陳蔚冰，陳蔚華，葉婷婷

(南昌大學(xué)附屬口腔醫(yī)院病理科,南昌 330006)

口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)約占頭頸部惡性腫瘤的95%，且在近十年有逐漸增長(zhǎng)的趨勢(shì)。根據(jù)組織病理表現(xiàn)不同，OSCC分為普通類型和特殊類型，其中特殊類型包括疣狀癌、乳頭狀鱗癌、基底細(xì)胞樣鱗癌、梭形細(xì)胞樣鱗癌、腺樣鱗狀細(xì)胞癌和腺鱗癌；因OSCC早期易發(fā)生浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，整體預(yù)后較差[1]，5年生存率僅為45%～50%，且復(fù)發(fā)率較高，因此找到一個(gè)與預(yù)測(cè)OSCC復(fù)發(fā)和預(yù)后相關(guān)的敏感標(biāo)志物至關(guān)重要。有文獻(xiàn)[2]指出，血清中鱗狀細(xì)胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen，SCC-Ag)水平高低與OSCC患者的病情復(fù)發(fā)和預(yù)后有關(guān)。SCC-Ag是一種為鱗癌標(biāo)記的糖蛋白，其特異性好而敏感性低，癌細(xì)胞不僅分泌中性成分SCC-Ag1，也分泌酸性成分SCC-Ag2[3]。因此本文將通過(guò)檢測(cè)OSCC患者血清中SCC-Ag2水平高低，探討血清中SCC-Ag2水平與OSCC預(yù)后相關(guān)病理參數(shù)的關(guān)系，以期為OSCC患者的預(yù)后提供可靠的血清標(biāo)志物。

1 材料與方法

1.1 病例選擇及分組

選取2019年11月至2021年11月南昌大學(xué)附屬口腔醫(yī)院就診的54例OSCC患者為OSCC組(17例收集到術(shù)后血清的患者中普通類型11例，特殊類型6例)。以同期入院非OSCC患者為對(duì)照組(n=15)。排除標(biāo)準(zhǔn)：小于18歲和大于80歲者；妊娠期及哺乳期女性；患有其他惡性腫瘤者；術(shù)前行放療/化療者；血清樣本溶血嚴(yán)重者。2組性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 SCC-Ag2的檢測(cè)

采集1.5 mL血清于EP管中置-20 ℃儲(chǔ)存，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)測(cè)定血清SCC-Ag2的水平；SCC-Ag2購(gòu)自CUSABIO公司——人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCC-Ag2)酶聯(lián)免疫試劑盒(產(chǎn)品編號(hào)CSB-E04776h)、生物安全柜、高速離心機(jī)、振蕩器、37 ℃溫育箱、干凈的移液器和槍頭、無(wú)菌的量筒和試管、去離子水。

1.3 觀察指標(biāo)

比較對(duì)照組和OSCC組(術(shù)前術(shù)后)血清SCC-Ag2的水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS25.0軟件統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)(四分位數(shù))表示；采用χ2檢驗(yàn)或曼惠特尼-U檢驗(yàn)等對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，采用線性回歸方程分析臨床病理參數(shù)與血清中SCC-Ag2水平相關(guān)性及ROC曲線分析算出SCC-Ag2的cut-off值。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 OSCC患者臨床病理參數(shù)

54例OSCC患者中，男37例，女17 例，年齡37～79歲，其中舌癌23例，牙齦癌14例，頰癌8例，口底癌4例，上腭癌3例；磨牙后區(qū)癌1例，下唇癌1例。相關(guān)臨床病理參數(shù)比較，結(jié)果顯示性別、部位、分化程度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 54例OSCC患者性別、年齡及臨床病理參數(shù)

2.2 OSCC組和對(duì)照組SCC-Ag2水平

OSCC組和對(duì)照組SCC-Ag2水平分別為0.59、0.45 μg·L-1，OSCC組SCC-Ag2水平高于對(duì)照組(P<0.05)。

2.3 OSCC患者臨床病理參數(shù)與血清中SCC-Ag2水平的關(guān)系

以血清SCC-Ag2水平為因變量做線性回歸分析，結(jié)果顯示腫瘤體積和分化程度與SCC-Ag2水平有關(guān)，且腫瘤體積和分化程度均與血清水平呈負(fù)相關(guān)(β=-0.324、β=-0.202，P<0.05)。 見(jiàn)表2。

表2 OSCC患者臨床病理相關(guān)參數(shù)與血清中SCC-Ag2水平的關(guān)系

2.4 不同類型OSCC患者術(shù)前術(shù)后血清SCC-Ag2之間的關(guān)系

術(shù)前術(shù)后,普通類型患者血清SCC-Ag2水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；特殊類型鱗癌術(shù)前血清SCC-Ag2水平高于術(shù)后，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 術(shù)前術(shù)后不同類型OSCC患者血清中SCC-Ag2水平比較 M(Q1，Q2)，μg·L-1

2.5 OSCC患者血清SCC-Ag2水平ROC曲線分析

OSCC患者血清SCC-Ag2水平為0.481 μg·L-1時(shí)，敏感度較高(77.78%)，但特異度僅為63.33%，診斷意義不大。見(jiàn)圖1、表4。

圖1 血清中SCC-Ag2水平診斷OSCC的ROC曲線

表4 血清中SCC-Ag2水平對(duì)OSCC的診斷價(jià)值

3 討論

SCC-Ag是1977年由Kato從宮頸癌組織中提取的一種分子量為48 000的糖蛋白，是T4-A的一個(gè)亞片段，基因位于18q21.3上，包括SCC1和SCC2 兩個(gè)基因，分別編碼SCC-Ag1和 SCC-Ag2糖蛋白，二者有高度的同源性[3-4]。許多研究表明血清中SCC-Ag水平可用作食管癌、頭頸癌和宮頸癌等惡性腫瘤的生物標(biāo)記物，可作為一種非創(chuàng)傷性手段進(jìn)行疾病的早期診斷、預(yù)測(cè)病情進(jìn)展、是否復(fù)發(fā)及治療效果[5-9]，其中癌細(xì)胞分泌的SCC-Ag2可以在血清中檢測(cè)到。為此，本文重點(diǎn)對(duì)OSCC患者血清中SCC-Ag2水平進(jìn)行研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，54例OSCC患者血清SCC-Ag2水平為0.207～2.111 μg·L-1，非OSCC患者血清中SCC-Ag2水平為0.111～0.925 μg·L-1，2組血清SCC-Ag2水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

LIN等[10研究發(fā)現(xiàn)術(shù)前血清SCC-Ag>2.0 μg·L-1與OSCC的病理狀態(tài)、淋巴結(jié)囊外擴(kuò)散及腫瘤浸潤(rùn)深度顯著相關(guān)，且晚期遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率高，因此推測(cè)術(shù)前血清SCC-Ag水平的升高與OSCC患者的無(wú)病生存率及總生存率可能有關(guān)，但該結(jié)論需要更長(zhǎng)的隨訪數(shù)據(jù)和病例數(shù)證實(shí)。而本研究結(jié)果顯示，OSCC患者的腫瘤分化程度、腫瘤體積與SCC-Ag2水平呈負(fù)相關(guān)，這一點(diǎn)與LIN等[10]的觀點(diǎn)不一致，其原因可能是兩者納入的SCC-Ag類型不同有關(guān)。本研究中OSCC組有6例為特殊類型鱗狀細(xì)胞癌，其中1例為腺樣鱗狀細(xì)胞癌，其血清中SCC-Ag2水平最高為2.111 μg·L-1，而腺樣鱗狀細(xì)胞癌預(yù)后較差，并且非OSCC患者與特殊類型鱗癌血清中SCC-Ag2水平相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)，本研究發(fā)現(xiàn)15例患者術(shù)后血清中SCC-Ag2水平較術(shù)前明顯降低，但有2例患者血清術(shù)后血清SCC-Ag2略微升高，推測(cè)這可能與患者術(shù)后機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)和個(gè)體差異有關(guān)；但特殊類型鱗癌患者的術(shù)后血清均降低，且與術(shù)前相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。李海如等[2]發(fā)現(xiàn)術(shù)前和術(shù)后血清SCC-Ag>1.5 μg·L-1的普通鱗癌患者具有明顯的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移傾向。這提示，SCC-Ag參與普通鱗癌的發(fā)生發(fā)展，其結(jié)果可以用來(lái)判斷病情的復(fù)發(fā)及是否轉(zhuǎn)移。

另外ROC曲線分析顯示，當(dāng)血清中SCC-Ag2水平為0.481 μg·L-1時(shí)，特異度較高，但是無(wú)診斷價(jià)值。YASUMATSU等[11]研究結(jié)果顯示，96例頭頸部(包括鼻旁竇、口腔、口咽部、喉咽部和喉部)鱗癌患者的血清SCC-Ag2水平顯著高于健康組(P<0.05)，但在口腔鱗狀細(xì)胞癌中，卻無(wú)顯著升高(P>0.05)。這一點(diǎn)與本文研究結(jié)果類似，雖然本研究中2組SCC-Ag2水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但其中有23例OSCC患者的血清SCC-Ag2水平與對(duì)照組保持相近范圍，而這一點(diǎn)與已知理論基礎(chǔ)——SCC-Ag2主要由癌細(xì)胞分泌存在于細(xì)胞中相反，推測(cè)可能與試劑類型不同有關(guān)，仍需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)加以佐證。

根據(jù)現(xiàn)有的文獻(xiàn)報(bào)道，SCC-Ag可聯(lián)合其他血清標(biāo)志物如長(zhǎng)鏈非編碼RNA AC007271.3[12]、Cyfra21-1[13]等作為OSCC的早期診斷。而NAKASHIMA等[3]指出，SCC-Ag1的過(guò)表達(dá)可以抑制頭頸部鱗癌細(xì)胞系的侵襲潛能，可作為預(yù)后標(biāo)記物，這提示SCC-Ag1參與口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展，其結(jié)果可以用來(lái)判斷病情的復(fù)發(fā)及是否轉(zhuǎn)移。但腎功能不全、肝功能障礙或患其他免疫性疾病者血清中也會(huì)出現(xiàn)SCC-Ag水平的升高，呈現(xiàn)假陽(yáng)性的結(jié)果，因此要結(jié)合其他檢測(cè)方法聯(lián)合應(yīng)用。

關(guān)于SCC-Ag2在OSCC中的血清水平變化的研究較少。SCC-Ag的測(cè)定多采用血清和組織樣本，VAN SCHAIK等[14]認(rèn)為采用細(xì)針吸取活檢技術(shù)從頭頸部鱗癌的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)獲得樣本，從而測(cè)定SCC-Ag水平，也是一種比較可靠的技術(shù)。但這一點(diǎn)仍需要更科學(xué)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和更大的樣本量來(lái)驗(yàn)證。目前大多數(shù)研究采用ELISA法或放射免疫測(cè)定法[15]對(duì)SCC-Ag進(jìn)行測(cè)定，且每一位研究者所選取的截?cái)嘀挡煌?，因而結(jié)論不一。因此，這3種檢測(cè)方法的一致性也可作為未來(lái)研究的方向。

5 結(jié)論

本研究中通過(guò)檢測(cè)OSCC患者血清中SCC-Ag2的水平，分析了口腔鱗癌相關(guān)組織病理學(xué)特征如腫瘤體積、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等，結(jié)果顯示腫瘤體積和組織分化程度與血清中SCC-Ag2的水平呈負(fù)相關(guān)，且OSCC患者血清中SCC-Ag2水平高于非OSCC患者血清中SCC-Ag2水平，但是血清中SCC-Ag2水平為0.481 μg·L-1時(shí)敏感度較高，但特異度較低，無(wú)診斷價(jià)值。因此，血清中SCC-Ag2水平可以作為預(yù)測(cè)OSCC患者預(yù)后的相關(guān)血清標(biāo)志物，但不能作為診斷的血清標(biāo)志物。