閔 文，屈大龍，林發(fā)坤，李 航，彭 俊，張前軍

(1 貴州大學化學與化工學院，貴州 貴陽 550025；2 貴州省石阡縣大沙壩鄉(xiāng)任家寨村，貴州 銅仁 555104)

八月瓜是木通科(Lardizabalaceae)木通屬三葉木通Akebiatrifoliata(Thunb)Koidz的果實，是一種原生態(tài)無污染的綠色水果，主要分布于我國長江流域的大部分地區(qū)及山東，山西，河南，河北等省[1]。八月瓜營養(yǎng)價值極為豐富，果實中含有大量的蛋白質氨基酸、可溶性糖、維生素C 等成分，同時還含有豐富的Fe、Zn、Ca、Mg、Mn 等人體必需微量元素；不僅有防癌抗癌，預防和治療高血壓、高血脂等效用[2]，還有消炎止痛、除濕利尿、補腎養(yǎng)肝、治療陽痿、潤腸通便等作用[3]。近年來，貴州、湖南等地將其作為扶貧項目進行推廣種植，已形成規(guī)模。八月瓜籽油是從八月瓜種子里提取出來的植物油，富含不飽和脂肪酸，其含量高達70.1%[4]，同時八月瓜具有良好的抗氧化活性[5]。因此本文從八月瓜成分功效原理出發(fā)，制備一款八月瓜籽油護膚霜，并對其性能進行測定和評價。

1 實 驗

1.1 試劑與儀器

八月瓜籽采，貴州石阡縣；乳木果油、甘油、尿囊素、透明質酸鈉、月桂酰谷氨酸鈉、三乙醇胺、硬脂酸、尼泊爾金丙酯，山東優(yōu)索化工科技有限公司；橄欖乳化蠟，廣州珠峰進出口貿(mào)易有限公司；去離子水；乙醇；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)，上海源葉生物科技有限公司)；2，2’-聯(lián)氮雙二銨鹽(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)，上海吉至生化有限公司。

RBX-916皮膚水分測試儀，國榮電子商務有限公司；GL-2型恒溫加熱磁力攪拌器，鄭州長城科工貿(mào)有限公司；SB5200D超聲波清洗機，寧波新芝生物科技股份有限公司；101-1AB電熱鼓風干燥箱，天津市泰斯特儀器有限公司；RE52-99旋轉蒸發(fā)器，上海亞榮生化儀器廠；pHS-3C pH計，上海儀電科學儀器股份有限公司；UV-2700紫外分光光度計，島津儀器有限公司。

1.2 八月瓜籽油的制備

八月瓜種子——粉碎——石油醚回流提取三次——旋蒸除去石油醚——八月瓜籽油。

1.3 護膚霜的制備

表1列出了含八月瓜籽油護膚霜配方，其制備工藝如下：將A組分和B組分加熱到75 ℃并維持10 min，將A組分先取出恒溫勻質攪拌1 min，再將B組分勻速加入到A組分中，并持續(xù)恒溫勻質攪拌，加入三乙醇胺繼續(xù)攪拌5 min，降低攪拌速度至40～45 ℃時可按加入適量香精等成分。

表1 八月瓜籽油護膚霜配方Table 1 The formula of Akebia trifoliata seed oil skin cream

1.4 產(chǎn)品保濕能力的測定

以不含八月瓜籽油，其余相同組分所制備的護膚霜為對照，采用單因素實驗考察了不同水油比例以及不同的八月瓜籽油含量對八月瓜籽油護膚霜補水能力的影響。

1.4.1 護膚霜的水油比例對保濕能力的影響

改變護膚霜的水油比例，其余組分不變(表2)，通過測定八月瓜護膚霜保濕效果以確定制備護膚霜的水油比。

表2 護膚霜的不同水油比例(乳木果油∶八月瓜籽油=1∶1)Table 2 The skin creams of different water-oil ratio (shea butter∶Akebia trifoliata seed oil=1∶1)

由圖1測定結果發(fā)現(xiàn)，改變水油比，護膚霜的保濕效果有明顯的區(qū)別，5號樣品(水油比為4∶6)的保濕效果最差，3號樣品水油比為6∶4的水分保持率可達46%，且持久，保濕效果最佳。

圖1 不同八月瓜籽油含量對皮膚保濕性的影響Fig.1 Effect of different Akebia trifoliata seed oil content on skin moisturizing properties

1.4.2 油相中八月瓜籽油含量對保濕能力的影響

選擇水油比為6∶4，通過改變油相中八月瓜籽油含量，其余組分不變(見表3)制備護膚霜，測定護膚霜的保濕效果以確定籽油最佳含量。

表3 護膚霜中八月瓜籽油的含量(水油比=6∶4)Table 3 Content of Akebia trifoliata seed oil in skin care cream (water/oil ratio=6∶4)

由圖2測定的結果發(fā)現(xiàn)，隨著時間的延長，涂抹八月瓜籽油護膚霜及對照產(chǎn)品的水分率均先提高后緩慢降低，相對于對照品八月瓜籽油護膚霜有較明顯的保濕效果，這是由于八月瓜籽油中富含各種氨基酸和不飽和脂肪酸，滲透能力強，不僅能迅速突破皮膚屏障滲入皮下組織，同時還能在皮膚表面形成一層膜，降低水分蒸發(fā)的速度。通過條件優(yōu)化，當水油比為6∶4，八月瓜籽油含量約66.7%時產(chǎn)品保濕效果最佳。

圖2 不同八月瓜籽油含量對皮膚保濕性的影響Fig.2 Effect of different Akebia trifoliata (Thunb)seed oil content on skin moisturizing

1.5 產(chǎn)品抗氧化活性的測定

1.5.1 測定方法

(1)DPPH試驗

DPPH溶液配置：準確1.972 mg DPPH，乙醇定容于10 mL容量瓶中，配置成濃度為0.5 mmoL/L DPPH溶液，避光保存[6]。

分別取1 mL提取物與0.5 mmoL/L DPPH溶液0.25 mL混合，搖勻后常溫下保存20 min，以乙醇為空白組，在524 nm下測定吸光度。根據(jù)以下公式計算樣品對DPPH自由基的清除率I：I=[(Ao-Ai)/Ao]×100%，式中Ao為未加入樣品的吸光值，Ai為加入樣品的吸光值[6]。平行操作三次，取平均值。

(2)ABTS試驗

ABTS+自由基工作液制備：5 mL 7 mmoL/L ABTS的水溶液與88 μL 140 mmoL/L過二硫酸鉀的水溶液混合，黑暗環(huán)境下室溫放置12 h，用無水乙醇稀釋至吸光度為0.68～0.72，此溶液即為ABTS+自由基工作液[6]。

分別取50 μL提取物與1 mL ABTS+自由基工作液混合，搖勻后于30 ℃下保存5 min，以乙醇為空白組，在734 nm下測定吸光度。根據(jù)以下公式計算樣品對ABTS自由基的清除率I：I=[(Ao-Ai)/Ao]×100%，式中Ao為未加入樣品時ABTS+溶液的吸光值，Ai為加入樣品時的吸光值[6]。平行操作三次，取平均值。

1.5.2 測定結果及分析

由表4可以看出，八月瓜籽油護膚霜和大寶SOD蜜清除DPPH自由基，ABTS自由基的能力均弱于陽性對照BHT。八月瓜籽油護膚霜具有清除DPPH自由基(IC50=38.50 mg/mL)和ABTS自由基能力(IC50=39.49 mg/mL)，其抗氧化活性稍弱于大寶SOD蜜。

表4 八月瓜籽油護膚霜與大寶SOD蜜抗氧化活性Table 4 Akebia trifoliata (Thunb)seed oil skin cream with antioxidant activity

1.6 產(chǎn)品性能測定和評價

1.6.1 產(chǎn)品感官和理化指標測試

按照行業(yè)標準QB/T 1857-2004《潤膚霜膏》的規(guī)定對試驗產(chǎn)品進行檢測試驗(表5)，結果表明八月瓜籽油護膚霜的質量指標較為符合行業(yè)標準(QB/T 1857-2004)。

表5 八月瓜籽油護膚霜的質量指標Table 5 Quality indicators ofAkebia trifoliata (Thunb)seed oil skin creams

1.6.2 產(chǎn)品安全性的測定

選擇30名皮膚健康，無化妝過敏史的志愿者，取0.2 g八月瓜籽油護膚霜樣品用濾紙浸潤后放入斑試器內，對照組為對照樣品。將八月瓜籽油護膚霜和對照樣品貼于受試者前臂曲側，持續(xù)24 h，去除斑貼30 min，待壓痕消失后觀察皮膚反應。試驗后24 h，48 h分別再觀察一次。試驗結果(表6)表明八月瓜籽油護膚霜和對照樣品對人體均無不良反應，說明八月瓜籽油制備護膚霜是安全的。

表6 人體皮膚斑貼試驗結果Table 6 The results of human skin patch test

2 結 論

通過單因素方法優(yōu)化不同水油比例以及不同的八月瓜籽油含量對八月瓜籽油護膚霜保濕性能影響，并按有關標準對八月瓜籽油護膚霜進行了性能測試和評價。在此工藝下八月瓜籽油護膚霜產(chǎn)品性能穩(wěn)定，對皮膚無刺激，安全性高，具有良好的補水保濕以及抗氧化能力。目前八月瓜種植面積在不斷擴大，但其籽油的綜合應用還處于起步階段，相信八月瓜籽油在化妝品中具有廣闊的應用前景。