金穎慧，閆國(guó)強(qiáng)，張俊艷，張 倩，李寶芬

（河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，河北 滄州 061000）

骨質(zhì)疏松癥為全身慢性代謝性疾病，主要特征是骨密度降低、骨微結(jié)構(gòu)破壞，造成骨脆性增加［1］，易導(dǎo)致骨折。其嚴(yán)重的不良反應(yīng)事件為發(fā)生脆性骨折，較輕的碰撞、跌倒，甚至咳嗽均可能導(dǎo)致骨折發(fā)生，威脅老年人的身體健康。骨密度受一系列細(xì)胞因子、信號(hào)通路的影響和控制。骨代謝過(guò)程中的信號(hào)傳遞調(diào)控機(jī)制的障礙為誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松癥關(guān)鍵因素，對(duì)于Wnt信號(hào)通路影響骨代謝調(diào)節(jié)機(jī)制的研究日益增多，該通路分為經(jīng)典與非經(jīng)典兩類(lèi)，目前僅對(duì)前者的研究較多。中醫(yī)藥防治骨質(zhì)疏松癥日益受到重視，并突顯出巨大優(yōu)勢(shì)。在此，以“Wnt/β-catenin 信號(hào)通路”“骨質(zhì)疏松癥”“中醫(yī)藥”為關(guān)鍵詞，檢索國(guó)內(nèi)外數(shù)據(jù)庫(kù)中相關(guān)文獻(xiàn)，總結(jié)Wnt/βcatenin 信號(hào)通路對(duì)骨質(zhì)疏松癥的影響及中醫(yī)藥防治骨質(zhì)疏松癥的研究進(jìn)展?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 發(fā)病機(jī)制

骨質(zhì)疏松癥主要發(fā)病機(jī)制為骨代謝失衡，即骨吸收大于形成，其以破骨細(xì)胞活動(dòng)占優(yōu)勢(shì)或成骨細(xì)胞活動(dòng)不足、成骨性刺激不夠等為主要致病因素［2-3］。骨系統(tǒng)平衡一旦被打破，會(huì)導(dǎo)致骨量減少、骨密度下降，引發(fā)骨質(zhì)疏松。骨重建可維持骨代謝平衡，該過(guò)程包括激活、骨吸收、偶聯(lián)、骨形成、休止5 個(gè)階段［4］。成骨細(xì)胞（骨形成細(xì)胞）和破骨細(xì)胞（骨吸收細(xì)胞）在骨重建過(guò)程中起主要作用，其可成為治療骨質(zhì)疏松癥的著手點(diǎn)。

2 Wnt/β-catenin 通路與疾病的關(guān)系

Wnt/ β -catenin 信號(hào)通路在調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化、凋亡、存活及癌變等過(guò)程中起重要作用，這可能與其參與骨代謝有關(guān)［5］。Wnt/ β -catenin 通路主要由細(xì)胞外Wnt 配體蛋白（Wnt1、Wnt3、Wnt3a、Wnt7b、Wnt8等）、細(xì)胞膜上的受體［Frizzled 家族分子和低密度脂蛋白受體5/ 6（LRP5/ 6）］、細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)蛋白［β 聯(lián)蛋白（β -catenin）、Dsh 蛋白（Dsh）、APC 蛋白（APC）、軸蛋白（Axin）、糖原合成激酶3β（GSK -3β）等］以及細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子［T 細(xì)胞因子/ 淋巴增強(qiáng)因子（TCF/ LEF）］等幾部分組成［5］。有研究表明，Wnt 信號(hào)通路可通過(guò)調(diào)控成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞，引發(fā)骨改建，影響骨形成和骨代謝，進(jìn)而改善骨質(zhì)疏松癥程度［6-8］。

成骨細(xì)胞是由成骨細(xì)胞前體衍生而來(lái)的單核細(xì)胞單位。它負(fù)責(zé)制造骨的主要蛋白和骨鈣素、骨橋蛋白等Ⅰ型膠原蛋白，構(gòu)成骨的有機(jī)環(huán)境；還負(fù)責(zé)骨礦化和制造酶堿性磷酸鹽。研究顯示，成骨細(xì)胞在控制破骨細(xì)胞形成中起重要作用［9］。骨細(xì)胞為另一種類(lèi)型骨組織的細(xì)胞，主要源于成骨細(xì)胞中骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSCs）分化，也參與骨的維持和礦化。許多不同骨骼疾病的治療方法均通過(guò)骨細(xì)胞發(fā)揮作用。激活Wnt/ β -catenin信號(hào)通路可促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖，且可調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化的各個(gè)時(shí)期，例如Wnt3a 可通過(guò)Wnt/ β -catenin信號(hào)通路，促進(jìn)BM-MSCs 向成骨細(xì)胞分化，并且在成骨誘導(dǎo)的早期刺激效果最明顯，在成骨誘導(dǎo)的后期，Wnt3a對(duì)成骨誘導(dǎo)效果明顯減弱［10］。當(dāng)BM-MSCs開(kāi)始向成骨方向分化時(shí)，Wnt信號(hào)通路可促使干細(xì)胞向成骨分化，即細(xì)胞形態(tài)由梭形轉(zhuǎn)變?yōu)槎嘟切危?1］。而Wnt信號(hào)通路的拮抗分子，如分泌型卷曲相關(guān)蛋白（SFRP）、通路抑制劑Dickkopf -1（DKK1）等在成骨細(xì)胞分化后期表達(dá)量明顯增加，可阻止Wnt 蛋白的下行傳導(dǎo)，阻礙成骨細(xì)胞的活動(dòng)，進(jìn)而抑制成骨；反之，拮抗分子的失活則可導(dǎo)致高骨密度癥［12］。LRP5 在骨代謝中起重要作用，作為Wnt受體和β-catenin 的上游基因，其激活可導(dǎo)致骨量增高，失活則可導(dǎo)致骨量減少，進(jìn)而誘發(fā)骨質(zhì)疏松癥［13］。β -catenin 為Wnt 信號(hào)通路的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中起重要作用，當(dāng)激活Wnt信號(hào)通路時(shí)，β -catenin 通過(guò)與核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子（TCF/ LEF）DNA結(jié)合，改變DNA 結(jié)構(gòu)啟動(dòng)下游靶基因的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)成骨細(xì)胞的分化、增殖；β -catenin 的缺失可使成骨細(xì)胞的數(shù)量減少，破骨細(xì)胞數(shù)量增加，從而影響骨的生理功能，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松［14］。Wnt信號(hào)通路中的GSK-3β具有雙向作用，其通過(guò)磷酸化β-catenin促進(jìn)其降解進(jìn)而減少其含量，抑制成骨細(xì)胞的分化增殖；同時(shí)GSK-3β可與Axin 向細(xì)胞膜移動(dòng)并結(jié)合配體，磷酸化LRP5/ 6 并形成的大量蛋白質(zhì)體可阻斷GSK3β，促進(jìn)β-catenin活動(dòng)。GSK -3β 抑制劑可通過(guò)誘導(dǎo)成骨細(xì)胞分化及促進(jìn)骨形成增加骨密度［15］。研究表明，Wnt 可直接影響前體細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的總過(guò)程，當(dāng)成骨細(xì)胞外Wnt蛋白與細(xì)胞膜上受體LRP5/LRP6 結(jié)合后，通過(guò)與細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的Dsh、GSK-3β，Axin，DKKs 等相互作用形成二聚體，升高β -catenin 水平，進(jìn)而進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，通過(guò)TCF/LEF1 影響Runx2 及Osterix 的表達(dá)，促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖與分化［16-19］。

Wnt/β-catenin 信號(hào)通路激活后可調(diào)控破骨細(xì)胞的表達(dá)，對(duì)其生成、分化過(guò)程具有重要的影響［20-21］。破骨細(xì)胞是由骨髓巨噬細(xì)胞在關(guān)鍵細(xì)胞因子、巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）、核因子（NF-κB）配體受體激活因子（RANKL）的存在下產(chǎn)生的［22］，為致死性分化的髓樣多核破骨細(xì)胞前體，其轉(zhuǎn)化可消除礦化骨環(huán)境。破骨細(xì)胞前體在血液中流動(dòng)，由這些前體的合成產(chǎn)生骨髓和成體破骨細(xì)胞。在骨吸收過(guò)程中，破骨細(xì)胞附著于骨，并在其細(xì)胞質(zhì)的大致圓形延伸中與骨基質(zhì)形成密封，在這些密封區(qū)域內(nèi)，破骨細(xì)胞形成皺褶的邊界膜。這種封閉和分泌意味著骨基質(zhì)降解，骨礦物質(zhì)溶解，可保護(hù)鄰近細(xì)胞免受鹽酸傷害。Wnt/ β -catenin 信號(hào)通路主要的配體Wnt3a 與破骨細(xì)胞具有密切關(guān)系。Wnt3a通過(guò)與破骨細(xì)胞表面的卷曲蛋白（Frz）和LRP5/ LRP6復(fù)合物結(jié)合，激活Wnt 信號(hào)通路，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)的Axin-APC -GSK -3β 復(fù)合體形成，導(dǎo)致GSK -3β 無(wú)法磷酸化β -catenin，當(dāng)后者在破骨細(xì)胞內(nèi)聚集到一定濃度后，就會(huì)進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄而發(fā)揮作用［23］，在任何狀態(tài)下，破骨細(xì)胞中β-catenin的失活均能增加破骨細(xì)胞的數(shù)量和骨吸收，導(dǎo)致骨量減少［24］。成骨細(xì)胞內(nèi)Wnt信號(hào)改變會(huì)引起其分化，一小部分可能由破骨細(xì)胞功能改變或RANKL 信號(hào)通路改變引起［23］。而成骨細(xì)胞或其他細(xì)胞產(chǎn)生的Wnts 也會(huì)影響破骨細(xì)胞功能。如成骨細(xì)胞來(lái)源的Wnt5a 可增強(qiáng)破骨細(xì)胞分化［25］。但有相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，人體即便在缺少骨保護(hù)素（OPG）的條件下，Wnt系統(tǒng)依然具有骨保護(hù)的作用［24］。

3 中醫(yī)病解及中藥點(diǎn)評(píng)

3.1 中醫(yī)病解

骨質(zhì)疏松癥屬中醫(yī)“骨痿”“骨痹”“骨枯”“骨極”范疇。古文中也有“歷節(jié)”“骨肉疏薄”等相似記載［26］。中醫(yī)理論認(rèn)為，腎為先天之本，主骨，滋養(yǎng)骨骼，《素問(wèn)·六節(jié)臟象論》曰“腎者……封藏之本……其充在骨”，腎精充足骨髓得養(yǎng)，腎精不足則骨痿無(wú)力。《靈樞·本臟》有論述“經(jīng)脈者，所以行血?dú)舛鵂I(yíng)陰陽(yáng)，濡筋骨，利關(guān)節(jié)者也”，瘀血阻滯，氣血不能濡養(yǎng)骨骼，則關(guān)節(jié)不利。骨質(zhì)疏松癥病位雖在骨骼，但存在臟腑失調(diào)，腎臟及脾胃功能失司，病因病機(jī)有虛有實(shí)，多以虛為主，氣虛及腎氣不足為根本，脾胃虛損、脈絡(luò)瘀阻是發(fā)病的重要因素。相關(guān)文獻(xiàn)表明，腎虛是原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥發(fā)生發(fā)展的重要病機(jī)。而補(bǔ)益藥可改善患者的腎陰虛、腎陽(yáng)虛癥狀，有補(bǔ)氣血陰陽(yáng)功效，以助患者補(bǔ)陽(yáng)滋陰，調(diào)和氣血，益氣健脾［27］。

3.2 中藥點(diǎn)評(píng)

近年來(lái)，許多經(jīng)典中藥方，如左歸丸［28］、益骨湯［29］、壯骨止痛方［30］等均被證實(shí)具有上調(diào)Wnt/ β -catenin 通路表達(dá)、促進(jìn)BMSCs 成骨分化、增加骨密度的作用。中藥復(fù)方［31］組成以滋補(bǔ)肝腎類(lèi)淫羊藿、補(bǔ)骨脂、骨碎補(bǔ)等為主，配以熟地黃、白芍等補(bǔ)血藥，或黃芪等補(bǔ)氣藥等加減而成。大部分上述中藥被證實(shí)可通過(guò)調(diào)控Wnt 信號(hào)通路或下游靶基因表達(dá)促進(jìn)骨形成和骨礦化，故挑選其中應(yīng)用頻率較高的5種總結(jié)如下。

熟地黃：性溫，味甘，功效長(zhǎng)于補(bǔ)?！侗静菥V目》中記載熟地黃“填骨髓，長(zhǎng)肌肉，生精血，補(bǔ)五臟、內(nèi)傷不足”?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，熟地黃含梓醇、地黃苷（A，B，D 等）、地黃素、氨基酸、糖類(lèi)等成分，具有抗氧化、抗癌、抗衰老、影響骨代謝等作用［32-33］。熟地黃可促進(jìn)骨形成，抑制骨破壞，延緩骨量丟失，促進(jìn)骨系統(tǒng)平衡，進(jìn)而防治骨質(zhì)疏松癥。臨床研究發(fā)現(xiàn)六味地黃丸聯(lián)合唑來(lái)膦酸治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥，可通過(guò)降低血清中Ⅰ型原膠原氨基端前肽（PINP）、β-膠原降解產(chǎn)物（β-CTX）、堿性磷酸酶（ALP）及骨鈣素（BGP）的水平，進(jìn)而使腰椎1-4、全髖關(guān)節(jié)骨和左側(cè)股骨頸部位的骨密度增加，緩解患者的骨質(zhì)疏松癥癥狀［34］。另有研究表明，右歸丸聯(lián)合阿侖膦酸鈉治療腎陽(yáng)虛證型的絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥，可在一定程度上改善骨密度并緩解患者因骨質(zhì)疏松癥導(dǎo)致的腰背部疼痛，緩解其疲勞癥狀［35］。熟地黃在中藥復(fù)方中多作為君藥發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松的作用。研究發(fā)現(xiàn)，地黃水提物治療去卵巢骨質(zhì)疏松癥模型大鼠8周后，實(shí)驗(yàn)大鼠的股骨及腰椎骨密度均顯著增加，且不影響其雌激素水平［36］。歐莉等［37］研究表明，熟地黃配伍黃芪能明顯升高Wnt2、LRP5 及β -catenin mRNA 的表達(dá)水平，說(shuō)明熟地黃-黃芪可能通過(guò)激活Wnt/ LRP/ β -catenin 信號(hào)通路，抑制β -catenin的降解，使β -catenin 穩(wěn)定積聚于細(xì)胞質(zhì)中，進(jìn)而促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖分化，調(diào)節(jié)骨代謝。

淫羊藿：性溫，味辛、甘，長(zhǎng)于壯腎陽(yáng)?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》云：“淫羊藿主陰痿絕傷，益氣力，強(qiáng)志。”《本草綱目》指出，淫羊藿具有“強(qiáng)心力、堅(jiān)筋骨、益精氣、實(shí)腰膝”功效。研究表明，淫羊藿具有雌激素樣作用，無(wú)毒副作用，口服后產(chǎn)生的活性代謝產(chǎn)物能直接刺激BM-MSCs的增殖，并誘導(dǎo)其向成骨細(xì)胞方向分化，從而改善骨質(zhì)疏松［38-40］。臨床運(yùn)用淫羊藿總黃酮治療老年骨質(zhì)疏松性橈骨遠(yuǎn)端骨折，可有效縮短骨折愈合時(shí)間，促進(jìn)腕關(guān)節(jié)功能恢復(fù)，改善骨質(zhì)疏松效果明顯［41］。且淫羊藿可有效增加患者的骨密度，緩解腰背疼痛程度，對(duì)骨質(zhì)疏松癥療效確切［42］。淫羊藿總黃酮為淫羊藿的主要有效成分，具有提高BM -MSCs 向成骨分化的能力以及抑制破骨細(xì)胞活性和破骨細(xì)胞生成的雙重活性，可防治骨質(zhì)疏松癥［43-45］；淫羊藿素對(duì)大鼠BM-MSCs 的增殖效果具有濃度依賴(lài)性［46］；淫羊藿苷通過(guò)ERα -Wnt/ β -catenin 通路促進(jìn)BMSCs 向成骨分化，促進(jìn)骨生成，并可利用ERα 相關(guān)的OPG/RANKL/RANK 系統(tǒng)，抑制破骨細(xì)胞生成，進(jìn)而抑制骨吸收［47］。李磊等［48］研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿苷可誘導(dǎo)MSCs 向成骨細(xì)胞分化，也可通過(guò)促進(jìn)Wnt3a相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)促進(jìn)MSCs向成骨細(xì)胞分化。還發(fā)現(xiàn)，淫羊藿苷能提高ALP 活性，促進(jìn)鈣化結(jié)節(jié)的形成，從而促進(jìn)BMSCs 向成骨細(xì)胞分化。進(jìn)一步研究表明，淫羊藿可明顯上調(diào)成骨分化基因（Runx2，osteopotin，DLX5，osteocalcin，collagen type I，ERα）以及Wnt信號(hào)通路相關(guān)基因（β-catenin，Lef1，TCF7，c-jun，c-myc，cyclin D）的表達(dá)，但該促進(jìn)作用可被Wnt/β-catenin信號(hào)通路的抑制劑DKK1抑制［49］?？梢?jiàn)，淫羊藿可能通過(guò)激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路防治骨質(zhì)疏松癥。

黃芪：味甘，性微溫，歸脾、肺二經(jīng)，補(bǔ)益力較強(qiáng)，且有直接補(bǔ)腎氣的作用，《本草綱目》第十二卷草部一中記載“黃芪，氣味甘，微溫，無(wú)毒。主治補(bǔ)虛，小兒百病，又補(bǔ)丈夫虛損，五勞羸瘦，益氣，利陰氣。主虛喘，腎衰耳聾”［50］。《湯液本草》中指出，黃芪“治傷寒尺脈不至，又補(bǔ)腎臟元?dú)?，為里藥，是上中下?nèi)外三焦之藥”，明確其“補(bǔ)腎臟元?dú)狻保?1］?！度杖A子本草》中記載黃芪具有“助氣，壯筋骨”功效［52］。臨床運(yùn)用黃芪可很好地緩解患者的腰腿疼痛、麻木無(wú)力等骨質(zhì)疏松癥狀，其組方能抑制破骨細(xì)胞，減輕骨丟失程度，從而發(fā)揮抑制骨組織的吸收和增加骨量的作用［53］。黃芪主成分為黃酮類(lèi)、黃芪多糖，其具有提升免疫力、抗病毒、抗菌、保護(hù)心腦血管的重要作用，且在治療骨質(zhì)疏松癥方面療效明顯。黃芪多糖可通過(guò)促進(jìn)成骨細(xì)胞MC-3T3-E1的增殖發(fā)揮防治骨質(zhì)疏松癥的作用［54］。黃芪可提高性激素水平及胃腸消化與吸收功能，并可促進(jìn)鈣、磷、鎂等眾多微量元素的吸收，促使骨量增多及骨密度升高［55］。此外，骨質(zhì)疏松癥以黃芪治療，患者腰椎和股骨骨密度值會(huì)隨治療時(shí)間延長(zhǎng)而顯著升高，腎虛癥的評(píng)分呈明顯下降趨勢(shì)，癥狀改善明顯。大量研究證實(shí)，黃芪及其復(fù)方是通過(guò)Wnt/β -catenin 信號(hào)通路促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖、礦化和表達(dá)，從而發(fā)揮防治骨質(zhì)疏松癥的作用。黃芪甲苷通過(guò)調(diào)節(jié)FoxO3a/ Wnt2/ β -catenin 通路，升高β -catenin 和Wnt2 蛋白表達(dá)水平，抑制FoxO3a 蛋白表達(dá)水平，可有效緩解氧化應(yīng)激介導(dǎo)的去卵巢大鼠的骨質(zhì)疏松癥［56］。歐莉等［57］研究發(fā)現(xiàn)，黃芪注射液聯(lián)合摩擦步訓(xùn)練可降低絕經(jīng)期骨質(zhì)疏松癥患者血清ALP，BGP 含量及血清中白細(xì)胞介素（IL）-8、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）含量，升高IL-10及骨密度，對(duì)絕經(jīng)期骨質(zhì)疏松癥療效確切。

骨碎補(bǔ)：味苦，性溫，歸肝、腎經(jīng)，有堅(jiān)腎、補(bǔ)腎強(qiáng)骨功效。骨碎補(bǔ)始載于《本草拾遺》，清朝《本草述》中記載骨碎補(bǔ)“可治腰痛行痹”。骨碎補(bǔ)可抑制骨吸收相關(guān)的OPG/RANKL/RANK 通路、CTSK信號(hào)通路中的調(diào)控蛋白，或促進(jìn)與骨形成相關(guān)的Wnt/ β -catenin 通路和BMP 通路中調(diào)控蛋白的合成和釋放，改善骨代謝不平衡，從而防治骨質(zhì)疏松癥。骨碎補(bǔ)抗骨質(zhì)疏松癥的主成分為總黃酮，其活性單體成分含量較高的為柚皮苷及新北美圣草苷。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，骨碎補(bǔ)總黃酮促進(jìn)BMSCs 成骨分化早期β -catenin、LEF -1、cycline D 的mRNA 表達(dá)，抑制BMSCs 成骨分化晚期β -catenin、LEF -1、cycline D 的mRNA 表達(dá)，表明此過(guò)程中Wnt/β -catenin 信號(hào)通路可能主要參與BMSCs 成骨早期分化［58］。柚皮苷可通過(guò)Wnt/β-catenin 信號(hào)通路抑制人脂肪源性間充質(zhì)干細(xì)胞（hADMSCs）因氧化反應(yīng)導(dǎo)致的成骨分化［59］。研究發(fā)現(xiàn)，柚皮苷可通過(guò)調(diào)節(jié)Akt 和AMPK 激活β -catenin，促進(jìn)β -catenin 的mRNA 和蛋白表達(dá)，并促進(jìn)UMR-106 細(xì)胞中β-catenin 的Ser552磷酸化，進(jìn)而激活LEF，TCF 轉(zhuǎn)錄因子，說(shuō)明柚皮苷可通過(guò)影響Wnt/β-catenin 信號(hào)通路促進(jìn)去卵巢骨質(zhì)疏松癥模型小鼠成骨細(xì)胞的形成［60］。另有研究報(bào)道，柚皮苷能有效地抗去卵巢骨質(zhì)疏松癥，促進(jìn)BMSCs 的增殖和分化，增加BGP 的表達(dá)，并增加骨密度、增大骨體積和小梁厚度，可有效逆轉(zhuǎn)卵巢切除術(shù)引起的大鼠骨質(zhì)疏松癥［61］。但有研究表明，骨碎補(bǔ)中另一抗骨質(zhì)疏松癥的活性成分新北美圣草苷在MC3T3-E1細(xì)胞增殖和成骨分化方面優(yōu)于柚皮苷，其可促進(jìn)ALP 活性及上調(diào)Runx2、COLI 和OCN 的表達(dá)，可成為治療骨質(zhì)疏松癥的候選藥物［62］。目前，新北美圣草苷抗骨質(zhì)疏松癥的研究尚少，柚皮苷抗骨質(zhì)疏松癥實(shí)驗(yàn)多限于去勢(shì)骨質(zhì)疏松癥模型，表明骨碎補(bǔ)抗骨質(zhì)疏松癥的活性成分還需進(jìn)一步研究。

補(bǔ)骨脂：味辛、苦、性溫，入脾、腎二經(jīng)，補(bǔ)腎陽(yáng)，固腎氣。《本草經(jīng)疏》云“補(bǔ)骨脂，能暖水土…壯火益土之要藥也”?！端幮哉摗酚涊d其能“治男子腰痛、膝冷…腹中冷”?！痘菝窈蛣┚址健分杏涊d“補(bǔ)骨脂丸主治腎虛陽(yáng)痿證”。研究表明，補(bǔ)骨脂主要成分補(bǔ)骨脂素可促進(jìn)成骨細(xì)胞分化成熟，并可調(diào)控免疫功能，抑制破骨細(xì)胞分化及骨吸收［63］。治療骨質(zhì)疏松常用臨床組方中常含補(bǔ)骨脂，可補(bǔ)腎助陽(yáng)，強(qiáng)筋健骨，增加骨密度［64］。如以青娥丸（補(bǔ)骨脂、杜仲、胡桃、蒜）連續(xù)治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松6個(gè)月，發(fā)現(xiàn)其可能通過(guò)下調(diào)DKK1 的表達(dá)及增加β -catenin 蛋白表達(dá)水平，提高Wnt/ β -catenin 信號(hào)通路活性，進(jìn)而促進(jìn)成骨細(xì)胞的骨形成，從而增加骨密度［65］。DKK1 作為阻斷Wnt/ β -catenin 信號(hào)通路的抑制劑，可使Wnt3a、LRP5和下游的β-catenin顯著降低，使用較高濃度的補(bǔ)骨脂酚或補(bǔ)骨脂二氫黃酮處理后，Wnt3a，LRP5 和β -catenin 的表達(dá)顯著升高，且呈劑量依賴(lài)性，補(bǔ)骨脂酚和補(bǔ)骨脂二氫黃酮具有雌激素樣作用，促進(jìn)成骨細(xì)胞分化［66］，表明補(bǔ)骨脂酚和補(bǔ)骨脂二氫黃酮可能通過(guò)上調(diào)Wnt/β-catenin 信號(hào)通路來(lái)誘導(dǎo)成骨細(xì)胞的分化。

4 小結(jié)與展望

目前臨床治療骨質(zhì)疏松癥的主要藥物有雌激素類(lèi)、降鈣素、雙膦酸鹽類(lèi)、鈣劑和維生素類(lèi)、甲狀旁腺激素、鍶鹽、雷諾昔芬、氟化物及硬化蛋白抗體等，可通過(guò)抑制破骨細(xì)胞的破骨作用，促進(jìn)成骨細(xì)胞的成骨作用，達(dá)到骨代謝正平衡，治療骨質(zhì)疏松，但長(zhǎng)期使用有一定風(fēng)險(xiǎn)，故臨床應(yīng)用受限制［67］。傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)采用整體觀，辨證論治療，如《中國(guó)老年骨質(zhì)疏松癥診療指南》中推薦的龍牡壯骨顆粒、仙靈骨葆膠囊和強(qiáng)骨膠囊等，治療骨質(zhì)疏松均有一定效果。查閱中醫(yī)藥防治骨質(zhì)疏松癥的相關(guān)文獻(xiàn)資料，發(fā)現(xiàn)熟地黃、淫羊藿、黃芪、骨碎補(bǔ)、補(bǔ)骨脂等均可通過(guò)調(diào)控Wnt/β-catenin 等信號(hào)通路促進(jìn)成骨細(xì)胞分化，促進(jìn)骨形成，增加骨密度。目前正處于臨床研究中的新藥DKK1抗體，可通過(guò)阻止溶骨性病變來(lái)治療骨質(zhì)疏松，增加骨形成［68］。而研究已表明補(bǔ)骨脂可降低DKK1 的表達(dá)及增加β -catenin 蛋白表達(dá)水平，提高Wnt/β-catenin 信號(hào)通路活性，進(jìn)而促進(jìn)成骨細(xì)胞的骨形成，從而增加骨密度［69］。目前臨床用于治療骨質(zhì)疏松癥的藥物種類(lèi)繁多，尚未發(fā)現(xiàn)可根治此類(lèi)疾病的特效藥物，篩選防治骨質(zhì)疏松癥的安全有效藥物迫在眉睫。為此，深入對(duì)中醫(yī)藥防治骨質(zhì)疏松癥的研究，可為開(kāi)發(fā)出治療骨質(zhì)疏松癥的中藥特效藥提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。