鴨圓環(huán)病毒感染的診斷及防控

彭艷伶，陳世云，伍天碧，周可磊，李昊

（1.四川省西昌市動物疫病預防控制中心，四川 西昌 615050；2.四川省涼山州動物疫病預防控制中心，四川 西昌 615050；3.西昌學院，四川 西昌 615050）

圓環(huán)病毒是一類無囊膜單鏈環(huán)狀DNA病毒，屬于圓環(huán)病毒科，包括圓圈病毒屬、圓環(huán)病毒屬。鴨圓環(huán)病毒（DuCV）目前被列為圓環(huán)病毒屬的暫定種，DuCV 無囊膜，呈二十面體對稱，直徑為14～17 nm，基因組大小為2 kb。

感染DuCV 的病鴨在臨床上表現(xiàn)為發(fā)育遲緩、體重減輕及羽毛雜亂等。從病理學分析，感染DuCV鴨的免疫組織受損，導致淋巴細胞萎縮、凋亡甚至壞死等，從而讓鴨免疫力降低，對其他疾病易感，容易發(fā)生繼發(fā)感染和多重感染，DuCV與鴨大腸桿菌、鴨疫里默氏桿菌（RA）、鴨病毒性肝炎Ⅰ型病毒（DHV）等混感率較高。

1 臨床癥狀

病鴨為櫻桃谷肉鴨，其羽毛凌亂，羽軸出血，生長遲緩，站立不穩(wěn)，行走時雙腳向外叉開，呈八字腳。個別鴨癱瘓，腳皮干燥、無光澤，蹼有出血斑，流淚，眼周圍有淚圈，臉部一側(cè)有囊腫，排綠色、褐色稀便。

2 剖檢病變

剖檢20 羽病鴨，見心包積液，心臟有針點狀出血，個別的心尖彌漫性出血；胸腺萎縮，有出血點；喉頭變形；肝臟腫大，邊緣鈍圓，有的肝變性、壞死，與氣囊粘連，表面有淡黃色纖維素性滲出物；脾臟腫大或萎縮；胰腺有出血點；氣囊內(nèi)有白色或黃色纖維素性滲出物；臉部囊腫內(nèi)容物為黃色干酪樣物質(zhì)。

3 實驗室檢查

無菌采集病鴨胸腺、肝臟、脾臟、心臟、肺臟等組織。采集的樣本分為兩份，一份進行細菌分離，冷藏保存，一份進行鴨病原分子檢測，冷凍保存。

3.1 病料總核酸提取 取0.5 g胸腺、肝臟、脾臟、心臟、肺臟等組織置于2 mL EP 管中，加入滅菌PBS，于勻漿器進行研磨，反復凍融3 次，離心取上清，用總核酸提取試劑盒進行核酸提取。

使用實驗室建立的RT-qPCR 方法對坦布蘇病毒（DTMUV）、C型鴨肝炎病毒（DHCV）、A型鴨肝炎病毒（DHAV）、血清4 型禽腺病毒（FAdV-4）、禽肉瘤病毒（ASV）、新型鵝細小病毒（NGPV）、鴨圓環(huán)病毒（DuCV），番鴨細小病毒（MPDV）8 種病原進行檢測，所有檢測反應體系為：2×One Step SYBR Green Mix 10 μL、One Step SYBR Green Enzyme Mix 1 μL、上下游引物各1μL、模板2μL，ddH2O補足至20 μL，反應程序為：逆轉(zhuǎn)錄50 ℃3 min，預變性95 ℃30 s，循環(huán)反應95 ℃15 s，55 ℃20 s（循環(huán)數(shù)為40），溶解段：95 ℃15 s，60 ℃1 min，95 ℃15 s（循環(huán)數(shù)為1）。

引物序列見表1，RT-qPCR結(jié)果見圖1。

表1 常見病原檢測引物信息

圖1 RT-qPCR結(jié)果

3.2 細菌分離鑒定 無菌取鴨肝臟等病料分別接種于麥康凱瓊脂平板和血瓊脂平板，于37 ℃恒溫培養(yǎng)24～48 h，結(jié)果未見菌落生長。

在20份樣本中，有4份樣本為DuCV陽性，其他病原DTMUV、DHCV、DHAV、FAdV-4、ASV、NGPV和MPDV均為陰性。

4 防控

根據(jù)鴨場情況制定有效防控方法，降低鴨的死亡率，控制繼發(fā)感染。

4.1 加強消毒和飼養(yǎng)管理 對飼養(yǎng)環(huán)境、鴨群、器具、飲水、飼料等進行嚴格消毒，使用0.3%的過氧乙酸帶鴨消毒，飲水用2%～5%的含氯量25%以上漂白粉消毒，消毒液現(xiàn)配現(xiàn)用。加強進出場人員的隔離和管理。

加強飼養(yǎng)管理，改善養(yǎng)殖環(huán)境，增加飼料營養(yǎng)，提高病鴨抵抗力。

病鴨、疑似感染鴨隔離飼養(yǎng)，病死鴨進行無害化處理。

4.2 治療

緊急利用抗病毒類中草藥板藍根10 g、黃芪10 g、金銀花10 g、連翹10 g、黨參5 g、蒼術(shù)5 g、當歸5 g、白術(shù)3 g、陳皮3 g進行治療。

5 小結(jié)

鴨圓環(huán)病毒可造成免疫抑制，導致其感染其他病原而死亡。

臨床上防控鴨圓環(huán)病毒傳播和流行應加強早期診斷，發(fā)現(xiàn)疑似病例要及時隔離及治療。避免該病造成損失，應做好平時防控和消毒。