葛洪玲
(山東省臨沂市臨沭縣臨沭畜牧獸醫(yī)站,山東臨沂 276700)
近年來,隨著畜牧業(yè)的高質(zhì)量、高標(biāo)準(zhǔn)的快速發(fā)展和免疫無高致病性禽流感、免疫無口蹄疫省創(chuàng)建工作的完美收官,以及各類無疫小區(qū)、牛羊布魯氏菌病、結(jié)核病等凈化場的積極推行,各地的動物疫病檢測工作也得到了足夠的重視和快速的發(fā)展。多地實(shí)現(xiàn)了從無到有,從實(shí)驗(yàn)單一到血清學(xué)和病原學(xué)齊舉的轉(zhuǎn)化,甚至出現(xiàn)了一批設(shè)備精良、技術(shù)人員本領(lǐng)過硬,業(yè)務(wù)水平高的專業(yè)性的第三方檢測機(jī)構(gòu),在動物疫病的防控中越來越多地發(fā)揮了重大作用。就山東省而言,為創(chuàng)建免疫無口蹄疫和免疫無禽流感省,全省所有縣級以上的實(shí)驗(yàn)室均通過了省級的實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收考核,對規(guī)范實(shí)驗(yàn)室的檢測行為和提高實(shí)驗(yàn)室的檢測能力和標(biāo)準(zhǔn)化功不可沒。不可否認(rèn),檢測工作將在重大動物疫病的防控和動物產(chǎn)品的質(zhì)量安全控制中發(fā)揮著重要的技術(shù)支撐作用,并對疫情的提前預(yù)警和政策的正確決策產(chǎn)生積極影響。所以,做好檢測工作是動物疫情防控的重中之重。由于目前鄉(xiāng)鎮(zhèn)級的官方實(shí)驗(yàn)室尚不能開展全面的動物疫病檢測工作,本文所指基層僅指縣級的檢測機(jī)構(gòu)。
本文簡要地介紹一下目前基層檢測工作開展的種類、工作流程、檢測進(jìn)行的時間、常用的實(shí)驗(yàn)方法、檢測結(jié)果的處置等方面工作開展的情況。
1.1.1 被動檢測
養(yǎng)殖場、屠宰場、無害化場點(diǎn)等日常巡查發(fā)現(xiàn)的問題,比如動物表現(xiàn)異常:有與某種傳染病十分相似的癥狀或者特征性的解剖特征,需要緊急采樣確診的;或者某些畜禽產(chǎn)品在檢疫過程中發(fā)現(xiàn)異常,比如有病灶,某器官有特征性的病變組織,或者有囊包、淋巴結(jié)異常等,需要通過試驗(yàn)驗(yàn)證的:比如無害化場在進(jìn)行病死畜禽無害化處理的時候,發(fā)現(xiàn)體表的皮膚特征或者耳朵出現(xiàn)某種重要傳染病的特異性臨床特征,而且最近這種癥狀出現(xiàn)的比較多,懷疑某種重要傳染病正在流行時,需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)一步確診的。以及來自診療單位和基層畜牧獸醫(yī)站、獸藥飼料行業(yè)發(fā)現(xiàn)的動物疫病風(fēng)險,需要進(jìn)行檢測的情況等等都屬于被動檢測的范圍。發(fā)生重大疫情時的應(yīng)急檢測,是為排除風(fēng)險而必須緊急進(jìn)行的檢測活動。特殊時期的重點(diǎn)監(jiān)測。比如冬春季節(jié)是非洲豬瘟、高致病性禽流感等動物疫病高發(fā)的時間節(jié)點(diǎn),國家省市會開展一些專項(xiàng)的攻堅(jiān)活動,開展相關(guān)檢測。都屬于此類檢測。
1.1.2 主動檢測
行業(yè)主管部門文件通知下達(dá)各種動物疫病檢測方面的檢測任務(wù)。比如動物免疫后的免疫效果評價,病原學(xué)的檢測,以及針對某種重要傳染病的流行病學(xué)調(diào)查的配合抽檢,還有配合省市實(shí)行“先打后補(bǔ)” 工作的監(jiān)督抽檢等等。都是圍繞著政府的指令,有計(jì)劃、有步驟,逐步分時段完成的檢測任務(wù)。強(qiáng)制免疫是長久以來我們國家一直實(shí)行的一項(xiàng)免疫政策,是指國家對嚴(yán)重危害養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)和人體健康的動物疫病,采取制定強(qiáng)制免疫計(jì)劃,確定免疫用生物制品和免疫程序,對免疫效果進(jìn)行監(jiān)測的一系列預(yù)防控制動物疫病的強(qiáng)制性措施,以達(dá)到科學(xué)高效地預(yù)防、控制、撲滅動物疫病的目的。因此,強(qiáng)制免疫是國家統(tǒng)一的一項(xiàng)防疫政策。強(qiáng)制免疫后的效果評價即血清學(xué)的檢測是檢測工作的重中之重。但近年來,隨著“先打后補(bǔ)” 工作的持續(xù)推進(jìn),國家的免疫政策逐漸由強(qiáng)制免疫向自購疫苗免疫并給予養(yǎng)殖戶一定的補(bǔ)貼鼓勵自行免疫靠攏,因此免疫抗體效果評價的檢測將逐漸被 “先打后補(bǔ)” 的監(jiān)督抽檢所代替。另外,病原學(xué)的檢測是比血清學(xué)發(fā)展慢的一項(xiàng)檢測,但隨著實(shí)驗(yàn)新技術(shù)的不斷推廣,近幾年的病原學(xué)檢測發(fā)展很快,過去一些基層不會做的試驗(yàn),比如非洲豬瘟的熒光PCR 試驗(yàn)、高致病性禽流感的RT-PCR 試驗(yàn)、炭疽桿菌的熒光PCR試驗(yàn)都在陸續(xù)開展?!跋却蚝笱a(bǔ)” 的監(jiān)督抽檢的內(nèi)容也逐漸涵蓋血清學(xué)和病原學(xué)的檢測。
政府部門的行業(yè)監(jiān)管的實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)全部納入了省行業(yè)部門考核體系,擁有自身完善的管理體系,按照省級標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行管理,檢測工作的大致流程如下:
1.2.1 樣品采集
有的實(shí)驗(yàn)室是據(jù)監(jiān)管需要自己下場采樣,有的實(shí)驗(yàn)室是由基層的畜牧獸醫(yī)站聯(lián)合村級防疫員完成采樣。實(shí)驗(yàn)室完成樣品的集結(jié)后批量或者單獨(dú)開展樣品的前期處置和準(zhǔn)備工作,包括審核采樣單,核對疫苗的毒株類型,為后續(xù)的抗體水平檢測或病原學(xué)檢測做初步的準(zhǔn)備。
1.2.2 簽訂委托書
樣品審核合格被收取后,根據(jù)需要決定是否留樣,與客戶簽訂委托書,遵從保密規(guī)定出具試驗(yàn)的委托編號,標(biāo)識樣品,為保密不能體現(xiàn)客戶的任何信息,樣品進(jìn)入樣品保存室待檢。
1.2.3 下達(dá)檢測任務(wù)書
實(shí)驗(yàn)室根據(jù)客戶的檢測需要和自身任務(wù)的需要向相關(guān)科室下達(dá)檢測任務(wù)書,抗體檢測任務(wù)歸血清學(xué)室,病原檢測任務(wù)歸分子生物學(xué)室或病原學(xué)室,由不同的室領(lǐng)取樣品,完成樣品的流轉(zhuǎn)與標(biāo)識的轉(zhuǎn)換。
1.2.4 按標(biāo)檢測
各檢測室根據(jù)自己的任務(wù)按照作業(yè)指導(dǎo)書規(guī)定的檢測方法進(jìn)行檢測,收集數(shù)據(jù),填寫相關(guān)表格,在規(guī)定的時間內(nèi)完成檢測任務(wù)。血清學(xué)檢測記錄出抗體滴度,病原學(xué)檢測導(dǎo)出圖譜。可以使用國標(biāo)、行標(biāo),也可以使用非標(biāo)準(zhǔn)方法,非標(biāo)方法必須通過驗(yàn)證才可使用。
1.2.5 記錄結(jié)果,出檢驗(yàn)報(bào)告
結(jié)果記錄必須詳細(xì):包括實(shí)驗(yàn)的簡化程序、使用的儀器設(shè)備、檢測的時間,對照值的情況,實(shí)驗(yàn)的真實(shí)結(jié)果等等。然后,進(jìn)一步整理后出檢驗(yàn)報(bào)告,蓋好印章。正本下發(fā),副本存檔,將原始記錄與采樣單、委托書、檢測任務(wù)書和檢驗(yàn)報(bào)告副本一起裝訂成冊,一場戶一檔,完整易追溯。
1.2.6 分析、總結(jié)、預(yù)警
匯總分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),寫總結(jié)分析報(bào)告,對疫情做出預(yù)警,通過系統(tǒng)逐級上報(bào)檢測結(jié)果。
常規(guī)檢測主要根據(jù)上級文件制定的年度計(jì)劃來進(jìn)行。一般在每年的春秋兩季進(jìn)行動物強(qiáng)制免疫后的集中檢測,包括相關(guān)的病原學(xué)檢測。病原學(xué)檢測主要包括口蹄疫初篩陽性的定性檢測、日常必須檢測的任務(wù)和對風(fēng)險較高的某種疫病的緊急或者加強(qiáng)檢測,還有針對本地流行特點(diǎn)進(jìn)行的有針對性的提前預(yù)警檢測,或者是飼料、肉品污染后去疑檢測等。應(yīng)急檢測隨時進(jìn)行,風(fēng)險檢測根據(jù)本地實(shí)際有針對性進(jìn)行,“先打后補(bǔ)” 的監(jiān)督抽檢根據(jù)養(yǎng)殖戶提報(bào)的情況自行決定抽檢時間,一般都是按方案逐步施行。
目前常用的實(shí)驗(yàn)方法是平板凝集、血凝與血凝抑制,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和RT-PCR、熒光PCR 等。
檢測抗體水平不合格時:對于抽檢的養(yǎng)殖場(戶),山東省規(guī)定的強(qiáng)制免疫后抗體水平的合格判定標(biāo)準(zhǔn)是:口蹄疫必須達(dá)到80%以上,其他70%以上即可,對于強(qiáng)制免疫后抗體水平不合格的養(yǎng)殖場(戶),及時通知基層畜牧獸醫(yī)站和養(yǎng)殖場(戶),由鄉(xiāng)鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站監(jiān)督養(yǎng)殖場(戶)補(bǔ)免,間隔一段時間后,重新抽檢,直到抗體合格為止。
檢測出現(xiàn)病原學(xué)陽性時:對于養(yǎng)殖場(戶),立即將陽性動物隔離、限制流動、強(qiáng)化消毒、緊急流行病學(xué)調(diào)查,并采樣去更高級別的實(shí)驗(yàn)室強(qiáng)化檢測、確診,但疫情的發(fā)布權(quán)歸農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。屠宰場出現(xiàn)檢測病原陽性時,立即封鎖產(chǎn)品,強(qiáng)化消毒、禁止出庫、溯源、進(jìn)一步采樣送檢、確診后依法依規(guī)處置。無害化場點(diǎn)出現(xiàn)病原學(xué)陽性時,立即展開調(diào)查,溯源、強(qiáng)化消毒、防止疫情的進(jìn)一步擴(kuò)散,采樣送檢,確診后依法依規(guī)處置。引入動物出現(xiàn)病原學(xué)陽性后,隔離、強(qiáng)化消毒、流調(diào)、溯源、進(jìn)一步采樣送檢、確診后依法依規(guī)處置。隔離場動物檢測出陽性后,即使隔離期滿也要限制移動、強(qiáng)化消毒、采樣送檢確診后依法依規(guī)處置。
履行動物疫病檢測功能的實(shí)驗(yàn)室業(yè)務(wù)發(fā)展速度還是跟不上畜牧業(yè)快速增長的檢測需求。主要表現(xiàn)在部分實(shí)驗(yàn)室的基礎(chǔ)設(shè)施相對落后,有的雖然擁有合格的場地、合規(guī)的功能室劃分,業(yè)務(wù)檢測量也很多,但依然存在部分儀器設(shè)備老化,更新速度慢,業(yè)務(wù)范圍窄、經(jīng)費(fèi)不足等一系列突出問題。實(shí)驗(yàn)室的資源分配不均衡,實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)化、標(biāo)準(zhǔn)化程度和業(yè)務(wù)拓展度均有待提高。
從事動物疫病檢測的技術(shù)人員青黃不接。技術(shù)人員因年齡老化,因退休、升遷或者崗位調(diào)動而退出實(shí)驗(yàn)崗位,但后續(xù)的實(shí)驗(yàn)人才還沒培養(yǎng)出來,實(shí)驗(yàn)新手面對嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室考核標(biāo)準(zhǔn)、厚重的體系文件,超難的國標(biāo)、行標(biāo),不經(jīng)過數(shù)年的理論與實(shí)踐的摸索與摸爬滾打,短期內(nèi)根本無法做到獨(dú)立實(shí)驗(yàn)和撐起一片天。基層中最缺的是全能型檢測人才和能長期留在檢測崗位的人才。
不配合動物疫病檢測的事件時有發(fā)生,相關(guān)法律法規(guī)意識淡薄。動物疫病檢測工作是一個系統(tǒng)性的工作,是由養(yǎng)殖場戶、村級防疫員、基層畜牧獸醫(yī)站和各相關(guān)部門團(tuán)結(jié)協(xié)作完成的一項(xiàng)工作,而實(shí)際生產(chǎn)中,經(jīng)常有養(yǎng)殖場戶不配合采樣的情況發(fā)生。雖然 《動物防疫法》 規(guī)定飼養(yǎng)動物的單位和個人必須履行如下9 條法定義務(wù):①依法履行動物疫病強(qiáng)制免疫義務(wù),按照獸醫(yī)部門的要求做好免疫、消毒等動物疫病預(yù)防工作;②按照獸醫(yī)部門的規(guī)定建立免疫檔案,加施畜禽標(biāo)識;③及時向獸醫(yī)部門報(bào)告動物疫情,不對社會發(fā)布動物疫情信息;④按照獸醫(yī)部門的規(guī)定處理病死或者死因不明的動物尸體及其排泄物、墊料、包裝物、容器等污染物;⑤遵守縣級以上人民政府及其獸醫(yī)主管部門依法作出的有關(guān)控制、撲滅動物疫病規(guī)定;⑥接受并配合動物衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)的監(jiān)督檢查;⑦接受并配合動物疫病預(yù)防控制中心對動物疫病的檢測;⑧開辦的養(yǎng)殖場要具備國務(wù)院獸醫(yī)主管部門規(guī)定的動物防疫條件,并取得縣級以上地方人民政府獸醫(yī)主管部門頒發(fā)的動物防疫條件合格證⑨銷售動物前要向動物衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)申報(bào)檢疫。但總有養(yǎng)殖場戶以各種各樣的理由,比如怕動物應(yīng)激,怕采樣人員給動物帶來傳染病等等各種理由拒檢。有的養(yǎng)殖戶想檢測飼料,懷疑污染了某種病原體,卻表達(dá)不清楚,讓檢測人員無法有針對性地開展檢測工作。
另外,動物疫病檢測與動物診療的結(jié)合不夠緊密。機(jī)構(gòu)改革取消了門診,強(qiáng)化行業(yè)的監(jiān)管和服務(wù)職能,動物疫病檢測人員雖然不再門診與檢測工作并舉,不再受風(fēng)里來雨里去的看診之苦,但失去了直接接觸臨床病例的機(jī)會,也失去歷練自己的機(jī)會,對基層動物疫情的辨識度降低,采樣的針對性弱化,對動物疫病的正確診治非常不利。
實(shí)驗(yàn)樣品采集中存在不足,主要表現(xiàn)為以下3 個方面:
2.4.1 偶有分樣
由于經(jīng)常遇到養(yǎng)殖戶不配合的情況,有時采雞血,實(shí)際采30 份,養(yǎng)殖戶卻只肯抱出10 只或20 只雞,為完成任務(wù),有些人便采取分樣,浪費(fèi)檢測人員的精力和試劑。
2.4.2 實(shí)驗(yàn)人員親自采樣帶來后續(xù)的風(fēng)險問題
有的基層實(shí)驗(yàn)室人手短缺,實(shí)驗(yàn)人員不得不親自采樣,很容易把病毒細(xì)菌帶進(jìn)實(shí)驗(yàn)室,到時候一旦病原學(xué)實(shí)驗(yàn)陽性,說不清楚到底是樣品陽性還是來自環(huán)境的污染。
2.4.3 樣品采集和運(yùn)輸不規(guī)范
有的采樣人員不穿防護(hù)裝備,易得人畜共患??;有的樣品采集量過少,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果;夏季不使用或者缺乏冷藏設(shè)備,導(dǎo)致樣品保存不當(dāng);有的本來是應(yīng)該采體內(nèi)血的卻采集了體外血;有的心臟采血扎針不當(dāng)導(dǎo)致了牲畜死亡,引發(fā)了索賠爭議等等。
2.5.1 個人防護(hù)疏松
個別實(shí)驗(yàn)員在做簡單實(shí)驗(yàn)的時候圖省事穿戴不整齊,有時候只戴口罩穿白大褂,不戴帽子,有的僅戴個手套。
2.5.2 樣品標(biāo)識不正確
為圖省事,不貼規(guī)定的標(biāo)簽,只用記號筆簡單記錄。
2.5.3 實(shí)驗(yàn)廢棄物處理不及時
試驗(yàn)后的廢棄物應(yīng)當(dāng)立即高壓蒸汽滅菌后交由專業(yè)的機(jī)構(gòu)處理,但為了節(jié)省時間攢一起高壓滅菌,處理的不夠及時,增加了病原微生物的散播風(fēng)險。
多方籌措資金,改善實(shí)驗(yàn)室的基礎(chǔ)設(shè)施,對老破小的實(shí)驗(yàn)室,特別影響檢測工作質(zhì)量的破舊儀器設(shè)備,布局不合理的實(shí)驗(yàn)室能淘汰的盡快淘汰,無法淘汰的升級改造,把防火、防水、防泄漏、防擴(kuò)散作為所有實(shí)驗(yàn)生物安全防護(hù)工作的重中之重。更加科學(xué)與標(biāo)準(zhǔn)地做好獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的整體運(yùn)營工作。多方聯(lián)動,防疫人員搞好防疫,認(rèn)真分析檢測結(jié)果、數(shù)據(jù)、并選擇免疫效果最好的廠家。養(yǎng)殖場戶搞好日常的飼養(yǎng)管理和生物安全工作,檢疫與監(jiān)管人員控制好移動動物的傳染病控制,檢測人員配合好畜牧部門做好疫病的綜合防控,并積極地參與到專業(yè)化的系統(tǒng)培訓(xùn)中,尤其是新的檢測技術(shù)的推廣與學(xué)習(xí)中,不斷提升檢測工作質(zhì)量,為做好動物疫病的預(yù)防與控制出一把力。
除了組織檢測技術(shù)人員參加國家、省、市的外部培訓(xùn),還要注意加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室人員的內(nèi)部培訓(xùn)。尤其是實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)理論和實(shí)操的培訓(xùn)。實(shí)驗(yàn)的精確度主要靠的就是不斷重復(fù)與練習(xí),還要有針對性地參與到實(shí)驗(yàn)室間比對和實(shí)驗(yàn)室人員內(nèi)部的比對實(shí)操中,不斷地提高實(shí)驗(yàn)的精度,拓展實(shí)驗(yàn)業(yè)務(wù)的廣度。
要與產(chǎn)地檢疫、動物衛(wèi)生監(jiān)督、養(yǎng)殖場戶和基層防疫員保持緊密溝通和高度配合,保證從采樣、樣品運(yùn)轉(zhuǎn)到實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的處置等各個環(huán)節(jié)的流暢性,各負(fù)其責(zé)又密切配合地把動物疫病防控好。
建立起實(shí)驗(yàn)人員與采樣工作相分離的工作機(jī)制,加強(qiáng)個人消毒和防護(hù),增強(qiáng)對試驗(yàn)環(huán)境的凈化工作,防止病原微生物的外溢和傳入。定期培訓(xùn),加強(qiáng)采樣人員標(biāo)準(zhǔn)化操作和合格運(yùn)輸?shù)目刂?,確保所有樣品都合規(guī)。
嚴(yán)格不定期的巡查實(shí)驗(yàn)過程中的規(guī)范化操作,發(fā)現(xiàn)疏漏及時糾正,嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室廢棄物的處置,確保實(shí)驗(yàn)規(guī)范、及時規(guī)避風(fēng)險隱患,提高整體的防護(hù)水平。
基層動物疫病檢測工作千頭萬緒,要想做到完美無缺很難,需要多部門配合,需要政府的大力支持,也需要業(yè)務(wù)部門的重視與扶持。但既然設(shè)立了這個業(yè)務(wù),就要努力改進(jìn),把工作做扎實(shí)了,發(fā)揮為動物疫病防控提供好技術(shù)支撐的功效。抓好疾病監(jiān)測活動,做好動物診斷與治療工作,提高檢測人員的診斷水平,至關(guān)重要。近30年的基層檢測工作的實(shí)踐讓我對這項(xiàng)工作進(jìn)行了深度思考。筆者認(rèn)為要想進(jìn)一步提高檢測工作的效率和標(biāo)準(zhǔn)化必須做到以下幾個方面:一是要有足夠的財(cái)力支撐,檢測工作花費(fèi)高,檢測文件要和財(cái)政局一起發(fā),才能確保檢測經(jīng)費(fèi)到位。二是要提高檢測技術(shù)人員的福利待遇,改變技術(shù)人員培養(yǎng)難和流動性大的難題,要用高薪吸引和留住人才,提高衛(wèi)生津貼標(biāo)準(zhǔn)并執(zhí)行到位。三是有序開展一些重要疾病的檢測計(jì)劃,并把計(jì)劃與培訓(xùn)相結(jié)合,計(jì)劃的內(nèi)容要接基層的地氣、充分考慮基層的實(shí)際,而不是一味的加碼卻不關(guān)心基層的實(shí)際承受力,并堅(jiān)持培訓(xùn)一項(xiàng)新技術(shù)開展一項(xiàng)新的檢測項(xiàng)目的運(yùn)行模式。