史躍燕，劉紅利，林 蘭，顧益鳳，張小霞

江蘇省南通市腫瘤醫(yī)院檢驗科，江蘇南通 226000

卵巢癌、宮頸癌和乳腺癌是女性三大腫瘤，嚴(yán)重危害女性健康，卵巢癌的發(fā)病率在女性常見腫瘤中并不高[1]，但因其發(fā)病隱匿，早期癥狀不明顯，同時缺乏大規(guī)模篩查的早期診斷方法[2]，病死率居婦科腫瘤之首[3]，2018年全球卵巢癌死亡病例超過新增病例萬分之六[4]。近年來，隨著檢測技術(shù)及靶向藥物等研究不斷深入，卵巢癌的治療也取得了突飛猛進(jìn)的發(fā)展[5]。但早診斷、早治療仍然是提高卵巢癌生存率非常有效的途徑。病理學(xué)診斷操作繁瑣且有創(chuàng)傷性，不適用于大規(guī)模篩查，腫瘤標(biāo)志物測定方法簡單，快速且無創(chuàng)，被廣泛用于大規(guī)模篩查[6]。目前用于卵巢癌早期篩查的腫瘤標(biāo)志物主要有糖類抗原125(CA125)和人附睪蛋白4(HE4)，其測定的主要方法主要為電化學(xué)發(fā)光法，對試劑和設(shè)備要求比較高，在偏遠(yuǎn)地區(qū)和基層很難大規(guī)模篩查。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和硫氧還蛋白還原酶(TrxR)在卵巢癌外周血中的表達(dá)情況鮮有報道，本文主要探討外周血測定VEGF和TrxR作為卵巢癌早期篩查指標(biāo)的可行性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2020年9月至2021年8月本院收治的初診住院患者，其中54例為卵巢癌患者，年齡30～85歲，平均60歲，作為卵巢癌組；40例為卵巢良性病變患者，年齡17～84歲，平均45歲，作為良性病變組。另外，將同期于本院體檢的80例體檢健康者作為健康組，年齡32～80歲，平均55歲。所有患者均經(jīng)病理組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查證實，入院前未經(jīng)任何放化療及抗腫瘤治療。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)，所有納入研究者均知情同意。

1.2儀器與試劑 HE4采用羅氏電化學(xué)發(fā)光儀E601測定，檢測試劑為羅氏公司產(chǎn)品，質(zhì)控品為上海昆淶生物科技有限公司產(chǎn)品。VEGF采用邁瑞-96A酶標(biāo)儀進(jìn)行測定，試劑和質(zhì)控品均為北京健平金星生物科技有限公司產(chǎn)品。TrxR采用KEA-TR100全自動分析儀(凱熙醫(yī)藥股份有限公司)測定，試劑和質(zhì)控品均為武漢尚宜康健科技有限公司產(chǎn)品。

1.3方法 所有受試者均為清晨空腹抽取靜脈血。HE4和VEGF的檢測標(biāo)本為靜脈血血清，TrxR的檢測標(biāo)本為靜脈血血漿(肝素抗凝)，行實驗室質(zhì)量控制，結(jié)果在控后測定結(jié)果。HE4的檢測采用電化學(xué)發(fā)光法；VEGF采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定；TrxR采用分光光度法測定。比較3組外周血HE4、VEGF和TrxR水平，分析外周血HE4、VEGF和TrxR水平與病理特征(卵巢癌FIGO分期[7]、是否轉(zhuǎn)移和病理類型)之間的關(guān)系。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS23.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料呈非正態(tài)分布，采用M(P25,P75)表示；多組間比較比較采用Kruskal-WallisH檢驗，進(jìn)一步兩兩比較采用Nemenyi法；兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗；配對樣本用Wilcoxon符號秩檢驗。采用Spearman相關(guān)性分析；ROC及AUC用于評價各指標(biāo)對卵巢癌的診斷價值；以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.13組間外周血HE4、VEGF和TrxR水平比較 健康組、良性病變組和卵巢癌組各指標(biāo)測定結(jié)果見表1，3組間兩兩比較，各項指標(biāo)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。

表1 健康組、良性病變組和卵巢癌組各指標(biāo)檢測結(jié)果比較[M(P25,P75)]

2.2外周血VEGF和TrxR水平與病理特征之間的關(guān)系 各指標(biāo)與卵巢癌FIGO分期、是否轉(zhuǎn)移和病理類型均無相關(guān)性(P>0.05)，見表2。

表2 VEGF和TrxR水平與卵巢癌臨床病理特征之間的關(guān)系[M(P25,P75)]

續(xù)表2 VEGF和TrxR水平與卵巢癌臨床病理特征之間的關(guān)系[M(P25,P75)]

2.3Spearman相關(guān)性分析 外周血VEGF和HE4(r=0.530,P<0.001)、TrxR和HE4(r=0.581,P<0.001)、TrxR和VEGF(r=0.566,P<0.001)水平呈正相關(guān)。

2.4ROC曲線分析 外周血HE4、VEGF和TrxR水平單獨及聯(lián)合檢測用于區(qū)分卵巢癌和卵巢良性病變的ROC曲線見圖1，診斷價值見表3。TrxR診斷效能優(yōu)于HE4和VEGF，3項聯(lián)合診斷無明顯優(yōu)勢。外周血HE4、VEGF和TrxR水平單獨及聯(lián)合檢測用于區(qū)分卵巢癌患者和健康者的ROC曲線見圖2，診斷價值見表4。TrxR診斷效能優(yōu)于其他兩項，VEGF和TrxR聯(lián)合診斷的準(zhǔn)確度最高，3項聯(lián)合無明顯優(yōu)勢。

表3 各指標(biāo)用于區(qū)分卵巢癌和卵巢良性病變的診斷效能(%)

圖1 各指標(biāo)用于區(qū)分卵巢癌和卵巢良性病變的ROC曲線

圖2 各指標(biāo)用于區(qū)分于卵巢癌患者和健康者的ROC曲線

表4 各指標(biāo)用于區(qū)分卵巢癌患者和健康者的診斷效能(%)

續(xù)表4 各指標(biāo)用于區(qū)分卵巢癌患者和健康者的診斷效能(%)

2.5卵巢癌手術(shù)前后患者外周血HE4、VEGF和TrxR水平比較 卵巢癌手術(shù)前后，外周血VEGF和TrxR水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，HE4水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.125)，見表5。

表5 卵巢癌手術(shù)前后HE4、VEGF和TrxR水平比較

3 討 論

VEGF是一種血管源性蛋白質(zhì),其家族有A～F和胎盤生長因子(PLGF)共7個成員，其中VEGF-C是促進(jìn)血管形成最重要的因子。VEGF通過與受體之間的相互作用，在腫瘤新生血管形成中起著重要作用，能增加血管通透性、促使細(xì)胞外基質(zhì)變性及新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂和增殖，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移[8-9]。有研究顯示VEGF在上皮性卵巢癌組織中陽性表達(dá)率高于良性卵巢囊腺瘤組織，卵巢正常細(xì)胞中表達(dá)率最低[10]。

TrxR是硫氧還蛋白系統(tǒng)含硒酶部分，參與體內(nèi)氧化反應(yīng)的信號傳導(dǎo)，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時，高水平TrxR與腫瘤細(xì)胞生長和凋亡進(jìn)程有著密切的關(guān)系，在多種原發(fā)性腫瘤中過表達(dá)，從而維持細(xì)胞氧化還原的穩(wěn)定性，因此可以已成為其診斷和治療的新靶點[11-15]，但其在卵巢癌中的研究罕有報道。

在本研究中，VEGF和TrxR在健康組、卵巢良性病變組和卵巢癌組中的水平依次增高，且與HE4水平有相關(guān)性,在區(qū)分卵巢癌和良性病變時TrxR的診斷效率優(yōu)于傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物HE4。在區(qū)分卵巢癌患者和健康者時，單獨檢測VEGF和TrxR均具有良好的診斷效能，高于HE4。VEGF和TrxR聯(lián)合檢測時診斷卵巢癌準(zhǔn)確度最高，這說明VEGF和TrxR均可用于卵巢癌早期篩查。有研究表明，卵巢癌FIGO分期越高，VEGF表達(dá)率越高，轉(zhuǎn)移卵巢癌組織表達(dá)率也高于未轉(zhuǎn)移組織[16-17]。但在本次研究中外周血VEGF和TrxR的水平與卵巢癌的病理特征無關(guān)，還需擴(kuò)大標(biāo)本量做進(jìn)一步研究。VEGF和TrxR在卵巢癌手術(shù)后均明顯降低，HE4血清水平手術(shù)前后比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，說明VEGF和TrxR或可用于卵巢癌術(shù)后療效觀察。

VEGF和TrxR外周血測定，方法簡便快捷，設(shè)備要求低，可用于卵巢癌早期的大規(guī)模篩查，同時可用于術(shù)后療效監(jiān)測。