肖飛 杜磊

(1.寶雞市第二中醫(yī)醫(yī)院，陜西 寶雞 721300；2.咸陽市涇陽縣醫(yī)院，陜西 咸陽 713700)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是一種慢性全身性的炎癥疾病，屬自身免疫性疾病的范疇，好發(fā)于女性[1]。Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)是Ⅱ型膠原的裂解產(chǎn)物，與關(guān)節(jié)軟骨損傷有關(guān)，其被認(rèn)為是可反映軟骨破壞程度的評估指標(biāo)[2]。血紅素氧合酶-1(HO-1)是催化血紅素在體內(nèi)氧化降解的限速酶之一，通常在應(yīng)激條件下表達(dá)增加[3]。最近有文獻(xiàn)報(bào)道，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜組織中可檢測到HO-1表達(dá)[4]。因此，本研究旨在分析血清CTX-Ⅱ和HO-1水平與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者疾病活動(dòng)度的相關(guān)性，以探討CTX-Ⅱ和HO-1對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病活動(dòng)度的監(jiān)測意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1月至2019年6月我院收治的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者80例，所有患者均符合風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，排除合并糖尿病、高血壓、高血脂、心腦血管疾病、嚴(yán)重肝腎功能障礙、甲狀旁腺功能障礙及其他風(fēng)濕性疾病。其中男22例，女58例，年齡43～75歲，平均年齡(56.37(12.16)歲，病程16～103個(gè)月，平均病程(77.82(21.36)個(gè)月。另納入43例非類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者和39例體檢健康自愿者作對照，其中非類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組，男16例，女27例，年齡45～73歲，平均年齡(55.08(10.37)歲，疾病類型：骨關(guān)節(jié)炎11例、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎18例、非類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎彌漫性結(jié)締組織病14例；健康對照組，男14例，女25例，年齡41～72歲，平均年齡(54.36(10.91)歲。3組的一般資料相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

1.2方法

1.2.1樣本采集 采集3組空腹外周靜脈血4～5 mL，EDTA抗凝處理，室溫靜置30 min，3 000 rap/min離心15 min，分離上層血清，于-80℃保存?zhèn)溆?，血清分離過程中避免發(fā)生溶血。

1.2.2主要試劑與儀器 人CTX-Ⅱ酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒購自上海滬震生物有限公司，人HO-1酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒購自上海極威生物科技有限公司，Synergy2多功能酶標(biāo)儀購自美國BioTek公司。

1.2.3檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清CTX-Ⅱ和HO-1水平，實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照相應(yīng)試劑盒說明書進(jìn)行操作，首先設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔、樣本孔及空白孔，向標(biāo)準(zhǔn)孔加入按一定比例稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔加入待測樣本，空白孔不加溶液，然后除空白孔外，其余孔均加HRP標(biāo)記的檢測抗體，附上封板膜，37℃溫育60 min，棄去孔內(nèi)液體，甩干、洗板、再甩干，所有孔均加入配置好的底物溶液，37℃避光溫育15min，最后向每孔中加入終止液，立即使用Synergy 2型多功能酶標(biāo)儀在450 nm波長處測定各孔的OD值，然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出血清樣本中CTX-Ⅱ和HO-1水平。

1.3觀察指標(biāo) 采用疾病活動(dòng)度評分28(DAS28)評價(jià)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的疾病活動(dòng)程度，首先計(jì)算28個(gè)關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)腫脹數(shù)(SJC)和關(guān)節(jié)壓痛數(shù)(TJC)，根據(jù)SJC、TJC和血沉(ESR)數(shù)值計(jì)算DAS28評分[6]。

2 結(jié) 果

2.13組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平比較 3組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平存在顯著性差異(P<0.05)，其中類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明顯高于非類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組和健康對照組(P<0.05)，非類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明顯高于健康對照組(P<0.05)。見表1。

表1 3組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平比較

2.2類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平的相關(guān)性 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組患者的血清CTX-Ⅱ水平與HO-1水平呈正相關(guān)(r=0.726，P<0.05)。

2.3類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平與疾病活動(dòng)度指標(biāo)的相關(guān)性 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組患者血清CTX-Ⅱ水平與SJC及DAS28評分均呈正相關(guān)(P<0.05)，而與TJC及ESR不相關(guān)(P>0.05)，血清HO-1水平與TJC及DAS28評分均呈正相關(guān)(P<0.05)，而與SJC及ESR不相關(guān)(P>0.05)。見表2。

表2 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平與疾病活動(dòng)度指標(biāo)的相關(guān)性

3 討 論

有研究顯示，在正常情況下細(xì)胞內(nèi)的HO-1基因呈低表達(dá)，但當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎癥、缺氧等應(yīng)激反應(yīng)時(shí)，應(yīng)激反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子NF-kB可與HO-1啟動(dòng)子區(qū)域的特殊位點(diǎn)結(jié)合，促進(jìn)HO-1基因高表達(dá)[7]，而普遍認(rèn)為NF-kB的異常活化與關(guān)節(jié)損傷及骨膜組織炎性增生密切相關(guān)[8]，且近年在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液中檢測到了HO-1[9]。因此，研究CTX-Ⅱ和HO-1表達(dá)與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的關(guān)系有一定意義。

本文結(jié)果顯示，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明顯高于非類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組和健康對照組(P<0.05)，同時(shí)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組患者的血清CTX-Ⅱ水平與HO-1水平呈正相關(guān)(P<0.05)，表明類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平明顯上升，且二者具有明顯的相關(guān)性。

監(jiān)測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病進(jìn)展，對于此類患者的臨床治療和預(yù)后具有重要意義。本文結(jié)果發(fā)現(xiàn)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組患者血清CTX-Ⅱ水平與SJC及DAS28評分均呈正相關(guān)(P<0.05)，而與TJC及ESR不相關(guān)(P>0.05)，血清HO-1水平與TJC及DAS28評分均呈正相關(guān)(P<0.05)，而與SJC及ESR不相關(guān)(P>0.05)，由于DAS28評分是評價(jià)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者疾病活動(dòng)程度的重要指標(biāo)，而血清CTX-Ⅱ和HO-1水平又均與DAS28評分呈正相關(guān)，這表明血清CTX-Ⅱ和HO-1水平與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病活動(dòng)程度呈正相關(guān)，檢測二者水平對于監(jiān)測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病活動(dòng)度具有積極意義。

綜上，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清CTX-Ⅱ和HO-1水平升高，且與患者的疾病活動(dòng)度呈正相關(guān)，是可用于監(jiān)測類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病活動(dòng)度的潛在指標(biāo)。