劉杰淋,孔曉蕾,張 強(qiáng),王雪珊,彭大慶,曲洪生
( 1.黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院草業(yè)研究所,黑龍江 哈爾濱 150086 ; 2.商艾享生態(tài)科技股份有限公司,黑龍江 哈爾濱 150070 )
刺果甘草屬豆科(Leguminosae)甘草屬(Glycyrrhiza),分布于北半球溫帶或亞熱帶、北美洲和澳大利亞等地區(qū),我國(guó)約有10種[1]。刺果甘草甘草屬植物用途廣,經(jīng)濟(jì)價(jià)值大,不但是重要的藥用植物,也是優(yōu)良的防風(fēng)固沙、保護(hù)水土植物。刺果甘草將成為高速公路邊坡護(hù)坡用的重要草資源,其研發(fā)將對(duì)區(qū)域生態(tài)環(huán)境建設(shè)起到重要作用。
刺果甘草因其藥理作用成為家畜飼料中的重要泌乳添加劑之一,將會(huì)是增加農(nóng)民收入和推動(dòng)社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的最新增長(zhǎng)點(diǎn)。本文綜述了目前刺果甘草的化學(xué)組分、組織培養(yǎng)、生物遺傳多樣性、植物學(xué)特征特性等方面的研究進(jìn)展,以期為刺果甘草作為飼料資源及藥用資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)、利用提供參考。
近年來(lái)針對(duì)刺果甘草的營(yíng)養(yǎng)成分方面進(jìn)行了大量而廣泛的研究。研究表明,刺果甘草含有豐富的黃酮類(lèi)化合物、甘草黃酮類(lèi)化合物[2]。
黃酮類(lèi)化合物是一類(lèi)重要的天然有機(jī)化合物。甘草黃酮具有清除自由基、抗氧化的作用,可以預(yù)防腫瘤發(fā)生,引起了人們的廣泛關(guān)注和重視[3]。研究表明,甘草中分離鑒定的黃酮類(lèi)化合物有300多種,可分為黃酮類(lèi)、黃烷類(lèi)、異黃酮類(lèi)、黃酮醇類(lèi)、查爾酮類(lèi)以及二氫黃酮等[4]。李秀影[5]、常桂英等[6]研究發(fā)現(xiàn),刺果甘草中黃酮類(lèi)化合物的抗氧化效果略高于維生素C(VC)。此外,日糧中添加黃酮類(lèi)化合物可抑制細(xì)菌生長(zhǎng),調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu),緩解致病菌對(duì)家禽小腸的損傷,促進(jìn)小腸對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收;還可促進(jìn)牛生長(zhǎng)發(fā)育,可作為抗生素類(lèi)生長(zhǎng)促進(jìn)劑的替代品應(yīng)用于畜禽生產(chǎn)[7]。
張繼等[8]研究發(fā)現(xiàn),刺果甘草葉的主要化學(xué)成分為不飽和醇、烯、不飽和酯、烷類(lèi)以及萜類(lèi)化合物,含量最多的是5-(2-丙烯基)-1,3-苯并間二氧雜環(huán)戊烯,占19.02%;其次是3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇,占17.70%;以及[1R-(1R*,4Z,9S*)]-4,11,11-三甲基-8-亞甲基-二環(huán)[7.2.0]十一碳-4-烯(占11.53%)、2,3,6-三甲基-1,6-庚二烯(占8.36%)、2-十一酮(占4.24%)、香豆素-7,8-二醇(占3.81%)、2-甲基-6-亞甲基-7-辛烯-2-醇(占3.47%)、3,7,11,15-四甲基-2-十六烯-1-醇(占3.43%)等;上述8種化合物的含量占總量的71.56%。
張繼等[3]研究采用水蒸氣蒸餾法提取刺果甘草根化學(xué)成分,運(yùn)用毛細(xì)管氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法結(jié)合計(jì)算機(jī)檢索對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行分析和鑒定。結(jié)果發(fā)現(xiàn),經(jīng)毛細(xì)管色譜分離出25個(gè)峰,并且鑒定出峰所對(duì)應(yīng)的化合物化學(xué)成分主要為亞油酸乙酯(占32.77%)、十六烷酸乙酯(占10.02%)、2,3,7-三甲基-癸烷(占6.49%)、5-甲基-二十一烷(占5.74%)、二十三烷(占3.80%)、1-環(huán)己基壬烯(占3.70%)、二十烷(占3.63%)、十八酸乙酯(占3.59%)。李偉東等[9]以乙醇提取硅膠柱層析分離刺果甘草,IR、NMR和MS法確定結(jié)構(gòu),結(jié)果顯示,得到3個(gè)化合物經(jīng)鑒定為十六酸、芒柄花素和異甘草素。
在刺果甘草二氯甲烷提取部位化學(xué)成分的研究中,梁軍[10]利用超聲波提取刺果甘草根的有效成分,得到β-谷甾醇和美迪紫檀素,其中β-谷甾醇占二氯甲烷提取物的3.53%,美迪紫檀素占二氯甲烷提取物的1.31%。石榮火等[11]采用波普數(shù)據(jù)處理刺果甘草,得到14個(gè)化合物,已鑒定其中9個(gè),分別為后莫紫檀素、豆甾-3,6-二酮、β-谷甾醇、4,7一二甲氧基異黃酮、白樺脂酸、美迪紫檀素、異光甘草酚、芒柄花素、胡蘿卜甙,其中白樺脂酸、豆甾-3,6-二酮和胡蘿卜甙為首次分離自刺果甘草。石榮火[12]在刺果甘草化學(xué)成分及抗腫瘤活性的研究中發(fā)現(xiàn),后莫紫檀素、美迪紫檀素等7個(gè)單體對(duì)HepA實(shí)體瘤具有較強(qiáng)的抑制作用,其中5個(gè)單體具有較強(qiáng)的活性。刺果甘草中含有的化學(xué)組分中包括醫(yī)學(xué)中較為珍貴的抗腫瘤藥物成分以及黃酮類(lèi)化合物,因此,刺果甘草的根、莖、葉中均較高的藥用價(jià)值。
芮和愷[13]研究發(fā)現(xiàn),刺果甘草種子經(jīng)消毒后在MS培養(yǎng)基上芽的誘導(dǎo)頻率分別為43%和17%,l周后先產(chǎn)生腫脹狀愈傷組織,將芽轉(zhuǎn)接在1/2 MS附加0.1 mg/L萘乙酸(NAA)的培養(yǎng)基上,2周后從切口處長(zhǎng)出白色的根,形成完整植株。鄒翠霞等[14]利用刺果甘草嫩莖進(jìn)行分化培養(yǎng),結(jié)果顯示,試驗(yàn)成功地進(jìn)行了試管苗生根,成活率達(dá)到69%;移栽90 d后,實(shí)生苗基本一致,試管苗的生長(zhǎng)優(yōu)于實(shí)生苗,其根系為實(shí)生苗的2倍左右。
近年來(lái),隨著分子生物技術(shù)的迅速發(fā)展,利用RAPD、SRAP、AFLPI、SSR、基因組SSR等分子標(biāo)記進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析及親緣關(guān)系鑒定的研究越來(lái)越多[15]。宋美玲[16]對(duì)新疆和吉林地區(qū)甘草、脹果甘草、光果甘草以及刺果甘草進(jìn)行遺傳多樣性分析,結(jié)果顯示,4種甘草屬植物的Nei's基因多樣性(H)均為0.862 8,Shannon's指數(shù)(I)為2.376 5,表示遺傳多樣性水平較高;刺果甘草遺傳多樣性(H:0.669 1、I:1.508 3)高于脹果甘草(H:0.543 2、I:0.851 1)。楊萍[17]研究發(fā)現(xiàn),4種甘草的進(jìn)化順序由低到高依次為刺果甘草、脹果甘草、甘草、光果甘草;0.2%濃度秋水仙素處理刺果甘草24 h時(shí)誘變率(88.64%)最高。孔紅[1]研究發(fā)現(xiàn),刺果甘草體細(xì)胞染色體數(shù)2n=16,核型公式為:k(2n)=2x=16=4M+8m+4sm。
吳玉香等[18]發(fā)現(xiàn),采用改良瓊脂(0.2%濃度的秋水仙堿與0.1%的瓊脂混合成半固體涂抹法處理甘草幼苗2 d的效果最好,變異率達(dá)55%,結(jié)果表明改良瓊脂體涂抹法是一種非常高效的多倍體誘變方法。趙月梅等[19]采用ITS2序列區(qū)分直接滴滲處理刺果甘草幼苗頂芽的基源植物,根據(jù)其藥材的來(lái)源選用了12條(3屬6種)ITS2序列,用MEGA 4.0計(jì)算種間的K2P距離并基于該距離建立了NJ系統(tǒng)樹(shù),結(jié)果顯示,基于DNA條形碼的ITS2序列可以區(qū)分甘草、苦參、黃芪和其常見(jiàn)偽品刺果甘草。
王鈺琦等[20]根據(jù)植物來(lái)源、顯微特征、功能主治、化學(xué)成分、理化特征等對(duì)黃芪與其偽品蜀葵、刺果甘草進(jìn)行鑒別,以免藥房中使用混淆。黃冬蘭等[21]研究發(fā)現(xiàn),采用紅外光譜的三級(jí)鑒定法可鑒定黃芪及其偽品刺果甘草,譜圖的三級(jí)鑒定表明黃芪及其偽品刺果甘草的糖苷類(lèi)化合物、芳香類(lèi)化合物和有機(jī)酯類(lèi)化合物的相對(duì)含量不一致。虞文妹[22]研究鑒別了同科屬植物苦參與刺果甘草??鄥⒅匈|(zhì)堅(jiān)韌,難折斷,折斷面纖維性,黃白色,氣微,味極苦;刺果甘草質(zhì)堅(jiān)硬,氣弱,味苦澀。兩種植物的薄壁細(xì)胞均含有眾多淀粉粒及草酸鈣方晶,刺果甘草經(jīng)理化鑒別可知含有黃酮。試驗(yàn)還采用色譜鑒別(薄層色譜法)法檢測(cè)兩種植物,其中苦參兩個(gè)斑點(diǎn)與對(duì)照品色譜位置相同;而刺果甘草的色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上未見(jiàn)相同顏色的斑點(diǎn)。
林玉蓮等[23]研究表明,苦參及其混淆品刺果甘草的性狀、顯微、理化反應(yīng)、薄層色譜法及紫外光譜特征均具有不同之處,可作為鑒別依據(jù),且刺果甘草不含苦參堿和槐定堿,不能混用。王智勇[24]指出,黃芪的功能主治主要是補(bǔ)氣固表,刺果甘草主要是外用殺蟲(chóng);此外,黃芪僅含微量皂苷,刺果甘草含大量皂苷,兩者間差異明顯。王淑紅等[25]對(duì)蒼耳子的混淆品刺果甘草的果實(shí)進(jìn)行了生藥性狀、顯微特征和薄層層析鑒別,并與正品蒼耳子進(jìn)行對(duì)比,為鑒別二者提供了參考依據(jù)。
刺果甘草種子休眠深而長(zhǎng),因此有學(xué)者對(duì)其種子萌發(fā)特性進(jìn)行了研究。林艷艷[26]研究發(fā)現(xiàn),采用98%硫酸處理刺果甘草種子8 min效果最佳,種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)分別達(dá)20%、15%。初艷[27]研究中闡述了選用的激素及其濃度、處理時(shí)間對(duì)發(fā)芽率無(wú)影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),種子類(lèi)型對(duì)發(fā)芽率有顯著影響,扁形種子發(fā)芽率高,為87.6%;而圓形種子發(fā)芽率低,僅為7.5%。劉杰淋等[28]研究破除刺果甘草種子休眠的方法,分析種子發(fā)芽指標(biāo)及幼苗生長(zhǎng)的指標(biāo),探究濃硫酸對(duì)破除刺果甘草種子休眠的影響。結(jié)果顯示,刺果甘草在濃硫酸處理后24 h播種最佳。
張繼等[29]研究表明,烏拉爾甘草莖葉氨基酸含量為26.96%,粗蛋白含量為23.56%,總糖含量為14.05%,粗纖維含量為19.6%;刺果甘草氨基酸、鈣、鉀含量較高,分別為28.24%、1.41 mg/g、1.47 mg/g。劉方明等[30]研究發(fā)現(xiàn),刺果甘草植株各部分水浸液化感作用順序?yàn)楦?莖>根際土。
刺果甘草的莖、葉、根含有多種化學(xué)成分,主要包括皂苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、香豆素和生物堿、后莫紫檀素、美迪紫檀素等多種化學(xué)物質(zhì),且具有多種生物活性,如抗菌、殺蟲(chóng)、增強(qiáng)免疫力作用、抗腫瘤作用。前人對(duì)刺果甘草的化學(xué)組分及藥用開(kāi)發(fā)等方面研究較多。刺果甘草屬于豆科植物,植株高大,根系發(fā)達(dá),產(chǎn)量尤為高,可作為飼料也可作為生態(tài)草,后續(xù)可針對(duì)其固土能力及飼料方面開(kāi)展研究。