文│陳曉曉 宋靜（陜西省榆林市吳堡縣動物疫病預防控制中心）

巴貝斯蟲是一種寄生于宿主紅細胞內的血液原蟲，感染羊時可導致羊巴貝斯蟲病。通過動物發(fā)病史、臨床癥狀、實驗室血涂片顯微鏡鏡檢即可確診巴貝斯蟲。但在動物感染早期及后期，由于染蟲率較低，顯微鏡鏡檢常會出現(xiàn)漏檢；而且在基層使用過程中常會由于血涂片質量較差、檢測人員對巴貝斯蟲形態(tài)不熟悉而出現(xiàn)誤診。PCR方法很好地解決了傳統(tǒng)病原學檢測中由于敏感性不足而漏檢的問題，現(xiàn)已成為巴貝斯蟲分子生物學檢測領域應用最廣的技術。本研究采用實驗室血涂片鏡檢及PCR技術相結合的方法，對陜西省榆林市某羊場疑似巴貝斯蟲感染的綿羊進行診斷，并制定相應的治療方案，現(xiàn)將診治情況報道如下。

一、發(fā)病情況

陜西省榆林市某綿羊場飼養(yǎng)綿羊328只，2021年1月開始數(shù)只羊陸續(xù)出現(xiàn)精神不振，食欲減退，并伴有呼吸急促及發(fā)熱癥狀。發(fā)病后駐場獸醫(yī)使用抗生素治療后沒有明顯效果。截至3月12日，共發(fā)病18只，死亡4只，發(fā)病率5.49%，死亡率占發(fā)病羊的22.22%。為確定羊只發(fā)病原因，送6份臨床血樣。

二、臨床癥狀

病死羊只病程為2～15天。送檢的6只病羊癥狀表現(xiàn)為消瘦、黏膜蒼白、排血紅蛋白尿和惡臭的褐色糞便，發(fā)熱熱型均為稽留熱（39.8～41.0℃），心率加快至98～180次/分鐘，呼吸至98～156次/分鐘。

三、病理變化

病死羊尸檢發(fā)現(xiàn)尸體消瘦，血液稀薄如水且凝固不良。脾臟及肝臟腫大、質脆，被膜上有散在出血點，皮下組織、漿膜水腫，肌間結締組織及脂肪均有不同程度的黃染，膽囊腫大，且充滿膽汁，心肌松軟，心臟內膜及外膜、心冠脂肪表面有不同程度的出血。

四、實驗室檢查及診斷

病原學檢查采用血液涂片進行鏡檢和分子生物學方法進行PCR擴增。將送檢的6份血樣進行血液涂片、姬姆薩染色、鏡檢，結果發(fā)現(xiàn)，1份血樣的紅細胞呈不規(guī)則的橢圓形，大小不均且邊緣不規(guī)則，內有成對的特征性蟲體。血液涂片鏡檢結果顯示陽性檢出率為16.7%（1/6）。

參照Hornok等文獻中的上游引物BJ1：5ˊ-GTCTTGTAATTGGAATGATGG-3ˊ和下游引物為BJ2：5ˊ-TAGTTTATGGTTAGGACTACG-3ˊ擴增巴貝斯蟲18S rRNA基因的部分片段，PCR反應體系及PCR擴增程序均參照參考文獻進行。PCR擴增結果表明，6份待檢樣品中的1份檢測結果呈陽性。PCR擴增結果顯示陽性檢出率為16.7%（1/6），與鏡檢的陽性率一致。綜合上述檢查結果并結合發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢病理變化，確診為羊巴貝斯蟲病。

五、防治措施

首先，迅速隔離病羊，使用5%的貝尼爾（三氮脒）溶液進行肌內注射，用量為7毫克/千克，每天1次，連續(xù)用藥3天。癥狀嚴重者進行強心補液、健胃等支持療法，為控制繼發(fā)感染，也可使用抗體重生素、解熱藥等進行對癥治療。其次，對健康羊加強飼養(yǎng)管理，對從外地引入的羊只要加強檢疫，采用咪唑苯脲在發(fā)病季節(jié)進行預防，同時使用伊維菌素驅除體內外寄生蟲。

六、小結

羊巴貝斯蟲病暴發(fā)與其媒介生物蜱的活動季節(jié)相關，呈季節(jié)性，較高的發(fā)病率和死亡率制約了羊養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。自巴貝斯蟲被發(fā)現(xiàn)以來，建立了多種用于巴貝斯蟲的檢測方法。最常用的方法為通過動物發(fā)病史、臨床癥狀及實驗室血涂片顯微鏡檢做出診斷。PCR技術也廣泛用于巴貝斯蟲診斷，很好地解決了傳統(tǒng)病原學檢測中由于敏感性而漏檢的問題。本研究采用實驗室血涂片鏡檢及PCR技術相結合的方法，對某羊場疑似巴貝斯蟲感染的綿羊進行診斷，診斷結果表明，PCR方法陽性檢出率與鏡檢的陽性率一致，均為16.7%（1/6）。由于巴貝斯蟲在動物體內染蟲率隨時間變化而變化。因此，在染蟲率較低的早期和帶蟲期用該方法檢測結果并不理想。藥物本身的毒副作用及藥物殘留等現(xiàn)象對藥物使用產(chǎn)生限制，如咪唑苯脲靜脈注射時有較大毒性，存在肝損傷的風險。所以臨床一般采用輪換用藥或穿梭用藥來預防和治療該病。盡早診療羊巴貝斯蟲病，避免錯過最佳治療時期并正確用藥，可將損失降到最低。