黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥ＩL(zhǎng)性能及血液生化指標(biāo)、血細(xì)胞理化特性的影響

楊宇為，李會(huì)菊，丁偉，馬青*

（1.寧夏農(nóng)林科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所 銀川 750002；2.寧夏農(nóng)業(yè)學(xué)校 銀川 750021）

斷奶期是飼喂?fàn)倥５囊后w乳品替換為固態(tài)飼料的過(guò)渡期。我國(guó)規(guī)?；?、集約化養(yǎng)殖中，犢牛早期斷奶技術(shù)已得到廣泛應(yīng)用，在提高母牛利用率同時(shí)，還可促進(jìn)犢牛及早適應(yīng)固態(tài)飼料，健全瘤胃發(fā)育。另一方面，斷奶期亦是奶牛生命活動(dòng)中一個(gè)極為關(guān)鍵的生理脆弱期，特別是飼料形態(tài)的轉(zhuǎn)變對(duì)犢牛而言，其消化系統(tǒng)適應(yīng)能力弱使其極易產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，表觀性狀往往呈現(xiàn)出采食量減少、日增重降低，腹瀉甚至死亡等現(xiàn)象。目前，除改善環(huán)境衛(wèi)生條件外，調(diào)整日糧結(jié)構(gòu)及飼料添加劑使用是應(yīng)對(duì)犢牛斷奶應(yīng)激的重要營(yíng)養(yǎng)調(diào)控措施。曲廣柱[1]、姜鑫等[2]指出，當(dāng)犢牛采食固體飼料后瘤胃的發(fā)育才正式拉開(kāi)帷幕，瘤胃發(fā)育及飼料消化能力不但與日齡有關(guān)，還與固體飼料投喂期的早晚存在密切聯(lián)系；通常犢牛在8 周齡，干物質(zhì)采食量達(dá)0.75～1 kg 時(shí)即可實(shí)施斷奶，而功能性飼料添加劑則主要通過(guò)調(diào)節(jié)胃腸道消化吸收功能、提高機(jī)體免疫力，進(jìn)而緩解斷奶應(yīng)激對(duì)犢牛生長(zhǎng)發(fā)育所帶來(lái)的負(fù)面效應(yīng)。近些年，以功能性飼料添加劑為切入點(diǎn)，通過(guò)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控將應(yīng)激誘因與動(dòng)物模型、現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合，探究應(yīng)激機(jī)制并尋找解決方案也是研究奶牛應(yīng)激的主要方向[3]。

黃芪甲苷（astragaloside IV，ASIV）是中藥黃芪的提取物，具有水溶性好、綠色安全、強(qiáng)穩(wěn)定性及生物活性等優(yōu)點(diǎn)。動(dòng)物臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，ASIV 可顯著提高機(jī)體免疫力，在抗病毒、抗氧化、抑制細(xì)胞凋亡等方面均有不同程度正向作用，這對(duì)預(yù)防和治療氧化應(yīng)激損傷具有十分重要意義[4,5]。目前，有關(guān)ASIV 的研究多以臨床小鼠試驗(yàn)為主，在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用卻報(bào)道甚少。鑒于此，試驗(yàn)?zāi)M犢牛斷奶應(yīng)激條件，通過(guò)飼喂含不同比例ASIV 飼料，從生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)、血細(xì)胞理化特性方面探究ASIV 對(duì)斷奶應(yīng)激犢牛的影響，以期篩選出具有緩解犢牛斷奶應(yīng)激的ASIV 最適添加量，為奶牛高效健康養(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

試驗(yàn)于2021 年6 月在寧夏農(nóng)墾平吉堡奶牛場(chǎng)開(kāi)展。選擇6 周齡體重相近（65 kg±5 kg）、體況健康的犢牛60 頭，分別按試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2 組、試驗(yàn)3 組、對(duì)照組將供試牛平均分為4 組，每組15頭犢牛。

1.2 日糧組成、添加劑及飼養(yǎng)管理

1）試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平 試驗(yàn)日糧參照《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)-奶牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 34—2004），按照生長(zhǎng)母牛體重60 kg，日增重800 g 制作飼料配方，日糧組成為犢牛顆粒料、苜蓿干草、玉米秸稈，犢牛顆粒料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 犢牛顆粒料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（DM基礎(chǔ)）

2）添加劑ASIV 購(gòu)自成都德思特醫(yī)藥科技有限公司，純度為ASIV≥90%，皂苷≤10%。

3）飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)牛在犢牛島圈養(yǎng)，試驗(yàn)前做好犢牛驅(qū)蟲(chóng)及圈舍消毒工作。每天8:00、18:00 投喂日糧并保證飲水自由。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)在正式期第0～6 天各組試驗(yàn)牛處于飼料過(guò)渡期，每日飼喂牛奶、犢牛顆粒料、苜蓿干草及玉米秸稈，牛奶中試驗(yàn)1、2、3 組分別添加0.5、1 和1.5 g/d ASIV，對(duì)照組不添加ASIV。試驗(yàn)第7 天犢牛日糧完全替換為固態(tài)飼料，其中犢牛顆粒料添加ASIV 與前期含量保持一致，直至試驗(yàn)第35天結(jié)束。整個(gè)試驗(yàn)期，分別在試驗(yàn)第0 天（斷奶前期）、7 天（斷奶0d）、14 天（斷奶7d）、21 天（斷奶14d）、35天（斷奶28d）早晨空腹采血，測(cè)定各時(shí)期血液生化指標(biāo)和血細(xì)胞理化特性值，且試驗(yàn)初末期測(cè)定犢牛體重，分析ASIV 對(duì)斷奶應(yīng)激犢牛的影響。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

1）生長(zhǎng)性能測(cè)定 生長(zhǎng)性能測(cè)定包括：干物質(zhì)采食量、平均日增重。

平均日增重=（試驗(yàn)?zāi)w重-試驗(yàn)初體重）/試驗(yàn)天數(shù)

干物質(zhì)采食量=（投喂量-剩料量）/試驗(yàn)天數(shù)

2）血液生化指標(biāo)測(cè)定 血液生化指標(biāo)測(cè)定包括：血總蛋白（TP）、血糖（GLU）、總膽固醇（TCH）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）。試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

3）血細(xì)胞理化特性測(cè)定 血細(xì)胞理化特性測(cè)定包括：WBC（白細(xì)胞）、Lym（淋巴細(xì)胞）、Neu（中性粒細(xì)胞）、RBC（紅細(xì)胞）、HGB（血紅蛋白濃度）指標(biāo)。測(cè)定儀器型號(hào)為邁瑞全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（MEK-6400C）。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用SAS8.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥ＩL(zhǎng)性能的影響

結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥ＩL(zhǎng)性能的影響

表2 結(jié)果表明，各試驗(yàn)組初體重?zé)o顯著差異（p〉0.05），末體重試驗(yàn)3 組顯著高于對(duì)照組（p〈0.05）。平均日增重試驗(yàn)3 組顯著高于試驗(yàn)1 組（p〈0.05），極顯著高于對(duì)照組（p〈0.01），且試驗(yàn)1 組、試驗(yàn)2 組平均日增重分別極顯著高于對(duì)照組（p〈0.01）。試驗(yàn)干物質(zhì)采食量仍以試驗(yàn)3 組最高，為2.08 kg/d，分別顯著、極顯著高于試驗(yàn)1組（p〈0.05）、對(duì)照組（p〈0.01），試驗(yàn)1 組、試驗(yàn)2 組干物質(zhì)采食量分別比對(duì)照組提高9.14%（p〈0.05）、17.14%（p〈0.01）。說(shuō)明ASIV 對(duì)提升斷奶犢牛的生長(zhǎng)性能具有明顯促進(jìn)作用，日糧添加1.5g/d ASIV犢牛生長(zhǎng)性能最優(yōu)。

2.2 黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥Ｑ荷笜?biāo)的影響

結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥Ｑ荷笜?biāo)的影響

由表3 可以看出，除GLU 值在斷奶0 d 對(duì)照組顯著高于試驗(yàn)2組（p〈0.05），28d Tp 含量試驗(yàn)2 組顯著高于對(duì)照組（p〈0.05），其他各組在不同時(shí)期指標(biāo)無(wú)顯著差異（p〉0.05）。盡管各組試驗(yàn)牛血液生化指標(biāo)變化差異較小，但從數(shù)值來(lái)看試驗(yàn)整體變化是由斷奶前至斷奶后的降低再隨著時(shí)間的變化逐漸升高的回旋變化，而試驗(yàn)2 組總體回旋恢復(fù)速度較優(yōu)。

2.3 黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥Ｑ?xì)胞理化特性的影響

結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥Ｑ?xì)胞理化特性的影響

表4 結(jié)果可知，同一時(shí)期各組試驗(yàn)牛WBC、Lym、Neu、RBC、HGB 指標(biāo)無(wú)顯著差異（p〉0.05）。不同時(shí)期試驗(yàn)3 組、試驗(yàn)4 組試驗(yàn)牛WBC、Lym、Neu、RBC、HGB 指標(biāo)亦為無(wú)顯著差異（p〉0.05），而對(duì)照組在斷奶前RBC 值顯著高于斷奶14 d（p〈0.05）和斷奶28 d（p〈0.05）RBC 值；對(duì)照組、試驗(yàn)1 組HGB 值在斷奶28 d 顯著低于本組斷奶前HGB 值。說(shuō)明添加不同劑量ASIV可有效緩解斷奶應(yīng)激造成的血液RBC 值和HGB 值的降低。

3 討論

3.1 黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥ＩL(zhǎng)性能的影響

應(yīng)激反應(yīng)是造成動(dòng)物飼料利用率及生產(chǎn)性能低的重要因素。國(guó)內(nèi)諸多研究發(fā)現(xiàn)，ASIV 對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能的促進(jìn)作用，主要是通過(guò)提高機(jī)體免疫力使其對(duì)飼料消化利用率提升，進(jìn)而表現(xiàn)出采食量增加、增重提高[6-9]。魏海燕[10]研究發(fā)現(xiàn)，斷奶牦犢牛日糧添加黃芪根水提物，其平均日增重顯著高于對(duì)照組（p〈0.05），且平均日增重、飼料轉(zhuǎn)化率隨黃芪根水提物添加量的提高而增加。本試驗(yàn)得到類(lèi)似的結(jié)果，試驗(yàn)1、2、3 組犢牛末體重分別比對(duì)照組提高7.91%、10.10%、11.72%，平均日增重及干物質(zhì)采食量隨ASIV 添加的增加而增加，說(shuō)明日糧添加ASIV 可有效提高犢牛生產(chǎn)性能。從數(shù)值來(lái)看，試驗(yàn)3 組平均日增重及干物質(zhì)采食量最高，試驗(yàn)2 組與試驗(yàn)3組平均日增重、干物質(zhì)采食量?jī)H相差0.02 和0.03 kg/d，但本試驗(yàn)采購(gòu)的ASIV 為5 000 元/kg，且飼料成本按2 元/kg，肉牛活重價(jià)格按70 元/kg 計(jì)算，則試驗(yàn)2 組比試驗(yàn)3 組節(jié)約成本1.16 元，說(shuō)明日糧添加1 g/d ASIV 可獲得犢牛較優(yōu)生產(chǎn)性能。

3.2 黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥Ｑ荷笜?biāo)的影響

斷奶期對(duì)犢牛的血液生化指標(biāo)可反映犢牛體況健康狀態(tài)。TP含量水平能夠反映出蛋白質(zhì)在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的代謝與合成狀況[11]。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)3 組在28 d TP 含量顯著高于對(duì)照，且28 d 添加A SIV 組整體數(shù)值均高于對(duì)照，可能與試驗(yàn)環(huán)境有關(guān)，本試驗(yàn)在28 d處于天氣炎熱期，斷奶應(yīng)激和熱應(yīng)激的雙重作用，致使ASIV 在后期的作用體現(xiàn)的更為明顯。而斷奶期0 d，對(duì)照組GLU 值最高，且顯著高于試驗(yàn)2 組（P〈0.05），這可能是由于斷奶應(yīng)激造成的動(dòng)物對(duì)外界環(huán)境適應(yīng)力降低，體內(nèi)腎上腺素加快了GLU 產(chǎn)生，機(jī)體能量負(fù)平衡，分解產(chǎn)生的血中GLU 用來(lái)機(jī)體耗能；而ASIV 的添加使血液GLU 維持于相對(duì)緩慢的變化過(guò)程，說(shuō)明ASIV 可緩解犢牛斷奶應(yīng)激造成的能量消耗；而TCH、TG、BUN 值在本試驗(yàn)期無(wú)顯著影響，說(shuō)明A SIV 對(duì)脂質(zhì)代謝、氮代謝無(wú)影響。

3.3 黃芪甲苷對(duì)斷奶應(yīng)激下?tīng)倥Ｑ?xì)胞理化特性的影響

動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)在變化的外在表現(xiàn)形式，而血液中生理生化指標(biāo)的變化便是其外在變化的內(nèi)在表現(xiàn)[12]。紅細(xì)胞是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)氧氣運(yùn)輸?shù)闹匾浇?，因此營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸交換與代謝過(guò)程存在緊密聯(lián)系，而HGB 則是判斷維持或適應(yīng)機(jī)體缺氧有關(guān)內(nèi)外環(huán)境變化的重要指標(biāo)[13]。范超等[14]研究發(fā)現(xiàn)，斷奶使?fàn)倥．a(chǎn)生厭食、消化不良等反應(yīng)，體內(nèi)鐵含量降低，血紅蛋白合成減少，進(jìn)而降低了紅細(xì)胞的合成，造成貧血現(xiàn)象。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)3 組、試驗(yàn)4 組在不同時(shí)期WBC、Lym、Neu、RBC、HGB 無(wú)顯著差異（P〉0.05），試驗(yàn)1 組HGB 及對(duì)照組RBC、HGB 在不同時(shí)期呈現(xiàn)顯著差異（P〈0.05），說(shuō)明斷奶應(yīng)激影響犢牛紅細(xì)胞、血紅蛋白濃度，ASIV 的添加對(duì)血液生理生化指標(biāo)維持相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)，這與唐蕊涵等[15]在斷奶仔豬中的研究結(jié)果相似。

4 結(jié)論

日糧添加10mg/頭·d ASIV 可獲得較優(yōu)犢牛生產(chǎn)性能及良好血液理化指標(biāo)。