孫雪萍

（盱眙縣綜合檢驗檢測中心，江蘇淮安 211700）

氯是一種非金屬元素，在自然界中通常以氯化物形式存在[1]。氯離子參與維持人和動物正常的生理狀態(tài)[2]。但是人體不能靠自身合成氯，只能通過外界攝入來補充。氯離子的主要攝入來源是食用鹽，也就是氯化鈉[3]。而高鈉鹽攝入已被證明是引起高血壓和心血管疾病的重要誘因。在我國，畜禽肉是居民餐桌上最普遍的食材，但在有些畜禽肉或肉制品中氯的含量較多，而過量的氯的攝入可能會對人的健康造成不利影響，因此檢測畜禽肉中氯化物的含量并加以控制顯得尤為重要。

《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中氯化物的測定》 （GB 5009.44—2016）中，測定畜禽肉中氯化物含量的方法有電位滴定法、佛爾哈德法和銀量法[4]。其中銀量法、電位滴定法滴定終點前后的顏色變化肉眼不易辨別，容易出現(xiàn)人員誤差[5]。鉻酸鉀，硝酸銀等屬于有毒有害試劑，而且過程煩瑣，分析檢測流程較長。隨著時代科技的發(fā)展，離子色譜法逐漸發(fā)展成熟，具有穩(wěn)定性好、測定時間短、靈敏度較高等優(yōu)點，用于檢測無機陽離子和有機化合物的濃度[6-8]。因此本文提出離子色譜法檢測畜禽肉中氯化物的含量，通過多次試驗，證明其可行性，該方法彌補了國標(biāo)方法檢測的不足，可為畜禽肉類及肉制品中氯化物的檢測提供參考和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

試劑：氯離子標(biāo)準(zhǔn)溶液1000 mg·L-1（壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司）；去離子水。

儀器：CIC-D120型離子色譜儀，SH-AC-11型陰離子色譜柱（250 mm×4.6 mm），SHY-A-6型陰離子抑制器；SHRF-10淋洗液發(fā)生器、電導(dǎo)檢測器（均為青島盛瀚色譜技術(shù)有限公司）；BS224S型電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；KQ-500DE型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；TDKZ-1型恒溫振蕩水浴鍋（上海一恒科學(xué)儀器有限公 司）；Centrifuge 5804R型高速離心機（德國艾本德股份公司）。

1.2 試驗方法

1.2.1 樣品前處理

將樣品粉碎混勻，稱取2.5 g（精確至0.001 g）樣品于150 mL具塞錐形瓶中，加入80 mL水，20 min超聲提取，期間每隔5 min振搖1次，保證固相分散。置于80 ℃水浴中加熱20 min至可清晰看見有組織液滲透，加熱完成后自然冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移到 100 mL容量瓶，加水稀釋至刻度線，混勻。取其中的部分溶液，離心機10000 r·min-1離心15 min，取上 清，并用0.22 μm水性濾膜針頭濾器過濾，收集濾液到進(jìn)樣瓶中，以備進(jìn)樣。

1.2.2 標(biāo)液配制

分別準(zhǔn)確移取氯離子標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.05 mL、0.10 mL、 0.20 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、5.00 mL和10.00 mL于100 mL容量瓶中，用水稀釋并定容至標(biāo)線，混勻。制成氯離子濃度分別為0.50 mg·L-1、1.00 mg·L-1、2.00 mg·L-1、5.00 mg·L-1、10.0 mg·L-1、20.0 mg·L-1、50.0 mg·L-1和100.0 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)工作液。按從濃度低到高分別將標(biāo)準(zhǔn)工作液注入離子色譜儀中，得到各濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液色譜圖，利用軟件分析測定相應(yīng)的峰高或峰面積。

1.2.3 色譜條件

色譜柱：陰離子色譜柱4.6 mm×250 mm（帶保護(hù)柱4 mm×50 mm）；淋洗液：氫氧化鉀溶液，濃度為15 mmol·L-1；等度洗脫；流速1.2 mL·min-1；抑制器：電流75 mA；檢測器：電導(dǎo)檢測器，檢測池溫度：35 ℃；進(jìn)樣體積：25 μL。

1.2.4 結(jié)果計算

氯離子含量的計算公式為

式中：X為試樣中氯化物的含量（以氯離子計），mg·kg-1；ρ為測定用試樣溶液中的氯離子濃度，mg·L-1；ρ0為試劑空白液中氯離子的濃度，mg·L-1；V為試樣溶液體積，mL；f為試樣溶液稀釋倍數(shù)； 1000為換算系數(shù)；m為試樣取樣量，g。

2 結(jié)果與分析

2.1 淋洗液濃度和流速對保留時間的影響

2.1.1 淋洗液濃度優(yōu)化

淋洗液流速為1.0 mL·min-1，濃度分別設(shè)為 10 mmol·L-1、15 mmol·L-1、20 mmol·L-1時，氯離子的保留時間分別為8.25 min、6.88 min、5.92 min。淋洗液濃度過大則保留時間提前，分離不完全；濃度過小則出峰位置過后，浪費時間。濃度為15 mmol·L-1最為合適。

2.1.2 淋洗液流速優(yōu)化

淋洗液濃度為15 mmol·L-1，流速分別設(shè)為 1.0 mL·min-1、1.2 mL·min-1、1.5 mL·min-1時，氯離子的保留時間分別為6.88 min、5.66 min、4.52 min。淋洗液流速大于1.2 mL·min-1時，基線不穩(wěn)定，壓力過大，對儀器不友好；流速過小則耗費時間。流速為 1.2 mL·min-1效果最優(yōu)。

經(jīng)過多次試驗，在淋洗液濃度為15 mmol·L-1，流速為1.2 mL·min-1時氯離子出峰效果最好，標(biāo)液色譜圖如圖1所示。雞肉樣品經(jīng)前處理后在此色譜條件下的離子色譜圖見圖2。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

以標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)x，以峰面積為縱坐標(biāo)y，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如圖3。由圖3可得出，標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=0.439413x-0.023245，相關(guān)系數(shù)r=0.999731，線性關(guān)系良好。

2.3 方法檢測限

將標(biāo)準(zhǔn)工作液分別稀釋并制成不同濃度的溶液，精密吸取上述溶液，分別進(jìn)樣進(jìn)行測定，根據(jù) GB/T 27404—2008提供的方法[9]，按照下列公式計算得出檢出限為0.123 mg·L-1。

式中：CL為方法檢出限；Sb為空白值標(biāo)準(zhǔn)偏差；b為方法校標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率。

2.4 精密度與準(zhǔn)確度

2.4.1 精密度

對氯離子濃度分別為1.0 mg·L-1、5.0 mg·L-1、10.0 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)工作液，進(jìn)行6次平行測定，結(jié)果見表1。相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為3.69%、1.63%、2.87%，均屬允許范圍，表明本試驗方法的精密度 較好。

圖1 氯離子標(biāo)液色譜圖

圖2 雞肉樣品色譜圖

圖3 氯離子標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.4.2 準(zhǔn)確度

分別向雞肉、豬肉樣品中加入氯離子含量為 5.0 mg·L-1、10.0 mg·L-1和20.0 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)工作液并進(jìn)行測定，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程進(jìn)行計算，結(jié)果如表2所示。加標(biāo)回收率為94.3%～105.0%，符合《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》（GB/T 27404— 2008）的要求，準(zhǔn)確度較高。

表1 方法精密度結(jié)果

表2 加標(biāo)回收率結(jié)果

2.5 比較試驗

用本法與GB 5009.44—2016國標(biāo)法進(jìn)行比較，對5份樣品進(jìn)行測定，結(jié)果見表3，對兩種方法所得結(jié)果進(jìn)行配對t檢驗，二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=0.02727，P＞0.05）。

表3 兩法對照試驗結(jié)果（以Cl-計，%）

3 結(jié)論

通過對該方法的準(zhǔn)確性和精密度等的驗證，結(jié)果均能滿足檢測需求且符合國家要求。用離子色譜法測定畜禽肉中氯化物具有結(jié)果理想和靈敏性好等優(yōu)點。用此方法測定畜禽肉中的氯化物含量與國標(biāo)提供的參考方法相比，樣品前處理簡單，能夠有效提高分析質(zhì)量和工作效率，所用試劑少且安全，利于環(huán)境保護(hù)，能為日后相關(guān)研究提供參考和支持。