■ 張國華 金振華 王麗坤 張 備 沈思思 薛沾枚 林秀蔚 張 艷

（黑龍江省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)分院，黑龍江齊齊哈爾 161005）

畜禽寄生蟲類疾病對養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展危害極大，且胃腸道線蟲病在日常養(yǎng)殖業(yè)中十分常見[1]。我國部分地區(qū)羊消化道線蟲的感染率為27%～100%，85.7%的群體對伊維菌素（Ivermectin，IVM）耐藥，75.0%的群體對阿苯達唑耐藥，并且存在對IVM 和阿苯達唑雙重耐藥的情況[2]。目前主要以IVM類藥物治療消化道線蟲病，但是長期大量地使用相同的藥物會產生耐藥性，降低用藥效果[3-4]。耐藥性的產生促使得我們必須盡快選擇出更適合的藥物、劑型、劑量來解決目前羊消化道線蟲治療困難的問題。

莫西菌素（Moxidectin，MXD）是由鏈霉素發(fā)酵的單一成分的大環(huán)內酯類抗生素，其作用機制和驅蟲范圍與IVM 類似，然而由于其親脂性等特點導致了其具有更好的藥效[5]。目前MXD 被廣泛應用于豬、牛、羊等動物的寄生蟲病的預防與治療[6-8]。微乳載體系統(tǒng)相對于普通給藥系統(tǒng)有可減少給藥次數、降低毒副反應、增加藥物治療穩(wěn)定性等優(yōu)點。

本研究將MXD 與微乳載體系統(tǒng)相結合，以有效地增加其溶解度，獲得更好的穩(wěn)定性，幫助藥物的釋放以及吸收，提高生物利用度和降低應激[9-10]。MXD因其特殊的親脂性可以制備出很多劑型，但目前國內外未見關于MXD 微乳制劑對小尾寒羊生產性能、血清生化指標、胃腸道線蟲防治效果的研究，因此本研究對MXD 微乳制劑的小尾寒羊生長性能和血液生化指標的影響進行初步研究，并將其與IVM注射劑、MXD 注射劑和MXD 微乳制劑注射劑對胃腸道線蟲的治療效果進行比較，為MXD 微乳制劑的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

MXD 微乳制劑（主要成分：MXD 含量為1%；批號：20220320）黑龍江省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)分院自制；IVM 注射液（主要成分：IVM 含量為1%；批號：20220120）購自重慶方通動物藥業(yè)有限公司；MXD 注射液（主要成分：MXD 含量為1%；批號：20211220）購自安徽天安生物科技有限公司；血清生化檢測白蛋白(ALB；批 號20220418)、谷 丙 轉 氨 酶（ALT；批 號20220527）、谷草轉氨酶等(AST；批號20220613)、肌酸激酶（CK；批號：20220312）、乳酸脫氫酶（LDH；批號：20220329）、尿素氮（UREA；批號：20220607）購自深圳雷杜生命科學股份有限公司?；A日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 主要儀器

制冷離心機（LEGEND MICRO 17R）購自賽默飛世爾中國有限公司，電子天平(TD30001C)購自天津天馬電子衡器有限公司，全自動生化分析儀（BS220）購自深圳邁瑞醫(yī)療器械有限公司，顯微鏡（E200）購自尼康儀器（上海）有限公司。

1.3 試驗動物及分組

試驗在黑龍江省西部地區(qū)某小尾寒羊養(yǎng)殖場開展，通過飽和鹽水漂浮法及麥克馬斯特氏法測定糞便中含有蟲卵的母羊125 只，3 月齡左右，體重（24.26±1.67）kg，在試驗前2周未使用驅蟲藥及抗生素。試驗動物隨機分為5組，每組25只，分別為空白對照組（不注射任何藥物）、IVMSC0.2組（皮下注射IVM 0.2 mg/kg）、MXDSC0.2組（皮下注射MXD 0.2 mg/kg）、MXDSC0.2微乳組（皮下注射1倍劑量MXD 微乳，0.2 mg/kg）、MXDSC1.0微乳組（皮下注射5倍劑量MXD微乳，1.0 mg/kg）。各試驗動物在試驗當天早上用藥，皮下注射為頸部皮下注射，按照試驗分組分欄飼養(yǎng)。在試驗前2 周安排進入新的飼養(yǎng)環(huán)境以減少應激反應的發(fā)生，試驗期間自由采食干草、全價飼料和水。飼料不含抗生素及驅蟲藥，舍飼，觀察小尾寒羊的臨床表現。

1.4 生長性能測定

試驗的第0天第30天早上6：00，在試驗動物未進行進食的情況下稱重，記錄初始體重（IBW）、終末體重（TBW）。計算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（FCR）。

ADG（g）=（TBW-IBW）/30

FCR=ADFI/ADG

1.5 血液生化指標測定

各試驗組動物在試驗第0 天和第7 天早上6：30，空腹采集靜脈血10 mL，4 000 r/min 離心分離得到血漿后12 000 r/min 離心分離血清。應用全自動生化分析儀（BS220）進行血液生化檢測。檢測項目包括白蛋白（ALB）、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）、尿素（UREA）。

1.6 糞便樣本采集以及檢測

試驗第0、7、14、30 天早上8：00 采集各試驗組動物的新鮮糞便10 g，對采集的每一份糞便樣本標記好采集時間以及分組情況，立即進行實驗室檢測。

新鮮糞便應用飽和鹽水漂浮法制片，置于顯微鏡下進行鑒定和計數，運用麥克馬斯特氏法測定每克糞中蟲卵個數（EPG），以蟲卵減少情況來評價療效。

療效（%）=（試驗前EPG-試驗后EPG）/試驗前EPG×100

1.7 數據處理

試驗數據應用SPSS 26.0 進行統(tǒng)計分析，莫西菌素微乳制劑對小尾寒羊生長性能的分析采用單因素方差法（one-way ANOVA），對試驗動物血清指標生化指標和消化道線蟲EPG采用雙因素方差分析，各個處理之間的數據用“平均值±標準差”表示，設置P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 莫西菌素微乳制劑對小尾寒羊生長性能的影響

由表2 可知，與空白對照組相比，IVMSC0.2組的平均日增重差異不顯著（P＞0.05），MXDSC0.2組、MXDSC0.2微乳組、MXDSC1.0微乳組平均日增重差異顯著（P＜0.05）。ADFI各組間差異不顯著（P＞0.05）。各試驗組FCR極顯著低于空白對照組（P＜0.01）。

表2 試驗期間各處理組小尾寒羊增重情況

表3 各處理組試驗第0天和第7天血清生化指標

2.2 莫西菌素微乳制劑對小尾寒血液生化指標的影響

由表4 可知，通過分組、時間、分組×時間交互作用進行分析可見，試驗第0 d 和第7 天各組血清生化指標未見顯著差異（P＞0.05）。

表4 各處理組消化道線蟲EPG檢測情況

2.3 莫西菌素微乳制劑對小尾寒羊胃腸道線蟲驅蟲效果的影響

試驗前在試驗動物糞便中檢測出有捻轉血矛線蟲、毛首線蟲、仰口線蟲3 種寄生蟲，試驗后胃腸道線蟲EPG 檢測結果見表4。通過分組、時間、分組×時間交互作用進行分析可見差異極顯著（P＜0.01）。采用單因素方差分析可見，與空白對照組相比第0 天各試驗組差異不顯著（P＞0.05），用藥第7、14、30 天空白對照組與試驗組差異極顯著（P＜0.01）。

對消化道線蟲療效見表5。試驗第7 天IVMSC0.2組、MXDSC0.2組、MXDSC0.2微乳組、MXDSC1.0微乳組的療效分別為81.69%、95.08%、95.55%、95.22%，試驗第14天療效分別為69.45%、92.62%、92.31%、93.63%，試驗第30天療效分別為58.58%、75.41%、87.45%、87.25%，各組間無顯著差異（P＞0.05）。

表5 各處理組對消化道線蟲療效（%）

3 討論

3.1 莫西菌素微乳制劑對小尾寒羊生長性能的影響

胃腸道線蟲是一類嚴重影響家畜生產性能的疾病，大多數情況下，患有消化道線蟲的家畜即使得到一定的治療，但由于消化道線蟲產生耐藥性不能完全被驅除，仍然會導致體重下降[11-12]。Fazzio 等[13]研究發(fā)現，MXD 不僅有很好的驅殺效果，還具有增加用藥對象體重的功效，這與本試驗的研究結果相符。本試驗結果顯示感染消化道線蟲的試驗動物在用藥后臨床癥狀均有很好的改善，MXD 用藥組的平均日增重明顯高于空白對照組和IVM組。

3.2 莫西菌素微乳制劑對小尾寒血液生化指標的影響

微乳載體系統(tǒng)作為目前新獸藥研發(fā)的一種劑型，安全性較高，且可以有效的增加載藥量，溶解更多的藥物[14]。陳雪虹[15]對硫酸氫氯吡格雷亞微乳的初步安全性進行評價，結果顯示微乳制劑不引起溶血,對血管和皮下組織刺激性小，對器官組織無明顯毒性可以安全使用。本研究在試驗的第0、7天進行的血液學試驗結果顯示，血清生化指標顯示各組檢測項目未見顯著差異（P＞0.05）。通過長期對6項與肝腎功能相關的血清生化指標進行檢測顯示數值均在正常范圍之內，說明試驗用藥對肝、腎的血清生化指標未產生影響。初步研究說明MXD微乳制劑對試驗動物安全可靠。

3.3 莫西菌素微乳制劑對小尾寒羊胃腸道線蟲驅蟲效果的影響

IVM 和MXD 這兩種藥物均屬于阿維菌素家族抗寄生蟲類藥物，但由于近年來IVM 等廣譜驅蟲藥的長期使用導致寄生蟲抗藥性產生，當胃腸道線蟲對IVM的敏感性降低時，MXD 仍保持其效力[16-17]。Lloberas等[18]將這一問題在綿羊身上得到了證實，IVM 對捻轉血矛線蟲的療效為0時，而MXD的療效為95%。本試驗在自然感染消化道線蟲的125 只小尾寒羊糞便中檢出捻轉血矛線蟲、毛首線蟲、仰口線蟲3 種寄生蟲，通過觀察不同時間段試驗動物胃腸道線蟲EPG，通過雙因素方差分析顯示各交互之間差異極顯著（P＜0.01），單因素方差分析顯示試驗第7、14、30天空白對照組與其他試驗組差異極顯著（P＜0.01），驅蟲效果顯示，隨著試驗天數的增加，EPG 數量有所上升，在指定的時間點內，用藥第7 天的EPG 最低，第14 天和第30 天較之前有所上升，其中IVMSC0.2組EPG 上升最快，MXDSC0.2組次之，MXDSC0.2微乳組、MXDSC1.0微乳組EPG 上升最緩慢。試驗期間對于胃腸道線蟲療效在第7 天療效最佳，療效為81.69%（IVMSC0.2組）至95.55%（MXDSC0.2微乳組）。在第30 天療效為58.58%（IVMSC0.2組）至87.45%（MXDSC0.2微乳組），可見在試驗第30 天時各試驗組的療效均有不同程度的降低，但是MXDSC0.2微乳組、MXDSC1.0微乳組仍保持較好的療效，說明MXD 微乳制劑具有一定的緩釋作用。該試驗中可能是由于對IVM 耐藥的胃腸道線蟲P-糖蛋白表達增強所以IVM 和MXD 對該轉運蛋白的親和力不同，導致了IVM 和MXD 之間療效差異較大[19-20]。有研究表明MXD 對IVM 耐藥的胃腸道線蟲具有更好的療效，可以有效的提高飼養(yǎng)場羊只對胃腸道線蟲的抵抗能力，但在臨床應用中要合理使用MXD，避免胃腸道線蟲對MXD產生耐藥性[21-22]。

4 結論

MXD微乳制劑增重試驗顯示在試驗期間MXD組可以有效的增加小尾寒羊的平均日增重。試驗后試驗動物血清生理指標未見出現異常情況。治療效果試驗顯示對小尾寒羊的胃腸道線蟲藥效更長，驅蟲效果十分顯著。本試驗中MXD 微乳注射組用藥濃度為0.2 mg/kg 可以很好地對小尾寒羊消化道線蟲進行治療，適合應用于臨床，有著良好的市場前景，為MXD微乳制劑的進一步推廣奠定了基礎。