岳雪梅 胡彩云

(1.西安國際醫(yī)學(xué)中心醫(yī)院檢驗(yàn)中心，陜西 西安 710100；2.陜西省寧強(qiáng)縣中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科，陜西 寧強(qiáng) 724400)

宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)為宮頸癌的癌前病變，約15%的CIN會(huì)發(fā)展為宮頸癌[1]。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是一種重要的血管生成因子，在腫瘤血管形成的復(fù)雜機(jī)制中起著重要作用，被認(rèn)為是最具前景的癌癥標(biāo)志物之一[2]。緩激肽(BK)是激肽激酶系統(tǒng)產(chǎn)生的一種活性肽，近年研究[3]表明，BK參與了癌細(xì)胞增殖與血管生成的調(diào)控。卵泡刺激素(FSH)是一種垂體糖蛋白激素，在控制顆粒細(xì)胞中孕酮的合成起重要作用。目前，BK和FSH在宮頸癌變中的作用均不得而知[4]。為此，本研究檢測了CIN和宮頸癌患者血清中VEGF、BK、FSH的表達(dá)水平，以分析 VEGF、BK、FSH是否與宮頸癌變有關(guān)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年5月至2021年5月收治的宮頸病變患者60例，年齡25～67歲，平均(46.57±8.11)歲，均經(jīng)病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)明確診斷。包括CIN患者30例與宮頸癌患者30例，CIN組中CINⅡ13例，CINⅢ組17例。宮頸癌組中臨床分期：Ⅰ～Ⅱ期11例，Ⅲ～Ⅳ期19例；病理類型：鱗癌21例，腺癌9例；病理分級(jí)低分化10例，中高分化20例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例。同時(shí)選擇同期子宮肌瘤30例作為對照組，年齡28～63歲，平均(45.92±9.17)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：無合并其它惡性腫瘤、無放化療史以及無婦科手術(shù)史，排除臨床資料不齊全者。

1.2方法 收集整理患者的一般資料，包括年齡、初潮年齡、生育情況、吸煙史、家族史等。所有患者均采用PCR法行人乳頭瘤病毒(HPV)檢測，使用GeneAmp9700PCR基因擴(kuò)增儀(美國ABI公司)及人HPV基因分型檢測試劑盒(深圳亞能生物技術(shù)有限公司)，可測定高危型HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)與低危型HPV(6、11、13、32、34、40、42、43、44、53、54)的DNA。同時(shí)抽取靜脈外周血5 mL，離心獲取血清，檢測性激素、BK、VEGF水平。其中雌激素(E2)、FSH的檢測采用放射免疫法，使用AU5800 全自動(dòng)生化分析儀(德國貝克曼庫爾特公司) 及配套試劑盒。抗苗勒管激素(AMH ) 、BK、VEGF的檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISE)，使用 BIO-RAD-680全自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國 Thermo 公司)及配套試劑盒。嚴(yán)格按照試劑盒進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1各組患者一般資料及臨床資料比較 CIN組、宮頸癌組、對照組之間的BK、VEGF、FSH水平比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組患者一般資料及臨床資料比較

2.2CIN各亞組和宮頸癌BK、VEGF、FSH水平比較 宮頸癌組BK水平明顯高于CINⅡ組(P<0.05)；CINⅢ組和宮頸癌組VEGF水平明顯高于CINⅡ組(P<0.05)，同時(shí)宮頸癌組VEGF水平明顯高于CINⅢ組(P<0.05)；宮頸癌組FSH水平明顯高于CINⅡ組和CINⅢ組(P<0.05)。見表2。

表2 CIN各亞組和宮頸癌BK、VEGF、FSH水平比較

2.3BK、VEGF、FSH與高危型HPV感染的關(guān)系 CIN和宮頸癌組中共45例高危型HPV陽性，15例高危型HPV陰性，陽性組與陰性組BK、VEGF、FSH水平比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.763、0.955、0.389，P>0.05)。見表3。

表3 BK、VEGF、FSH與高危型HPV感染的關(guān)系

2.4BK、VEGF、FSH與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系 BK在宮頸癌不同臨床分期、病理類型、病理分級(jí)以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.748、0.255、0.562、2.014，P>0.05)；VEGF在Ⅲ～Ⅳ期中的表達(dá)水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期(t=3.568，P<0.05)，在不同病理類型、病理分級(jí)以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.914、1.786、2.924，P>0.05)；FSH在鱗癌中的表達(dá)水平明顯高于腺癌(t=3.551，P<0.05)，在不同臨床分期、病理分級(jí)以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.824、1.797、1.931，P>0.05)。見表4。

表4 BK、VEGF、FSH與宮頸癌臨床病理特征的關(guān)系

2.5相關(guān)性分析 BK、VEGF、FSH水平兩兩之間均無相關(guān)性(P>0.05)。

2.6BK、VEGF、FSH對宮頸癌的預(yù)測效能 以誤診率(1-特異度)為橫坐標(biāo)，以各指標(biāo)的敏感度為縱坐標(biāo)，繪制ROC圖，BK的曲線下面積(AUC)為0.611(95CI：0.548～0.918)，敏感度、特異度分別為59.2%、44.3%。VEGF的AUC為0.829(95CI：0.657～1.081)，敏感度、特異度分別為81.9%、74.6%。FSH的AUC為0.636(95CI：0.505～1.014)，敏感度、特異度分別為63.9%、66.1%。

3 討 論

新生血管的生成是腫瘤發(fā)生發(fā)展的必要條件。VEGF家族是惡性腫瘤發(fā)生過程中與血管生成相關(guān)的重要信號(hào)通路之一。本文結(jié)果顯示，從CIN至宮頸癌，血清VEGF水平明顯升高，且與宮頸癌的臨床分期相關(guān)。HPV感染與生殖道良惡性病變的關(guān)系已被明確證實(shí)，VEGF的表達(dá)似乎也與HPV感染有關(guān)。研究[5]表明，HPV腫瘤蛋白E6和E7是致癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵，E6可介導(dǎo)腫瘤抑制因子p53的降解，HPV 18 E6腫瘤蛋白可通過獨(dú)立的p53機(jī)制誘導(dǎo)VEGF-121轉(zhuǎn)錄。本文結(jié)果顯示，無論有無高危型HPV感染，其血清VEGF水平無明顯差異，未見高危型HPV感染對血清VEGF水平存在影響。

BK是由9個(gè)氨基酸組成的多肽，是激肽群中最重要的成員。有研究表明BK是腫瘤生長的多能效因子，可能通過MAPK、PKC、NF -κB、ERK等信號(hào)通路參與腫瘤的發(fā)生。在宮頸癌中，BK可能通過STAT3信號(hào)通路促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲[6]。本文結(jié)果顯示，健康者、CIN及宮頸癌患者的血清BK水平有差異，但與宮頸癌臨床病理特征無關(guān)。BK可通過刺激基質(zhì)金屬蛋白酶的生成而促進(jìn)腫瘤的遷移和侵襲，同時(shí)還可通過刺激VEGF的釋放促進(jìn)腫瘤的新生血管。本文結(jié)果中未見血清BK與VEGF具有相關(guān)性(P>0.05)。BK與HPV之間的關(guān)系尚無報(bào)道，本文結(jié)果中高危型HPV感染對血清BK水平無影響。以上提示尚無足夠的證據(jù)能夠證明BK與宮頸癌有關(guān)，也只能推測BK可能參與了宮頸癌變過程。FSH在卵泡生長和卵巢類固醇生成過程中發(fā)揮重要作用，可特異性結(jié)合其高親和力細(xì)胞結(jié)合受體(FSHR)，通過激活G蛋白、腺苷酸環(huán)化酶和蛋白激酶A等途徑上調(diào)雌激素生物合成相關(guān)基因的表達(dá)[7]。本文結(jié)果顯示，與健康組和CIN組相比，宮頸癌組的FSH水平顯著升高。盡管宮頸癌患者的FSH水平升高，但基本在正常范圍內(nèi)，而且與宮頸癌臨床病理特征及HPV感染的相關(guān)性弱，所以尚無法有力地證明FSH水平升高對宮頸癌的發(fā)生具有促進(jìn)作用，只限于推測。通過繪制ROC分析，通常認(rèn)為AUC>0.7可判斷為可靠性強(qiáng)，三個(gè)指標(biāo)中，只有VEGF的AUC達(dá)到了0.829，BK和FSH的AUC均<0.7，提示BK和FSH對宮頸癌的預(yù)測效能一般，而VEGF則對宮頸癌具有較強(qiáng)的預(yù)測效能。

綜上所述，血清VEGF升高與宮頸癌的發(fā)生密切有關(guān)，可作為宮頸癌早期預(yù)測、診斷及臨床評估的標(biāo)志物，而BK和FSH與宮頸癌的關(guān)系尚需進(jìn)一步研究。