盧 青, 何 季, 吳傳美, 向仰州, 劉鴻雁
(1.貴州大學農(nóng)學院,貴州貴陽 550025; 2.貴州師范學院地理與資源學院,貴州貴陽 550018)
茶樹是山茶科常綠喬木植物[1]。貴州省由于氣候溫和,冬暖夏涼,終年多雨,地勢高差大,立體氣候明顯,這使得貴州在茶葉生產(chǎn)要素方面具有得天獨厚的優(yōu)勢[2]。近年來,由于經(jīng)濟快速發(fā)展,人們生活水平顯著提高,對茶葉品質(zhì)的要求也越來越高[3]。土壤是茶樹生存和生長的基質(zhì),茶樹生長發(fā)育所需的營養(yǎng)成分大多來源于土壤的供給[4]。研究發(fā)現(xiàn),土壤酸堿性、孔隙性以及氮、磷、鉀含量等均對茶樹生長及茶葉品質(zhì)有重要影響[5]。葉江華等研究發(fā)現(xiàn),土壤pH值與茶葉品質(zhì)含量呈顯著負相關(guān),土壤pH值降低會導致鮮茶葉品質(zhì)成分含量下降[6]。李小飛等研究發(fā)現(xiàn),茶園土壤中茶葉的品質(zhì)可以通過改善土壤的孔隙度來提高[7]。覃瀟敏等研究發(fā)現(xiàn),茶多酚含量與土壤全氮、堿解氮、有效磷含量呈負相關(guān),而氨基酸含量與上述指標含量的比值則相反[8]。羅凡等研究表明,適當施用氮、磷、鉀有助于增加茶葉氨基酸類物質(zhì)、咖啡堿和茶多酚含量,還有助于降低酚氨的含量比[9]。種植年限的增加導致茶園土壤理化性質(zhì)和茶園肥力發(fā)生一系列變化,如土壤酸化嚴重,土壤中有毒、抗菌物質(zhì)的積累,顯著影響土壤質(zhì)量、土壤結(jié)構(gòu)和土壤發(fā)育等,進而影響茶葉的品質(zhì)[10]。因此,營造良好的土壤環(huán)境,有助于提高茶園產(chǎn)量和茶葉品質(zhì),具有很強的現(xiàn)實意義。
四球茶種(CamelliatetracoccaZhang)是山茶屬茶亞屬(subgen.Thea)茶組(sect.Thea)五室茶系(ser.Quique-locularis)中的一種。四球茶不僅在研究茶樹的起源、演化和分類方面發(fā)揮著重要作用,而且是四球茶野生老茶樹的最大存量,同時也是不可多得的古茶資源,并且是貴州省著名的地方茶樹群體種之一,是普安縣特有的珍稀種,享有“可以喝的活化石”之稱。四球茶對環(huán)境具有良好的適應(yīng)性,種質(zhì)資源優(yōu)良,因其口感生津回甘,回味持久,普安縣正進行大面積人工種植。目前關(guān)于四球茶的研究很少,僅限于四球茶葉片解剖特征與光合生理[11]、茶園土壤團聚體穩(wěn)定性[12]、四球茶轉(zhuǎn)錄組SSR位點信息分析[13]、四球茶種群種間聯(lián)結(jié)分析[14]及生命表與生存分析[15]等方面的初步研究,而關(guān)于人工種植四球茶茶園土壤肥力和茶葉品質(zhì)的研究尚未見報道。以此為基礎(chǔ),選擇研究對象為普安縣不同種植年限珍稀四球茶園,獲取不同種植年限的四球茶園土壤性質(zhì)、養(yǎng)分和茶葉品質(zhì)的變化,并運用相關(guān)分析及通徑分析分析土壤理化性質(zhì)與茶葉品質(zhì)的關(guān)系,明確影響茶葉品質(zhì)最主要的因素,揭示土壤肥力及茶葉品質(zhì)隨種植年限增加的變化規(guī)律,為茶園的規(guī)范化科學管理提供理論支撐。
研究區(qū)位于貴州省黔西南布依族苗族自治州普安縣(104°51′10″~105°09′24″E,25°18′31″~26°10′35″N),該區(qū)被譽為“中國古茶樹之鄉(xiāng)”,平均海拔高度為1 400 m,年均氣溫14 ℃,無霜期280~290 d,年均日照時長1 563 h,年均降水量 1 360 mm,土壤類型為黃壤,屬低緯度、高海拔的亞熱帶季風性濕潤氣候。
通過資料查閱和實地調(diào)研,對茶樹的地理位置和生長情況進行整體觀察,研究對象選定為基礎(chǔ)材料相同、生長相對均勻、地理位置相對集中的四球茶。在貴州省普安縣青山鎮(zhèn)確定植茶年限分別為5、15、25、40年的茶園,在每個植茶年限茶園隨機布設(shè)3個典型地塊,共12個地塊,每個地塊的面積約為50 m2。茶園每年10月底施肥1次,肥料為有機肥(豬糞),施入量為1.5 t/hm2,茶樹行株距分別為3、2 m,每年10月進行人工清除雜草,茶樹修剪枝條歸還土壤,手工清除行間雜草。
土壤采集:采集時間為2021年4月。劃分地塊后,設(shè)置5個采樣點(按“S”形布點),在茶樹冠幅范圍內(nèi)分別取0~20 cm和20~40 cm土層土(選用直徑為 10 cm土鉆取土)。將土壤樣品帶到實驗室,在自然條件下干燥,剔除大塊砂礫和枯枝落葉,最后過篩,用于測定土壤的理化性質(zhì)。
植物采集:2021年4月,按照一芽二葉的標準采集鮮葉,蒸汽殺青后,80 ℃烘至全干后粉碎,用于茶葉可溶性糖等主要生化成分的測定。
土壤理化性質(zhì)測定:土壤pH值采用電位法(NY/T 1377—2007《土壤pH的測定》)測定,土壤有機質(zhì)含量采用重鉻酸鉀容量法-外加熱法(GB 9834—1988《土壤有機質(zhì)的測定》)測定,陽離子交換量(CEC)采用乙酸銨交換法(DB 33/T 966—2015《土壤陽離子交換量的測定》)測定,土壤容重采用環(huán)刀法(NY/T 1121.4—2006《土壤檢測 第4部分:土壤容重的測定》)測定,土壤堿解氮含量采用NaOH-堿解擴散法(DB51/T 1975—2014《土壤堿解氮的測定》)測定,土壤有效磷含量采用氟化銨-鹽酸浸提-鉬藍比色法(NY/T 1849—2010《酸性土壤 銨態(tài)氮、有效磷、速效鉀的測定 聯(lián)合浸提-比色法》)測定,土壤速效鉀含量采用乙酸銨浸提-火焰光度法(NY/T 889—2004《土壤速效鉀和緩效鉀含量的測定》)測定。
茶葉主要生化成分測定:茶多酚含量采用福林酚法(GB/T 8313—2008《茶葉中茶多酚和兒茶素含量的檢測方法》) 測定;游離氨基酸含量采用茚三酮比色法 (GB/T 8314—2002《茶 游離氨基酸總量的測定》測定);咖啡堿含量采用紫外分光光度法 (GB/T 8312—2002《茶 咖啡堿測定》) 測定;可溶性糖含量采用蒽酮比色法[16]測定。
根據(jù)NY/T 391—2013《綠色食品 產(chǎn)地環(huán)境質(zhì)量》[17]、NY/T 853—2004《茶葉產(chǎn)地環(huán)境技術(shù)條件》中茶園土壤的肥力分級標準[18]和優(yōu)質(zhì)高效高產(chǎn)茶園的土壤營養(yǎng)診斷指標[19]提出茶園土壤養(yǎng)分含量分級標準(表1)。
表1 土壤養(yǎng)分分級標準
使用SPSS 16.0對數(shù)據(jù)進行整理分析,使用Origin 8.0進行統(tǒng)計繪圖。其中,方差分析采用 One-way ANOVA,多重比較采用LSD法,相關(guān)分析采用Pearson’s法。
由圖1可見,在0~20 cm土層,土壤pH值在4.63~5.04之間,土壤pH值隨植茶年限的增加逐漸增加,植茶5年顯著低于植茶15年、25年、40年(P<0.05),分別低6.84%、6. 09%、8.14%。土壤CEC值在16.09~17.70 cmol/kg之間,隨植茶年限的增加呈先增加后降低再增加的趨勢,在植茶40年達到最高,植茶25年最低,植茶40年比植茶25年顯著高10.01%(P<0.05)。土壤容重在1.08~1.16 g/cm3之間,不同植茶年限間的土壤容重差異不顯著。有機質(zhì)含量在37.22~47.39 g/kg之間,隨著茶樹種植年限的增加,呈先增加后減少趨勢,植茶25年出現(xiàn)最高值,均顯著高于植茶5年、15年(P<0.05),分別高27.32%和23.28%。土壤堿解氮含量在132.23~158.21 mg/kg之間,植茶5年顯著高于植茶15年、25年、40年(P<0.05),分別高13.78%、11.05%、19.65%。有效磷含量在3.29~4.11 mg/kg之間,隨植茶年限的增加先增加后降低,在植茶15年達到最高值,但不同植茶年限間差異不顯著。土壤速效鉀含量在169.56~204.44 mg/kg,隨植茶年限的增加逐漸降低,在植茶5年顯著高于植茶40年(P<0.05),高20.57%。
在20~40 cm土層中,土壤pH值在4.49~5.07之間,植茶5年最低,植茶15年和40年最高,植茶5年顯著低于植茶15年和40年(P<0.05),低12.92%。土壤CEC值在15.13~18.09 cmol/kg之間,隨植茶年限的增加先降低后增加,植茶5年顯著高于植茶15年、25年(P<0.05),分別高9.72%、3.81%。土壤容重在1.13~1.31 g/cm3之間,隨植茶年限的增加先增加后降低,植茶25年達最高值,植茶5年最低,植茶25年顯著高于植茶5年(P<0.05),高15.93%。土壤有機質(zhì)含量在21.52~39.04 g/kg之間,隨植茶年限的增加先降低后增加,植茶40年顯著高于植茶5年、15年、25年(P<0.05),分別高52.02%、81.41%、27.46%。土壤堿解氮含量在100.49~120.54 mg/kg之間,隨植茶年限的增加先增加后降低,但不同植茶年限間差異不顯著。土壤有效磷含量在2.73~3.04 mg/kg之間,不同植茶年限間差異不顯著。土壤速效鉀含量在109.89~163.44 mg/kg,隨植茶年限的增加先增加后降低,植茶15年顯著高于植茶25年、40年(P<0.05),分別高35.44%、48.73%。
由表1及圖1可知,按照土壤養(yǎng)分分級標準,四球茶茶園土壤pH值在4.49~5.07之間,為Ⅱ級標準;土壤有機質(zhì)含量在21.52~47.39 g/kg之間,為Ⅰ級標準;堿解氮含量在100.49~158.21 mg/kg之間,為Ⅰ級標準;有效磷含量在2.73~4.11 mg/kg之間,為Ⅲ級標準;土壤速效鉀含量為109.89~204.44 mg/kg,除20~40 cm土層植茶40年外,其他均達到Ⅰ級標準。綜上,土壤pH值、有機質(zhì)、堿解氮和速效鉀均符合優(yōu)質(zhì)茶園的肥力標準。
由圖2可見,茶葉中咖啡堿含量為12.38~17.42 mg/g,其含量隨植茶年限的增加呈先增加后減少趨勢,在植茶15年時含量最高,在植茶40年時含量最低,植茶15年顯著高于植茶5年、25年、40年(P<0.05),分別高13.19%、10.39%、40.71%??扇苄蕴呛繛?6.73~64.94 mg/g,隨植茶年限的增加,其含量呈先增加后降低趨勢,在植茶15年含量最高,在植茶40年含量最低,植茶40年顯著低于植茶15年和25年(P<0.05),分別低43.47%、31.83%。茶多酚含量為463.73~478.50 mg/g,不同植茶年限下茶多酚含量無顯著差異。游離氨基酸總量為50.28~70.03 mg/g,其含量隨植茶年限的增加逐漸降低,其中,植茶40年顯著低于植茶5年、15年,分別低28.20%、19.15%(P<0.05)。茶葉中酚氨比為6.83~9.27,在植茶25年達到最高值,其中,植茶25年和40年顯著高于植茶5年、15年(P<0.05),分別高35.72%、22.62%和35.29%、22.22%。
2.3 土壤理化性質(zhì)與茶葉品質(zhì)的相關(guān)性及通徑分析
由表2、表3、表4可知,咖啡堿含量與堿解氮、有效磷及速效鉀以外的指標均呈負相關(guān)關(guān)系,但相關(guān)性均不顯著,各理化指標對咖啡堿含量直接通徑系數(shù)絕對值較大的3個指標依次為CEC值(-0.433)>土壤pH值(0.374)>速效鉀(0.297);對咖啡堿含量間接通徑系數(shù)絕對值較大的3個指標依次為土壤pH值(-0.544)>有效磷(0.418)>容重(-0.272)??扇苄蕴呛颗cCEC值呈極顯著負相關(guān),與土壤pH值、有效磷及速效鉀呈正相關(guān)關(guān)系,與土壤容重、有機質(zhì)、堿解氮呈負相關(guān)關(guān)系,對可溶性糖直接通徑系數(shù)絕對值較大的3個指標依次為CEC(-0.635)>pH值(0.573)>速效鉀(0.424),對可溶性糖間接通徑系數(shù)絕對值較大的3個指標依次為有效磷(0.346)>pH值(-0.289)>有機質(zhì)(0.197)。各理化指標對茶多酚含量除土壤pH值外其他指標均呈正相關(guān)關(guān)系,對茶多酚含量直接通徑系數(shù)絕對值較大的3個指標依次為土壤容重(0.841)>pH值(-0.644)>CEC值(0.463),對茶多酚含量間接通徑系數(shù)絕對值較大的前3個指標依次為有效磷(0.442)>土壤容重(-0.402)>pH值(0.162)。游離氨基酸與pH值、土壤容重、有機質(zhì)及速效鉀呈負相關(guān),與CEC值、有效磷、堿解氮呈正相關(guān)關(guān)系,對游離氨基酸直接通徑系數(shù)絕對值較大的3個指標依次為有效磷(-0.601)>CEC值(0.518)>速效鉀(-0.438),對游離氨基酸間接通徑系數(shù)絕對值較大的3個指標依次為有效磷(0.816)>土壤容重(-0.465)>CEC值(-0.297)。酚氨比與CEC值、堿解氮、有效磷均呈負相關(guān)關(guān)系;與pH值、土壤容重、有機質(zhì)、速效鉀均呈正相關(guān)關(guān)系;對酚氨比直接通徑系數(shù)絕對值較大的3個指標依次為有效磷(0.379)>CEC值(-0.370)>速效鉀(0.326),對酚氨比間接通徑系數(shù)絕對值較大的3個指標依次為有效磷(-0.640)>pH值(0.537)>土壤容重(0.445)。
表2 土壤理化性質(zhì)與茶葉品質(zhì)的相關(guān)性
表3 土壤理化性質(zhì)與茶葉品質(zhì)的直接通徑系數(shù)
表4 土壤理化性質(zhì)與茶葉品質(zhì)的間接通徑系數(shù)
3.1 不同種植年限下四球茶茶園土壤的肥力特征
土壤養(yǎng)分是植物營養(yǎng)的主要來源,植物生長和養(yǎng)分代謝與土壤養(yǎng)分供應(yīng)密切相關(guān)[20]。近年來,諸多研究報道土壤理化性質(zhì)受植被類型、土壤狀況、種植年限及土層深度等外部條件的影響[21-22]。土壤陽離子交換能力可以作為評估土壤肥力和緩沖性能的指標[23],土壤肥力的重要影響因素之一是土壤有機質(zhì)含量[24]。李敬等研究發(fā)現(xiàn),茶樹種植后期土壤陽離子交換量增加[25],本研究結(jié)果與之相似。其原因是土壤有機質(zhì)含量隨著種植年限的增加而增加,植茶25年土壤有機質(zhì)含量達到最高,可能是因為茶樹生長導致茶樹凋落物、殘根和根系分泌物數(shù)量增加,最終造成土壤有機質(zhì)的積累[10]。土壤中氮、磷、鉀含量隨種植年限的增加均有降低趨勢,這可能與茶樹生長消耗速效養(yǎng)分以及養(yǎng)分流失有關(guān)[26]。但在茶園土壤分級標準中,有機質(zhì)、堿解氮、速效鉀(除20~40 cm土層植茶40年外)的養(yǎng)分含量仍處于Ⅰ級標準,表明本研究區(qū)土壤中有機質(zhì)、氮、鉀含量豐富,屬于優(yōu)質(zhì)茶園。而有效磷含量低于全國平均水平,其原因是該茶園土壤中的磷元素主要來自其天然成土母質(zhì)和肥料,在我國其含量由北向南逐漸減少,由于磷以沉積的形式存在,遷移性低,尤其是南方酸性或極酸性土壤較多,活性鐵和鋁含量較高,可溶性磷主要與它們結(jié)合形成不溶性鹽,從而降低了土壤中磷的含量[4]。茶葉中多酚、氨基酸、茶氨酸、葉綠素和類胡蘿卜素的形成與土壤磷有關(guān)??赏ㄟ^充分補充磷肥或使用生物質(zhì)炭、有機肥等措施提高磷利用率。因此,在四球茶種植及栽培過程中考慮磷的可用性水平具有重要的實際意義[27]。
茶樹是喜酸作物,適宜生長在土壤pH值為 4.5~5.5的土壤環(huán)境中[28]。有研究表明,隨著茶樹年齡的增長,茶園土壤的酸度增加[29]。而本研究表明,土壤表面的pH值隨著茶葉播種年限的增加呈上升趨勢,但保持在適宜茶樹生長的區(qū)域內(nèi),這可能與人工種植的古茶樹本身的適應(yīng)性有關(guān)[30],但還需更多深入研究。任璐璐等研究表明,20~40 cm土層的養(yǎng)分低于0~20 cm土層[31],本研究結(jié)果與之相符。這是因為表層土壤將首先得到的營養(yǎng)(地表碎屑、動物遺骸和糞便、植物殘體)集中在表層土壤中,同時地下 90% 的生物質(zhì)都集中在表土中[32],因此,土壤表層的養(yǎng)分含量較高。
一般來說,茶葉的品質(zhì)水平是由茶葉中茶多酚、氨基酸、咖啡堿和可溶性糖含量決定的??Х葔A具有多種生理和治療功能,它有一定的苦味,但由于與茶黃素結(jié)合形成復合物,令其具有清新爽口的味道[5,33]。有研究表明,如果咖啡堿含量低于4.5%,綠茶品質(zhì)與其含量呈正相關(guān)[34]。本研究咖啡堿含量在4.5%以下,且隨著茶樹種植年限的增加先升高后降低,植茶15年的茶葉中含量最高,說明種植15年的茶葉品質(zhì)最好。茶湯的味道和香氣來源于可溶性糖,其含量越高,茶葉滋味越甘醇而不苦澀[35]。本研究可溶性糖含量在植茶15年時出現(xiàn)最高值,表明與其他年份相比,植茶15年的茶更甘醇,苦味更少。
茶多酚主要有兒茶素類、花青素、黃酮類、黃酮醇和酚酸等[36],茶多酚對人體健康有益[37],當茶多酚含量達到一定濃度時,有助于殺死癌細胞并防止其擴散[38]。有研究表明,茶多酚含量為22%時,茶湯的口感更好,20%~24%的含量可以保持茶湯濃稠、鮮度協(xié)調(diào),但如果茶多酚含量超過24%,會降低茶葉的新鮮度,苦味也會增加[39]。本研究中,在不同植茶年限茶園,茶葉中茶多酚含量穩(wěn)定在20%左右,說明種植年限對茶多酚含量影響不大。氨基酸也是影響茶葉品質(zhì)的因素之一,其組成、含量、分解轉(zhuǎn)化產(chǎn)物和這些成分的含量將直接影響茶葉的香氣和口感[40]。陳亮等對全國596份茶樹資源分析發(fā)現(xiàn),平均氨基酸含量僅為3.3%[41]。本研究發(fā)現(xiàn),人工種植的四球茶其新稍葉片中的氨基酸含量(5.1%~7.0%)遠大于3.3%,且在植茶5年和15年時含量最高,說明種植早期茶葉的香氣和滋味較好,茶葉品質(zhì)較佳,因此建議盡量選擇種植早期采摘茶葉。酚氨比(茶多酚與氨基酸的比值)是決定茶葉品質(zhì)的關(guān)鍵指標之一[42]。相關(guān)研究表明,酚氨比與綠茶品質(zhì)呈負相關(guān)。酚氨比越小,茶湯的鮮爽度越高,說明生產(chǎn)出來的綠茶品質(zhì)越好[43]。葉乃興研究表明,酚氨比<8適制綠茶,酚氨比在8~15紅綠茶兼制,酚氨比>15適制紅茶[44]。在本研究中,酚氨比在植茶年限為5年和15年時較低,在植茶25年和40年時較高,表明種植早期茶葉品質(zhì)較好且較適制綠茶。
通徑分析是回歸分析的擴展,主要用于分析各種自變量和因變量之間的線性關(guān)系(包括直接通徑系數(shù)和間接通徑系數(shù))[45],它的絕對值表示每個環(huán)境因素對目標變量的直接和間接影響,從而說明每個環(huán)境因素與目標變量之間的關(guān)系[46]。土壤CEC值對咖啡堿的直接通徑系數(shù)遠高于其他因素,是影響咖啡堿的主要因素,土壤pH值對咖啡堿的直接通徑系數(shù)也較高,但由于土壤pH值與咖啡堿的直接和間接通徑系數(shù)相反且互斥,導致土壤pH值與咖啡堿之間的相關(guān)系數(shù)較低。土壤速效鉀對咖啡堿的直接通徑系數(shù)較大,且大于間接通徑系數(shù),直接影響與間接影響均為正效應(yīng),表明增加土壤速效鉀含量能提高咖啡堿含量。土壤CEC值與可溶性糖呈極顯著負相關(guān)關(guān)系,表明可通過減小土壤CEC值增加可溶性糖的含量,土壤pH值、有機質(zhì)是可溶性糖的主要影響因素,土壤pH值、有機質(zhì)的直接通徑系數(shù)大于間接通徑系數(shù),且由于土壤pH值、有機質(zhì)對可溶性糖的直接通徑系數(shù)與間接通徑系數(shù)相反,相互抵消,使得土壤pH值、有機質(zhì)與可溶性糖的相關(guān)系數(shù)較小。土壤CEC值、堿解氮、有效磷是游離氨基酸的主要直接影響因素,因為土壤CEC、堿解氮、有效磷對游離氨基酸直接通徑系數(shù)遠大于其他因素,且其他因素通過這3個變量的間接通徑系數(shù)也較大。但由于CEC值、堿解氮、有效磷對游離氨基酸的直接通徑系數(shù)與間接通徑系數(shù)相反,相互抵消,使得各因子與游離氨基酸的相關(guān)系數(shù)較小。土壤容重、pH值、CEC值是茶多酚主要直接影響因素。有效磷是酚氨比的主要影響因素,由于有效磷與酚氨比的直接和間接通徑系數(shù)相反且互斥,導致土壤有效磷與酚氨比之間的相關(guān)系數(shù)較低。
此外,本研究中土壤肥力狀況對茶葉咖啡堿含量、可溶性糖含量、茶多酚含量、游離氨基酸總量、酚氨比的剩余通徑系數(shù)均較大,說明,除此之外,還存在未被考慮的其他因素對這5個目標變量具有較大的影響,這些因素可能與茶樹自身代謝能力及其對養(yǎng)分的吸收利用等有關(guān)[47-48]。因此,應(yīng)該進一步開展植物吸收利用養(yǎng)分與茶葉品質(zhì)的關(guān)系等方面的研究。
四球茶茶園的土壤肥力水平較高,不同種植年限下土壤性狀差異顯著,土壤有機質(zhì)在植茶25年達到最高,CEC值、容重在植茶40年時達到最高,堿解氮、速效鉀在植茶40年最低,有效磷在植茶15年達到最高。
除茶多酚外,不同植茶年限下四球茶新稍葉片的主要生化成分均有顯著差異,咖啡堿及可溶性糖含量為植茶15年和25年時較高,游離氨基酸總量為植茶5年和15年時較高,酚氨比隨植茶年限的增加逐漸增加,種植早期茶葉的香氣和滋味最好,品質(zhì)較佳。
土壤中的CEC值、pH值是咖啡堿及可溶性糖的重要影響因素;土壤容重及pH值是茶多酚的主要影響因素;有效磷、CEC值是游離氨基酸及酚氨比的重要影響因素。