隱孔菌的研究進展

胡建平

（慶元縣食用菌科研中心，浙江 慶元 323800）

隱孔菌（Cryptoporus volvatus）屬擔子菌亞門（Basidiomycotina）層菌綱（Hymenomycetes）非褶目（Aphyllophorales）多孔菌科（Polyporaceae）隱孔屬（Cryptoporus）[1]，又稱荷色菌、松橄欖、樹疙瘩等。2000年在我國云南分布的隱孔菌被鑒定為一個新種，即中華隱孔菌（Cryptoporus sinensis）。隱孔菌的應用由來已久，是民間的常用藥材，主要用于治療氣管炎和哮喘，在《新華本草綱要》和《滇南本草》等典籍中均有記載[2-3]。

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，隱孔菌在肺部疾病的預防和治療方面表現(xiàn)出色，且隱孔菌多糖、隱孔酸等活性成分具有抗腫瘤作用，是一種很有開發(fā)前景的中藥。然而，隱孔菌雖然分布廣闊，總體而言野生資源卻不多，不能很好的滿足市場需求；而且相關(guān)研究滯后，近年來報道的學術(shù)論文較少。為更好地研究隱孔菌，解決其資源稀缺問題，現(xiàn)對相關(guān)的研究進展進行綜述。

1 形態(tài)特征及分布

隱孔菌子實體為扁球形或球形，無柄或有柄基部，菌蓋木栓質(zhì)，表面光滑，深蛋殼色，菌幕白色，菌蓋邊緣鈍圓，與白色菌幕相連，菌幕幼嫩時全部復蓋子實層，后期于近基部形成一個弓形的孔口，子實體形如一空囊。長直徑2 cm～5 cm，短直徑1.5 cm～4.0 cm。菌管長3 mm～5 mm，管口圓形，數(shù)量為每毫米3個～5個。孢子無色，卵圓形，平滑，長9 μm～11 μm，寬7 μm～8 μm[3]。隱孔菌由生殖、骨架和聯(lián)絡等3種菌絲組成，發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲幾乎均為生殖菌絲，該菌絲細胞壁薄，菌絲多分枝，有鎖狀聯(lián)合[4]。

隱孔菌為木腐菌，常著生在馬尾松（Pinusmassoniana Lam b.）枯立木的背影面，或倒木的向地面，也生于多種松樹及冷杉、云杉等樹干或其枯木上[4]。野生菌株分布較廣，在黑龍江、吉林、四川、浙江、云南、海南、廣東、廣西等省份均有發(fā)生[5-10]。在杭州地區(qū)，每年5月～6月特別是梅雨季節(jié)時，濕度高，溫度適宜，其子實體生長發(fā)育快，6月上旬即可采到子實體，7月～8月大量子實體成熟[4]。隱孔菌也可生活在氣溫較低的地區(qū)，如在西藏海拔1 900 m～3 000 m區(qū)域有分布[11]；在位于吉林省撫松縣寒溫帶濕潤氣候的原始林中也有分布[12]。

2 主要成分及藥用藥理

2.1 主要活性成分

2.1.1 隱孔酸

上世紀90年代，日本學者發(fā)表了系列研究論文對隱孔酸進行詳細報道[13-18]。2002年，Gabriela等[19]提取分離出了隱孔酸H、隱孔酸I。2011年Wu等[20]從中華隱孔菌中分離出來4種隱孔菌酸，分別以隱孔酸J、隱孔酸K、隱孔酸L、隱孔酸M來命名。同年，Wu等[21]從隱孔菌中采用甲醇提取分離出隱孔菌酸G等4種隱孔酸及其異構(gòu)衍生物。Wang等[22]分離出隱孔酸R、隱孔酸G二甲基酯。周凌云等[23]從隱孔菌子實體中分離出隱孔酸的異構(gòu)衍生物，分別是隱孔酸A三甲酯、隱孔酸D四甲酯、隱孔酸C五甲酯、隱孔酸B三甲酯。

2.1.2 揮發(fā)油

華啟洪等[24]采用氣質(zhì)聯(lián)用儀（GC-MC）分析，鑒定出19種隱孔菌揮發(fā)油化合物。吳錦忠等[25]通過水蒸氣蒸餾提取，氣質(zhì)聯(lián)用數(shù)據(jù)系統(tǒng)（GC-MS-DS）分析技術(shù)，從隱孔菌子實體中分離鑒定出29種成分，其中包含11種萜類化合物、12種脂肪族化合物、6種芳香族化合物，其中大部分化合物首次被分離檢出。

2.1.3 多糖

多糖作為食（藥）用菌中最常見的活性物質(zhì)，具有提高人體免疫力、抗腫瘤等多種作用，隱孔菌的多糖成分也是眾多學者研究的重點。日本學者Kitamura等[26]在隱孔菌發(fā)酵菌絲中提取出了多糖，并經(jīng)過動物試驗證明其在抑制腫瘤方面的作用。王政等[27]發(fā)現(xiàn)發(fā)酵法培養(yǎng)的隱孔菌菌絲的多糖含量顯著高于子實體中的多糖含量?？聜骺萚28]提取出了隱孔菌中相對分子量在2 k～200 k的多糖，經(jīng)檢驗發(fā)現(xiàn)此類多糖由巖藻糖、木糖、甘露糖和半乳糖鏈接而成。

2.1.4 麥角甾醇

隱孔菌含有麥角甾醇以及麥角甾醇過氧化物。馬偉光等[29]隱孔菌從子實體中分離得到了4種隱孔菌所含的麥角甾醇類物質(zhì)。

麥角甾醇過氧化物分布廣泛，在靈芝（Ganoderma lucidum）、雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）、隱孔菌等許多食（藥）用菌中均有檢出[30-32]，其在抗腫瘤和抗炎等方面有較好的作用[33]。高麗等[34]發(fā)現(xiàn)隱孔菌提取物對豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）感染有較強的抑制作用，并分離出其中的主要成分為麥角甾醇過氧化物，試驗證明其是通過宿主細胞發(fā)揮作用從而抑制病毒的感染，而不是直接發(fā)揮抗病毒作用。

2.1.5 其他活性成分

除以上幾種活性成分外，其他的活性成分也有報道。Ma等[35]采用免疫熒光技術(shù)從隱孔菌中分離純化出了一種新的化合物，是一種含有羧基、酰胺基的多元醇。研究表明，隱孔菌還含有維生素、核苷類、生物堿等其他活性成分。通過化學分析也表明，不管是隱孔菌子實體還是發(fā)酵菌絲體，主要活性成分以多糖、麥角甾醇和芳香物質(zhì)等為主[36]。

隨著科技的進步和先進技術(shù)的應用，隱孔菌中越來越多的活性成分被發(fā)現(xiàn)。但隱孔菌的主要活性成分、各活性成分的主要作用等仍然需要更多的研究。

2.2 隱孔菌的藥用

隱孔菌的藥用價值在多部中醫(yī)藥典籍中均有記載[2-3，37-38]，其在止疼、抗腫瘤、止咳平喘、治療氣管炎和哮喘等方面有著較為突出的表現(xiàn)。但目前隱孔菌用于藥物開發(fā)的研究仍然較少，這與其藥理研究還不透徹有重要關(guān)系。

2.3 藥理研究

2.3.1 抗腫瘤作用

試驗發(fā)現(xiàn)，隱孔菌子實體的提取物中含有抗腫瘤活性物質(zhì)。Kitamura等[39]報道稱其水提取物（1→3）-β-D-葡聚糖具有抗腫瘤活性。Narisawa等[40]報道隱孔酸E對大鼠結(jié)腸瘤和小鼠結(jié)腸癌有抑制作用；Matsunaga等[41]認為隱孔酸等活性成分抗腫瘤作用的主要機制是抑制超氧陰離子自由基釋放；從隱孔菌的發(fā)酵菌絲中提取分離的多糖經(jīng)動物試驗表明具有抑制腫瘤細胞增長的作用[42]。武文等[43]經(jīng)過抗腫瘤活性篩選證明隱孔酸B、隱孔酸G等具有弱細胞毒性，但比抗腫瘤藥順鉑的毒性低。

腫瘤是目前人類面對的重大健康殺手，如何在眾多藥物活性成分中找到既有作用又相對安全的材料作為制備抗腫瘤的安全藥物是需要解決的重大問題。隱孔菌在抗腫瘤作用中表現(xiàn)突出，可成為今后相關(guān)研究的重要突破口。

2.3.2 抗炎、平喘作用

諸多試驗研究表明隱孔菌發(fā)酵物（CVFS）和隱孔菌多糖對于抗炎、平喘有顯著的作用。但是由于發(fā)酵物成分復雜，具體的活性成分及其抗炎、平喘的作用機理等仍需進一步研究，方可為開發(fā)藥物提供理論基礎。

趙曉燕[44]研究了致敏蛋白對氣道炎癥模型的影響，通過采用整體試驗法觀察到CVFS對嗜酸粒細胞和炎癥細胞有明顯的抑制作用，可改善肺功能。包兆勝[45]的研究表明CVFS可以抑制哮喘小鼠模型的脾指數(shù)降低和中性嗜酸粒細胞的增加，從而減輕小鼠的肺過敏炎癥，保護肺功能。金賽紅等[46]認為CVFS通過抑制中性粒細胞的白三烯以發(fā)揮其抗炎作用。謝強敏等[47]認為CVFS通過調(diào)節(jié)Th1細胞和Th2細胞的平衡起治療哮喘作用。

鄧俊芳[48]研究表明，隱孔菌多糖通過減少嗜酸性粒細胞趨化因子mRNA表達和嗜酸性細胞（Eos）活化來減輕過敏性蛋白誘發(fā)的變應性鼻炎（AR）。姚紅伊[49]研究表明隱孔菌多糖具有抗炎、抗氧化等多方面作用。陳黎[50]認為經(jīng)過純化的隱孔菌多糖，在抗炎等方面明顯優(yōu)于CVFS，純化的隱孔菌多糖可能是CVFS抗過敏性主要成分。隱孔菌提取物能在體內(nèi)外抑制豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）感染，Gao等[51]研究發(fā)現(xiàn)，提取物直接抑制PRRSV RNA依賴性RNA聚合酶（RdRp）活性，從而干擾PRRSV RNA和蛋白合成，進而抑制PRRSV感染。

3 人工培養(yǎng)

3.1 子實體栽培

隱孔菌子實體栽培研究較少。屠六邦等[52]研究發(fā)現(xiàn)，松針培養(yǎng)基能長出成熟的子實體，杉葉培養(yǎng)基中只能長出原基。趙琪等[53]發(fā)明了以針葉木屑、棉籽殼、麩皮、過磷酸鈣、石膏等原輔材料栽培隱孔菌子實體的方法。

3.2 發(fā)酵培養(yǎng)

隱孔菌雖然是腐生真菌，但由于其生長對環(huán)境要求嚴格，導致野生資源緊缺。通過比較野生隱孔菌和發(fā)酵培養(yǎng)物的次生產(chǎn)物，結(jié)果表明，發(fā)酵培養(yǎng)物所含的成分種類與野生隱孔菌的基本相似[54-59]，因此發(fā)酵培養(yǎng)可作為獲取隱孔菌的重要途徑。但目前其發(fā)酵工藝研究學術(shù)論文較少，相關(guān)參數(shù)仍需進一步研究優(yōu)化。

吳錦忠等[57]比較了不同隱孔菌培養(yǎng)基，結(jié)果以玉米培養(yǎng)基（玉米粉2%、蔗糖2%、蛋白胨0.2%、酵母膏0.2%、KH2PO40.1%、MgSO40.06%，pH自然），培養(yǎng)溫度15℃～18℃，培養(yǎng)7 d～8 d條件下培養(yǎng)的隱孔菌菌絲產(chǎn)量最高，經(jīng)過濾得到的新鮮菌絲體占總發(fā)酵液19.90%，菌絲含水量97.05%。華啟洪等[59]發(fā)明了利用發(fā)酵法培養(yǎng)制備隱孔菌菌絲粉的生產(chǎn)方法，該方法的培養(yǎng)溫度為23℃～30℃，菌種接種后采用壓差法，發(fā)酵罐壓46 kPa～98 kPa，最后將發(fā)酵好的菌絲經(jīng)烘干、粉碎等工序得到隱孔菌菌粉。

4 結(jié)語

近年來，霧霾天氣發(fā)生頻繁，新型冠狀病毒肆虐，隱孔菌因具有抗炎、平喘、抗癌、抗病毒等方面的作用，可開發(fā)成為一種應用廣泛的藥用菌。然而當前隱孔菌的栽培和發(fā)酵工藝研究均不夠深入。進一步探索優(yōu)化隱孔菌的栽培工藝，擴大子實體的產(chǎn)量，優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)工藝條件，從而獲得成本更低、周期更短的培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)工藝參數(shù)，促進隱孔菌的發(fā)酵培養(yǎng)工業(yè)化，才能提高隱孔菌菌絲體產(chǎn)量，解決其資源緊缺問題。這是今后研究的主要任務，關(guān)系到隱孔菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展與壯大。