覃翠遠

（廣西貴港市覃塘區(qū)覃塘街道農(nóng)業(yè)農(nóng)村中心，廣西貴港 537121）

動物檢疫作為全全面保證動物及動物產(chǎn)品安全重要措施，動物檢疫基本前提需全面保證采樣工作，正式采樣過程中需嚴格依照相關規(guī)范和要求實施，保證采樣質(zhì)量可靠，從中選取有代表性的病變組織，對其進行規(guī)范檢測。

1 動物檢查材料的采集和處理

1.1 供病原學檢查材料的采集、處理

供微生物學檢查材料采集包含的內(nèi)容較多，常見的有以下幾點：（1）血液。采血部位建議選取頸靜脈或尾靜脈，家禽從翅靜脈或心臟，死亡動物一般建議從右心房進行采血，正常狀況下，大、中動物采血量建議控制在10 ml，小動物和家禽控制在3～5 ml。（2）分泌物和滲出物?？谇弧⒈乔坏葘嶋H分泌物建議選取滅菌棉球進行蘸?。谎适车婪置谖?，正式采樣前需禁食12 h，食道探子刮??；尿液實際排尿時采集或用導尿管進行采取，常取30～50 ml。（3）淋巴結。淋巴結連帶周圍相關脂肪進行整體性采集。

供寄生蟲檢查材料的采集、處理。正式采集血液時主要從耳靜脈完成采集工作，第一時間制作相應的標本；陰道分泌物選用棉擦拭采取，糞便檢查材料的獲取主要通過直腸或采集新排出的糞便。

1.2 供血清血檢查材料的采集、處理

1.2.1 血清采集處理

正式采血過程中需結合動物實際狀況進行分析，針對大中頭動物每頭應超過10 ml，家禽自身采集一般需超過3 ml，建議選用自然析出的學清，正式制備過程中血清若處于1周內(nèi)完成檢測，應及時將其做好冷藏，將其實際溫度控制于4℃，若需存儲時間周期較長，一般將其控制在-30℃凍結。

1.2.2 抗原

抗原材料采集、處理方法等均與微生物學檢查材料程序相統(tǒng)一。

1.3 供病理組織學檢查材料采集、處理

1.3.1 選材

材料選取主要需結合實際狀況，嚴格依照相關規(guī)范和要求實施，一般需選取發(fā)生病變與健康部位銜接處組織，關鍵性病變部位應適當多選取幾塊，精準、客觀評析整個病變實際發(fā)展全過程，若處于同一個器官存在多種病變，建議分類進行采集。

1.3.2 固定

供石蠟切片使用的組織切好后，充分利用清水進行沖洗血污及時浸入固定液內(nèi)，但胃腸、膽囊等嚴禁用水沖洗。正常狀況下固定液包含福爾馬林溶液、酒精等，用量應是病料體積5～10倍，固定時間通常為12～14 h。若應進行長期存儲，歷經(jīng)12～24 h后更換1次固定液。

2 動物檢疫技術分析

2.1 病理學檢查技術

2.1.1 病理剖檢檢查技術

正常狀況下動物疾病檢測方法無法實現(xiàn)疫病確診的目標，無法精準性掌握動物死亡核心因素，需聯(lián)合病理學檢查相關技術使用。實際病理解剖檢查過程中，需積極掌握尸體實際剖檢基本要求，體現(xiàn)在以下幾方面：

（1）解剖前檢查。正式解剖之前需系統(tǒng)性檢查尸體體表相關特征，以及是否存在異常狀況，進一步排除各類惡性傳染??；患炭疽病動物及其相關尸體，嚴禁進行剖檢。解剖時間一般需越早越好，建議處于白天進行剖檢，實際剖檢數(shù)量需超過5只以上，大中動物至少應剖檢3頭。

（2）內(nèi)外部檢查。外部檢查主要體現(xiàn)在尸體變化、皮膚、天然孔等；內(nèi)部實際檢查主要體現(xiàn)在皮下檢查、內(nèi)臟器官的檢查，特別注意的是，應積極對病變或病變特征，精準性判定病變實際性質(zhì)。

（3）剖檢記錄。記錄內(nèi)容要求應保證完整、客觀和真實，記錄需做好全過程記錄，病變描述客觀需精準性，呈現(xiàn)組織器官自身實際變化[1]。

2.1.2 病理組織學檢查

病理組織學檢查主要是從源頭補充人們?nèi)庋蹤z查存在的不足，可進一步提升整個病變產(chǎn)生的性質(zhì)，從本質(zhì)層面精準確診疫病，有的放矢開展治療。優(yōu)勢針對腫瘤定性，腦組織發(fā)生病變具有較高的檢查優(yōu)勢，一般主要包含以下幾方面：

（1）石蠟切片。組織離開機體后很快就會死亡和產(chǎn)生組織腐敗，失去原有正常結構，因此，組織要經(jīng)固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡，而能清晰辨認其形態(tài)結構。優(yōu)點：組織細胞形態(tài)清晰；切片可長期保存，供病理診斷及復察，并可利用蠟塊作其他項目的回顧性研究；可以切（2～3 m）的薄片，片子薄而均勻，無皺褶。實際操作過程中包含多個操作環(huán)節(jié)，不僅包含取材、固定、洗滌等環(huán)節(jié)，而且涵蓋脫水、透明、透蠟等環(huán)節(jié)。

（2）蘇木素-伊紅染色法。蘇木素伊紅染色法最為使用頻次較高的方法，具體務實中受多方面因素的干擾，需進一步重新染片，建議需利用一種較為高效、簡介的方式，從本質(zhì)層面提高診斷時間，可利用此種方法，自身實用性較強。細胞涂片或細胞甩片的制備：對于貼壁細胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細胞長于玻片上，然后用藥物誘導細胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5 min。對于懸浮細胞，用藥物誘導細胞凋亡后，離心1000 r/min收集細胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細胞數(shù)為1×105 /ml，涂片或用離心甩片，用4%多聚甲醛固定5 min。

2.2 病原學檢查技術

2.2.1 細菌性傳染病病原檢查

針對細菌性傳染病病原檢查方法較多，不同方法使用原理、特征等存在較大差異性，需充分結合實際狀況，嚴格依照相關規(guī)范和要求進行操作，包含以下幾個方面方法：

（1）顯微鏡檢查法。正式檢查過程中，顯微鏡檢查方法較為常用，可將其病料涂抹至均勻涂片上，放置于室內(nèi)溫度下自然干燥，若為細菌培養(yǎng)物涂片火焰進行固定。染色水洗后涂片標本，將其利用吸水紙進行吸干，需注意應嚴禁進行磨擦，亦或處于酒精燈火焰遠端進行烘干，內(nèi)部加入相應的香柏油，充分利用油浸鏡仔細觀察細菌自身實際形態(tài)結構和染色特性。

（2）培養(yǎng)檢查法。培養(yǎng)檢查法主要包含兩種方法，固體培養(yǎng)基上實際菌落形狀檢查，其菌落自身大小、形狀及表面形狀因菌種存在較大差異性，所以菌落實際特征作為精準鑒別細菌關鍵依據(jù)；液體培養(yǎng)基上方實際液體性狀精細化觀察，細菌放置于實際液體上可發(fā)生渾濁、沉淀等現(xiàn)象。

（3）生化試驗。生化試驗基本原理為，積極選用生物化學方法，動態(tài)化檢測細菌處于人工培養(yǎng)繁殖過程中是否存在新陳代謝產(chǎn)物，其屬于一類定性檢測方法。

2.2.2 病毒傳染病病原檢查

病毒實際檢查方法存在較大差異性，包涵體檢查主要包含狂犬病、犬瘟熱病毒；病毒培養(yǎng)性狀觀察，針對雞新城疫病毒，應積極判定雞胚全身皮膚是否存在出血點，雞痘病毒判定其痘斑病變，積極分析細胞病變，如細胞變形皺縮、胞漿內(nèi)產(chǎn)生顆粒等。

2.2.3 寄生蟲病原檢查

寄生蟲病原檢查主要包含兩大方面，即蟲卵檢查法、蟲體檢查法，蟲卵檢查法主要包含直接涂片鏡檢、集卵法檢查。蟲體檢查法主要包含以下3種方式：

（1）蠕蟲蟲體檢查方法。幼蟲檢查方法主要是處于低倍鏡下精細化觀察液體內(nèi)部活體實際幼蟲；成蟲檢查方法主要通過肉眼觀察其自身實際形態(tài)特征。

（2）蜘蛛昆蟲蟲體檢查法。螨蟲實際檢查主要是病料放置于載玻璃片上，滴加數(shù)滴煤油，上方覆蓋相應的載玻片，利用手搓動兩玻片促使其皮屑粉碎，進一步做好鏡檢工作。針對蜱等昆蟲檢查建議選取肉眼檢查方法。

（3）原蟲蟲體檢查法。原蟲多為單細胞寄生蟲，正常狀況下不可見，需通過使用顯微鏡進行檢查。

3 免疫學檢查技術

3.1 血清學檢測技術

當下血清學檢測技術呈現(xiàn)為多元化，可充分使用抗原抗體內(nèi)已經(jīng)獲知的方法檢測未知的另一方，進一步達到檢疫目標。實際檢測方法包含以下幾個方面：

3.1.1 凝集反應

凝集反應包含多種內(nèi)容，如直接凝集反應、間接凝集反應、血凝和雪凝抑制試驗，其中直接凝集反應一般適用于布氏桿菌和豬傳染性萎縮性鼻炎成效較佳；雞白痢、雞支原體病主要為全血平板凝集反應。間接凝集反應其基本應用原理為，利用已知抗原基于相應載體上判定其抗體，其多適用于豬細小病毒病、牛日本血吸蟲病等檢測；血凝和雪凝抑制試驗，部分病毒能選擇性凝集部分動物的紅細胞，將此類現(xiàn)象稱之為血凝，處于相應病毒懸液內(nèi)適量加入特異性抗體并保持一段時間，將紅細胞加入其中，紅細胞凝集被抑制，稱之為紅細胞凝集抑制反應[2]。

3.1.2 標記抗體技術

結合抗原抗體結合的特異性，以及標記分子自身敏感性的診斷檢測技術，主要包含兩種類型：一種是酶標記抗體技術。其適用于豬偽狂犬病、豬弓形蟲病、禽白血病等診斷的方法，最為典型的特征是簡便、快速、敏感，適合進行大批量樣品檢測；另一種是熒光標記抗體技術，主要用于抗原的定位、定性，該技術自身優(yōu)勢在于特異性強、敏感度較高。

3.2 變態(tài)反應檢測技術

變態(tài)反應檢測技術多用于部分慢性傳染病檢疫和監(jiān)測，具有較佳的成效，尤其是動物群體性檢疫等，作為一類檢疫牛結核病檢疫、馬鼻疽病的常規(guī)方法。

4 臨診檢疫技術

4.1 群體檢疫

群體檢疫主要是指對待檢動物群體進行現(xiàn)場檢疫，群體檢疫通常可劃分為3種類型，即靜態(tài)觀察、動態(tài)觀察和飲食觀察。

4.1.1 靜態(tài)觀察

靜態(tài)觀察主要是指動物處于安靜休息狀態(tài)，軀體處于放松狀態(tài)，觀察其自身站立、睡臥等姿勢、精神狀況、營養(yǎng)狀況等基本活動現(xiàn)象。需強調(diào)的是，應積極注意是否發(fā)生異常站立、睡臥姿勢，是否發(fā)生咳嗽、喘息、呻吟等。

4.1.2 動態(tài)化觀察

通過上述靜態(tài)觀察后，需將被檢動物進行驅(qū)趕，精細化觀察其自然活動和驅(qū)趕活動，應將重點置于起立、運動姿勢和步態(tài)、精神狀態(tài)，應進一步注意是否存在不愿起立、步態(tài)蹣跚、曲背弓腰等態(tài)勢。

4.1.3 飲食觀察

飲食觀察核心作用在于檢查動物自身食欲和口腔疾病，動態(tài)化觀察動物自然采食飲水動作，亦或有意少給食物看其搶食行為，從中發(fā)現(xiàn)不食不飲、少食少飲的動物。充分依托群體性檢疫，可第一時間從大群動物內(nèi)部精準篩選存在病態(tài)的動物，將其進行及時隔離展開個體化檢疫工作。

4.2 個體檢疫

個體檢疫作為一類臨診檢查工作，其實際針對主體目標為群體檢疫呈現(xiàn)的可疑病態(tài)動物，對其進行詳細化檢查。若群體檢疫過程中并未發(fā)現(xiàn)相應的病態(tài)動物，亦可抽查其中5%～20%的動物作為個體檢疫，若抽查發(fā)現(xiàn)實際檢疫主體目標，再抽查10%，有必要需對全群動物進行逐一復查。個體檢疫實際方法包含以下幾個方面：

（1）視診。視診主要是從動物自身精神狀態(tài)、營養(yǎng)程度、姿勢與運動、皮膚被毛等狀況，以此判定是否存在疾患。

（2）觸診。主要通過耳根、四肢末端、體表皮膚等進行診斷。

（3）聽診。從動物自身叫聲進行判定，從中及時篩查異常聲音，通過咳嗽精準性判定動物是否存在呼吸器官病變，干咳通常多見于炎癥、濕咳多于支氣管和肺部炎癥。

（4）測量體溫。一般處于健康狀態(tài)的動物，其通常早晨溫度較低，處于午后略高，實際波動范圍處于0.5℃～1℃，動物檢疫中多按照體溫實際升高狀況，進而判定動物發(fā)熱程度，估測疫病嚴重程度和可疑范圍[3]。

5 提高動物防疫檢疫工作水平措施

5.1 加強資源籌措，強化防疫檢疫設備管理

防疫設備作為動物防疫工作實施的前提，我國從資金、政策等方面給予強有力的支撐，應進一步擴大資金來源，為防疫檢疫基礎設施完善奠定良好的基礎。同時，當?shù)卣畱浞纸Y合實際狀況，充分將此類資金納入實際預算中，并及時引入先進檢測設備，推動檢疫防疫工作高質(zhì)量實施。

5.2 健全動物防疫檢疫工作管理機制

相關部門應及時將各部門職責精準劃分，并動態(tài)化將其落于實處，利用信息技術構建相應的平臺，實現(xiàn)內(nèi)部信息數(shù)據(jù)共享和交流。

此外，還需制定完善的考評制度。針對防疫檢疫工作開展成效，為積極調(diào)動工作人員積極性，應給予表現(xiàn)優(yōu)異人員獎勵，針對態(tài)度急哦觀念缺少正確的人員，應動態(tài)化進行正確引導并給予懲處，調(diào)動人員自身工作積極性，從本質(zhì)層面促進檢疫工作高效化落實[4]。

5.3 完善防疫檢疫監(jiān)督程序，促進防疫檢疫管理規(guī)范化

健全的防疫檢疫監(jiān)督機制，為工作人員各環(huán)節(jié)工作推進提供導向，要求防疫人員處于具體務實工作中，始終以我國基本相關規(guī)范和要求，深層次分析動物疫病成因、潛在隱患等，并第一時間將其上報于上級部門，構建完善的檢疫網(wǎng)，從不同層級完成動物品種、數(shù)量全方位登記，對其做好動態(tài)化管控。應顯著增強養(yǎng)殖人員自身法律意識，擴展多個途徑加大宣傳力度，持續(xù)性將防疫政策完成推廣，顯著提升養(yǎng)殖者防范意識，處于防疫檢疫工作中為全方位配合防疫人員，從本質(zhì)層面減少動物產(chǎn)生疫病[5]。

5.4 加強動物防疫檢疫工作隊伍建設

檢疫防疫人員自身綜合素養(yǎng)直接關乎防疫檢疫工作實施成效，應從多方面采取相應的措施，進一步加強防疫檢疫人員隊伍建設，不僅需從本質(zhì)層面保證其數(shù)量實際需求，還應開展多方面培訓工作，提升人員自身素養(yǎng)，增強人員自身薄弱點，不斷增強防疫檢疫人員專業(yè)素養(yǎng)。同時，邀請動物防疫專家實際入駐現(xiàn)場提供相應指導，第一時間做好解疑答惑工作，增強防疫檢疫工作人員自身現(xiàn)場解決問題水平。

6 結束語

檢疫作為避免動物疾病大面積爆發(fā)、保證廣大群眾身體健康的重要舉措，在樣品采集操作環(huán)節(jié)需嚴格執(zhí)行相關規(guī)范和要求，相關工作人員應積極結合實際狀況，不斷提高樣品采集水平，按照不同的情況選擇合適的檢疫技術，保證檢疫工作落于實處，避免疫病發(fā)生和蔓延。