王晨，劉傲蕾，吳和珍，楊艷芳，吳松濤

(1.湖北中醫(yī)藥大學藥學院，武漢 430065；2.中藥資源與中藥化學湖北省重點實驗室，武漢 430065；3.現(xiàn)代中藥與民族藥湖北省工程研究中心，武漢 430065)

延胡索(Corydalis Rhizoma)為罌粟科植物延胡索CorydalisyanhusuoW.T.Wang的干燥塊莖，別名元胡、玄胡索、延胡；性溫，味辛、苦；歸肝、脾經(jīng)；具有活血，行氣，止痛之功效；常用于胸脅、脘腹疼痛，胸痹心痛，經(jīng)閉痛經(jīng)等[1]。川楝子(Toosendan Fructus)為楝科植物川楝MeliatoosendanSieb.et Zucc.的干燥成熟果實，別名楝實、金鈴子、苦楝子等；性寒，味苦；歸肝、小腸、膀胱經(jīng)；具有疏肝泄熱，行氣止痛，殺蟲之功效；常用于肝郁化火，胸脅、脘腹脹痛，疝氣疼痛等[2]。金鈴子散為延胡索與川楝子等比組成的中藥復方，為理氣劑，具有疏肝泄熱，活血止痛的功效，臨床上常用于抗炎、鎮(zhèn)痛等[3-5]。

延胡索與金鈴子散同為鎮(zhèn)痛藥，但兩者只有一味藥川楝子的差異。文獻[6-7]對金鈴子散及其單味藥的抗炎鎮(zhèn)痛作用和血清內源性代謝物進行了研究，發(fā)現(xiàn)金鈴子散具有明顯且相比單味藥更優(yōu)異的抗炎鎮(zhèn)痛效果，金鈴子散及延胡索給藥后，能夠降低神經(jīng)元的興奮性，從而達到抗炎鎮(zhèn)痛的目的。焦苗苗等[8]對延胡索、烏藥、金鈴子散及小活絡丹的神經(jīng)病理性鎮(zhèn)痛作用進行了研究，發(fā)現(xiàn)金鈴子散的鎮(zhèn)痛作用最強且見效快，其次為延胡索。以上學者均對金鈴子散及延胡索的鎮(zhèn)痛作用進行了研究，其研究結果意義重大，然而其僅探索了金鈴子散及延胡索鎮(zhèn)痛的藥效作用，未對金鈴子散及延胡索鎮(zhèn)痛的作用機制差異進行研究，存在很大的局限性。為此，通過動物藥理實驗、網(wǎng)絡藥理學和分子對接技術對延胡索及金鈴子散鎮(zhèn)痛的藥效作用和作用機制進行系統(tǒng)的比對研究，以期為經(jīng)典名方金鈴子散的現(xiàn)代化和臨床上鎮(zhèn)痛藥的選擇與推廣提供進一步的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 受試動物

體質量為(20±2)g的SPF級BALB/c雄性小鼠40只，購自三峽大學，許可證號：SCXK(鄂)2017-0012。小鼠自由進食進水，于恒溫恒濕的屏障環(huán)境下適應性飼養(yǎng)一周。

1.2 儀器

HH-4恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司)，Milli-Q Advantage超純水儀(美國Milipore公司)，500 mL燒杯(四川蜀玻集團有限責任公司)。

1.3 藥物與試劑

延胡索水煎醇沉液2 g/mL及金鈴子散水煎醇沉液2 g/mL均由湖北中醫(yī)藥大學藥理實驗中心提供，0.6%醋酸溶液(現(xiàn)用現(xiàn)配，冰醋酸購于國藥集團化學試劑有限公司，批號：10000218)，0.9%生理鹽水(四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號：L121071404)。

1.4 延胡索及金鈴子散的藥效學實驗

1.4.1 熱板法

調節(jié)恒溫水浴鍋至水溫恒定在(55±0.5)℃，將500 mL燒杯放入其中，燒杯底部接觸水面。每次取1只小鼠，放入燒杯內，記錄自放入燒杯至出現(xiàn)舔后足所需時間(單位：s)，作為該鼠的痛閾值。30 s內不出現(xiàn)舔后足者，棄之不用。依次測量各小鼠的痛閾值，取預選合格的小鼠24只，隨機分為純水對照組、生理鹽水組、延胡索液給藥組及金鈴子散液給藥組，每組6只，稱重后編號。各給藥組小鼠分別以0.2 mL/10 g的劑量灌胃，分別在給藥后15、30、60、90 min測定各小鼠的痛閾值，若小鼠在熱板上60 s仍無舔后足現(xiàn)象，取出并按60 s計。

取不同時間測定的各小鼠痛閾平均值，計算用藥后痛閾提高的百分率，計算公式為

(1)

1.4.2 扭體法

小鼠稱重，標記后隨機分組。40只小鼠分設純水對照組、生理鹽水組、延胡索液給藥組及金鈴子散液給藥組。各組小鼠分別以0.2 mL/10 g的劑量灌胃，30 min后，各小鼠腹腔注射0.2 mL 0.6%醋酸溶液。觀察小鼠并記錄15 min內出現(xiàn)扭體反應的次數(shù)，計算用藥后各組的鎮(zhèn)痛百分率，計算公式為

(2)

1.5 網(wǎng)絡藥理學研究

為進一步研究延胡索與金鈴子散間的差異，展開網(wǎng)絡藥理學和分子對接實驗對兩者的作用機制進行比較分析。

1.5.1 活性成分的檢索和篩選

通過中藥系統(tǒng)藥理學數(shù)據(jù)庫與分析平臺(TCMSP, https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)、中醫(yī)藥綜合數(shù)據(jù)庫(TCMID, http://119.3.41.228:8000/tcmid/)、中醫(yī)藥分子機制生物信息學分析工具(BATMAN-TCM, http://bionet.ncpsb.org.cn/batman-tcm/)等多個中藥專項數(shù)據(jù)庫平臺對川楝子和延胡索的所有成分進行檢索。通過設置閾值口服生物利用度(OB)≥30%和類藥性(DL)≥0.18，篩選出潛在的活性成分[9]。通過PubChem數(shù)據(jù)庫逐一驗證這些活性成分的分子質量、化學結構和理化性質等，并下載其3D結構(.SDF格式)留以檢索藥物靶點以及進行分子對接實驗[10]。

1.5.2 交集靶點的獲取

將1.4.1節(jié)中獲得的3D結構導入SwissTargetPrediction(http://www.swisstargetprediction.ch/)和PharmMapper(http://www.lilab-ecust.cn/pharmmapper/)數(shù)據(jù)庫中，當Probability≥0時，被認為是潛在靶點, 綜合兩數(shù)據(jù)庫獲取藥物作用靶點[11-12]。通過GeneCards(https://www.genecards.org/)和MalaCards(https://www.genecards.org/)數(shù)據(jù)庫檢索關鍵詞“Analgesic”和“Pain”，獲取疾病相關靶點[13]。用Venny在線繪圖工具(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html)表示疾病和藥物的交集靶點，這些交集靶點即可視為延胡索及金鈴子散鎮(zhèn)痛的潛在靶點。

1.5.3 交集靶點的富集分析

DAVID(https://david.ncifcrf.gov/)在線平臺能夠對基因進行注釋、可視化，并綜合發(fā)現(xiàn)基因的生物學功能和參與調控的信號通路[14]。因此，將交集靶點導入DAVID數(shù)據(jù)庫進行富集分析。結果以GO(gene ontology)和KEGG(Kyoto encyclopedia of Genes and Genomes pathway)形式呈現(xiàn)，其中GO功能由生物過程(biological process, BP)、細胞成分(cellular component, CC)、分子功能(molecular function, MF)組成。通過GO功能富集分析，可以判斷被作用交集靶點的變化是否具有生物學意義，通過KEGG信號通路富集分析，可以預測這些交集靶點主要參與并調控的信號通路。

1.5.4 蛋白質-蛋白質相互作用網(wǎng)絡

蛋白質相互作用(protein-protein interaction, PPI)及其衍生網(wǎng)絡在大多數(shù)生物學功能中發(fā)揮著重要作用，并且大多數(shù)蛋白質能夠通過相互作用來激活自身的功能[15]。對PPI網(wǎng)絡的分析有助于從系統(tǒng)的角度研究疾病的分子機制，發(fā)現(xiàn)新的藥物靶點。將交集靶點導入STRING(https://www.string-db.org/)數(shù)據(jù)庫，構建PPI網(wǎng)絡，并探索蛋白質相互作用之間的聯(lián)系或潛在聯(lián)系，從而遴選出相互作用最密切，或者最為可能的潛在靶點基因[16]。

1.5.5 “成分-靶點-通路”網(wǎng)絡的構建

將潛在活性成分、交集靶點和高度相關的信號通路導入Cytoscape3.9.1軟件，構建“成分-靶點-通路”(compound-target-pathway，C-T-P)以將所有數(shù)據(jù)可視化便于分析。通過對網(wǎng)絡圖進行分析，篩選出關鍵成分與核心靶點。

1.6 分子對接

綜合PPI和C-T-P結果，選取核心靶點與關鍵成分進行虛擬分子對接。在RCSB PDB數(shù)據(jù)庫(http://www1.rcsb.org/)中檢索這些核心靶點，獲取該靶點與疼痛病癥密切相關的蛋白結構[17]。利用Discovery Studio 2019 Client軟件對這些蛋白質結構進行前處理，包括去除小分子配體、氫離子和清理蛋白質等，然后將其與關鍵成分進行虛擬對接。一般認為，當LibDock Score≥90時，小分子配體與蛋白質受體間的親和力更強，更易結合[18]。

1.7 統(tǒng)計學分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(mean ± SD)表示。單因素方差分析P<0.05時，組間比較有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 藥效學研究結果

2.1.1 熱板法

通過小鼠熱板法探索并比對延胡索及金鈴子散的鎮(zhèn)痛效果，結果如表1、圖1所示。結果表明，延胡索組與金鈴子散組給藥后，各時長內痛閾值均有顯著性提高(P<0.005)。其中，延胡索組在給藥后60 min時能夠最大限度提高痛閾值，在60 min后鎮(zhèn)痛能力逐漸衰減。金鈴子散組在給藥后60 min時能夠最大限度提高痛閾值，在60 min后鎮(zhèn)痛能力趨于穩(wěn)定。在給藥60 min內，延胡索與金鈴子散的鎮(zhèn)痛作用相似；在給藥60 min后，金鈴子散的鎮(zhèn)痛能力比延胡索更強(P<0.001)。

表1 給藥后各時長內痛閾平均值和平均提高率

***表示P<0.005；****表示P < 0.001

2.1.2 扭體法

通過小鼠扭體法探索并比對延胡索及金鈴子散的鎮(zhèn)痛效果，結果如表2、圖2所示。結果表明，延胡索組與金鈴子散組給藥30 min后，均能大幅降低小鼠扭體次數(shù)，有顯著的鎮(zhèn)痛率(P<0.001)。在給藥30 min后，延胡索與金鈴子散的鎮(zhèn)痛作用差異并不明顯。

表2 扭體平均次數(shù)和鎮(zhèn)痛率

*P<0.05, ****P表示<0.001

2.2 網(wǎng)絡藥理學結果

2.2.1 活性成分的檢索和篩選

通過篩選，共得到47個延胡索活性成分，55個金鈴子散活性成分。通過已發(fā)表文獻對川楝子的報道，雖然川楝素(Toosendanin)的OB值沒有達到閾值，但它仍然是川楝子中活性很強的成分，因此納入結果。篩選結果如表3所示。

表3 金鈴子散中活性成分基本信息

2.2.2 交集靶點的獲取

通過篩選，分別獲取659個延胡索作用靶點、746個金鈴子散作用靶點以及346個鎮(zhèn)痛疾病靶點。利用Venny圖對藥物作用靶點和疾病靶點進行分析和比較，如圖3所示。藥物作用靶點和疾病靶點的交集靶點即為該藥物鎮(zhèn)痛的潛在作用靶點。其中，延胡索鎮(zhèn)痛的潛在靶點有103個，金鈴子散鎮(zhèn)痛的潛在靶點有110個。

圖3 Venny圖

2.2.3 KEGG通路與GO功能富集分析

分別將延胡索和金鈴子散鎮(zhèn)痛的潛在靶點導入DAVID數(shù)據(jù)庫中，對其進行KEGG信號通路與GO功能富集注釋分析，結果如圖4、圖5所示。KEGG信號通路富集分析結果顯示，延胡索103個潛在作用靶點中有99個靶點基因被富集(96.12%)，涉及56條信號通路，其中47條信號通路與靶點基因顯著相關(P≤0.05)。以下通路涉及靶點基因參與程度最高：神經(jīng)活性配體-受體相互作用(neuroactive ligand-receptor interaction, 42個靶點, 40.78%)、鈣離子信號通路(calcium signaling pathway, 26個靶點, 25.24%)、5-羥色胺能突觸(serotonergic synapse, 17個靶點, 16.50%)。金鈴子散110個潛在作用靶點中有106個靶點基因被富集(96.36%)，涉及64條信號通路，其中47條信號通路與靶點基因顯著相關(P≤0.05)。以下通路涉及的靶點基因參與程度最高：neuroactive ligand-receptor interaction(46個靶點, 41.82%)、calcium signaling pathway(27個靶點, 25.55%)和serotonergic synapse(17個靶點, 15.45%)。

P越小，說明結果與鎮(zhèn)痛越相關，結果更可靠；代表信號通路的點越大，說明該通路富集的交集靶點數(shù)量越多

antioxidant activity為抗氧化活性；behavior為行為；binding為結合；biological adhesion為生物黏附；biological regulation為生物調節(jié)；catalytic activity為催化活性；cell為細胞；cell aggregation為細胞聚集；cell junction為細胞連接；cell killing為細胞殺傷；cellpart為細胞部分；cell proliferation為細胞增殖；cellular component organization or biogenesis為細胞成分組織或生物成因；cellular process為細胞過程；detoxification為解毒；developmental process為發(fā)展過程；extracellular region為細胞外區(qū)域；extracellular region part為細胞外區(qū)域部分；growth為生長；hijacked molecular function為劫持分子功能；immune system process為免疫系統(tǒng)過程；localization為局部化；locomotion為運動；membrane為膜；membrane part為膜部分；membrane-enclosed lumen為膜封閉腔；metabolic process為代謝過程；molecular function regulator為分子功能調節(jié)劑；molecular transducer activity為分子換能器活性；multicellular organismal process為多細胞生物過程；multi-organism process為多生物體過程；negative regulation of biological process為生物過程負調節(jié)；nucleoid為擬核；organelle為細胞器；organelle part為細胞器部分；pigmentation為著色；positive regulation of biological process為生物過程正調節(jié)；protein-containing complex為含蛋白質的復合物；regulation of biological process為生物過程的調節(jié)；reproduction為繁殖；reproductive process為繁殖過程；response to stimulus為對刺激的反應；rhythmic process為節(jié)奏過程；signaling為信號；structural molecule activity為結構分子活性；supramolecular complex為超分子復合物；synapse為突觸；synapse part為突觸部分；transcription regulator activity為轉錄調節(jié)活性；transporter activity為轉錄體活性；紅色為BP；綠色為CC；藍色為MF;柱形圖越高，表明該項目富集的交集靶點數(shù)量越多

GO功能富集分析結果顯示，延胡索103個潛在作用靶點全部被富集(100%)。其中BP富集主要涉及cellular process(103個靶點, 100%)、biological regulation(101個靶點, 98.06%)和response to stimulus(98個靶點, 95.15%)。CC富集主要涉及membrane(94個靶點, 91.26%)、organelle(83個靶點, 80.58%)和synapse(51個靶點, 49.51%)。MF富集主要涉及binding(100個靶點, 97.09%)、molecular transducer activity(55個靶點, 53.40%)和catalytic activity(46個靶點, 44.66%)。金鈴子散110個潛在作用靶點全部被富集(100%)。其中BP富集主要涉及cellular process(110個靶點, 100%)、biological regulation(108個靶點, 98.18%)和response to stimulus(104個靶點, 94.55%)。CC富集主要涉及membrane(101個靶點, 91.82%)、organelle(88個靶點, 80.00%)和synapse(54個靶點, 49.09%)。MF富集主要涉及binding(107個靶點, 97.27%)、molecular transducer activity(59個靶點, 53.64%)和catalytic activity(48個靶點, 43.64%)。

由KEGG信號通路和GO功能富集分析結果即可預測延胡索及金鈴子散鎮(zhèn)痛的可能機制。

2.2.4 蛋白質-蛋白質相互作用網(wǎng)絡

分別將延胡索和金鈴子散鎮(zhèn)痛的潛在靶點導入到STRING數(shù)據(jù)庫，構建PPI網(wǎng)絡，并使用Cytoscape3.9.1軟件對該網(wǎng)絡進行分析，結果如表4、圖6所示。顯然，SLC6A4、COMT、CNR1、PTGS2和TH等在延胡索和金鈴子散的PPI網(wǎng)絡中都占據(jù)著重要地位。

當兩蛋白質間有相互作用時，以連線表示，連線越多，表明該蛋白質相互作用能力越強，Degree數(shù)值越高

2.2.5 “C-T-P”網(wǎng)絡的構建

分別將獲取的延胡索和金鈴子散的所有數(shù)據(jù)導入Cytoscape3.9.1軟件中，構建“C-T-P”網(wǎng)絡，結果如表4和圖7所示。在圖7(a)中，共有166個節(jié)點，其中1個黃色節(jié)點代表延胡索，47個藍色節(jié)點代表活性成分，103個紅色節(jié)點代表交集靶點，15個綠色節(jié)點代表信號通路，且有1 409條邊。在圖7(b)中，共有182個節(jié)點，其中2個黃色節(jié)點代表川楝子和延胡索，55個藍色節(jié)點代表活性成分，110個紅色節(jié)點代表交集靶點，15個綠色節(jié)點代表信號通路，且有1 452條邊。

節(jié)點越大，包圍的邊越密集，表明其Degree數(shù)值越高；綠色為信號通路；紅色為靶點；藍色為成分；黃色為藥物

表4 PPI和“C-T-P”網(wǎng)絡中排名較高的靶點基因與成分的數(shù)值

網(wǎng)絡顯示了節(jié)點與節(jié)點之間的聯(lián)系，并以連線表示，即邊。節(jié)點的相關度越高，節(jié)點的邊收斂越集中，節(jié)點的Degree數(shù)值越大。同時，同一節(jié)點與不同節(jié)點間均有聯(lián)系，體現(xiàn)了中藥多成分，多基因相互作用的特點。根據(jù)表2中節(jié)點的Degree數(shù)值選出排名靠前的關鍵基因：Drd2、Drd4、Drd1、Adra1d和Adra2c，以及排名靠前的關鍵成分：四氫小檗堿(Canadine)、唐松草坡芬堿(Thaliporphine)、延胡索甲素(Corydaline)、延胡索堿(Capaurine)和延胡索乙素(Rotundine)。根據(jù)對網(wǎng)絡的分析，延胡索和金鈴子散中的多成分能夠通過多靶點，作用于多途徑，從而達到鎮(zhèn)痛的目的。

2.3 分子對接

圖8中，左側為小分子配體與蛋白質PTGS2受體結合的3D效果圖，右側為配體與受體具體結合位點的2D效果圖。

一般認為，小分子配體與蛋白質受體間親和力越強，結合程度越高，LibDockScore越大，成分的潛在活性越強。根據(jù)PPI和“C-T-P”網(wǎng)絡的分析結果，選擇Degree數(shù)值較高的9個靶點：SLC6A4、COMT、CNR1、PTGS2、TH、DRD2、DRD4、DRD1和ADRA2C，以及5個活性成分：四氫小檗堿、唐松草坡芬堿、延胡索甲素、延胡索堿和延胡索乙素。對接結果以LibDock Score(對接分數(shù))作為篩選標準進行分析，結果如表5和圖8所示。結果表明，所選擇的核心靶點與關鍵成分的對接分數(shù)均大于閾值90，顯示出良好的結合活性，表明這5個關鍵成分在鎮(zhèn)痛的過程中起著重要作用，這9個核心靶點為延胡索及金鈴子散鎮(zhèn)痛的潛在作用靶點。

表5 分子對接結果

圖8 部分分子對接結果

3 討論

熱板法和扭體法是篩選鎮(zhèn)痛藥的經(jīng)典方法[19]。小鼠的足部受熱板刺激而產(chǎn)生疼痛時，會發(fā)生舔舐后足(后足為身體重量支撐點)的特殊反應，以接觸熱板到舔舐后足所需的時間作為痛閾值，以此作為觀測指標，比對藥物的鎮(zhèn)痛藥效作用。當小鼠腹腔受化學藥物刺激而產(chǎn)生疼痛時，表現(xiàn)為扭體反應(腹部收縮內凹，伸展后肢，臀部抬高，蠕行)，以此作為指標，比對藥物的鎮(zhèn)痛藥效作用。藥效學結果顯示，延胡索與金鈴子散均能在一定時間內提高小鼠的痛閾值和減輕外部刺激給小鼠帶來的痛感，表明兩者均具有良好的鎮(zhèn)痛效果。但相比延胡索，金鈴子散的鎮(zhèn)痛作用更持久。延胡索本身便為鎮(zhèn)痛藥，在與川楝子配伍組成金鈴子散后，鎮(zhèn)痛作用更好更持久，這與中醫(yī)方劑配伍理論中協(xié)同增效相吻合。

活性成分和靶點基因一直是中醫(yī)藥現(xiàn)代化的重點問題?，F(xiàn)有方法主要關注藥物指標性成分及其潛在藥理作用，而網(wǎng)絡藥理學研究由于與中藥的多成分、多靶點、多途徑的特點相契合，成為一種能夠更有效識別中藥活性化合物和靶點基因的方法[20-22]。以系統(tǒng)生物學理論為基礎，通過對藥物和疾病進行多平臺、多軟件、多途徑的分析和探索，共獲得47個延胡索活性成分和55個金鈴子散活性成分以及103個延胡索潛在作用靶點和110個金鈴子散潛在作用靶點，這些可能是延胡索和金鈴子散鎮(zhèn)痛過程中的可能信息。GO功能和KEGG信號通路富集分析結果顯示，延胡索和金鈴子散的交集靶點共同涉及細胞膜、細胞器、突觸等，在分子水平上，交集靶點涉及結合，分子換能器活性，催化活性等，與神經(jīng)活性配體受體相互作用、鈣離子信號通路、5-羥色胺能突觸等相關通路有關。通過對構建的“成分-靶點-通路”拓撲網(wǎng)絡進行分析，關鍵活性成分四氫小檗堿、唐松草坡芬堿、延胡索甲素、延胡索堿和延胡索乙素，以及核心靶點SLC6A4、COMT、CNR1、PTGS2、TH、DRD2、DRD4、DRD1和ADRA2C在網(wǎng)絡中占據(jù)著核心位置，推測為延胡索和金鈴子散鎮(zhèn)痛的關鍵成分和核心靶點。分子對接結果表明，5個關鍵成分與9個核心靶點間均存在非常強的對接能力，提示這5個關鍵成分可能為延胡索和金鈴子散鎮(zhèn)痛的藥效物質，而這9個蛋白可能為延胡索和金鈴子散的作用靶點。

通過網(wǎng)絡藥理學分析，推測延胡索和金鈴子散中的四氫小檗堿、唐松草坡芬堿、延胡索甲素、延胡索堿和延胡索乙素可能通過與細胞膜及細胞器結合，調控SLC6A4、COMT、CNR1、PTGS2、TH、DRD2、DRD4、DRD1和ADRA2C的表達，作用于神經(jīng)活性配體受體相互作用、鈣離子信號通路、5-羥色胺能突觸等相關通路，影響Ca2+釋放，從而影響神經(jīng)遞質的合成與釋放，達到鎮(zhèn)痛的目的，并且這5個關鍵成分均歸屬于延胡索，而被大量報道的具有較強鎮(zhèn)痛活性的川楝素[23-24]并沒有被篩選出，說明網(wǎng)絡藥理學仍舊有較大的局限性，需要進一步完善。對延胡索和金鈴子散的作用機制進行比對，發(fā)現(xiàn)藥效物質，作用靶點及信號通路均沒有明顯差異，而藥效物質均為臣藥延胡索成分，作為君藥的川楝子卻沒有關聯(lián)度較高的成分，推測金鈴子散中臣藥延胡索的藥效作用優(yōu)于君藥川楝子。

4 結論

延胡索與金鈴子散均具有良好的鎮(zhèn)痛作用，金鈴子散的鎮(zhèn)痛效果相比延胡索要更加持久；網(wǎng)絡藥理學結果表明，延胡索與金鈴子散均能夠通過多成分、多靶點、多通路達到鎮(zhèn)痛的目的，且作用機制沒有明顯差異。但同時，由于網(wǎng)絡藥理學方法本身的局限性，作用機制預測結果與臨床前實際研究結果可能存在一定的差異性，因此有待體內外實驗進一步研究。