鈄凌娟，王琤帥，陳有來，吳梅，李根有，傅楊群

(1.金華市農(nóng)業(yè)科學研究院，浙江 金華 321017；2.金華市食品藥品檢驗檢測研究院，浙江 金華 321001；3.磐安縣雙溪鄉(xiāng)綜合農(nóng)技服務中心，浙江 金華 322309；4.浙江農(nóng)林大學 暨陽學院，浙江 紹興 311800；5.浙江大成藥業(yè)有限公司，浙江 磐安 322305)

覆盆子為薔薇科植物掌葉覆盆子的干燥果實，用于腎虛遺尿、小便頻數(shù)、陽瘓早泄、遺精滑精等癥的治療[1]，其功能和療效民間基礎好、認可度高，同仁堂、胡慶余堂和九芝堂等諸多國內(nèi)知名的中成藥生產(chǎn)企業(yè)均對該藥材有大量需求。浙江為覆盆子道地產(chǎn)區(qū)，栽培面積達0.49萬hm2[2]，但是近幾年發(fā)現(xiàn)，市場上覆盆子鞣花酸含量常常達不到藥典規(guī)定標準，對整個覆盆子產(chǎn)業(yè)造成不良影響。本文從種源、施肥、遮陰、果實成熟階段、炮制方法等方面對覆盆子鞣花酸含量的影響因素開展研究，為栽培和加工過程中提高覆盆子鞣花酸含量提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

種源對比試驗在磐安縣雙溪鄉(xiāng)進行，海拔560 m，砂壤土，土壤肥力中等。施肥對比試驗在塔石鄉(xiāng)進行，海拔 240 m，砂壤土，土壤肥力中等。遮陰對比試驗在蘭溪市水亭鄉(xiāng)天保藥材發(fā)展有限公司進行，海拔52 m，黃壤土，土壤肥力較差。成熟階段對比試驗的覆盆子采自塔石鄉(xiāng)試驗點，炮制方法對比試驗的果實采自蘭溪市水亭鄉(xiāng)天保藥材發(fā)展有限公司試驗點。試驗收集了浙江中西部13個種質(zhì)資源，具體采集地點和編號如表1。2020年5月6日果實青轉(zhuǎn)黃時采集，采用45 ℃低溫烘干。以上栽培及采集的覆盆子經(jīng)浙江農(nóng)林大學暨陽學院植物分類學教授李根有鑒定，均為掌葉覆盆子。

1.2 處理設計

1.2.1 不同施肥方案對覆盆子鞣花酸含量影響

試驗設置每叢施羊糞0.5 kg、羊糞1 kg、硫酸鉀復合肥100 g、硫酸鉀復合肥200 g、不施肥(CK)5個處理，每處理重復3次。所用的羊糞為湖州購買，硫酸鉀復合肥為史丹利品牌，在2020年2月22日灑施在樹盤附近。2020年4月28日果實青轉(zhuǎn)黃時采摘，采用45 ℃低溫烘干。

1.2.2 不同遮陰處理對覆盆子鞣花酸含量影響

據(jù)相關研究，遮陰對植物的光合特性及基因轉(zhuǎn)錄有影響[3]，為避免長期遮陰對覆盆子坐果產(chǎn)生影響，進而影響產(chǎn)量，試驗采取了短期遮陰，即坐果后再進行遮陰的處理。試驗設置50%遮陰度、75%遮陰度和不遮陰3個處理，每處理重復3次。遮陰網(wǎng)于2020年4月14日覆蓋，2020年4月28日果實青轉(zhuǎn)黃時采摘，采用45 ℃低溫烘干。

1.2.3 不同成熟階段覆盆子鞣花酸含量比較

試驗于2020年5月5日開始采集轉(zhuǎn)白、轉(zhuǎn)黃、轉(zhuǎn)橙、軟熟4個階段果實，每處理重復3次，采用45 ℃烘干。

1.2.4 不同炮制方法對覆盆子鞣花酸含量影響

2020年4月28日果實青轉(zhuǎn)黃時采摘覆盆子，設曬干、45 ℃烘干、蒸青后45 ℃烘干再回潮發(fā)酵、開水焯后曬干4個處理，每個處理重復3次。

1.2.5 鞣花酸測定

按《中國藥典》(2015版)測定方法測定[1]。

1.3 數(shù)據(jù)分析與處理

使用Excel 2019對數(shù)據(jù)進行整理，用SPSS25.0軟件進行單因素和雙因素分析，單因素試驗用ANOVA方差分析，用LSD法進行多重比較；雙因素試驗采用雙因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同種源覆盆子鞣花酸含量對比

從表1看，不同種源覆盆子鞣花酸含量在0.055 0%～0.135 7%，都未達到藥典要求的含量0.2%。種源間鞣花酸含量相差較大，很多相互間達到了極顯著差異。其中JY-04的鞣花酸含量最高，為0.135 7%，極顯著高于其他種源，比本地種源(CK)高；JY-01的鞣花酸含量最低，為0.055 0%，比本地種源(CK)低，極顯著低于除JY-05外的其他種源。

表1 不同種源覆盆子鞣花酸含量對比

2.2 不同施肥方案對覆盆子鞣花酸含量影響

由表2可知，施肥處理的覆盆子鞣花酸含量總體比不施肥(CK)的高。其中施硫酸鉀復合肥的鞣花酸含量提高較多，施200 g硫酸鉀復合肥的鞣花酸含量最高，為0.072 3%。但不同施肥處理間覆盆子鞣花酸含量方差分析差異不顯著，羊糞和硫酸鉀對覆盆子鞣花酸含量的影響均不顯著。因此從本試驗看，施肥對覆盆子鞣花酸含量的提高有一定作用，但效果不顯著。

表2 不同施肥方案對覆盆子鞣花酸含量影響

2.3 遮陰處理對覆盆子鞣花酸含量影響

由表3可知，遮陰處理的覆盆子鞣花酸總體含量比不遮陰處理(CK)高，其中50%遮陰的覆盆子鞣花酸含量最高，比不遮陰(CK)高23.63%。各遮陰處理間達到極顯著差異，說明遮陰對覆盆子鞣花酸含量影響效果明顯。

表3 遮陰處理對覆盆子鞣花酸含量影響

2.4 不同成熟階段覆盆子鞣花酸含量比較

由表4可知，覆盆子鞣花酸含量隨著果實成熟度的提高逐漸下降。軟熟階段鞣花酸含量最低，為0.040 0%；轉(zhuǎn)白階段鞣花酸含量最高，為0.056 9%，比軟熟階段高。轉(zhuǎn)白階段覆盆子鞣花酸含量顯著低于轉(zhuǎn)橙階段，軟熟覆盆子的鞣花酸含量極顯著低于其他成熟階段覆盆子。

表4 不同成熟階段覆盆子鞣花酸含量比較

2.5 炮制方法對覆盆子鞣花酸含量影響試驗

由表5看出，使用曬干、烘干回潮發(fā)酵再烘干、45 ℃烘干這3種炮制方法的覆盆子的鞣花酸含量都極顯著高于開水焯后曬干，曬干和烘干回潮發(fā)酵再烘干的炮制技術鞣花酸含量達到《中國藥典》要求，并且使用烘干回潮發(fā)酵再烘干炮制方法的覆盆子鞣花酸含量超出《中國藥典》含量標準較多，達0.737 8%。

表5 炮制方法對覆盆子鞣花酸含量影響

3 討論

中藥材在炮制過程中受外界條件影響，極易引起外觀性狀、有效成分及生物活性的轉(zhuǎn)變，直接影響到中藥材的藥用價值與經(jīng)濟價值[4-6]。從本試驗看，炮制方法對覆盆子鞣花酸含量影響較大，烘干回潮發(fā)酵再烘干的覆盆子鞣花酸含量較大幅度地超過《中國藥典》要求，這可能與覆盆子蒸青后，使相關的酶失活[7]，減少了鞣花酸采后的分解有關，其中原理還需要進一步深入研究。近年來，隨著覆盆子產(chǎn)量增加，農(nóng)戶采摘后多為晴天直接曬干或陰雨天低溫烘干，省工省力，蒸青再烘干技術較少采用，但從本試驗看，該技術提升覆盆子鞣花酸含量效果明顯，在實際生產(chǎn)中值得推廣。

本試驗考慮到浙江地區(qū)覆盆子采摘時期常遇陰雨天氣，烘干處理方便實用，所以在種源、肥料、遮陰、成熟階段等對覆盆子鞣花酸含量的影響的試驗中，都采用了45 ℃烘干處理，這可能是造成這幾個試驗中的覆盆子鞣花酸含量未能達到《中國藥典》標準的原因。

但從總體來看，除炮制方法外，仍可觀察出以下因素對覆盆子鞣花酸含量的影響：(1)掌葉覆盆子種源間差異顯著，這與姚鑫等[8]發(fā)現(xiàn)的掌葉覆盆子單株間藥用組分變異豐富的結(jié)論相一致；縉云雙溪口鄉(xiāng)松樹崗村的1個種源(JY-04)的覆盆子鞣花酸含量最高，極顯著高于其他種源；(2)施羊糞和硫酸鉀復合肥都能提高覆盆子鞣花酸含量，但效果不顯著；(3)隨著覆盆子果實成熟度提高，鞣花酸含量逐漸降低，與孫乙銘等[9]開展的覆盆子成熟過程顏色表征及其與品質(zhì)指標消長的相關性研究結(jié)論一致；(4)短期遮陰處理的覆盆子鞣花酸含量較不遮陰高，這可能與短期遮陰條件下，覆盆子成熟度低于不遮陰有關，也從另一方面驗證了本試驗覆盆子鞣花酸含量隨著果實成熟度提高逐漸降低的結(jié)論。75%遮陰的覆盆子鞣花酸含量不如50%遮陰的覆盆子，可能與遮陰提高到一定程度，會逐漸影響覆盆子果實發(fā)育有關，需要進一步深入研究。