receptor，VEGFR）主要位于膜細(xì)胞層的內(nèi)皮細(xì)胞，表明VEGF 通過旁分泌起作用。有研究發(fā)現(xiàn)，卵泡VEGF 濃度在中等卵泡液中變化很大，并且與血管密度和E濃度的增加密切相關(guān)。FGF-2 通常分布于血管基底膜和內(nèi)皮下細(xì)胞外基質(zhì)，在缺氧和傷口愈合時高表達(dá)，可能與VEGF 存在復(fù)雜的互作關(guān)系。Hunter 等在大量發(fā)育的卵泡中發(fā)現(xiàn)FGF-2 呈現(xiàn)高水平表達(dá)，主要分布于卵泡內(nèi)膜細(xì)胞和外膜細(xì)胞。此外，促性腺激素可刺激顆粒細(xì)胞產(chǎn)生VEGF，促性腺激素支持不足可能降低卵泡血管化程度及隨后的功能受損。在嚙齒動物中，Vi 對VEGF存在拮抗作用，母豬斷奶后不發(fā)情，推測母豬斷奶后高水平的PRL 經(jīng)過水解產(chǎn)生Vi，從而影響了卵泡血管發(fā)生。

5 結(jié) 語

卵泡是卵巢的基本單位，卵泡的正常發(fā)育與雌性個體的健康及繁殖行為息息相關(guān)。卵泡發(fā)育是非常復(fù)雜的生物學(xué)過程，除了促性腺激素，PRL 在此過程中同樣發(fā)揮著重要作用，對PRL 進(jìn)行挖掘和研究有助于明確卵泡/生殖細(xì)胞的生長和發(fā)育機(jī)制，為提高哺乳動物的繁殖力提供依據(jù)。

另外，關(guān)于PRL/Vi 軸系統(tǒng)，PRL 的糖基化對Vi 生理的影響尚不清楚；但糖基化可能會改變PRL 的蛋白水解切割，從而可能影響Vi 的生成及其作用和清除。由于缺乏定量分析方法，個體循環(huán)內(nèi)源性Vi 的濃度難以確定。目前測定內(nèi)源性Vi 相對可靠的方法是免疫沉淀和蛋白質(zhì)印跡，但僅是半定量的，且存在較大的批間差異性。質(zhì)譜技術(shù)已成功應(yīng)用于確定血清中的Vi，但該技術(shù)仍是實驗性的，未能商業(yè)化。Vi 在糖尿病并發(fā)癥、癌癥和妊娠相關(guān)疾病中的臨床意義進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了對Vi 的定量測定的迫切需求。若可以快速建立循環(huán)中的Vi 水平和參考范圍，建立循環(huán)中Vi 的定量與診斷方法，對Vi 在健康和疾病中的作用的認(rèn)識將大大增強(qiáng)，并為將來的生物醫(yī)學(xué)研究提供方向。