羊布氏桿菌病的診斷和防治措施

(馬鞍山市和縣動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽 和縣 238200)

0 引言

布氏桿菌病不僅會(huì)感染各種家畜，而且會(huì)感染人類，是一種較為嚴(yán)重的慢性傳染疾病，當(dāng)羊出現(xiàn)布氏桿菌病時(shí)，顯著特征是生殖器官和胎盤發(fā)炎，同時(shí)會(huì)出現(xiàn)不育、流產(chǎn)和局部病癥[1]。更為不利的一點(diǎn)是，羊布氏桿菌病多為隱性感染，這導(dǎo)致臨床診斷的難度會(huì)有所增加，若是未能做好及時(shí)診斷，勢(shì)必影響到后續(xù)的治療。除此之外，目前還未有針對(duì)羊布氏桿菌病的治療藥物，開展有效的預(yù)防工作顯得尤為重要。

1 流行特點(diǎn)

羊布氏桿菌病的病原是布氏桿菌，其可以較為廣泛地存在于羊的生殖器官、血液與內(nèi)臟中。布氏桿菌有很強(qiáng)的抵抗外界環(huán)境的能力，比如可以在干燥的土壤中存活較長的時(shí)間，目前研究結(jié)果顯示存活的時(shí)間可以達(dá)到37 d，而在胎兒體內(nèi)和陰暗處存活的時(shí)間更長，通常可以達(dá)到6個(gè)月。

羊布氏桿菌對(duì)綿羊、山羊、牛、鹿和人的致病性較強(qiáng)。布氏桿菌病之所以在羊群中較大范圍的傳播，原因在于其傳播途徑較多，可經(jīng)消化道、呼吸道、生殖系統(tǒng)黏膜及損傷甚至未損傷的皮膚等多種途徑傳播。羊布氏桿菌病的主要傳染源有病羊和帶菌羊，且病菌會(huì)不定期排出體外，主要是隨著精液、乳汁、胎衣、陰道分泌物排出體外。易感性隨性成熟年齡接近而增高，母羊較公羊易感。在長期研究過程中發(fā)現(xiàn)，羊布氏桿菌病并未存在明顯的季節(jié)性。

2 臨床癥狀

羊布氏桿菌病的感染癥狀一般較為隱秘，有很多病例是隱形感染。對(duì)于妊娠羊來說，最為主要的癥狀是流產(chǎn)，通常情況下流產(chǎn)會(huì)發(fā)生在妊娠后的3～4個(gè)月，并且在妊娠羊流產(chǎn)前2～3 d會(huì)出現(xiàn)體溫升高的情況。對(duì)于公羊來說，所出現(xiàn)的癥狀表現(xiàn)較多，包括睪丸會(huì)上縮、行走困難、飲食量減少，在感染過程中會(huì)逐漸消瘦，甚至失去配種能力，觸診過程中會(huì)發(fā)現(xiàn)公羊睪丸局部發(fā)熱和疼痛[2]。

除此之外，患病羊的精神沉郁、食欲減退是較為常見的癥狀，若長時(shí)間行走困難而導(dǎo)致取食不足時(shí)，嚴(yán)重時(shí)會(huì)出現(xiàn)饑餓而死的情況?？偟膩碚f，雖然病羊在流產(chǎn)后可以治愈，但卻會(huì)終身攜帶病菌，一些感染較重的病羊可能會(huì)終身不愈，山羊的治愈時(shí)間慢于綿羊。

3 診斷要點(diǎn)與方法

3.1 診斷要點(diǎn)

在開展羊布氏桿菌病的診斷時(shí)，要把握好癥狀和病變兩方面的要點(diǎn)。在癥狀診斷方面，要對(duì)病羊所表現(xiàn)出各類癥狀開展全面的判斷與分析，確保從癥狀表現(xiàn)上及時(shí)確診。從病變?cè)\斷這一角度來說，羊布氏桿菌病的病變主要發(fā)生在生殖器官。胎盤絨毛膜下組織會(huì)出現(xiàn)黃色膠樣浸潤與出血，嚴(yán)重時(shí)會(huì)出現(xiàn)糜爛和壞死的情況。胎兒的皮下和肌肉會(huì)有出血浸潤的情況，胎兒胃特別是第四胃中有淡黃色或白色黏液絮狀物[3]。另外，胎兒的腸胃和膀胱漿膜下可見有點(diǎn)狀或線狀出血。臍帶常呈黏液性浸潤、肥厚。公羊生殖器官可能有出血點(diǎn)或壞死灶，睪丸和附睪可能有炎性壞死灶和化膿灶。結(jié)合羊布氏桿菌病的特點(diǎn)，在實(shí)際診斷時(shí)單純依靠一種診斷方式是無法精準(zhǔn)確診，必須將多種診斷方式結(jié)合起來，即將臨床癥狀、病理變化、實(shí)驗(yàn)室檢查這3種方式結(jié)合起來。

3.2 診斷方法

3.2.1 病原學(xué)檢查

病原學(xué)檢查時(shí)取病羊胎盤絨毛葉組織直接涂片，涂片主要優(yōu)先使用流產(chǎn)胎兒胃液或陰道分泌物，然后使用經(jīng)過改良的齊爾一尼爾森石炭酸復(fù)紅原液的稀釋液來染色處理，通常染色處理時(shí)間在10 min。繼而使用0.5%的醋酸溶液來脫色，脫色時(shí)間需要控制在20 s，待完成脫色處理后需要使用1%的美藍(lán)復(fù)染20 s。通過鏡檢可以發(fā)現(xiàn)布氏桿菌會(huì)將抹片染為紅色，背景色為藍(lán)色，同時(shí)可以發(fā)現(xiàn)布氏桿菌會(huì)大部分存在于細(xì)胞內(nèi)，只有少數(shù)會(huì)存在于細(xì)胞外部。在病原學(xué)檢查過程中需要特別注意，雖然衣原體和胎兒弧菌也會(huì)引發(fā)流產(chǎn)的癥狀，并將抹片染成紅色，但形態(tài)與布氏桿菌的形態(tài)會(huì)有很大的不同，可以較為輕易地區(qū)別開來。

3.2.2 血清學(xué)檢查

從當(dāng)前羊布氏桿菌病的血清學(xué)檢查來看，常用的方法有虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。其中的虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)最為常用。以補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)為例來說，其是一種較為特異的反應(yīng)，對(duì)于羊布氏桿菌病來說，往往凝集反應(yīng)檢測(cè)結(jié)果會(huì)顯示為陰性，但補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是陽性。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)與試管凝集反應(yīng)是一樣的，均被視為羊布氏桿菌病檢測(cè)的法定方法，但因?yàn)椴僮鬏^為復(fù)雜所以無法廣泛性使用。再以虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)為例來說，在實(shí)際生活中的應(yīng)用較為廣泛，非常值得推廣應(yīng)用。具體來說，虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)的原理為：當(dāng)羊感染布氏桿菌后，機(jī)體的免疫系統(tǒng)會(huì)形成抗體，此時(shí)可以將病羊被感染的血清制作成抗原，并與等量的待檢血清相混合，若是待檢血清中存在抗體，則會(huì)與抗原相結(jié)合，并產(chǎn)生沉淀物質(zhì)，稱之為陽性。若是沒有出現(xiàn)沉淀物質(zhì)，則稱之為陰性，表明羊未被感染。在開展虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)時(shí)，主要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括離心機(jī)、抗原、5 mL離心管、微量移液器、牙簽、5 mL采血注射器。在實(shí)驗(yàn)過程中，工作人員先采病羊靜脈血3 mL，注入到離心管，做好標(biāo)記；而后對(duì)采集血進(jìn)行離心處理，以4 000 r/min的速率離心處理7 min；使用微量移液器吸取0.03 mL的血清，放置到玻璃板上；將0.03 mL抗原與血清混合處理。需要特別注意每只羊必須單獨(dú)使用一個(gè)吸頭，4 min后查看實(shí)驗(yàn)結(jié)果。未出現(xiàn)凝集時(shí)記為陰性，出現(xiàn)少量凝集通常需要再復(fù)檢，為確保診斷結(jié)果，通常需要進(jìn)一步通過細(xì)菌學(xué)和生化實(shí)驗(yàn)來確診。

3.2.3 變態(tài)反應(yīng)檢查

工作人員需要將0.2 mL的布氏桿菌水解素注射到羊尾根皺襞部皮內(nèi)，在注射后的24 h和48 h均觀察1次。若是觀察時(shí)發(fā)現(xiàn)羊的注射部位出現(xiàn)紅腫，則可以判定為陽性。變態(tài)反應(yīng)檢查在羊布氏桿菌病的診斷中具有很高的敏感性，檢出率高，同時(shí)不會(huì)對(duì)血清學(xué)檢查造成影響，值得推廣應(yīng)用。

4 防治措施

從當(dāng)前的研究成果來看，羊布氏桿菌病并未有針對(duì)性的治療藥物，防控工作應(yīng)當(dāng)著重體現(xiàn)“預(yù)防為主”的原則，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，引種時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行檢疫。

4.1 做好凈化和淘汰

為有效做好免疫凈化工作，養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)該對(duì)羊開展定期的檢疫，可在春秋兩季采用普查的方法來掌握羊是否存在發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。在此過程中必須對(duì)每一只羊進(jìn)行100%的檢疫和凈化，全部進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，若是檢測(cè)結(jié)果顯示為陽性則要及時(shí)淘汰，并對(duì)病羊所生活的環(huán)境開展全面性的消毒處理，病羊必須進(jìn)行無害化深埋或焚燒[4]。除此之外，羊群感染后不具有太大的治療價(jià)值，防治措施是開展羊群檢疫，及時(shí)隔離檢測(cè)結(jié)果呈陽性和可疑反應(yīng)的羊，嚴(yán)禁病羊與可疑羊和健康羊產(chǎn)生接觸。

4.2 定期檢疫

在羔羊斷乳后要及時(shí)進(jìn)行1次布氏桿菌病的檢疫，成年羊可以2年檢疫1次，也可以每年做好預(yù)防接種而不需要檢疫。養(yǎng)殖戶必須要對(duì)檢疫出的陽性羊進(jìn)行撲殺，禁止留養(yǎng)。

4.3 免疫接種

始終堅(jiān)持自繁自養(yǎng)的原則，避免從疫區(qū)引進(jìn)羊，對(duì)于引進(jìn)的羊要嚴(yán)格執(zhí)行隔離措施，在規(guī)定的隔離時(shí)間內(nèi)未發(fā)現(xiàn)布氏桿菌病風(fēng)險(xiǎn)后方可混入羊群飼養(yǎng)。新生的羔羊在經(jīng)過檢疫顯示為陰性，則要及時(shí)注射豬布魯氏菌S2株疫苗，也可以采取飲服的方式。在疫苗注射中，可以優(yōu)先使用肌肉注射方式，每只羊要注射25億菌[5]。

4.4 控制和消滅傳染源

在羊的日常飼養(yǎng)過程中，務(wù)必做好羊舍的消毒工作，最大限度減少疾病傳播。具體來說，需要定期對(duì)羊舍開展全方位的消毒，嚴(yán)格禁止在羊舍屠宰，同時(shí)要限制外來人員進(jìn)出養(yǎng)殖場(chǎng)，這樣可以有效降低羊布氏桿菌病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于妊娠羊的流產(chǎn)物和病死羊必須嚴(yán)格執(zhí)行深埋處理，對(duì)其污染的環(huán)境可用20%漂白粉或10%石灰乳進(jìn)行消毒。病、健羊群分區(qū)放牧；病羊用過的牧場(chǎng)需經(jīng)3個(gè)月自然凈化后才能供健康羊群使用。

5 結(jié)語

羊布氏桿菌病是人畜共患傳染病，危害養(yǎng)殖業(yè)，影響人類健康，應(yīng)給予高度重視，認(rèn)真落實(shí)好羊布氏桿菌病的防治工作。要將羊布氏桿菌病的診斷與防治始終放在重要位置上，定期開展檢疫和診斷，將病羊和可疑羊及時(shí)處理，始終確保羊群的健康與安全。