醫(yī)學檢驗專業(yè)本科生畢業(yè)課題設計教學實踐

呂 園,劉春燕

南京市第一醫(yī)院/南京醫(yī)科大學附屬南京醫(yī)院核醫(yī)學科實驗診斷部，江蘇南京 210006

畢業(yè)課題設計是醫(yī)學檢驗專業(yè)本科教學培養(yǎng)過程中的重要組成部分，是醫(yī)學檢驗專業(yè)學習成果的展示[1]，它能夠引導學生將前期理論學習、臨床實習過程中學到的知識融會貫通，并讓學生熟悉科研設計整個流程[2]。南京醫(yī)科大學附屬南京醫(yī)院為每位醫(yī)學檢驗專業(yè)本科畢業(yè)生指定一名指導教師。指導教師可以從論文選題、文獻查閱、課題設計、實驗操作、結果統(tǒng)計、論文撰寫等多個環(huán)節(jié)給學生提出引導性建議[3]，并啟發(fā)學生將創(chuàng)新性科研思維應用到今后的研究生學習階段或臨床研究工作中[4]。通過指導教師的專業(yè)輔導，學生在畢業(yè)課題設計的濃厚科研氛圍中，能夠激發(fā)自身的科研熱情，培養(yǎng)合理有序的科研習慣，科研思維得到針對性鍛煉，為今后的學習和工作奠定科學、專業(yè)的理論和實踐基礎[5]。

1 畢業(yè)課題前期準備

1.1論文選題 恰當選題是畢業(yè)生保質保量順利完成課題設計的先決條件，也是提高畢業(yè)課題設計質量的關鍵環(huán)節(jié)[6]。醫(yī)學檢驗專業(yè)本科生畢業(yè)課題一般選擇專業(yè)前沿科學問題，既可激發(fā)學生的科研興趣，培養(yǎng)學生的科研思維，同時也鍛煉了學生的實踐操作能力，讓學生接觸到最新的科學前沿動態(tài)[7]。

指導教師在幫助學生確定畢業(yè)設計題目時，需要充分結合自己的科研課題和學生的專業(yè)背景，提供專業(yè)有效的建議和指導。在指導江蘇大學醫(yī)學檢驗專業(yè)本科生畢業(yè)論文設計過程中，選定科研項目“人CYP2C19基因分型檢測試劑盒性能驗證”。研究內(nèi)容主要包括：參照產(chǎn)品行業(yè)標準指南及專家共識設計實驗方案，對“CYP2C19基因分型檢測試劑盒”性能進行多方面評估，包括準確性、特異性、最低檢出限及抗干擾能力，該項目在臨床中具有一定的應用前景和價值，既與學生所學專業(yè)密切相關，也為將來學生獨立從事科學研究工作打下堅實基礎。

1.2文獻查閱 在本科生完成畢業(yè)課題過程中，文獻查閱是非常重要的環(huán)節(jié)，在此過程中，指導教師教授學生使用PubMed、中國知網(wǎng)和萬方醫(yī)學網(wǎng)等中英文網(wǎng)站進行文獻查閱。在給學生確定好畢業(yè)設計題目后，首先要求學生使用上述中英文網(wǎng)站查找?guī)灼胺肿釉\斷檢驗程序性能驗證”相關的技術指南和專家共識等，如《CNAS-CL02-A009-2018醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則在分子診斷領域的應用說明》[8]、《藥物代謝酶和藥物作用靶點基因檢測技術指南(試行)》[9]等，讓學生從“性能驗證”的時機、參數(shù)和判斷標準等方面學習性能驗證的行業(yè)標準。學生在掌握行業(yè)標準的前提下，通過進一步查閱相關同行論著，學習文獻作者的研究思路、實驗方法、結果統(tǒng)計和研究結論等，為下一步的實驗工作做好鋪墊。

1.3開題報告 指導學生進行充分的開題準備并完成開題報告是畢業(yè)課題設計的關鍵。開題報告是畢業(yè)設計前期最重要的工作，報告決定了學生的實驗設計和文章撰寫的方向和內(nèi)容，是畢業(yè)論文的重要基礎。學生應該根據(jù)各自的選題，通過查閱相關文獻，自主設計實驗方案，確定實驗進度，完成開題報告 PPT的制作。

邀請指導教師、其他同學及帶教教師共同參加開題報告會。報告會上，學生需要重點匯報課題實驗設計方案的可行性和創(chuàng)新性，講解課題實驗設計的思路，并詳細闡述研究背景、研究內(nèi)容、研究方法、技術路線及下一步工作計劃等。指導教師及帶教教師作為評審人員，針對學生匯報的開題報告進行評估，提出意見和建議，并鼓勵其他同學共同參與討論。通過這種互動交流方式，進一步梳理學生思路，提供操作性更強的實驗方案，使實驗更加合理和可行，同時在交流中碰撞出更多的思維火花，在教師和同學的討論中拓寬思路，充分借鑒他人的想法和觀點，為畢業(yè)論文設計融入新內(nèi)容，從而讓畢業(yè)課題更加多元、豐富。

2 畢業(yè)課題中期實驗

2.1實驗研究 經(jīng)過文獻查閱和開題準備后，學生開始進入實驗研究階段，完成“人CYP2C19基因分型檢測試劑盒性能驗證”，本課題參照產(chǎn)品行業(yè)標準技術指南設計驗證方案，對“人CYP2C19基因分型檢測試劑盒”的準確性、特異度、最低檢出限及抗干擾能力4個方面進行性能驗證。

指導學生在實驗開始前獨立設計實驗方案。(1)準確性：隨機選取20例臨床標本，計算“人CYP2C19基因分型檢測試劑盒”熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)檢測結果與“金標準”Sanger測序檢測結果的符合率。(2)特異度：每個位點選取10例野生型臨床標本，計算“人CYP2C19基因分型檢測試劑盒”熒光定量PCR檢測結果與“金標準”Sanger測序檢測結果的符合率。(3)最低檢出限：選取1例常見基因型的臨床標本基因組DNA。在純度符合要求的情況下(A260/280為1.8～2.0)，將上述基因組DNA按相應濃度稀釋至廠商聲明的最低檢出限(10 ng/μL)。計算稀釋后基因組DNA重復熒光定量PCR 20次檢測結果與未稀釋前檢測結果的符合率。(4)抗干擾能力：選取2例已知基因型的血液標本，分別加入3種干擾物質，終濃度為廠商聲明的最高抗干擾濃度：血紅蛋白為20 g/L，膽紅素為60 μmol/L，三酰甘油為11 mmol/L。分別計算干擾物質組與對照組檢測結果的符合率。

讓學生獨立設計實驗方案，啟發(fā)學生科研思維，培養(yǎng)學生獨立思考的習慣。引導學生首先提出科學假設(如最低檢出限為廠商聲明的10 ng/μL)，并在實驗過程中逐步分析論證所提出的科學假設(如將基因組DNA稀釋至10 ng/μL并重復檢測20次，計算與未稀釋前檢測結果的符合率)，從而完成整個性能驗證實驗。整個實驗過程中，學生應準備記錄本，記錄必要的實驗數(shù)據(jù)，包括實驗方法、實驗步驟、所用材料及實驗原始結果等，保證實驗的可重復性，以及實驗數(shù)據(jù)的真實性和可溯源性。實驗記錄是科學研究必備的一種良好習慣，可以幫助學生在實驗過程中及時發(fā)現(xiàn)問題，有利于追根溯源，做到查漏補缺，舉一反三，不斷完善實驗方案。

指導教師在科研實踐過程中，需要定期檢查學生的實驗記錄本，針對記錄內(nèi)容，引導學生對照實驗記錄本核驗，在整理實驗數(shù)據(jù)、梳理實驗方法、總結實驗結果的反復檢查過程中，逐步建立和完善實驗思路，并在后續(xù)的實驗中提出自己對在研課題的新想法。與此同時，在實驗出現(xiàn)問題時，學生應立即向指導教師反饋，并同步對照實驗記錄本核查問題，初步排查問題原因，再結合教師反饋的建議，在先前工作的基礎上，修正原有實驗方案中的問題和不足，提出改進措施，不斷優(yōu)化實驗方案，鍛煉和提高自己解決問題、分析原因和創(chuàng)新的能力。

2.2中期考核 通過中期考核檢查學生畢業(yè)課題的進展情況，指導教師應及時發(fā)現(xiàn)學生在畢業(yè)設計中存在的問題。在實驗開展一段時間后，指導教師、學生、其他同學及帶教教師可以共同參加中期考核報告會，學生通過PPT的形式匯報課題進展情況，并將實驗過程遇到的問題及處理方法和思路與教師和同學進行交流和討論。在解決現(xiàn)有問題的基礎上，教師和學生應一起確定下一階段的工作目標，優(yōu)化實驗方案，進一步完善技術路線，保證畢業(yè)課題設計任務能夠按時圓滿完成。

3 畢業(yè)課題后期總結

3.1實驗結果統(tǒng)計 所有實驗全部完成后，要求學生將實驗室結果進行統(tǒng)計。發(fā)現(xiàn)20例臨床標本的熒光定量PCR檢測結果與“金標準”Sanger測序結果比對，符合率為100%，滿足試劑盒準確性驗證要求；野生型位點臨床標本熒光定量PCR檢測結果與“金標準”Sanger測序結果比對，符合率為100%，滿足試劑盒特異度驗證要求；基因檢測試劑盒的最低檢出限為10 ng/μL；血紅蛋白、膽紅素和三酰甘油3種干擾物質加入已知基因型結果的臨床標本后，熒光定量PCR檢測結果與對照組100% 符合，滿足試劑抗干擾能力驗證要求。

3.2畢業(yè)論文撰寫 畢業(yè)論文撰寫是整個畢業(yè)課題設計過程中最重要的環(huán)節(jié)，是對畢業(yè)設計實驗成果的全面整理和總結，能夠體現(xiàn)指導教師的教學水平和學生的綜合素質。

指導教師要求學生第1步了解畢業(yè)論文的基本框架；第2步查閱相關同行文獻，了解“分子診斷檢驗程序性能驗證”內(nèi)容在國內(nèi)外同行中的研究水平；第3步根據(jù)實驗統(tǒng)計結果進行總結歸納，并撰寫論文。

整個過程對于初次撰寫論文的本科生來說有一定的困難。因此，指導教師需循序漸進地指導學生。論文一般包括中英文標題、中英文摘要、中英文關鍵字、正文、參考文獻等。標題要求簡潔明了，概括性強。摘要需要概括整個實驗研究的目的、方法、結果和結論，要求語句精練。正文是論文的核心，需要詳細描述整個實驗的研究內(nèi)容，包括研究背景、材料與方法、研究結果和討論。在闡述研究結果的過程中，實驗數(shù)據(jù)的處理方法和圖表的正確表示方法是重點教學內(nèi)容。對各類統(tǒng)計軟件和作圖軟件的學習，是引導學生開啟科研道路的必備技能。討論部分是論文的重點和難點，指導教師需要指導學生大量檢索國內(nèi)外文獻，在閱讀文獻的基礎上進行總結撰寫。首先，闡述國內(nèi)外“分子診斷檢驗程序性能驗證”的研究進展，力求全面；其次，廣泛、全面總結前人的發(fā)現(xiàn)、技術方法、優(yōu)缺點等；再次，總結本研究在實驗進行中遇到的問題及采取的解決措施；最后，可以對整個實驗研究的創(chuàng)新性和實用性等多個方面進行討論。參考文獻要求格式規(guī)范，指導學生學習EndNote等軟件的應用。

學術規(guī)范性對于本科畢業(yè)論文來說至關重要，包括2個方面：一是形式規(guī)范，比如規(guī)范的文字格式、圖表格式、圖表注釋、參考文獻格式等；二是內(nèi)容規(guī)范，尊重他人的研究成果，在引用和借鑒他人文章內(nèi)容時要標明文獻出處，避免出現(xiàn)語句的抄襲和剽竊。

學生完成畢業(yè)論文初稿后，指導教師需要反復對初稿中的內(nèi)容進行審核查閱，再與學生交流溝通論文撰寫中存在的問題和困難，提出針對性的建議和意見，讓學生領會到問題的解決思路和方法。學生也可以在論文的反復修改中不斷思考和探索，在挖掘問題本質的過程中不斷積累實驗和寫作經(jīng)驗。既可以提高畢業(yè)論文的質量，也可以培養(yǎng)學生的思考能力和實踐能力，形成獨立思考的思維習慣。

3.3論文預答辯 在完成論文撰寫后，學生需要著手準備預答辯PPT。論文預答辯是整個畢業(yè)課題設計過程中最后環(huán)節(jié)，是準確評價本科畢業(yè)生學術水平、科研思維和實驗操作能力等綜合素質的重要內(nèi)容。指導教師需要對學生PPT的版面設計、框架結構、內(nèi)容層次、文字圖片比例和文獻引用格式等進行全面指導。

論文預答辯的過程能夠充分鍛煉學生的文字表達能力和重點概括能力。學生需要提煉畢業(yè)論文中研究目的、方法、結果和結論等各個環(huán)節(jié)的要點，通過精煉的文字、簡潔的圖形、嚴密的邏輯及合理的解釋，將畢業(yè)論文的核心要素充分展示在PPT中，學生的語言表達能力也可以得到充分鍛煉。通常情況下，學生在指導教師面前首次講述PPT的時候，有時會由于緊張、熟練度不夠、思路不清及邏輯紊亂等各種原因，出現(xiàn)卡頓、聲音過小、語速過快等問題。指導教師在遇到這些問題的時候，應鼓勵學生加強練習和敢于表達，幫助學生理清表達的觀點和思路，指導文字內(nèi)容的使用規(guī)范，必要時建議學生在同學或家人面前多次模擬答辯。教師應與學生一起，不斷反復修改和完善PPT的文字和內(nèi)容，調整和修正講演過程中的問題與不足，從而提高預答辯內(nèi)容的準確性和完整性，加強講演的邏輯性和流暢性，為預答辯做好充分準備。

在學生實習結束前，教研室組織指導教師和其他帶教教師成立預答辯小組，嚴格按照預答辯制度，對學生畢業(yè)課題論文進行預答辯。學生應從畢業(yè)課題的研究背景、研究思路、材料與方法、研究結果、討論等方面進行綜合匯報。預答辯小組針對完整實驗流程向學生提出問題，如實驗過程中如何防止污染問題、標本容量選擇問題及指南解讀等，給學生一次參加正式答辯前演練的機會，讓學生有機會查漏補缺，進一步完善答辯內(nèi)容。

4 結 語

醫(yī)學檢驗是一門實踐性很強的學科，可以培養(yǎng)學生的理論知識、實驗操作和科研思維等各方面的綜合素質。一個完整的畢業(yè)課題設計，可以有效促進學生將前期理論學習階段從課本上學到的知識、實驗中應用的操作技能、科學研究中的科研思維三者有機結合起來，融會貫通，對培養(yǎng)具有創(chuàng)新精神和科研思維能力的檢驗醫(yī)學復合型人才具有重要意義[10]。