寧平，郭堂勛，李其利，唐利華，黃穗萍，莫賤友

（1.廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)大學(xué) 南寧市 530007；2.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/廣西作物病蟲害生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 南寧市 530007）

芒果是具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的熱帶水果，主要分布于我國海南、云南、廣西、四川、廣東、福建等地。近幾年，芒果產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，據(jù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，2019年我國芒果種植面積就達(dá)到了323 000 ha，年產(chǎn)量近2 782 000 t[1]。廣西芒果產(chǎn)區(qū)主要在田東縣，該縣有“中國芒果之鄉(xiāng)”的美譽(yù)，截至2020年底，田東縣芒果種植面積達(dá)到了21 300 ha，年產(chǎn)量近230 000 t[2]，已成為芒果產(chǎn)區(qū)農(nóng)民脫貧致富、鄉(xiāng)村振興的主要產(chǎn)業(yè)之一。在芒果生產(chǎn)中有很多病害影響芒果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，其中由膠孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起的芒果炭疽病是芒果的主要病原之一。根據(jù)目前的分類，膠孢炭疽菌現(xiàn)被認(rèn)為是一個(gè)復(fù)合群，果生炭疽菌（Colletotrichum fructicola）是膠孢炭疽菌復(fù)合群里的一個(gè)種[3]。在中國，芒果果生炭疽菌是芒果炭疽菌的優(yōu)勢病原菌之一[4]，此病原菌早期侵染，氣候環(huán)境合適則在葉片上表現(xiàn)癥狀，采收后的貯運(yùn)期更容易發(fā)病，輕則產(chǎn)生黑色斑點(diǎn)，重則果實(shí)腐爛，影響果實(shí)外觀和品質(zhì)。因此，探索安全有效的防控芒果采后炭疽病的方法一直是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。在綜合防治措施中，農(nóng)業(yè)防治是基礎(chǔ)措施，而選用和推廣抗性良種是最安全且經(jīng)濟(jì)有效的農(nóng)業(yè)防治措施。近些年，針對芒果不同品種炭疽病抗性評價(jià)已有不少研究，早期Prakash O和Spalding D H是根據(jù)田間抗病表現(xiàn)篩選抗病品種[5-6]，后來肖倩莼比較了3種抗病品種篩選方法，獲準(zhǔn)確率較高的綜合篩選法[7]，劉羽和侯健采用離體葉片孢子液接種法鑒定了國內(nèi)外芒果種質(zhì)資源對炭疽病的抗病性[8-9]，任惠在2013年利用果實(shí)菌絲塊接種法對廣西主栽的8個(gè)芒果品種的對炭疽病抗性進(jìn)行鑒定[10]。隨著廣西芒果產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展、新品種的引進(jìn)，主栽品種也在發(fā)生變化。本研究選取了廣西12個(gè)芒果品種，通過自然發(fā)病觀察和室內(nèi)人工接種炭疽菌的實(shí)驗(yàn)來比較不同品種對炭疽病的抗病性。因芒果炭疽病潛伏期長，芒果采收后發(fā)病率仍然很高，采后炭疽病的防控方法有很多，有熱處理、涂膜保鮮、臭氧保鮮等[11-12]，此類保鮮措施側(cè)重于控制芒果外觀、硬度、可溶性物質(zhì)的變化，對芒果采后炭疽病的發(fā)生雖有延緩作用，但不能從源頭解決問題，因?yàn)槊⒐墒旌蟾癄€主要是因?yàn)樘烤揖谠缙谇秩径槐憩F(xiàn)癥狀，待條件成熟時(shí)發(fā)病。因此，芒果的貯藏應(yīng)從殺菌防病著手，減少芒果炭疽病的發(fā)生。本研究篩選廣西12個(gè)芒果品種的抗病性并比較不同藥劑對芒果采后炭疽病的防治效果，旨在為田間芒果不同品種合理布局和炭疽病防控提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株

芒果炭疽病病原菌來自芒果果實(shí)分離到的果生炭疽菌（Colletotrichum fructicola）。

1.1.2 供試芒果

12個(gè)品種均采自廣西百色國家農(nóng)業(yè)科技示范園區(qū)。

1.1.3 供試藥劑

250 g/L吡唑醚菌酯EC（凱潤）、50%多菌靈WP（國光）、250 g/L嘧菌酯SC（阿米西達(dá)）、450 g/L咪鮮胺EW（施?？耍?/p>

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 不同品種的芒果果實(shí)對炭疽病抗性評價(jià)

（1）采后觀察不同芒果品種果實(shí)自然發(fā)病情況。選取臺農(nóng)、桂七等12個(gè)芒果品種，從廣西百色國家農(nóng)業(yè)科技示范園區(qū)芒果資源圃中采摘顏色、大小一致，外觀健康無病的芒果果實(shí)，置于室溫下觀察其發(fā)生炭疽病的情況。炭疽病分級標(biāo)準(zhǔn)參照謝藝賢和符悅冠主編的《熱帶作物種質(zhì)資源抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)程》[13]：0級，無病斑；1級，病斑面積占果實(shí)面積的5%（含5%）以下；3級，病斑面積占果實(shí)面積的6%～15%；5級，病斑面積占果實(shí)面積的16%～25%；7級，病斑面積占果實(shí)面積的26%～50%；9級，病斑面積占果實(shí)面積的50%（含50%）以上。

（2）通過菌絲塊刺傷接種評價(jià)不同品種對芒果炭疽病的抗性：從廣西百色國家農(nóng)業(yè)科技示范園區(qū)芒果資源圃中采摘顏色、大小一致，外觀健康無病的12個(gè)品種的芒果果實(shí)。在果實(shí)表面用75%酒精消毒30 s，次氯酸鈉消毒1 min，晾干后采用針刺法接種，每處理10個(gè)果實(shí)，重復(fù)3次；用打孔器從培養(yǎng)5 d的菌落邊緣打出直徑0.5 cm的菌餅，在刺傷的針眼處接種一塊菌餅，帶菌絲面接觸果實(shí)傷口，以接種無菌的PDA瓊脂塊和刺傷不接種的芒果果實(shí)做對照；接種后蓋膜密封，在室溫28±2℃條件下，保濕（RH值為85%～90%）10 d開始調(diào)查發(fā)病情況，用十字交叉法測量病斑直徑。計(jì)算病情指數(shù)，評價(jià)其對炭疽病的抗病性。

病害級別分為6級：0級，無病斑；1級，接種點(diǎn)病斑直徑(d)≤0.5 cm；2級，0.5 cm＜d≤1 cm；3級，1 cm＜d≤2 cm；4級，2 cm＜d≤4 cm；5級，接種點(diǎn)病斑直徑＞4 cm[9]。

抗性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)參照陳業(yè)淵等[13]設(shè)置的芒果炭疽病分級標(biāo)準(zhǔn)，將芒果種質(zhì)抗性分為6級：1級，免疫（I），病情指數(shù)DI=0；2級，高度抗?。℉R），0＜DI≤20；3級，中度抗?。∕R），20＜DI≤40；4級，中度感?。∕S），40＜DI≤60；5級，感病（S），60＜DI≤80；6級，高度感?。℉S），DI＞80。

發(fā)病率（%）=發(fā)病點(diǎn)數(shù)/總接種點(diǎn)數(shù)×100

自然發(fā)病的病情指數(shù)=Σ（該級病果數(shù)×病級代表值）/（調(diào)查總果數(shù)×最高級代表值）×100

人工接種的病情指數(shù)=Σ（該級病斑個(gè)數(shù)×病級代表值）/（調(diào)查總病斑個(gè)數(shù)×最高級代表值）×100

1.2.2 4種藥劑對芒果采后炭疽病的防效

將4種殺菌劑分別按照推薦倍數(shù)稀釋到終濃度為咪鮮胺450 mg/L、多菌靈500 mg/L、嘧菌酯250 mg/L和吡唑醚菌酯250 mg/L，對照用清水，每處理3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10個(gè)果實(shí)，各浸泡3 min后取出，晾干后裝箱，放置室內(nèi)25℃～30℃條件下存放，每7 d觀察記錄1次發(fā)病情況，統(tǒng)計(jì)發(fā)病率并參照自然發(fā)病的病情指數(shù)計(jì)算公式來計(jì)算病情指數(shù)，評價(jià)不同藥劑對采后炭疽病的防控效果。

式中：CK為空白對照不浸藥液的病情指數(shù)，PT為處理組浸泡藥液的病情指數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種的芒果果實(shí)對炭疽病抗性評價(jià)

對不同芒果品種進(jìn)行了采后炭疽病自然發(fā)生情況調(diào)查，共調(diào)查了12個(gè)品種，從調(diào)查結(jié)果表明金穗芒、吉爾芒、凱特芒病情指數(shù)最高，均達(dá)79以上，最抗病的品種為紅象牙和金煌芒（見表1），尤其是金煌芒，發(fā)病率僅為20%，病情指數(shù)僅為8。人工接種12個(gè)品種，臺農(nóng)表現(xiàn)最感病，病斑直徑為2.39 cm，吉爾發(fā)病最輕，病斑直徑為0.54 cm（見表2）。

表1 芒果采后10 d炭疽病自然發(fā)病情況

表2 芒果采后人工接種10 d炭疽病發(fā)病情況

（續(xù)表2）

2.2 不同藥劑對芒果采后炭疽病的防治效果

4種殺菌劑對廣西主栽品種臺農(nóng)采后藥劑處理試驗(yàn)結(jié)果表明，果實(shí)經(jīng)藥劑處理后室溫放置7 d，250 mg/L吡唑醚菌酯處理的發(fā)病率為16.7%，病情指數(shù)2.38，好果率為83.3%，防治效果為84.38%，而對照發(fā)病率為90.0%，病情指數(shù)為15.24，好果率僅為10.0%（見表3）。藥劑處理后室溫放置14 d，不同藥劑處理的芒果果實(shí)發(fā)病率顯著提高，除吡唑醚菌酯發(fā)病率為93.3%外，其他處理芒果發(fā)病率均達(dá)100.0%。結(jié)果表明，吡唑醚菌酯可作為芒果果實(shí)采后炭疽病處理的首選藥劑。

表3 4種殺菌劑對臺農(nóng)果實(shí)炭疽病的防治效果

3 討論與結(jié)論

任惠等人的研究顯示紅彬林、帕拉英達(dá)表現(xiàn)為中抗，紅象牙表現(xiàn)為中感；本研究接種10 d后觀察與任惠接種4 d的研究結(jié)果一致[10]，紅象牙自然發(fā)病觀察表現(xiàn)為中抗品種，但人工接種卻為中度感病，可能與采摘的紅象牙果實(shí)未成熟或者是人工刺傷接種可能誘導(dǎo)果實(shí)產(chǎn)生抗病性有關(guān)。吉爾在人工接種表現(xiàn)為中抗，但自然發(fā)病觀察卻表現(xiàn)為感病，病情指數(shù)差異顯著，吉爾在肖倩莼田間初篩中表現(xiàn)為中抗，室內(nèi)復(fù)篩表現(xiàn)為中感，這與肖倩莼研究結(jié)果不一致，有待進(jìn)一步研究吉爾對炭疽病的抗性。金穗在人工接種表現(xiàn)為中感，但自然發(fā)病觀察卻表現(xiàn)為感病。綜合兩種抗性評價(jià)方法的結(jié)果表明，2種鑒定方法的病情指數(shù)比較接近的有9個(gè)品種，金煌芒果實(shí)對炭疽病的抗性最強(qiáng)，其次是紅彬林、帕拉英達(dá)、紅芒6號，臺農(nóng)、金星芒均表現(xiàn)為感病。

芒果采后保鮮防病的方法很多。肖敏用不同殺菌劑對海南粵西一號芒果進(jìn)行采后炭疽病的防治，25%施?？薊C 500倍液處理12 d后防效最高，多菌靈相對較差，后又試驗(yàn)了不同殺菌劑不同濃度對海南芒果采后炭疽病的防病保鮮效果，發(fā)現(xiàn)250 g/L吡唑醚菌酯EC 1 000倍液浸果處理對芒果采后病害的防效最高[15-16]。本研究也嘗試了咪鮮胺、吡唑醚菌酯和多菌靈對主栽芒果品種臺農(nóng)采后藥劑浸果保鮮的效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)吡唑醚菌酯7 d防治效果達(dá)84.38%，14 d防治效果達(dá)65.17%。蘇子寒等研究發(fā)現(xiàn)提取胡椒科的生物堿蓽茇酰胺防炭疽病效果優(yōu)于咪鮮胺[17]，蔡晨晨實(shí)驗(yàn)證明用百里香精油微膠囊復(fù)合涂膜對芒果炭疽菌具有一定的抑菌作用[18]，曾鳳實(shí)驗(yàn)證明用赤霉素處理采后芒果既可保鮮還能降低病情指數(shù)[19]，劉榮等實(shí)驗(yàn)證明赤霉素、殼聚糖和氯化鈣按照一定的比例混配可以延緩芒果的腐爛[20]，這些保鮮措施在一定程度上能夠延緩炭疽病的發(fā)生，但目前還未得到廣泛應(yīng)用。藥劑防治則是生產(chǎn)上用得較多且高效的防治方法，如250 g/L吡唑醚菌酯EC在芒果上的安全間隔期為7 d，而芒果從采收到運(yùn)輸，再到消費(fèi)者口中，通常超過7 d，只要科學(xué)用藥，不必?fù)?dān)心農(nóng)藥殘留超標(biāo)的問題。因此，芒果炭疽病的防治，應(yīng)在芒果生長的不同階段綜合運(yùn)用各種防病措施，在采摘前后進(jìn)行藥劑防治，減少芒果炭疽菌的侵染，進(jìn)而減少采后炭疽病的發(fā)生。

本研究篩選出金煌芒表現(xiàn)為中抗的品種1個(gè)，為芒果炭疽病的田間防控和芒果品種在田間合理布局提供科學(xué)依據(jù)。金煌芒的農(nóng)藝性狀好，果大甜度高，在梅州市栽培結(jié)果表明單果平均重量達(dá)1.19 kg，甜度約20，可食率80.6%[21]，可以在炭疽病發(fā)生嚴(yán)重的區(qū)域大力推廣。同時(shí)，為減少芒果采后炭疽病的發(fā)生，可以在果實(shí)采摘后通過藥劑浸果進(jìn)行化學(xué)防病處理。