澤瀉及其炮制品化學(xué)成分和藥理作用的研究進(jìn)展

戴夢翔，金姝娜，宋成武，李 森

1.孝感市中醫(yī)醫(yī)院 藥劑科，湖北 孝感 432000

2.湖北中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，湖北 武漢 430065

3.湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖北 武漢 430065

4.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院 藥學(xué)部，湖北 武漢 430022

澤瀉Alisma Rhizoma為澤瀉科植物東方澤瀉Alisma orientale(Sam.)Juzep.或澤瀉A.plantagoaquaticaLinn.的干燥塊莖。其廣泛種植于江西、廣東、廣西、福建、四川等地，是四川和福建的道地藥材[1]。中醫(yī)理論認(rèn)為其性寒，味甘、淡，歸腎、膀胱經(jīng)，具有利水滲濕、泄熱、化濁調(diào)脂之功效[2]。澤瀉已有上千年的使用歷史，《神農(nóng)本草經(jīng)》《本草綱目》《傷寒論》等經(jīng)典古籍均有記載，六味地黃丸、五苓散、龍膽瀉肝湯、澤瀉湯等經(jīng)典名方中均有澤瀉的配伍使用。澤瀉的化學(xué)成分主要包括三萜類、二萜類、倍半萜類、多糖類、酚類、氨基酸和各種微量元素等，其中三萜類化合物為其主要藥效成分?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，澤瀉除了利尿作用以外，還有調(diào)血脂、降糖、抗腫瘤、抗病毒等多種功效[3-7]。

炮制古稱“炮炙”“修治”“修事”“修制”等，指中藥原料經(jīng)過烘、炮、泡、漂、蒸、煮等方法制成藥物的過程[8]。澤瀉的炮制方法早在南北朝劉宋時(shí)期《雷公炮炙論》中便有記載：“細(xì)挫，酒浸一宿，漉出，曝干任用”；宋代出現(xiàn)酒制澤瀉和炒澤瀉，隨后歷代又出現(xiàn)了鹽制、蒸制和米泔水制等炮制方法[9]。關(guān)于澤瀉炮制功效的記載最早出現(xiàn)于清代：“健脾生用或酒炒用，滋陰利水鹽水炒。”然而隨著炮制工藝的歷史變革，沿用的澤瀉炮制方法為凈制、切制、鹽制和炒制，目前我國各省市炮制規(guī)范中記載的澤瀉炮制品主要有生澤瀉、清炒澤瀉、麩澤瀉、鹽澤瀉和土澤瀉5 種[10]，而《中國藥典》2020年版收載的澤瀉炮制品僅有鹽澤瀉，此外臨床常用的還有麩澤瀉[11]。由于澤瀉的炮制方法不同，必然導(dǎo)致其炮制品化學(xué)成分和藥理作用的改變。本文查閱了近年來有關(guān)澤瀉、鹽澤瀉和麩澤瀉的研究進(jìn)展，對其化學(xué)成分和藥理作用進(jìn)行系統(tǒng)的總結(jié)和比較，以期為澤瀉及其炮制品的臨床合理使用、質(zhì)量控制、炮制工藝優(yōu)化及進(jìn)一步開發(fā)利用提供重要的參考依據(jù)。

1 澤瀉化學(xué)成分

自20世紀(jì)60年代，中國、日本、韓國等國家已對澤瀉進(jìn)行了研究，由于澤瀉入藥部位主要為根莖，目前對其化學(xué)成分的研究也主要集中在根莖上。萜類化合物被認(rèn)為是澤瀉的主要成分，原萜烷型四環(huán)三萜及愈創(chuàng)木烷型倍半萜為澤瀉的特征化合物[7]。原萜烷型三萜主要包括澤瀉醇A～I(xiàn)及其衍生物，而愈創(chuàng)木烷型倍半萜主要包括澤瀉烯醇、環(huán)氧澤瀉烯、orientalols A～F 以及orentalols sulphate 等化合物。此外，澤瀉中還含有少量的二萜類、黃酮類、生物堿類、天冬酰胺類、植物甾醇類、脂肪酸類等化合物[12]。

1.1 三萜類化合物

三萜類化合物是澤瀉中的主要生物活性成分。Murata 等[13]從澤瀉中首次分離得到23-乙酰澤瀉醇C、澤瀉醇A、澤瀉醇B 及其衍生物，該類化合物均有原萜烷型四環(huán)骨架結(jié)構(gòu)，具有A/B、B/C 和C/D環(huán)的反式結(jié)構(gòu)特征，同時(shí)C-8、C-10 和C-14 位存在α-CH3或β-CH3取代，C-17 側(cè)鏈存在多羥基或乙?；〈?。目前已從澤瀉屬植物中分離鑒定出129 種三萜，具體名稱和結(jié)構(gòu)見表1 和圖1。

圖1 澤瀉中的三萜類化合物結(jié)構(gòu)Fig.1 Structure of triterpenes in Alisma Rhizoma

表1 澤瀉中的三萜類化合物Table 1 Triterpenes in Alisma Rhizoma

續(xù)表1

續(xù)表1

1.2 倍半萜類化合物

倍半萜類化合物是澤瀉中的另一類主要成分，是由 3 個(gè)異戊二烯單元組成的萜類化合物。Yoshiteru 等[52]于1983年首次從澤瀉中分離出2 種愈創(chuàng)木烷型倍半萜化合物。Yoshikawa 等[53-54]于澤瀉中發(fā)現(xiàn)了愈創(chuàng)木烷型倍半萜化合物germacrene C、germacrene D、orientalol A、orientalol B、orientalol C、sulfoorientalol A、sulfoorientalol B、sulfoorientalol C 和sulfoorientalol D。彭國平等[55]從澤瀉中首次分離出刺參烷型倍半萜類化合物 orientalol E、orientalol F 和oplopanane。目前為止，在澤瀉中已發(fā)現(xiàn)了包括愈創(chuàng)木烷型、吉馬烷型、桉葉烷型、刺參烷型和蒼耳烷型等在內(nèi)的58 種倍半萜，倍半萜化合物總結(jié)及其結(jié)構(gòu)見表2 和圖2。

圖2 澤瀉中的倍半萜類化合物結(jié)構(gòu)Fig.2 Structure of sesquiterpenoids in Alisma Rhizoma

表2 澤瀉中的倍半萜類化合物Table 2 Sesquiterpenoids in Alisma Rhizoma

續(xù)表2

1.3 二萜類化合物

迄今為止，從澤瀉中分離得到的二萜類化合物只有3 個(gè)，且都為貝殼杉烷型二萜。Nakajima 等[16]首次從澤瀉中分離得到 16(R)-ent-kaurane-2,12-dione。彭國平等[67]從澤瀉中分離得到2 種新的二萜類化合物oriditerpenol 和oriediterpenoside。

1.4 其他成分

澤瀉中除了三萜類、倍半萜類和二萜類成分外，還有黃酮類、多糖類等化合物。目前，從澤瀉中分離得到的黃酮類化合物有9 種，包括robustaflavone、

amentoflavone、2,2?,4-trihydroxychalcone、daidzein、calycosin、7-hydroxy-coumarin、apigene、luteolin 和emodin[49,60,68-69]。Tomoda 等[70-71]首次從澤瀉中分離得到多糖類成分alisman PIIIF，并分離得到alisman SI。除此之外，還有alisman PII、manninotriose、verbascotetraose、verbascose、β-D-fructofuranose、5-hydroxymethylfuraldehyde、α-D-fructofuranose、ethyl α-D-fructofuranoside 和ethyl β-D-fructofuranoside 等多糖化合物[69,71-72]。

2 澤瀉的藥理作用

《中國藥典》2020年版中記載澤瀉主要用于小便不利、水腫脹滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛和高脂血癥?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究主要圍繞澤瀉的利尿和調(diào)脂作用，此外澤瀉還有抗癌、抗炎、抗菌和抗病毒等藥理活性。

2.1 利尿作用

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究已證實(shí)澤瀉具有良好的利尿作用，三萜類化合物為利尿的活性成分[73-74]。研究發(fā)現(xiàn)，澤瀉醇提物能顯著增加大鼠尿液量和Na+、K+離子濃度，并且下調(diào)腎髓質(zhì)水通道蛋白mRNA 表達(dá)[75]。然而，不同極性和不同劑量的澤瀉提取物對大鼠的利尿作用不同。王立新等[74]和Feng 等[76]研究表明澤瀉乙醇提取物比水提物具有更強(qiáng)的利尿作用，且澤瀉乙醇提取物低劑量（2.5、5、10 mg/kg）表現(xiàn)為利尿作用，高劑量（20、40、80 mg/kg）表現(xiàn)為抗利尿作用，其作用機(jī)制可能與腎末端血管的Na+,Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白有關(guān)。為了進(jìn)一步篩選其利尿活性成分，Chen 等[77]發(fā)現(xiàn)澤瀉乙醇提取物的醋酸乙酯和正丁醇部位較強(qiáng)極性的成分具有更好的利尿作用，但高劑量（醋酸乙酯部位800 mg/kg，正丁醇部位75、100 mg/kg）卻表現(xiàn)為抗利尿作用。Zhang 等[78]對大鼠ig 澤瀉三萜的混合物（23-乙酰澤瀉醇B、澤瀉醇B、24-乙酰澤瀉醇A、澤瀉醇A 和23-乙酰澤瀉醇C），通過三萜的代謝研究發(fā)現(xiàn)23-乙酰澤瀉醇B 和24-乙酰澤瀉醇A 能促進(jìn)Na+、K+和Cl-的排出，發(fā)揮利尿作用，而其他成分無利尿作用。

2.2 調(diào)脂作用

血脂異常通常伴隨著總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）含量的升高和高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）含量的降低。作為肥胖、代謝紊亂、胰島素抵抗和2 型糖尿病的典型特征，血脂異常已成為心肌梗死和心血管疾病的重要危險(xiǎn)因素[79-80]。近年來，大量研究表明澤瀉具有調(diào)節(jié)脂代謝紊亂的作用。Park 等[3]通過研究澤瀉提取物對小鼠骨髓基質(zhì)OP9 細(xì)胞分化的影響，發(fā)現(xiàn)澤瀉提取物主要在脂肪形成的早期階段（第1～2 天）發(fā)揮抑制作用，且對OP9 細(xì)胞分化的抑制作用是通過降低人CCAAT 增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β的表達(dá)來介導(dǎo)的，從而引起有絲分裂克隆擴(kuò)增和自噬的抑制。Miao 等[81]運(yùn)用代謝組學(xué)方法研究澤瀉對高脂飲食誘導(dǎo)的高脂血癥大鼠的尿液代謝物的影響，共發(fā)現(xiàn)19 個(gè)與高脂血癥相關(guān)的內(nèi)源性生物標(biāo)志物，如精氨酸、次黃嘌呤、甲基尿苷、肌酸酐等，表明澤瀉可通過調(diào)節(jié)氨基酸代謝、嘌呤代謝、嘧啶代謝和能量代謝，使代謝異常的生物標(biāo)志物回調(diào)至正常水平，從而起到調(diào)血脂的作用。

大量研究證實(shí)三萜類化合物是澤瀉發(fā)揮調(diào)脂作用的藥效成分[82-85]。Li 等[86]以高脂飲食誘導(dǎo)的高脂血癥小鼠為實(shí)驗(yàn)對象，研究澤瀉水提物中三萜部位和非三萜部位的調(diào)血脂作用的差異，首次證實(shí)澤瀉的調(diào)血脂活性源于三萜類成分，并運(yùn)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）從高脂小鼠血清中鑒定出59 個(gè)溶血磷脂酰膽堿（lysophosphatidylcholine，lyso-PC），發(fā)現(xiàn)78%的lyso-PC 在高脂小鼠血清中呈現(xiàn)不同程度的升高或降低，而澤瀉三萜能使52%異常的lyso-PC 回調(diào)并趨于正常水平。然而，不同結(jié)構(gòu)類型的三萜對血脂有著不同的調(diào)節(jié)作用。Xu等[87]通過測定澤瀉中23-乙酰澤瀉醇B 和24-乙酰澤瀉醇A 對高脂血癥小鼠總膽固醇、三酰甘油、HDL-C 和LDL-C 水平的影響，發(fā)現(xiàn)其可通過抑制3-羥基-3-甲基糖基輔酶 A （3-hydroxy-3-methylglutharylcoenzyme A，HMG-CoA）還原酶的活性來降低總膽固醇水平，且這種抑制作用可能是通過與HMG-CoA 直接競爭性結(jié)合來實(shí)現(xiàn)的。而澤瀉醇A 和澤瀉醇B 則是通過提高脂蛋白脂酶活性降低血漿的三酰甘油水平[88]。Imai 等[89]研究發(fā)現(xiàn)三萜結(jié)構(gòu)側(cè)鏈C-23 位的羥基被?；〈笳{(diào)脂活性增強(qiáng)，表明乙酰基可能為三萜類化合物的調(diào)脂活性基團(tuán)。Li 等[90]進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)C-16 位含羰基的三萜化合物調(diào)脂活性顯著強(qiáng)于其他結(jié)構(gòu)的三萜，且具有調(diào)脂活性的三萜結(jié)構(gòu)的側(cè)鏈C-24 和C-25 位多為環(huán)氧取代。同時(shí)，該研究還發(fā)現(xiàn)澤瀉中含量較高的23-乙酰澤瀉醇B 并非調(diào)脂活性最好的三萜類成分，澤瀉中還有更多三萜類成分的調(diào)脂活性有待證明。

2.3 抗腫瘤

Wang 等[4]研究表明23-乙酰澤瀉醇B 可作為潛在的調(diào)節(jié)因子，通過激活內(nèi)源性途徑誘導(dǎo)人肺癌A549 和NCI-H292 細(xì)胞凋亡與自噬而達(dá)到抗腫瘤作用。Zhang 等[91]研究發(fā)現(xiàn)23-乙酰澤瀉醇B 對卵巢癌細(xì)胞具有抗增殖、抗轉(zhuǎn)移和抗侵襲作用。Huang 等[92]研究發(fā)現(xiàn)23-乙酰澤瀉醇B 通過線粒體介導(dǎo)的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、8 和9 誘導(dǎo)人前列腺癌PC-3 細(xì)胞凋亡。Lee 等[93]研究發(fā)現(xiàn)澤瀉醇B 對人卵巢癌SK-OV3 細(xì)胞、小鼠黑色素瘤B16-F10 細(xì)胞和人纖維肉瘤HT-1080 細(xì)胞具有細(xì)胞毒性。24-乙酰澤瀉醇F 通過抑制P-糖蛋白介導(dǎo)和逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多系耐藥達(dá)到誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用[94-96]。然而，有關(guān)澤瀉的抗腫瘤研究并不深入，其他結(jié)構(gòu)三萜的抗腫瘤作用有待進(jìn)一步深入探索。

2.4 抗炎

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，水腫、糖尿病、高脂血、高血壓等與炎癥密切相關(guān)[97-98]。謝治深等[5]在澤瀉對脂多糖誘導(dǎo)小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病RAW264.7細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響及作用機(jī)制的研究中發(fā)現(xiàn)，澤瀉能顯著降低一氧化氮的釋放，并可顯著下調(diào)環(huán)氧合酶-2、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶、白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-6和腫瘤壞死因子-α 等炎癥因子mRNA 的表達(dá)。黃小強(qiáng)等[99]發(fā)現(xiàn)澤瀉三萜能顯著降低肺組織濕干質(zhì)量比，減輕脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷。林娜等[100]通過建立脂多糖誘導(dǎo)的小鼠小膠質(zhì)BV-2 細(xì)胞炎癥模型和檢測炎癥因子的表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)澤瀉能有效抑制IL-6 分泌，并減輕小鼠耳廓腫脹及大鼠棉球肉芽腫脹程度。

2.5 抗菌

澤瀉中的三萜和倍半萜也具有良好的抗菌活性。Jin 等[6]通過比較23-乙酰澤瀉醇B、澤瀉醇B、23-乙酰澤瀉醇C 和24-乙酰澤瀉醇A 的抗菌活性，發(fā)現(xiàn)其對屎腸球菌和綠膿桿菌等耐藥菌株的最小抑菌濃度（minimum inhibitory concentration，MIC）為2.5～10 μg/mL，均低于陽性對照（氯霉素和氨芐西林的MIC 值為5～80 μg/mL）。Ma 等[37]研究發(fā)現(xiàn)，澤瀉醇A、25-O-ethylalisol A、11-去氧澤瀉醇A、24-乙酰澤瀉醇E、澤瀉醇G 和25-anhydroalisol F 以及倍半萜 5βH-guaia-6-ene 和 10-hydroxy-7,10-epoxysalvialane 對革蘭陽性菌枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌具有良好的抗菌活性。

2.6 抗病毒

研究表明澤瀉具有抗乙肝病毒的活性。Jiang等[7]研究發(fā)現(xiàn)24-乙酰澤瀉醇A、25-anhydroalisol A、13β,17β-環(huán)氧澤瀉醇A、23-乙酰澤瀉醇B、澤瀉醇F 和24-乙酰澤瀉醇F 對人肝癌HepG2.2.15 細(xì)胞的乙型肝炎病毒表面抗原的分泌具有抑制作用。Zhang 等[101-103]通過對澤瀉醇A 進(jìn)行化學(xué)修飾，得到一系列四?；苹衔铮l(fā)現(xiàn)tetra-acetyl alisol A 、 tetra-methoxyacetyl alisol A 和 tetraethoxyacetyl alisol A 表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗乙型肝炎病毒活性。

3 炮制對澤瀉化學(xué)成分的影響

中藥炮制是根據(jù)中醫(yī)藥理論，依照辨證施治用藥的需要和藥物自身性質(zhì)，以及調(diào)劑、制劑的不同要求，所采取的一項(xiàng)制藥技術(shù)。炮制除了可降低藥物的不良反應(yīng)外，還可增強(qiáng)藥物療效、改變或緩和藥物藥性、改變或增強(qiáng)藥物作用部位和趨勢[9]。藥材經(jīng)不同炮制方法處理后，其化學(xué)成分及其含量可能會(huì)發(fā)生相應(yīng)變化[104]。目前，鹽澤瀉的炮制工藝大多采用100 kg 生澤瀉加2 kg 食鹽，待鹽水浸透生澤瀉后以文火（80～120 ℃）炒制干燥微黃即可。麩澤瀉的炮制工藝多采用100 kg 生澤瀉加10～15 kg 麩皮，以中火（150～220 ℃）炒制，先放入麩皮，待起煙后加入生澤瀉，共同炒制焦黃，撈出后篩去麩皮即可。23-乙酰澤瀉醇B 和24-乙酰澤瀉醇A 是澤瀉中含量較高的三萜，為常用的質(zhì)量控制成分。目前，大多數(shù)研究主要以這2 個(gè)三萜的含量變化為指標(biāo)，評價(jià)炮制溫度、炮制時(shí)間和輔料用量對澤瀉三萜的影響。三萜化合物由于結(jié)構(gòu)和官能團(tuán)的差異，在炮制過程中發(fā)生一系列脫水、去乙酰化、氧環(huán)開裂和重排等反應(yīng)，從而導(dǎo)致鹽澤瀉和麩澤瀉三萜的結(jié)構(gòu)和組成比例發(fā)生變化。

3.1 炮制溫度對澤瀉三萜的影響

炮制溫度是影響澤瀉三萜含量發(fā)生變化最主要的因素之一。向茜等[105]運(yùn)用LC-MS/MS 技術(shù)研究澤瀉鹽制前后28 個(gè)三萜類成分和2 個(gè)倍半萜類成分含量的差異，發(fā)現(xiàn)澤瀉經(jīng)鹽制后三萜成分含量顯著下降。Tai 等[106]運(yùn)用LC-MS/MS 技術(shù)研究加熱干燥溫度對生澤瀉三萜含量的影響，結(jié)果表明隨著溫度升高，澤瀉中的三萜總含量逐漸下降，在80 ℃時(shí)質(zhì)量分?jǐn)?shù)由93.4%下降至38.8%，在150 ℃ 23-乙酰澤瀉醇B 質(zhì)量分?jǐn)?shù)降至《中國藥典》2020年版要求的0.5 mg/g 以下。韓偉健等[107]基于核磁共振氫譜技術(shù)的代謝組學(xué)方法研究生澤瀉與鹽澤瀉中8種三萜化合物的含量差異，發(fā)現(xiàn)23-乙酰澤瀉醇B和24-乙酰澤瀉醇A 含量在鹽制后降低。

3.2 炮制時(shí)間對澤瀉三萜的影響

炮制時(shí)間也是影響澤瀉成分變化的另一個(gè)重要因素，隨著炮制時(shí)間的延長，會(huì)使三萜結(jié)構(gòu)上羥基、乙酰基等基團(tuán)發(fā)生不同程度的斷裂。由于鹽澤瀉的炮制溫度低于麩澤瀉，需要30～40 min 的炒制時(shí)間才能干透，而麩澤瀉在150～220 ℃下炮制時(shí)間一般不超過8 min。所以長時(shí)間的加熱可使三萜類化合物發(fā)生轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致含量降低。研究表明，澤瀉鹽制過程中23-乙酰澤瀉醇B 和24-乙酰澤瀉醇A 的含量均會(huì)慢慢升高，但在炒制40 min 后，二者含量迅速降低[108]。炮制過程中二者含量升高的原因與其結(jié)構(gòu)中C-23 和C-24 位上乙?；悩?gòu)化有關(guān)，使2種成分發(fā)生了不同比例的相互轉(zhuǎn)化，見圖3。戴小歡等[109]運(yùn)用高效液相色譜技術(shù)對鹽澤瀉、麩澤瀉中的23-乙酰澤瀉醇B 和24-乙酰澤瀉醇A 含量進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)二者在麩澤瀉中含量增加，而在鹽澤瀉中的含量降低。謝一輝等[110]以澤瀉有效成分和飲片外觀色澤均勻性為指標(biāo)，優(yōu)化澤瀉炮制工藝條件，發(fā)現(xiàn)23-乙酰澤瀉醇B 的含量與炮制溫度和時(shí)間呈負(fù)相關(guān)，但在最佳炮制溫度和時(shí)間內(nèi)，其含量變化不顯著。24-乙酰澤瀉醇A 在最佳炮制溫度和時(shí)間內(nèi)，其含量與炮制溫度和時(shí)間呈正相關(guān)。這是由于23-乙酰澤瀉醇B 在高溫下發(fā)生氧化裂解生成結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定的23-乙酰澤瀉醇A（14），隨之發(fā)生異構(gòu)化反應(yīng)生成24-乙酰澤瀉醇A，所以炮制過程中23-乙酰澤瀉醇B 含量會(huì)逐漸降低，24-乙酰澤瀉醇A 含量增加。但是隨著加熱時(shí)間的進(jìn)一步延長，24-乙酰澤瀉醇A 發(fā)生去乙?；磻?yīng)，生成澤瀉醇A（2）、澤瀉醇G（9）和23-acetate-25-anhydroalisol E（128）等其他結(jié)構(gòu)的三萜，見圖3。

圖3 24-乙酰澤瀉醇A 和23-乙酰澤瀉醇B 在澤瀉炮制過程中的轉(zhuǎn)化途徑Fig.3 Transformation pathway of alisol A 24-acetate and alisol B 23-acetate in processing of Alisma Rhizoma

3.3 炮制輔料對澤瀉三萜的影響

段啟等[111]運(yùn)用高效液相色譜技術(shù)分析比較鹽澤瀉、建昌幫法鹽炙澤瀉、樟幫法鹽炙澤瀉、烘法制澤瀉、清炒澤瀉（焦）、樟幫麩炒澤瀉、鹽麩澤瀉和生澤瀉中的23-乙酰澤瀉醇B 含量，發(fā)現(xiàn)23-乙酰澤瀉醇B 在樟幫麩炒澤瀉中的含量最高，而其余炮制品中的含量均低于生品。Dai 等[112]運(yùn)用LC-MS/MS 技術(shù)和代謝組學(xué)的方法系統(tǒng)研究澤瀉鹽制和麩制前后三萜類成分的變化，分別從生澤瀉、鹽澤瀉和麩澤瀉中鑒定了83、100 和103 個(gè)三萜類化合物；鹽澤瀉中三萜類化合物含量大多呈下降趨勢，而麩澤瀉中的三萜含量上升。其原因可能與麩皮的存在有關(guān)，麩皮使?jié)蔀a受熱更加均勻，且麩澤瀉炒制時(shí)間比鹽澤瀉時(shí)間短很多，使得含有乙?；?、多羥基、環(huán)氧基取代的三萜化合物不易發(fā)生裂解轉(zhuǎn)化。

4 炮制對澤瀉藥理作用的影響

中醫(yī)理論認(rèn)為澤瀉炒后寒性緩和，麩炒制后更能緩和藥物性能，增強(qiáng)補(bǔ)脾益氣的作用，鹽制后能引藥下行，增強(qiáng)滋陰泄熱的作用[105]。澤瀉炮制后，其三萜的種類和含量均發(fā)生變化，必然導(dǎo)致藥理作用發(fā)生改變。目前，關(guān)于澤瀉炮制前后藥理作用的研究多集中于利尿作用，此外還有少量的抗炎、抗應(yīng)激和健脾作用的研究，而澤瀉炮制前后調(diào)血脂作用差異的比較未見報(bào)道。表3 總結(jié)了澤瀉及其炮制品藥理作用的差異。

表3 澤瀉及其炮制品的藥理作用比較Table 3 Comparisions of pharmacological effect of Alisma Rhizoma and its processed products

4.1 炮制對利尿作用的影響

曾春暉等[113-114]發(fā)現(xiàn)澤瀉鹽制后能顯著增加水腫模型小鼠的尿量，并降低其水腫程度；廣西和四川產(chǎn)澤瀉鹽制前后均能明顯增加大鼠尿液量，且最大增長率分別為64.8%、56.6%，然而福建和江西產(chǎn)澤瀉鹽制后卻顯著減少大鼠尿液量，表現(xiàn)出抗利尿作用，表明澤瀉中某些具有利尿活性的三萜成分含量或種類發(fā)生了變化。Tao 等[115]使用LC-MS/MS 技術(shù)，對澤瀉鹽制前后6 種三萜類成分進(jìn)行了定量分析，并比較了其利尿作用的差異。發(fā)現(xiàn)澤瀉醇B、澤瀉醇F 和澤瀉醇A 鹽制后含量升高，且與利尿作用呈正相關(guān)，而鹽制后24-乙酰澤瀉醇A、23-乙酰澤瀉醇B 和23-乙酰澤瀉醇C 的含量降低，與利尿作用呈負(fù)相關(guān)。由此可見，不同結(jié)構(gòu)類型的三萜由于含量或結(jié)構(gòu)的差異，對泌尿系統(tǒng)產(chǎn)生不同的調(diào)節(jié)作用。在研究鹽澤瀉炮制工藝的時(shí)候，應(yīng)以具有利尿活性作用的三萜為指標(biāo)，篩選鹽澤瀉的最佳炮制溫度、炮制時(shí)間等工藝參數(shù)。

4.2 炮制對抗炎作用的影響

各項(xiàng)抗炎實(shí)驗(yàn)表明澤瀉炮制后抗炎活性顯著增強(qiáng)，且鹽澤瀉的抗炎作用優(yōu)于麩澤瀉。戴小歡[108]通過巴豆油誘發(fā)小鼠耳廓腫脹，比較了生澤瀉、鹽澤瀉和麩澤瀉的抗炎作用，發(fā)現(xiàn)生澤瀉及其炮制品均能有效抑制小鼠耳廓腫脹，抑制作用強(qiáng)度為鹽澤瀉＞麩澤瀉＞生澤瀉。龔又明等[116]采用小鼠耳廓二甲苯致炎法和大鼠蛋清性足腫脹法研究生澤瀉、鹽澤瀉和麩澤瀉抗炎作用的差異。發(fā)現(xiàn)生澤瀉及其炮制品均能顯著抑制小鼠耳廓腫脹度和各時(shí)間點(diǎn)的大鼠足腫脹度，且抑制作用強(qiáng)度為鹽澤瀉＞麩澤瀉＞生澤瀉。

4.3 炮制對健脾作用的影響

張宏達(dá)等[117]以大鼠胃泌素含量以及十二指腸Na+,K+-ATP 酶活性為指標(biāo)，研究澤瀉炮制前后健脾作用的差異。發(fā)現(xiàn)生澤瀉和麩澤瀉對大鼠離體十二指腸收縮振幅及相對張力都有增強(qiáng)的作用，麩澤瀉組的胃泌素和Na+,K+-ATP 酶含量顯著高于同劑量的生澤瀉組，證明麩澤瀉健脾作用優(yōu)于生澤瀉。此外，關(guān)于澤瀉健脾作用的現(xiàn)代藥理研究鮮有報(bào)道。中醫(yī)認(rèn)為脾失健運(yùn)是因飲食不節(jié)、水濕痰飲、情志失調(diào)等導(dǎo)致脾的運(yùn)化功能失常。脾失健運(yùn)，水濕停留，日久成痰濕體質(zhì)，而致肥胖[119]?，F(xiàn)代研究證明，“健脾”主要通過影響消化系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等相關(guān)功能達(dá)到效果[120]。未來可圍繞以上相關(guān)內(nèi)容對澤瀉及其炮制品的健脾作用進(jìn)行評價(jià)。

4.4 炮制對抗應(yīng)激作用的影響

韋海等[118]通過研究澤瀉鹽制前后對小鼠抗疲勞、耐缺氧及耐高溫等抗應(yīng)激作用的影響，發(fā)現(xiàn)生澤瀉能明顯減少小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，并降低其常壓耐缺氧和耐高溫的能力，而鹽澤瀉能顯著延長小鼠負(fù)重游泳持續(xù)時(shí)間，提高小鼠常壓耐缺氧和耐高溫能力?？梢?，鹽澤瀉和生澤瀉在對抗應(yīng)激作用方面表現(xiàn)出相反的藥理作用。

5 結(jié)語

澤瀉作為傳統(tǒng)中藥，有著悠久的使用和炮制歷史，其炮制品也有不同的藥用功效，見圖4。生澤瀉以利水滲濕為主，多用于小便不利、水腫泄瀉、淋濁、濕熱黃疸、滯下、痰飲等證。鹽澤瀉可引藥下行，滋陰瀉熱功效增強(qiáng)，利尿而不傷陰。麩澤瀉緩和寒性，以滲濕和脾，升清降濁為主，多用于濕阻中焦、脾失健運(yùn)、大便泄瀉和小便不利。雖然大量研究已證實(shí)三萜化合物為澤瀉的主要藥效成分，但不同結(jié)構(gòu)類型的三萜有著不同的藥理作用。三萜成分在炮制過程中發(fā)生脫水、去乙酰化、氧環(huán)裂解和異構(gòu)化等一系列反應(yīng)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)和組成比例發(fā)生改變，導(dǎo)致澤瀉炮制品的藥效強(qiáng)度發(fā)生變化甚至產(chǎn)生相反的作用。因此，系統(tǒng)闡明不同類型三萜對應(yīng)的各種藥效作用和量效關(guān)系，對澤瀉藥材的質(zhì)量控制、炮制工藝參數(shù)的優(yōu)化尤為重要。

圖4 澤瀉及其炮制品的化學(xué)成分及藥理作用Fig.4 Chemical components and pharmacological effects of Alisma Rhizoma and its processed products

澤瀉除利尿作用以外，已被證實(shí)具有卓越的調(diào)脂功效，在治療脂代謝紊亂引起的高脂血癥、非酒精性脂肪肝和動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病方面有著良好的應(yīng)用前景。但仍需運(yùn)用各種組學(xué)方法，從分子水平和動(dòng)物水平，深入揭示澤瀉對脂代謝調(diào)節(jié)的作用機(jī)制。目前，生澤瀉和鹽澤瀉的利尿作用已被系統(tǒng)比較，但澤瀉炮制品的調(diào)脂作用差異尚未報(bào)道，這也為澤瀉的后續(xù)研究提供了新方向。

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