黃博 阮磊 王蘭蘭 薛惠天 孫夢(mèng)龍 彭亮

〔摘要〕 骨骼肌損傷是人們生活中時(shí)常發(fā)生的一類疾患，嚴(yán)重者可造成肢體活動(dòng)障礙。推拿治療骨骼肌損傷類疾病有顯著療效，通過(guò)檢索近5年來(lái)推拿治療急慢性骨骼肌損傷的相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)，對(duì)推拿治療骨骼肌損傷的分子生物學(xué)機(jī)制研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)、歸納，從調(diào)控肌衛(wèi)星細(xì)胞、相關(guān)生長(zhǎng)因子及炎性因子、信號(hào)通路、細(xì)胞自噬等方面進(jìn)行綜述，以期為臨床治療骨骼肌損傷提供有力的理論依據(jù)，并對(duì)骨骼肌損傷的研究提供新思路。

〔關(guān)鍵詞〕 骨骼肌損傷；推拿；修復(fù)；分子生物學(xué)機(jī)制；肌衛(wèi)星細(xì)胞；細(xì)胞因子；信號(hào)通路；自噬

〔中圖分類號(hào)〕R244.1 ? ? ? 〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A ? ? ? ? ?〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674－070X.２０23.04.029

Research progress on the molecular biological mechanism of tuina in treating skeletal muscle injury

HUANG Bo， RUAN Lei， WANG Lanlan， XUE Huitian， SUN Menglong， PENG Liang*

College of Acupuncture & Tuina and Rehabilitation， Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Skeletal muscle injury is a common disease， and it results in limb movement disorders in severe cases. However， it is proven that tuina has significant efficacy in treating skeletal muscle injury. By searching the basic experimental literature related to tuina in treating acute or chronic skeletal muscle injury in the last 5 years， this article has summarized the research progress of the molecular biological mechanism of tuina in treating skeletal muscle injury and also has viewed the regulation of skeletal satellite cell， related growth and inflammatory factors， signaling pathways， and cellular autophagy， thus providing a strong theoretical basis for the clinical treatment of skeletal muscle injury as well as new ideas for the basic study of skeletal muscle injury.

〔Ｋｅｙｗｏｒｄｓ〕 skeletal muscle injury; tuina; repair; molecular biological mechanism; skeletal satellite cell; cellular factors; signaling pathway; autophagy

骨骼肌損傷的相關(guān)機(jī)制研究近年來(lái)受到廣泛關(guān)注，但骨骼肌損傷的具體機(jī)制因其復(fù)雜性至今仍未清晰，根據(jù)現(xiàn)有的研究成果也未得出一致結(jié)論。而對(duì)于修復(fù)骨骼肌損傷的分期有一致認(rèn)識(shí)，根據(jù)損傷后再生修復(fù)機(jī)制，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)將其分為3期，分別為損傷期、修復(fù)期、重塑期。同時(shí)，骨骼肌損傷后也包括4個(gè)病理過(guò)程：壞死、炎癥、再生以及纖維化[1]。損傷期包括肌纖維的壞死和骨骼肌周圍的炎性反應(yīng)；修復(fù)期則是以肌衛(wèi)星細(xì)胞（skeletal satellite cell， SSC）為主的成體干細(xì)胞的激活、相關(guān)細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)以及多種信號(hào)通路的參與等；重塑期主要是再生骨骼肌的成熟和瘢痕組織的機(jī)化。在治療骨骼肌損傷的過(guò)程中，著重在于抑制炎癥反應(yīng)，促進(jìn)骨骼肌再生，并減少瘢痕組織機(jī)化，從而修復(fù)骨骼肌的損傷。

骨骼肌損傷屬于中醫(yī)學(xué)“筋傷”“痹病”等范疇，其病機(jī)多為筋脈扭挫、經(jīng)筋受損、經(jīng)絡(luò)被阻，而致氣滯血瘀，治療上多以活血化瘀、舒筋通絡(luò)為主。推拿作為傳統(tǒng)醫(yī)療方法之一，有舒筋活血、消腫散瘀等作用[2]，并以其健康和較少不良反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)深受患者歡迎，有廣泛的臨床應(yīng)用價(jià)值和值得深入研究的實(shí)驗(yàn)方向。近些年，關(guān)于推拿治療骨骼肌損傷的實(shí)驗(yàn)研究已廣泛開(kāi)展，故本文對(duì)近年來(lái)推拿治療骨骼肌損傷的分子生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 促進(jìn)SSC增殖

推拿能加快SSC的增殖而促進(jìn)骨骼肌再生進(jìn)程，從而對(duì)骨骼肌損傷起到治療作用。SSC作為骨骼肌的成體干細(xì)胞，是骨骼肌維持和修復(fù)不可或缺的主要細(xì)胞，其功能主要是由內(nèi)在的信號(hào)通路以及與干細(xì)胞生態(tài)位的相互作用所調(diào)節(jié)[3]。在靜息狀態(tài)下，SSC駐留在肌纖維的基板下，即位于肌纖維和周圍的細(xì)胞外基質(zhì)（etracellular matrix， ECM）之間。在骨骼肌損傷時(shí)，一部分激活的SSC進(jìn)行末端骨骼肌分化，增加新生肌纖維數(shù)量，促進(jìn)肌肉再生，而其他的SSC則恢復(fù)靜止，以補(bǔ)充儲(chǔ)備的SSC種群，通過(guò)回歸高度專門化的生態(tài)位，重新建立它們的數(shù)量和靜止?fàn)顟B(tài)，從而確保以后受損的骨骼肌有足夠的再生能力[4]。SSC靜止時(shí)表達(dá)核轉(zhuǎn)錄因子Pax7，當(dāng)被激活時(shí)則有生肌調(diào)節(jié)因子（myogenic regulatory factors， MRFs）表達(dá)，這些因子包括肌原性因子5（myogenic factor 5， Myf5）、肌原性分化因子1（myogenic differentiation 1， MyoD1）、肌原性調(diào)節(jié)因子4（myogenic regulatory factor 4， MRF4）和肌原性蛋白[5-6]。SSC的增殖和分化也受到肌肉干細(xì)胞微環(huán)境分泌的特定信號(hào)的引導(dǎo)，一部分信號(hào)分子可刺激SSC增殖分化，比如肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor， HGF）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（fibroblast growth factor， FGF）、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（insulin-like growth factor-1， IGF-1）、腫瘤壞死因子-α（tumour necrosis factor-α， TNF-α）、血小板源性生長(zhǎng)因子（platelet-derived growth factor， PDGF）等，一部分則有相反作用，肌生成抑制素在SSC和成肌細(xì)胞中表達(dá)，其釋放導(dǎo)致Pax-7和Myf-5下調(diào)，并阻止MyoD-1的表達(dá)，從而抑制骨骼肌再生[7-8]。有研究表明，推拿振法可以促進(jìn)IGF-1、MyoD的分泌和表達(dá)，抑制炎性反應(yīng)，刺激肌衛(wèi)星細(xì)胞的大量增殖與分化，從而推進(jìn)肌力的盡早恢復(fù)和肌細(xì)胞的修復(fù)與再生[9]。HUNT等[10]研究表明對(duì)Brown Norway/F344大鼠的右腓腸肌進(jìn)行按摩，能使肌肉中的Pax7+細(xì)胞數(shù)量顯著增高，提高SSC數(shù)量。馬翔等[11]通過(guò)切除Sprague-Dawley大鼠的右側(cè)脛神經(jīng)致使骨骼肌萎縮，對(duì)損傷區(qū)域進(jìn)行推拿干預(yù)，第21天時(shí)檢測(cè)到microRNA的表達(dá)上升，進(jìn)而調(diào)控Pax7、MyoD和MyoG表達(dá)明顯增強(qiáng)，促進(jìn)肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖、分化以修復(fù)肌肉。

現(xiàn)有研究已證明，推拿可刺激SSC的大量增殖和分化來(lái)發(fā)揮其治療骨骼肌損傷的修復(fù)作用，但大都以細(xì)胞因子和SSC相互作用為主要研究?jī)?nèi)容，而SSC的增殖與相關(guān)信號(hào)通路的研究仍有不足。因此，在這一方面的研究可進(jìn)行深入探索，以補(bǔ)充和完善推拿修復(fù)骨骼肌損傷的分子生物學(xué)機(jī)制。

2 調(diào)節(jié)相關(guān)細(xì)胞因子

2.1 ?調(diào)節(jié)相關(guān)生長(zhǎng)因子

推拿通過(guò)增加堿性成纖維生長(zhǎng)因子（basic fibrob？鄄last growth factor， bFGF）、IGF-1、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β， TGF-β）、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor， VEGF）等表達(dá)，影響肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖、分化，進(jìn)而促進(jìn)肌細(xì)胞的再生與修復(fù)。

FGF在大多數(shù)中胚層和神經(jīng)外胚層來(lái)源的細(xì)胞中[12]，在細(xì)胞增殖、分化、遷移和生存中具有多種作用[13]。作為FGF的家族成員之一，bFGF是一種有效的有絲分裂原，在組織修復(fù)和再生中發(fā)揮著不同的生物學(xué)作用[14]。例如，bFGF在骨骼肌損傷愈合過(guò)程中表達(dá)明顯增多并參與組織的修復(fù)再生[15-16]。有研究表明，bFGF通過(guò)上調(diào)肌球蛋白重鏈（myosin heavy chain， MyHC）和肌生成蛋白表達(dá)水平以促進(jìn)肌細(xì)胞再生與增殖，以及通過(guò)促進(jìn)新生血管生成，來(lái)保護(hù)骨骼肌免受擠壓誘導(dǎo)的病理組織學(xué)損傷，并且激活的PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路可能參與bFGF對(duì)損傷骨骼肌的再生作用[17]?？讈喢舻萚18]為了研究捏法聯(lián)合跑輪治療對(duì)骨骼肌失神經(jīng)后堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響，對(duì)雄性SD大鼠行右下肢坐骨神經(jīng)橫向切斷并即時(shí)外膜修復(fù)術(shù)，給予捏法聯(lián)合跑輪治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，12周時(shí)推拿手法組的bFGF陽(yáng)性表達(dá)面積明顯多于模型組，表明捏法聯(lián)合跑輪訓(xùn)練可能上調(diào)bFGF生長(zhǎng)因子的表達(dá)，增強(qiáng)肌衛(wèi)星細(xì)胞的分化增殖，在一定程度上促進(jìn)受損部位骨骼肌的修復(fù)。

IGF-1在骨骼肌損傷時(shí)表達(dá)量顯著增加[19]。臨床實(shí)驗(yàn)表明，IGF-1與肌肉質(zhì)量和力量發(fā)育有關(guān)，它能減少肌肉退化，防止過(guò)度毒素誘導(dǎo)的炎癥擴(kuò)張，并能增加SSC的增殖能力[20]。除此之外，IGF-1可通過(guò)調(diào)控巨噬細(xì)胞活化[21]、骨骼肌纖維化[22]、促進(jìn)神經(jīng)[23]和血管再生[24]等參與骨骼肌修復(fù)過(guò)程。向勇等[25]研究發(fā)現(xiàn)大魚際揉法和指摩法能夠明顯上調(diào)IGF-1的表達(dá)，促進(jìn)肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖，從而促進(jìn)骨骼肌損傷的修復(fù)進(jìn)程。

骨骼肌正常再生與纖維化發(fā)展之間的轉(zhuǎn)換受到多種因素控制，其中有一些屬于TGF-β家族。TGF-β1是TGF-β家族成員之一，是一種多功能細(xì)胞因子，通過(guò)衛(wèi)星細(xì)胞激活、結(jié)締組織形成以及免疫反應(yīng)強(qiáng)度的調(diào)節(jié)，參與肌肉修復(fù)的過(guò)程[26]。陳海南等[27]對(duì)18只新西蘭兔的股四頭肌構(gòu)建骨骼肌鈍傷模型，對(duì)損傷處進(jìn)行小魚際滾法治療，檢測(cè)到治療組TGF-β1的表達(dá)程度相比于模型組有明顯上升，治療組的肌肉肌纖維恢復(fù)狀態(tài)更好，表明小魚際滾法能有效加速骨骼肌的恢復(fù)，降低骨骼肌纖維化的程度，提升恢復(fù)后的肌肉運(yùn)動(dòng)能力。

血管修復(fù)延遲導(dǎo)致的血液供應(yīng)減少會(huì)延遲軟組織的再生[28]。因此，肌肉再生、側(cè)枝形成和血管生成可能是相關(guān)的，損傷后血管形成也是肌肉再生的必要條件，而能影響血管生成的重要細(xì)胞因子之一則是VEGF。VEGF是血管生長(zhǎng)發(fā)育和組織修復(fù)的主要調(diào)控因子[29]，VEGF誘導(dǎo)的骨骼肌血管生成包括兩個(gè)明顯的階段，即最初4 d的向周圍血管擴(kuò)張階段，隨后在7 d內(nèi)完成縱向分裂[30]。肌肉拉伸已被證明可以增加VEGF的水平，并增加大鼠骨骼肌的毛細(xì)血管化[31]。ANDRZEJEWSKI等[32]研究發(fā)現(xiàn)，短期反復(fù)按摩顯著增加VEGF-A在肌肉中的表達(dá)，有助于增加運(yùn)動(dòng)時(shí)骨骼肌組織中已有血管網(wǎng)的形成和發(fā)展，從而有效促進(jìn)組織再生和恢復(fù)。

2.2 ?調(diào)節(jié)相關(guān)炎性因子

推拿不僅有對(duì)肌衛(wèi)星細(xì)胞的直接刺激作用和對(duì)多種細(xì)胞生長(zhǎng)因子的調(diào)控作用，并且能影響炎癥因子如白介素-6（interleukin-6， IL-6）、TNF-α和C反應(yīng)蛋白（c-reactive protein， CRP）等分泌和表達(dá)，進(jìn)而減輕骨骼肌受損局部的炎癥反應(yīng)，改善周圍微環(huán)境，間接促進(jìn)肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖分化，促進(jìn)損傷肌肉恢復(fù)[33-36]。TNF-α是一種由巨噬細(xì)胞/單核細(xì)胞在急性炎癥期間產(chǎn)生的炎癥細(xì)胞因子，可通過(guò)干預(yù)miRNA表達(dá)以抑制肌細(xì)胞的分化，從而對(duì)骨骼肌造成影響[37]。IL-6是參與免疫調(diào)節(jié)和炎性反應(yīng)的重要細(xì)胞因子之一，在感染和組織損傷時(shí)表達(dá)量會(huì)顯著增加[38]。而炎癥標(biāo)志物CRP的慢性升高，可以介導(dǎo)與年齡相關(guān)的肌肉質(zhì)量下降[39]。大量證據(jù)表明，CRP、IL-6和TNF-α水平的升高與骨骼肌質(zhì)量和功能的惡化相關(guān)[40-41]。而中醫(yī)傳統(tǒng)治療手段推拿可調(diào)控以上3種炎性因子，降低其產(chǎn)生與分泌，減輕機(jī)體氧化應(yīng)激損害，降低炎癥水平，加速骨骼肌的修復(fù)。有研究證明，推拿促進(jìn)骨骼肌損傷的修復(fù)機(jī)制之一，可能是通過(guò)降低TNF-α、CRP、IL-1β等促炎因子的表達(dá)水平，有效緩減炎癥及氧化應(yīng)激反應(yīng)以提供良好的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境[39，42]。另外，國(guó)內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，推拿可通過(guò)上調(diào)TGF-β1的表達(dá)，使IL-6和 TNF-α水平降低，減輕炎癥反應(yīng)，從而提高骨骼肌修復(fù)質(zhì)量[27，35]。

綜上所述，推拿可干預(yù)多種細(xì)胞生長(zhǎng)因子和炎性因子，對(duì)骨骼肌細(xì)胞內(nèi)環(huán)境加以改善，減輕受損區(qū)域的炎癥反應(yīng)，抑制骨骼肌纖維化，從而提高骨骼肌的修復(fù)和運(yùn)動(dòng)能力。

3 調(diào)控相關(guān)信號(hào)通路

推拿手法直接作用于骨骼肌損傷部位，由機(jī)械力學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)換成生物化學(xué)信號(hào)而產(chǎn)生影響，而信號(hào)傳導(dǎo)的過(guò)程中有多種信號(hào)通路參與其中，調(diào)控骨骼肌的修復(fù)與再生。Notch/CollagenV/CalcR信號(hào)通路[36]、Myostatin-Smad2/3信號(hào)通路[43]、Hippo/Yap通路[44]、GDF-8/Smad2信號(hào)通路[45]、TGF-β1/CTGF信號(hào)通路[46]均在推拿作用骨骼肌損傷過(guò)程中有所參與。Notch/CollagenV/CalcR信號(hào)軸自主維持SSC的靜息狀態(tài)，一旦骨骼肌損傷后出現(xiàn)微環(huán)境紊亂，導(dǎo)致穩(wěn)態(tài)環(huán)境的感受器Notch信號(hào)下降，維持微環(huán)境的V型膠原蛋白（collagenV， COLV）表達(dá)下調(diào)，干細(xì)胞退出靜息狀態(tài)，SSC為了修復(fù)骨骼肌而進(jìn)行增殖與分化[47]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在推拿干預(yù)運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷過(guò)程中，Notch/CollagenV/CalcR信號(hào)軸通過(guò)調(diào)控微環(huán)境中不同時(shí)相NICD、RBPJ-K、COLV、CalcR的表達(dá)，改善微環(huán)境的紊亂狀態(tài)，使SSC正常增殖分化，促進(jìn)骨骼肌的修復(fù)和再生[36]。P-Smad2/3的表達(dá)與肌肉中蛋白質(zhì)的生成息息相關(guān)，兩者之間為負(fù)相關(guān)關(guān)系[48]。改變Smad2 的蛋白結(jié)構(gòu)可使其磷酸化水平降低、蛋白活性下降，可促進(jìn)肌肉細(xì)胞中蛋白質(zhì)的合成，達(dá)到骨骼肌修復(fù)的目的，故Smad2/3相關(guān)信號(hào)通路在骨骼肌發(fā)育中起重要作用。楊之雪等[43]對(duì)骨骼肌損傷的SD大鼠進(jìn)行早期推拿聯(lián)合跑臺(tái)訓(xùn)練，得出其干預(yù)機(jī)制可能通過(guò)抑制Myostatin-Smad2/3信號(hào)通路，促進(jìn)mTOR-p70S6K信號(hào)通路，促進(jìn)肌細(xì)胞再生，改善損傷后腓腸肌結(jié)構(gòu)及功能。盧園等[45]使用小魚際滾法作用于新西蘭白兔鈍挫傷后的骨骼肌，通過(guò)蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)到滾法組的Smad2磷酸化水平降低、GDF-8表達(dá)降低，抑制GDF-8/Smad2信號(hào)通路以達(dá)到延緩組織纖維化、促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞生長(zhǎng)、肌肉修復(fù)的目的。

除以上信號(hào)通路，仍有許多通路可作用于骨骼肌損傷，例如經(jīng)典Wnt通路，可調(diào)控SSC的增殖分化和促進(jìn)肌管融合以修復(fù)肌損傷[49]。但現(xiàn)無(wú)相關(guān)研究可證明推拿治療骨骼肌損傷的機(jī)制中有Wnt通路等的參與，展開(kāi)對(duì)相關(guān)信號(hào)通路的探索可為推拿治療骨骼肌損傷的機(jī)制研究提供更為開(kāi)闊的思路。

4 促進(jìn)細(xì)胞自噬

細(xì)胞自噬是在大多數(shù)組織機(jī)體中廣泛發(fā)生和存在的一個(gè)生物學(xué)過(guò)程，可以主動(dòng)清除受損或衰老的蛋白，降解自身過(guò)剩的、有害的細(xì)胞質(zhì)成分，并再循環(huán)利用細(xì)胞組分，使得細(xì)胞維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)并有利于新陳代謝，對(duì)細(xì)胞和組織的正常生長(zhǎng)發(fā)育、增殖分化和發(fā)揮其功能有重要意義[50-51]。自噬相關(guān)基因（autophagy related gene， Atg）、自噬相關(guān)蛋白Beclin-1和微管相關(guān)蛋白1輕鏈3-Ⅱ（microtubule-associated protein-1 light chain， LC3-Ⅱ）等參與調(diào)控細(xì)胞自噬過(guò)程，在自噬的分子機(jī)制中占據(jù)重要地位。骨骼肌急性鈍挫傷后，自噬相關(guān)基因atg7、atg10、atg12、atg16L1轉(zhuǎn)錄水平和自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ、P62表達(dá)水平上調(diào)，提高自噬活性，有利于加快受損骨骼肌修復(fù)進(jìn)程[52]。也有研究報(bào)道，運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷的過(guò)程中可誘導(dǎo)骨骼肌細(xì)胞自噬現(xiàn)象，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)組的細(xì)胞內(nèi)Omi/HtrA2和Beclin1蛋白一過(guò)性升高，Hax-1一過(guò)性降低，骨骼肌修復(fù)時(shí)可能有Omi/HtrA2通過(guò)下游Hax-1-Beclin1途徑參與細(xì)胞自噬[53]。

推拿可通過(guò)調(diào)控自噬相關(guān)基因和蛋白以促進(jìn)細(xì)胞自噬，加快細(xì)胞新陳代謝，維持骨骼肌細(xì)胞微環(huán)境，對(duì)損傷骨骼肌的修復(fù)與再生有積極作用。有學(xué)者為研究推拿對(duì)SD大鼠腓腸肌急性鈍挫傷的修復(fù)過(guò)程中細(xì)胞自噬相關(guān)因子的影響，用Western blot檢測(cè)各組大鼠腓腸肌的LC3、Bcl-2同源結(jié)構(gòu)域蛋白Beclin1、泛素結(jié)合蛋白P62表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)在同一個(gè)取材時(shí)間點(diǎn)，與模型組比較，治療組的LC3（Ⅱ/Ⅰ）、Beclin1顯著升高、P62顯著降低，可認(rèn)為推拿能提高肌細(xì)胞中的LC3、Beclin1表達(dá)，降低P62表達(dá)水平，提高組織細(xì)胞自噬活性，促進(jìn)其自主降解和清除損傷的細(xì)胞質(zhì)，從而加速受損組織的修復(fù)[42，54]。

5 結(jié)語(yǔ)

推拿治療骨骼肌損傷的分子生物學(xué)機(jī)制，可歸納為干預(yù)調(diào)控肌衛(wèi)星細(xì)胞、多種細(xì)胞生長(zhǎng)因子和炎性因子、多條信號(hào)通路、細(xì)胞自噬。當(dāng)前，針對(duì)推拿治療骨骼肌損傷的生物分子機(jī)制研究涉及多方面、多系統(tǒng)，但每一種干預(yù)分子機(jī)制都不是單獨(dú)存在的，而是由多種細(xì)胞因子、信號(hào)通路或細(xì)胞微環(huán)境共同參與調(diào)控，相互聯(lián)系，密切相關(guān)。但目前為止，推拿治療骨骼肌損傷相關(guān)研究中仍有以下3個(gè)方面不足：一是推拿治療骨骼肌損傷的基礎(chǔ)試驗(yàn)研究中關(guān)于信號(hào)通路的報(bào)道仍有不足，如經(jīng)典Wnt通路以及其他氧化應(yīng)激相關(guān)通路等已有諸多實(shí)驗(yàn)證明參與了骨骼肌修復(fù)的進(jìn)程，這可為推拿治療骨骼肌損傷的機(jī)制研究提供新思路；二是大多基礎(chǔ)研究?jī)H從單個(gè)影響因素方面來(lái)探討其作用機(jī)制，如推拿對(duì)炎性因子或肌衛(wèi)星細(xì)胞影響，而多層面相互關(guān)系如肌衛(wèi)星細(xì)胞與信號(hào)通路、細(xì)胞自噬與肌衛(wèi)星細(xì)胞等有待深入研究；三是推拿治療骨骼肌損傷的相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究較多而臨床研究較少，而推拿作為中醫(yī)傳統(tǒng)治療手段之一，在臨床治療中運(yùn)用甚多，尤其對(duì)肌肉骨骼疾病療效顯著[55-56]，但相比針灸，推拿治療骨骼肌損傷相關(guān)疾病的臨床研究仍然相對(duì)較少。因此，無(wú)論是基礎(chǔ)研究還是臨床研究，推拿修復(fù)骨骼肌損傷的相關(guān)機(jī)制仍可從很多方面進(jìn)行深入挖掘，這不僅為臨床診療骨骼肌損傷提供有力的理論依據(jù)，并且對(duì)推拿在臨床的推廣運(yùn)用具有重要意義與價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉明晶.研究骨骼肌損傷的病理進(jìn)程及治療措施[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2016，14（32）：24-25.

[2] 黃世標(biāo)，呂 ?赟.推拿按摩對(duì)于運(yùn)動(dòng)損傷的作用研究[J].當(dāng)代體育科技，2021，11（28）：31-33.

[3] SCHMIDT M， SCH？譈LER S C， H？譈TTNER S S， et al. Adult stem cells at work： Regenerating skeletal muscle[J]. Cellular and Molecular Life Sciences， 2019， 76（13）： 2559-2570.

[4] CHEN B D， SHAN T Z. The role of satellite and other functional cell types in muscle repair and regeneration[J]. Journal of Muscle Research and Cell Motility， 2019， 40（1）： 1-8.

[5] DUMONT N A， BENTZINGER C F， SINCENNES M C， et al. Satellite cells and skeletal muscle regeneration[J]. Comprehensive Physiology， 2015， 5（3）： 1027-1059.

[6] SHIRAKAWA T， TOYONO T， INOUE A， et al. Factors regulating or regulated by myogenic regulatory factors in skeletal muscle stem cells[J]. Cells， 2022， 11（9）： 1493.

[7] BAIG M H， AHMAD K， MOON J S， et al. Myostatin and its regulation： A comprehensive review of myostatin inhibiting strategies[J]. Frontiers in Physiology， 2022， 13： 876078.

[8] SANCHO-MU？譙OZ A， GUITART M， RODR？魱GUEZ D A， et al. Deficient muscle regeneration potential in sarcopenic COPD patients： Role of satellite cells[J]. Journal of Cellular Physiology， 2021， 236（4）： 3083-3098.

[9] 孔亞敏，嚴(yán)雋陶，馬丙祥，等.推拿振法干預(yù)坐骨神經(jīng)損傷模型大鼠MyoD表達(dá)及肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖與分化[J].中國(guó)組織工程研究，2022，26（8）：1160-1166.

[10] HUNT E R， CONFIDES A L， ABSHIRE S M， et al. Massage increases satellite cell number independent of the age-associated alterations in sarcolemma permeability[J]. Physiological Reports， 2019， 7（17）： e14200.

[11] 馬 ?翔，唐成林，趙丹丹，等.推拿對(duì)失神經(jīng)肌萎縮大鼠肌特異性microRNA和肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖分化相關(guān)因子的影響[J].中國(guó)康復(fù)理論與實(shí)踐，2020，26（11）：1297-1304.

[12] ITOH N， ORNITZ D M. Fibroblast growth factors： From molecular evolution to roles in development， metabolism and disease[J]. Journal of Biochemistry， 2011， 149（2）： 121-130.

[13] SEIWERTH S， RUCMAN R， TURKOVIC B， et al. BPC 157 and standard angiogenic growth factors gastrointestinal tract healing， lessons from tendon， ligament， muscle and bone healing[J]. Current Pharmaceutical Design， 2018， 24（18）： 1972-1989.

[14] A X L， A C W， A J X， et al. Fibroblast growth factors， old kids on the new block[J]. Seminars in Cell & Developmental Biology， 2016， 53： 155-167.

[15] HU C， AYAN B， CHIANG G， et al. Comparative effects of basic fibroblast growth factor delivery or voluntary exercise on muscle regeneration after volumetric muscle loss[J]. Bioengineering， 2022， 9（1）： 37.

[16] 陳 ?功，莫偉彬，李國(guó)峰.羅漢果黃酮干預(yù)運(yùn)動(dòng)大鼠骨骼肌FLK-1及BFGF表達(dá)的影響[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2020，26（1）：45-48.

[17] SHI H X， XIE H H， ZHAO Y， et al. Myoprotective effects of bFGF on skeletal muscle injury in pressure-related deep tissue injury in rats[J]. Burns & Trauma， 2016， 4： 26.

[18] 孔亞敏，嚴(yán)雋陶.推拿聯(lián)合跑輪訓(xùn)練對(duì)大鼠骨骼肌失神經(jīng)后堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)探究[J].按摩與康復(fù)醫(yī)學(xué)，2019，10（11）：52-55，58.

[19] SUN K T， CHEUNG K K， AU S W N， et al. Overexpression of mechano-growth factor modulates inflammatory cytokine expression and macrophage resolution in skeletal muscle injury[J]. Frontiers in Physiology， 2018， 9： 999.

[20] SONG Y H， SONG J L， DELAFONTAINE P， et al. The therapeutic potential of IGF-I in skeletal muscle repair[J]. Trends in Endocrinology and Metabolism， 2013， 24（6）： 310-319.

[21] JOANNE， TONKIN. Monocyte/macrophage-derived IGF-1 orchestrates murine skeletal muscle regeneration and modulates autocrine polarization[J]. Molecular Therapy， 2015， 23（7）： 1189-1200.

[22] NAGASAO J， FUKASAWA H， YOSHIOKA K， et al. Research note： Expression of IGF-1 and IGF-1 receptor proteins in skeletal muscle fiber types in chickens with hepatic fibrosis[J]. Poultry Science， 2022， 101（10）： 102045.

[23] APEL P J， MA J J， CALLAHAN M， et al. Effect of locally delivered IGF-1 on nerve regeneration during aging： An experimental study in rats[J]. Muscle & Nerve， 2010， 41（3）： 335-341.

[24] SUBRAMANIAN I V， FERNANDES B C A， ROBINSON T， et al. AAV-2-mediated expression of IGF-1 in skeletal myoblasts stimulates angiogenesis and cell survival[J]. Journal of Cardiovascular Translational Research， 2009， 2（1）： 81-92.

[25] 向 ?勇，王春林，董有康，等.柔和手法對(duì)兔骨骼肌慢性損傷修復(fù)過(guò)程中生長(zhǎng)因子的影響[J].河南中醫(yī)，2018，38（7）：1016-1019.

[26] DELANEY K， KASPRZYCKA P， CIEMERYCH M A， et al. The role of TGF-β1 during skeletal muscle regeneration[J]. Cell Biology International， 2017， 41（7）： 706-715.

[27] 陳海南，盧 ?園，楊 ?舟，等.小魚際■法對(duì)骨骼肌鈍性損傷家兔生長(zhǎng)分化因子8與F-肌動(dòng)蛋白的影響[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2022，15（2）：205-210.

[28] HUMPHREY J D. Constrained mixture models of soft tissue growth and remodeling-twenty years after[J]. Journal of Elasticity， 2021， 145（1）： 49-75.

[29] LING M F， LAI X M， QUAN L L， et al. Knockdown of VEGFB/VEGFR1 signaling promotes white adipose tissue browning and skeletal muscle development[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2022， 23（14）： 7524.

[30] GIANNI-BARRERA R， TRANI M， FONTANELLAZ C， et al. VEGF over-expression in skeletal muscle induces angiogenesis by intussusception rather than sprouting[J]. Angiogenesis， 2013， 16（1）： 123-136.

[31] GORSKI T， DE BOCK K. Metabolic regulation of exercise-induced angiogenesis[J]. Vascular Biology， 2019， 1（1）： H1-H8.

[32] ANDRZEJEWSKI W， KASSOLIK K， KOBIERZYCKI C， et al. Increased skeletal muscle expression of VEGF induced by massage and exercise[J]. Folia Histochemica et Cytobiologica， 2015， 53（2）： 145-151.

[33] KLINGLER W， JURKAT-ROTT K， LEHMANN-HORN F， et al. The role of fibrosis in Duchenne muscular dystrophy[J]. Acta Myologica： Myopathies and Cardiomyopathies， 2012， 31（3）： 184-195.

[34] HUNT E R， CONFIDES A L， ABSHIRE S M， et al. Massage increases satellite cell number independent of the age-associated alterations in sarcolemma permeability[J]. Physiological Reports， 2019， 7（17）： e14200.

[35] 吳安林，艾玨萍，謝秀惠，等.推拿對(duì)骨骼肌損傷組織機(jī)化期TGF-β1、IL-6及TNF-α的影響[J].湖南中醫(yī)雜志，2020，36（2）：136-138.

[36] 宋思琦. Notch/CollagenV/CalcR軸在推拿干預(yù)EIMD肌肉干細(xì)胞微環(huán)境的作用研究[D].成都：成都體育學(xué)院，2020.

[37] TIAN Y， WANG T S， BU H， et al. Role of exosomal miR-223 in chronic skeletal muscle inflammation[J]. Orthopaedic Surgery， 2022， 14（4）： 644-651.

[38] NARA H， WATANABE R. Anti-inflammatory effect of muscle-derived interleukin-6 and its involvement in lipid metabolism[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2021， 22（18）： 9889.

[39] W？魡HLIN-LARSSON B， WILKINSON D J， STRANDBERG E， et al. Mechanistic links underlying the impact of C-reactive protein on muscle mass in elderly[J]. Cellular Physiology and Biochemistry， 2017， 44（1）： 267-278.

[40] LINYUAN， PAN. Inflammation and sarcopenia： A focus on circulating inflammatory cytokines[J]. Experimental Gerontology， 2021， 154： 111544.

[41] CAMILLA S L， TUTTLE. Markers of inflammation and their association with muscle strength and mass： A systematic review and meta-analysis[J]. Ageing Research Reviews， 2020， 64： 101185.

[42] 羅 ?翱，唐成林，黃思琴，等.推拿對(duì)骨骼肌急性鈍挫傷模型大鼠炎癥、氧化應(yīng)激及細(xì)胞自噬相關(guān)因子的影響[J].中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志，2018，40（6）：407-413.

[43] 楊之雪，朱正威，賀 ?舟，等.推拿聯(lián)合跑臺(tái)訓(xùn)練對(duì)急性骨骼肌損傷大鼠肌蛋白代謝相關(guān)因子的影響[J].中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志，2020，42（5）：385-391.

[44] 管華宗.中醫(yī)■法樣刺激對(duì)三維人骨骼肌細(xì)胞力學(xué)效應(yīng)的機(jī)制研究[D].上海：上海中醫(yī)藥大學(xué)，2019.

[45] 盧 ?園，陳海南，楊 ?舟，等.小魚際滾法對(duì)兔骨骼肌急性鈍搓傷組織機(jī)化期GDF-8/Smad2通路的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2021，41（9）：1345-1349.

[46] 趙 ?娜，張 ?瑋，龐 ?賡，等.基于TGF-β1/CTGF作用途徑探討推拿干預(yù)骨骼肌纖維化的作用機(jī)制[J].遼寧中醫(yī)雜志，2016，43（12）： 2539-2541.

[47] BAGHDADI M B， CASTEL D， MACHADO L， et al. Reciprocal signalling by Notch-Collagen V-CALCR retains muscle stem cells in their niche[J]. Nature， 2018， 557（7707）： 714-718.

[48] WELLE S L. Myostatin and muscle fiber size： Focus on Smad2 and 3 transcription factors control muscle mass in adulthood and Myostatin reduces Akt/TORC1/p70S6K signaling， inhibiting myoblast differentiation and myotube size[J]. American Journal of Physiology Cell Physiology， 2009， 296（6）： C1245-C1247.

[49] NICOLAS F， PETER S Z. Coordinated action of Axin1 and Axin2 suppresses β-catenin to regulate muscle stem cell function[J]. Cellular Signalling， 2015， 27（8）： 1652-1665.

[50] MIZUSHIMA N， LEVINE B. Autophagy in human diseases[J]. The New England Journal of Medicine， 2020， 383（16）： 1564-1576.

[51] 丁 ?宇，王彥豐，左夏林，等.人類細(xì)胞自噬研究的起源及細(xì)胞自噬的分子機(jī)制[J].國(guó)際老年醫(yī)學(xué)雜志，2022，43（1）：98-101，114.

[52] 羅 ?翱，唐成林，黃思琴，等.骨骼肌急性鈍挫傷修復(fù)過(guò)程中自噬相關(guān)因子的表達(dá)變化[J].中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志，2018，34（2）：97-101，114，193.

[53] 張 ?欣，尚畫雨，王瑞元. Omi/HtrA2介導(dǎo)的細(xì)胞自噬在運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷中的作用[J].西安體育學(xué)院學(xué)報(bào)，2022，39（1）：104-111.

[54] 羅 ?翱.推拿對(duì)骨骼肌鈍挫傷大鼠細(xì)胞自噬及凋亡相關(guān)因子的影響[D].重慶：重慶醫(yī)科大學(xué)，2018.

[55] 吳邦憲，劉啟華，唐宏亮，等.四步推拿法治療慢性腰肌勞損36例的臨床觀察[J].右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2021，43（6）：782-784，796.

[56] ZHOU X， YANG J， MA Q Y， et al. The effectiveness of Tuina in managing chronic non-specific low back pain： A protocol of a multicenter international randomized controlled trial[J]. Medicine， 2022， 101（7）： e28883.

〔收稿日期〕2022-09-21

〔基金項(xiàng)目〕國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（82174521）；湖南中醫(yī)藥大學(xué)研究生創(chuàng)新課題（2022CX109）。

〔第一作者〕黃 ?博，女，碩士研究生，研究方向：推拿治療機(jī)制研究。

〔通信作者〕*彭 ?亮，男，博士后，教授，博士研究生導(dǎo)師，E-mail：pengliangleo@foxmail.com。