醫(yī)學(xué)院校加強生物實驗室安全教育的思考

裴 明，胡曉玥

（1.太原市衛(wèi)生學(xué)校，山西 太原 030012；2.山西醫(yī)科大學(xué)，山西 晉中 030600）

實驗室生物安全是指實驗室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平，可避免實驗室人員、來訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到不可接受的損害，符合相關(guān)法規(guī)、標準等對實驗室生物安全責(zé)任的要求。根據(jù)不同實驗室的操作內(nèi)容和危害程度，應(yīng)在不同等級的生物安全實驗室開展實驗活動[1]。作為一名從事病原生物學(xué)與免疫學(xué)基礎(chǔ)教學(xué)和科研的教師，在實驗室做實驗或課題研究過程中，如何加強學(xué)生實驗室安全意識培養(yǎng)，避免生物毒性因子的暴露、有毒化學(xué)藥品的泄露，有效阻止其向周圍環(huán)境和人群擴散，顯得尤為重要。因此，筆者擬從實驗前、實驗中、實驗結(jié)束后幾方面談?wù)剬訌妼嶒炇疑锇踩逃乃伎肌?/p>

1 實驗前加強實驗安全意識教育

1.1 加強新生入學(xué)安全教育

為打造平安和諧的校園，每年新生入學(xué)教育的安全教育課程中，都將實驗室安全列入其中，這也是新生進入實驗室的第一課。教師通過介紹國內(nèi)外高校發(fā)生的實驗室安全事故，使學(xué)生認識到出現(xiàn)事故的主要原因是違反實驗操作規(guī)程或?qū)嶒灢僮鞑划?，?yīng)引起高度關(guān)注。實驗室安全事故中爆炸與火災(zāi)占比最高，第二是化學(xué)有毒藥品的泄露，第三是生物安全，第四是中毒。這些事故離我們很近，時刻都有可能發(fā)生在我們身邊，因此學(xué)生要把實驗室安全意識扎根心中。

1.2 認真學(xué)習(xí)實驗室安全知識，嚴格實驗室準入制度

大多數(shù)學(xué)生進入實驗室前未經(jīng)過系統(tǒng)的安全教育培訓(xùn)，缺乏必要的實驗室安全知識。學(xué)生進入實驗室前，要了解國家的有關(guān)法律法規(guī)，如《國家危險廢物名錄》《醫(yī)療廢物管理條例》《病原微生物實驗室生物安全管理條例》《實驗室生物安全通用要求》《實驗室生物安全手冊》等，由于實驗課時的限制，這部分內(nèi)容可在課前自學(xué)[2]。進入實驗室后，要認真學(xué)習(xí)相應(yīng)實驗室的安全管理制度、實驗儀器設(shè)備的使用規(guī)定、實驗室的注意事項等。做實驗前組織考核，可以通過學(xué)習(xí)通App、問卷星等，以選擇題方式進行測試，合格者方可進入實驗室做實驗。通過學(xué)習(xí)和考核，學(xué)生的實驗室安全意識大大增強。

另外，嚴格實驗室準入制度。在儀容儀表上，首先要穿實驗服，摘除首飾，不留長指甲，長發(fā)應(yīng)扎好，避免在實驗過程中長發(fā)遮蓋眼睛，用手整理時引發(fā)危險或使用酒精燈時燒著頭發(fā)；在實驗室不穿露腳趾的鞋，防止試劑直接滴灑在皮膚上；進行特殊實驗時要求學(xué)生穿隔離衣并戴口罩、護目鏡、防毒面具。在行為規(guī)范上，在實驗室不吸煙、不吃零食、不化妝打扮、不戴隱形眼鏡等；實驗臺上不放書包、衣服等與實驗無關(guān)的物品。

1.3 實驗教師要不斷提升個人素質(zhì)

實驗教師作為實驗室的第一責(zé)任人，不僅要具備豐富的理論知識及熟練的操作技能，還要具有學(xué)習(xí)新知識的興趣和能力[3]。學(xué)校要鼓勵和組織實驗教師參加有關(guān)實驗室生物安全的交流、培訓(xùn)活動，不斷更新實驗教師的實驗室安全知識，提高綜合業(yè)務(wù)素養(yǎng)。實驗教師在實驗室建設(shè)、管理、合理使用過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，也是保證學(xué)生實驗安全的重要力量。

2 實驗中嚴格遵守實驗操作規(guī)范

2.1 根據(jù)實驗教學(xué)大綱合理安排實驗內(nèi)容

學(xué)校根據(jù)實驗室和學(xué)生實際情況安排實驗教學(xué)，既要保證實驗課的開出率，又要考慮到學(xué)生實驗的安全性。教研室授課教師和實驗教師集體備課，對實驗教學(xué)內(nèi)容進行調(diào)整，采取逐層遞進原則，首先設(shè)置一些基本的驗證性實驗，其次設(shè)置綜合性實驗，最后設(shè)置創(chuàng)新設(shè)計性實驗，在保證學(xué)生掌握實驗室基本操作技能和實驗規(guī)范的基礎(chǔ)上，注重培養(yǎng)其實踐能力和創(chuàng)新能力。

在病原微生物實驗室開設(shè)的驗證性實驗包括細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查法、培養(yǎng)基的配制、細菌的分離與培養(yǎng)、藥敏試驗等；綜合性實驗主要是細菌的生化實驗和鑒定；設(shè)計性實驗在實驗材料選擇上盡量選擇容易得到的、安全性能高的、學(xué)生感興趣的材料，讓學(xué)生自主設(shè)計實驗步驟、流程，不僅可以大大提高學(xué)生的實驗積極性，還能加強學(xué)生對理論知識的理解。如在人體天然防御功能實驗中，可選擇學(xué)生自己的唾液作為實驗材料，做唾液中溶菌酶的殺菌實驗。對一些操作時間長、難度大的實驗，可以選取部分內(nèi)容對學(xué)生進行示范教學(xué)，這就要求教師在實驗前做更多準備工作和預(yù)實驗，也可選擇一些認真負責(zé)的學(xué)生參與進來和實驗教師共同完成，這對學(xué)生來說是一個很好的鍛煉機會，對實驗教師來說也減輕了工作量。對有可能造成學(xué)生感染的實驗，可以采用錄像教學(xué)或虛擬實驗方式，不但彌補了實驗課時的不足，還開闊了學(xué)生的視野。

2.2 在實驗中培養(yǎng)無菌操作意識

病原生物實驗室與其他生物實驗室有很大不同，有微生物培養(yǎng)，實驗過程中要嚴格按照無菌操作規(guī)范進行。如在進行細菌培養(yǎng)過程中，接種前要對接種環(huán)進行燒灼滅菌處理（有可能被環(huán)境中的微生物污染），接種過細菌的接種環(huán)一定要再次燒灼滅菌后再放回接種環(huán)架（避免接種環(huán)上殘留的細菌污染環(huán)境）。雖然實驗室一般選取的菌種標本是安全的，但學(xué)生在操作時可能由于不熟練導(dǎo)致菌種被污染，而實驗中的標本和培養(yǎng)物均有可能具有傳染性，要做好個人防護措施。實驗室所有用過的樣本、培養(yǎng)物和廢棄物應(yīng)假定有傳染性，要以安全方式進行處理。任何使形成氣溶膠的危險性上升的操作都必須在生物安全柜里進行，盡可能使氣溶膠或氣霧的形成控制在最小限度，有害氣溶膠不得直接排放[4]。盡量避免使用尖銳物品（如一次性手術(shù)刀、針頭、玻璃等），使用后的利器應(yīng)放入利器盒中，不能隨意丟棄。

2.3 培養(yǎng)嚴謹?shù)膶嶒瀾B(tài)度，養(yǎng)成良好的實驗習(xí)慣

良好的實驗習(xí)慣是實驗科研工作的重要組成部分，是減少實驗事故的有力保障[5]?？茖W(xué)實驗都是非常嚴謹細致的，容不得半點馬虎，實驗過程中要嚴格要求自己。

在使用水電的時候一定不要離開，萬一要離開，應(yīng)請其他人幫忙照看；實驗過程中要按實驗步驟逐步完成，不要為了省時省事而同時進行幾項不可能完成的事情；隨身帶上記號筆，養(yǎng)成隨時做記錄的好習(xí)慣，每次記錄的數(shù)據(jù)不能隨意亂放，要及時分析；新配制好的試劑一定要及時做好標記，加入試劑前一定要混勻，以免放置時間過長試劑濃度不均，影響實驗結(jié)果；在使用天平進行測量時，不能直接把測量的藥品放在托盤里，應(yīng)該在托盤里放上濾紙，再把藥品放在濾紙上；使用移液器移取溶液時要用洗耳球，禁止用口吹吸，不能甩移液管，防止移液管中的酸或堿等液體甩出傷到自己或他人；玻璃管冷凝管上套膠塞時一定要小心，不要用力過猛導(dǎo)致冷凝管破碎，扎傷皮膚。

使用有機高危溶劑或鹽酸等有刺激性氣味的物品時，一定要在通風(fēng)櫥中進行，實驗期間要開排風(fēng)扇或開窗通風(fēng)；硫酸、硝酸等氧化性酸若不小心滴在身上，要用清水清洗，然后用碳酸氫鈉液洗滌，不要因為濃度低而忽視，因為隨著水分的蒸發(fā)硫酸的濃度會增高，會使原來的稀硫酸變成濃硫酸[6]。

加熱試管一定不能集中加熱，試管口不得對準人，嚴防液體過熱而沖出試管[7]；未經(jīng)處理的有害微生物或有害化學(xué)品，不能直接向下水道排放，有可能污染周圍環(huán)境；用移液槍頭吸完后，應(yīng)當及時取下來，以免忙亂時又用同一槍頭吸取其他試劑；移液槍千萬不能用于揮發(fā)性有機溶劑的吸取。

在進行革蘭氏染色過程中，每一步染色步驟都有嚴格的時間規(guī)定，時間不能延長也不能縮短，否則會出現(xiàn)錯誤的實驗結(jié)果。染色過程中使用的載玻片、蓋玻片要先放入消毒液里消毒處理，不能直接在水龍頭下沖洗，不能直接丟入生活垃圾中，防止有活的微生物存在污染環(huán)境。實驗中使用過的玻璃器皿要及時浸泡、清洗、晾干，為下次實驗做好準備。

實驗結(jié)束后，要將實驗臺上的實驗試劑統(tǒng)一放回原來的位置。對工作臺面進行清潔消毒，脫去手套后用液體肥皂和流動水按七步洗手法洗手，脫去實驗服，確保水、電、門窗全都關(guān)好后方可鎖門離開實驗室。這些看起來都微不足道，但一旦出現(xiàn)事故可能會造成不可估量的損失。良好實驗習(xí)慣的養(yǎng)成對于高素質(zhì)人才培養(yǎng)非常重要，不僅可以避免很多意外事故的發(fā)生，還會對以后的生活、工作產(chǎn)生潛移默化的影響，使學(xué)生受益終身[8]。

2.4 實驗過程中突發(fā)事件的處理

（1）在生物實驗室中經(jīng)常要注意水、火、電的安全，水龍頭不能有滴漏現(xiàn)象，不能用濕手碰觸電器。在明火周圍不能放易燃易爆物品，在使用電爐加熱配制培養(yǎng)基時燒杯、燒瓶一定要墊上石棉網(wǎng)，防止容器破碎液體外流引起火災(zāi)，加熱容器中的液面不得超過2/3，防止液體噴出，電爐短路。使用過程中操作人員不得離開，直至加熱完畢關(guān)閉電源電爐絲冷卻后方可離開。冰箱中不能放置易揮發(fā)的溶劑，否則有爆炸的風(fēng)險。實驗室突發(fā)火災(zāi)（酒精燈里的酒精著火、電爐著火）的處理辦法，可以通過消防演練形式讓學(xué)生熟悉。在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，要檢查鍋內(nèi)水量是否達到標準，防止燒干，加熱前檢查鍋蓋是否密封良好，還要定期檢查壓力閥門是否堵塞。干烤箱消完毒后一定要溫度降下來方可打開箱門，并帶上厚手套防止燙傷，取出所需物品后及時關(guān)好箱門。在使用離心機時，要選擇重量相等的離心管，對稱放置；離心的液體不得超過離心體積的2/3，防止液體泄漏腐蝕轉(zhuǎn)頭，發(fā)生危險；離心機工作過程中有異常聲響時立刻切斷電源，等離心機停止運轉(zhuǎn)后再靠近。這些常識可以小視頻或Flash動畫形式發(fā)送給學(xué)生，讓學(xué)生提前觀看，課堂上檢查學(xué)生掌握情況。

（2）實驗過程中如有試劑濺出、有明顯或潛在的暴露感染性材料，應(yīng)及時報告實驗教師，不要擅作主張自行處理，根據(jù)實際情況進行消毒或立即按照意外事故應(yīng)急預(yù)案的程序處理。

2.5 大型實驗儀器設(shè)備的使用規(guī)范化

實驗室大型儀器設(shè)備必須有專人管理，儀器負責(zé)人在使用前需經(jīng)專門培訓(xùn)，考核合格方可操作使用，未經(jīng)允許任何人不準私自操作運行。儀器使用過程中不得私自離開，當儀器出現(xiàn)報警時能熟練處理，能做到安全斷電、斷水、斷氣，徹底消除因儀器故障出現(xiàn)的安全隱患。儀器使用完要按正確操作關(guān)機，切斷電源。實驗結(jié)束后將實驗儀器恢復(fù)到實驗前的狀態(tài)，將儀器內(nèi)的樣品及時取出進行安全處理，嚴禁在儀器內(nèi)存留實驗樣品。定期對實驗儀器進行安全檢查和維護，保證實驗的正常進行。教師以演示方式邊操作邊講解，學(xué)生操作時一定要有教師在旁邊指導(dǎo)。

3 實驗結(jié)束后廢棄物的處理

實驗室工作人員要牢固樹立環(huán)保意識，熟悉國家有關(guān)環(huán)境保護的法律法規(guī)，對醫(yī)療廢物可按《醫(yī)療廢物分類目錄（2021年版）》處理。嚴格執(zhí)行國家環(huán)保制度，對進入實驗室的工作人員必須進行環(huán)保方面的安全教育，使其熟悉廢棄物處理的原則和規(guī)定[9]。每次實驗結(jié)束后，根據(jù)實驗室廢棄物的特點，做到分類收集、存放，集中處理，處理方法應(yīng)簡單、易操作，處理效率高，不需要很多投資。

（1）廢棄的消毒液，有毒、有害、有腐蝕性的試劑，過期或廢棄的藥品等，不能隨意倒入水池中，應(yīng)放在指定的地點分類進行無害化處理，對于含有高濃度有機溶劑的廢液應(yīng)回收再用。對于某些數(shù)量較少、濃度較高的有毒有機物，可通入燃燒爐中供給充分的氧氣，使其完全燃燒，生成二氧化碳和水。對高濃度廢酸、廢堿液要經(jīng)中和至中性時排放。少量有毒氣體可通過通風(fēng)設(shè)備排出室外，通風(fēng)管道應(yīng)有一定的高度，使排出的氣體能讓空氣稀釋。產(chǎn)生毒氣量大時，必須經(jīng)過吸收處理才能排出。如氮、硫、磷等酸性氧化物氣體可用導(dǎo)管通入堿液中，使其被吸收后排出[10]。自己處理不了的廢棄物可收集后交由具備相應(yīng)資質(zhì)的醫(yī)療廢物處置單位或危險廢物處置單位進行處置。

（2）感染性廢物，如廢棄的細菌病毒標本、培養(yǎng)使用后的細菌、細胞、病毒，病原體培養(yǎng)基和污染的試管，菌種和毒種保存液及其容器，應(yīng)及時使用壓力蒸汽滅菌鍋進行消毒滅菌處理，然后按感染性廢物收集于符合環(huán)保規(guī)定的醫(yī)療廢物包裝袋中，運送至專門的處理地進行焚燒或深埋。

（3）實驗動物嚴禁帶出實驗室，如狗、兔子等不能作為寵物被領(lǐng)養(yǎng)，堅決制止實驗人員食用經(jīng)無害化實驗的實驗動物，活體動物如小白鼠、青蛙、蟾蜍等實驗后要妥善保管組織標本，廢棄的動物尸體、組織器官必須統(tǒng)一收集、集中存放、統(tǒng)一及時進行處理，不得積壓在室內(nèi)亂放。不得將動物尸體或器官隨意丟棄，應(yīng)由專人負責(zé)收集于符合國家標準的醫(yī)療廢物包裝袋中，作為醫(yī)療廢棄物交由具有相關(guān)資質(zhì)的環(huán)保部門統(tǒng)一處理。

（4）損傷性廢物指能夠刺傷或割傷人體的廢棄的醫(yī)用銳器，如廢棄的金屬類銳器針頭、探針、解剖刀、手術(shù)刀，玻璃類的載玻片、蓋玻片，應(yīng)收集于符合《醫(yī)療廢物專用包裝袋、容器和警示標志標準》（HJ421）的利器盒中，利器盒達到3/4滿時，應(yīng)當封閉嚴密，按流程運送、貯存[11]。

習(xí)近平總書記在指導(dǎo)抗擊新冠肺炎疫情的戰(zhàn)斗中強調(diào)，必須從保護人民健康、保障國家安全、維護國家長治久安的高度，把生物安全納入國家安全體系[12]。突如其來的疫情使我們深刻認識到實驗室安全的重要性，要將實驗室安全教育貫穿于實驗教學(xué)的全過程，加強培養(yǎng)學(xué)生實驗室生物安全意識，養(yǎng)成良好的實驗室安全操作習(xí)慣，不斷提高自身的生物安全素養(yǎng)[13]，從而更好地服務(wù)社會、服務(wù)患者。