畬藥天仙果化學成分及藥理活性研究進展

吳文明 王 甜 胡建新

江西省人民醫(yī)院(南昌醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院)藥學部，江西 南昌 330006

天仙果[FicuserectaThunb. var.beecheyana(Hook. et Arn.)King]為桑科(Moraceae)榕屬(Ficus)植物，多年生落葉小喬木或灌木，又名大號牛奶仔、牛奶柴、牛奶繩、牛乳繩[1-2]，最早記載于《本草綱目》[3]，主要分布于浙江、江西、福建、湖北、湖南、廣東、廣西和臺灣等地[4]。天仙果為畬族常用的畬藥，其根、莖、葉、果實皆有藥用價值，根為主要藥用部位，性溫、味甘、淡、無毒，具有補中益氣、健脾化濕、行氣活血、強筋壯骨、祛風通絡和清熱解毒等功效，主治風濕痹痛、貧血、月經不調、脫肛、骨結核、皮膚搔癢、跌打損傷和勞倦乏力等[5-8]。其莖、果多認為與根的藥用功效一致，葉對關節(jié)炎、腎炎、骨質疏松等疾病具有藥用價值。天仙果根除藥用之外，在浙南山區(qū)、武夷山地區(qū)還被用作烹制菜肴的調味品、保健品[9-10]；其嫩葉也被當做一種野菜食用[11]。目前，已有許多學者對其進行了現(xiàn)代化研究，旨在闡明其藥效物質基礎及作用機制，為臨床用藥提供科學依據。因此，對畬藥天仙果的化學成分及藥理活性進行系統(tǒng)總結，為民族藥更好的研究、利用和開發(fā)提供參考。

1 化學成分研究

目前，天仙果的根、莖、葉、果實都有相關的化學成分研究，提取天仙果化學成分的溶劑主要為乙醇和甲醇，分離的手段主要有硅膠色譜法和高效液相色譜法，鑒定的天仙果主要成分有苯丙素類、黃酮、三萜、甾體和酚酸類等。其中，苯丙素類、黃酮及酚酸類為天仙果的主要成分及可能的活性物質。

1.1 苯丙素類 苯丙素類是目前從天仙果中分離鑒定的最多的一類化合物，已從其根和葉中共鑒定了16個化合物?；衔?～5的結構為較為少見的苯丙素類衍生物，其中，化合物1為新天然產物，2和4為新化合物。6為雙四氫呋喃型木脂素，7～10為香豆素類，11～16為簡單苯丙素類化合物，皆為簡單的C6-C3結構，分子式見表1，結構式如圖1所示。

圖1 天仙果中苯丙素類化合物化學結構圖

表1 從天仙果中分離得到的化合物歸納表

1.2 黃酮類 黃酮類化合物普遍存在于榕屬植物中，且具有多種藥理活性，亦為天仙果的主要化學成分之一[12-13]。到目前為止，共分離鑒定了7個黃酮類化合物，其中17～20為異戊二烯化的黃酮，其結構中C6-C7-C8位有一個異戊二烯和一個甲基吡喃環(huán)，化合物18和20為新化合物。21和22為黃酮苷，其糖部分為C6位的蘆丁糖，23為黃烷類化合物，分子式見表1，結構式如圖2所示。

圖2 天仙果中黃酮、三萜、甾體、酚酸和脂肪酸酯類化合物化學結構圖

1.3 三萜和甾體類 三萜類化合物亦為榕屬植物的主要化學成分之一[12]，但目前從天仙果中僅分離鑒定了2個三萜類化合物24和25，結構類型分別為羽扁豆烷型(lupanne)和烏蘇烷型(ursane)。化合物26～29為甾體類化合物，其基本母核為膽甾烷，分子式見表1，結構式如圖2所示。

1.4 酚酸類 天仙果含有大量的酚酸類成分，可能是其抗氧化的主要活性成分[14]。目前已從其根和枝中鑒定了12個酚酸類化合物(30～41)，分子式見表1，結構式如圖2所示。

1.5 其他類 天仙果還含有脂肪酸酯類、單糖、多糖類等化學成分。唐克華等[15]采用堿化介質中微波提取的方法提取了天仙果果實中的多糖，通過大孔樹脂純化，以及紙層析和硅膠G薄板層析分析表明天仙果多糖為復合多糖，可能由三個均一多糖組分組成。余繼宏等[16]采取鹽酸溶液萃取、酒精沉析制取了天仙果果膠，其基本結構是D-吡喃半乳糖醛酸。

2 藥理作用研究

2.1 抗炎活性 Yoon等[24]研究發(fā)現(xiàn)天仙果葉甲醇提取物的正己烷、乙酸乙酯部位在濃度為100 μg/mL時能夠顯著抑制IL-1β誘導人骨肉瘤細胞MG-63產生炎癥因子IL-6、COX-2和PGE2，且能夠十分顯著地抑制RANKL誘導RAW 264.7細胞向破骨細胞分化。這些結果表明，天仙果葉對骨質疏松因子有顯著影響，并可能開發(fā)成為一種抗骨質疏松的藥物。張秋萍等[25]采用弗氏完全佐劑型關節(jié)炎模型，對藥食同源的天仙果根預防關節(jié)炎的作用進行了藥效學研究，結果顯示天仙果根以醇提、醇提水沉組效果最佳，且不影響大鼠體重的正常增長，表明了天仙果與肉類煲湯預防關節(jié)炎具有科學性。Ham等[18]研究發(fā)現(xiàn)天仙果葉80%乙醇提取物的CH2Cl2組分(CFE)能夠最有效地抑制LPS介導的RAW264.7細胞中NO的產生。通過免疫印跡和PCR實驗證明，CFE主要是通過抑制iNOS、COX-2、TNF-α、IL-1β和IL-6的產生，對LPS介導的炎癥反應產生抑制作用。從CFE中分離鑒定的化合物丁香樹脂醇(化合物6)和6，7-呋喃-5-甲氧基氫香豆素酸(化合物8)，能顯著的抑制LPS介導的PGE2的產生，可作為開發(fā)抗炎和抗傷害藥物的先導化合物。

2.2 抗腫瘤及細胞毒活性 Yoon等[24]采用MTT法研究發(fā)現(xiàn)，天仙果葉氯仿萃取部位在100 μg/mL時對MG-63細胞及RAW 264.7細胞有明顯的細胞毒性，對細胞生長的抑制率分別約為75%和10%。Yen等[14]采用MTT法研究發(fā)現(xiàn)天仙果根乙醇提取物(100μg/mL)能夠誘導人腫瘤細胞HL-60發(fā)生凋亡，凋亡率達到80%。其誘導HL-60細胞凋亡主要發(fā)生在亞G1期，且呈時間和劑量依賴性，作用機制是通過跨膜蛋白Fas和誘導HL-60細胞線粒體膜電位的喪失，從而導致細胞的凋亡或壞死。Abullah Al Faysal等[26]采用鹽水蝦無節(jié)幼體致死程度的方法(brine shrimp lethality bioassay，BSLB)對天仙果果實甲醇總提取物、石油醚部位、氯仿部位、四氯化碳部位及水部位進行細胞毒性測試，結果顯示以上各部位的LC50值分別為(1.50±0.06)μg/mL、(1.43±0.035)μg/mL、(1.20±0.028)μg/mL、(1.29±0.012)μg/mL、(1.99±0.07)μg/mL，具有一定的細胞毒性，活性稍弱于硫酸長春新堿[陽性對照，LC50=(0.45±0.003)μg/mL]。

2.3 抗氧化活性 Yen等[14]使用ORAC法和TEAC法分別測定天仙果根乙醇提取物和水提物的抗氧活性，結果顯示，乙醇提取物和水提物的氧自由基吸收值(Trolox當量，μM/g提取物)分別為45.0和33.3，總抗氧化能力(Trolox當量，μM/g提取物)分別為38.9和17.3。Abullah Al Faysal等[26]采用DPPH法評價了天仙果果實甲醇提取物及各極性部位的抗氧化活性，其中乙酸乙酯部位的活性最好，IC50值為(7.35±0.08)μg/mL，抗氧化活性較好，各部位的抗氧化活性強弱與黃酮含量成正比，表明抗氧活性的主要成分為黃酮類化合物。

2.4 抗老年癡呆活性(神經保護作用) Eunjin Sohn等[20]研究發(fā)現(xiàn)天仙果葉乙醇提取物(EEFE)通過延長自發(fā)交替和步入潛伏期的時間，對東莨菪堿(SCO)誘導記憶障礙的小鼠模型的記憶障礙有改善作用。其作用機制是EEFE通過激活Nrf2/HO-1通路對抗SCO誘導的氧化應激和腦損傷而產生神經保護作用，以及促進cAMP反應元件結合蛋白(CREB)磷酸化而發(fā)揮增強記憶的作用?；谔煜晒~乙醇提取物的神經保護作用，Eunjin Sohn等[21]對其防治阿爾茨海默病(AD)做了深入的研究，采用Aβ誘導的AD小鼠模型研究表明EEFE的神經保護作用機制與降低Aβ組小鼠腦組織中的神經元損失和神經元核(NeuN)的表達，和逆轉AD樣小鼠腦裂解物cAMP反應元件結合蛋白(CREB)磷酸化，以及降低腦源性神經營養(yǎng)因子BDNF蛋白的水平有關。EEFE顯著抑制Aβ組小鼠腦組織中的炎癥細胞因子IL-1β、TNF-α以及小膠質細胞激活標志物-離子化鈣結合接頭分子1 (iba-1)的表達，是其抗神經炎癥的作用機制。目前的研究表明，EEFE 可能是一種令人鼓舞的植物資源，并可以作為一種有效的神經藥理學候選藥物來對抗神經退行性疾病。

2.5 其他活性 Park Sung Hwan等[23]發(fā)現(xiàn)天仙果枝的70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位具有酪氨酸激酶抑制活性，IC50為75.7 μg/mL，活性好于陽性對照熊果苷(IC50=87.4 μg/mL)。從乙酸乙酯部位分離出來的化合物30和34對蘑菇酪氨酸酶具有較強的抑制活性，IC50值分別為0.98 mmol/L和0.66 mmol/L。Abullah Al Faysal等[26]研究發(fā)現(xiàn)天仙果果實甲醇提取物及各部位都有不同程度的溶栓活性，四氯化碳和水部位活性較強，溶栓率分別為(27.53±0.41)%、(26.38±1.03)%，活性強于陽性對照鏈激酶[溶栓率為(65.16±0.064)%]。陳旭波等[27]研究發(fā)現(xiàn)天仙果枝葉的乙醇提取物對綠豆象具有顯著的熏蒸活性，平均死亡率達90%，與農藥毒死蜱沒有顯著性差異(P>0.05)，表明其具備開發(fā)植物源農藥的潛力，殺蟲潛能值得更進一步的研究。

3 臨床應用

天仙果為畬族常用畬藥，其臨床應用在民間廣為流傳。雷后興等[1-2]在《中國畬族醫(yī)藥學》《中國畬藥學》中附方，其一：天仙果根100 g，煎湯，燉豬腳尖，喝湯食肉可治療脫力勞傷；其二：天仙果根50～100 g，煎湯，燉小公雞(500 g)，喝湯，分2次服，用于治療小兒疳積。徐德年[8]將天仙果根入藥，用于治療勞力過度的乏力癥，累計共治愈30余例患者。在福建省武夷地區(qū)，民間常將天仙果與肉類煲湯食用，其味醇美，是當地居民作為預防關節(jié)炎藥膳的首選中藥材[25]。

4 小結

天仙果作為畬族常用的、藥食同源的畬藥，具有補中益氣、健脾化濕、行氣活血、強筋壯骨、祛風通絡和清熱解毒等諸多功效，同時，也是民間常用的藥膳材料，在防治脫力勞傷、小兒疳積、關節(jié)炎等疾病都具有很好的效果，深受民間老百姓的喜愛，現(xiàn)也越來越被大眾接受。近年來，隨著色譜、波譜和光譜等技術的發(fā)展，為天仙果的化學成分的快速分離與鑒定奠定了基礎。目前，已從天仙果的不同部位分離鑒定了42個化合物，化合物類型豐富，涵蓋了苯丙素類、黃酮、三萜、甾體和酚酸類等。天仙果提取物及部分單體化合物在抗炎、抗氧化、抗腫瘤和抗老年癡呆等作用方面展示了多種藥理活性。

目前，有很多文獻報道天仙果為畬族道地藥材小香勾之一[28-30]，且收入《浙江省中藥炮制規(guī)范》(2005年版)，本文經過系統(tǒng)的文獻檢索及調研，發(fā)現(xiàn)天仙果并不作為小香勾之一使用，且未收入《浙江省中藥炮制規(guī)范》(2005或2016年版)[31-32]，亦沒有其相關的炮制規(guī)范，天仙果僅為畬族常用的畬藥，抑或在民間作為小香勾之一而使用。

綜上，可以看出有關天仙果的藥效物質基礎研究多集中于提取物，對單體化合物及藥理活性研究較少，且關于天仙果在臨床應用的報道亦較少，多為民間應用。中藥具有多成分、多靶點、多療效的特點[33]，因此，對天仙果單一成分或部位的藥理作用及作用機制的研究仍有待進一步探討，為天仙果的開發(fā)和臨床應用提供研究基礎。此外，在質量控制方面，天仙果尚缺乏專屬性的定量評價標準，因此，畬藥天仙果在活性化合物的篩選、藥理作用及作用機制、臨床應用以及質量控制標準等方面值得進一步的研究。