李澤青　王晗　于海霞　竇廣躍　王鴻英　閆峻

摘? ? 要：為了研究浮萍不同添加比例對(duì)60～70周產(chǎn)蛋中后期蛋雞血液常規(guī)、血清生化和抗氧化指標(biāo)的等影響，采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，選擇2 000羽60周齡的產(chǎn)蛋中后期產(chǎn)蛋雞，分成4組，在基礎(chǔ)日糧中分別添加0%、3%、5%、7%浮萍，每組5個(gè)重復(fù)，每重復(fù)100羽蛋雞，試驗(yàn)期60 d。試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、血小板數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、膽固醇（CHO）進(jìn)行分析。結(jié)果表明：與對(duì)照組相比，添加適量的浮萍可以降低產(chǎn)蛋中后期蛋雞MDA、BUN、TG、CHO含量，以及白細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)，升高了紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、血小板數(shù)、TP含量和總抗氧化能力。綜上，蛋雞飼糧中添加適量浮萍能改善產(chǎn)蛋中后期蛋雞血液指標(biāo)，促進(jìn)機(jī)體代謝，提高機(jī)體抗氧化能力。

關(guān)鍵詞：浮萍；蛋雞；血液指標(biāo)

中圖分類(lèi)號(hào)：S816.7? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2023.S.010

Effects of Dietary Duckweed Supplementation with Different Proportions on Blood Indexes of Laying Hens

LI Zeqing1， WANG Han2， YU Haixia1， DOU Guangyue3， WANG Hongying1， YAN Jun2

（1.Tianjin Agricultural Development Service Center， Tianjin 300061， China; 2.Tianjin Key Laboratory of Animal Molecular Breeding and Biotechnology/Tianjin Engineering Research Center of? Animal Healthy Farming/Institute of Animal Science and Veterinary， Tianjin Academy of Agricultural Sciences， Tianjin 300381， China; 3.Agricultural and Rural Development Service Center of Tianjin Binhai New Area， Tianjin 300480， China）

Abstract： In order to study the effects of different addition ratios of duckweed on blood routine levels， serum biochemical parameters and antioxidant indexes of laying hens aged 60-70 weeks， single factor completely random design was used. A total of 2 000 laying hens aged 60 weeks were divided into 4 groups. Duckweed of 0%， 3%， 5%， and 7% was added to the basal diet with five replicates per group. The experiment lasted for 60 days per replicate of 100 laying hens. At the end of the experiment， leukocyte count， erythrocyte count， hemoglobin content， platelet count， lymphocyte count， malondialdehyde （MDA）， superoxide dismutase （SOD）， glutathione peroxidase （GSH-Px）， total antioxidant capacity （T-AOC）， total protein （TP）， albumin （ALB）， urea nitrogen （BUN）， creatinine （CRE）， uric acid （UA）， triglyceride （TG） and cholesterol （CHO） were analyzed. The results showed that compared with the control group， the contents of MDA， BUN， TG， CHO， leukocyte count and lymphocyte count of laying hens in the middle and later laying period were decreased， and erythrocyte count， hemoglobin content， platelet count， TP content and total antioxidant capacity of laying hens were increased after adding duckweed in the moderate amount. In conclusion， dietary duckweed supplementation can improve some blood indexes， promote metabolism and enhance antioxidant capacity of laying hens in the middle and later laying period.

Key words： duckweed; laying hens; blood index

隨著社會(huì)的快速發(fā)展，人們對(duì)食品安全的關(guān)注也不斷提升。長(zhǎng)期濫用抗生素而導(dǎo)致的細(xì)菌耐藥、藥物殘留、環(huán)境污染等問(wèn)題層出不窮，迫使畜牧業(yè)急需開(kāi)發(fā)一種安全高效、無(wú)殘留、不易產(chǎn)生耐藥性的天然綠色抗生素替代品。植物提取物是一類(lèi)來(lái)源于天然植物的活性物質(zhì)。眾多研究表明，在動(dòng)物飼料中添加單一或復(fù)合植物提取物對(duì)畜禽生長(zhǎng)發(fā)育及生產(chǎn)性能具有促進(jìn)作用，“營(yíng)養(yǎng)活性物質(zhì)組學(xué)”理論認(rèn)為，這可能是多種營(yíng)養(yǎng)活性物質(zhì)之間的協(xié)同作用。浮萍（Lemna minor L.），浮萍科水面浮生植物，各地均有種植，是一種優(yōu)質(zhì)的飼料、食物和藥用植物[1]。浮萍中的主要有效化學(xué)成分為芹菜素、木犀草素、葒草素、牡荊素[2-4]等，其在抗氧化、抗菌、抗寄生蟲(chóng)、免疫調(diào)節(jié)和促進(jìn)修復(fù)方面均有一定作用[5-9]。浮萍的次級(jí)代謝產(chǎn)物中包括異黃酮，是一類(lèi)豆科植物中的黃酮類(lèi)化合物。有研究表明，42日齡的公雞飼喂含異黃酮（10～80 mg·kg-1）的飼糧可顯著降低血漿中MDA含量，提高血漿T-AOC和SOD活性[10]。還有研究證明，經(jīng)芹菜素治療能夠明顯提高AD大鼠海馬組織SOD、GSH-Px活性并降低MDA含量，降低TNF-α、IL-1β、IL-6水平，提高Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)量[11]。但是，在產(chǎn)蛋中后期蛋雞飼糧中添加浮萍對(duì)蛋雞血清中酶和免疫因子的變化缺乏研究和探討。本試驗(yàn)通過(guò)在蛋雞飼糧中添加不同比例的浮萍，研究其對(duì)產(chǎn)蛋中后期蛋雞各種血液指標(biāo)的影響，以期為浮萍在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)使用的浮萍由華睿（天津）生態(tài)環(huán)境科技有限公司提供，風(fēng)干物采用粉碎機(jī)粉碎后過(guò)40目篩，避光干燥保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

按照一定比例（0%、3%、5%、7%）將浮萍添加到產(chǎn)蛋雞基礎(chǔ)飼糧中。試驗(yàn)選擇2 000羽60周齡的產(chǎn)蛋中后期產(chǎn)蛋雞作試驗(yàn)動(dòng)物，分為4組，每組500羽。其中，1組為對(duì)照組，其他3組為試驗(yàn)組。每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)分為5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100羽蛋雞。飼養(yǎng)試驗(yàn)過(guò)程包括預(yù)試驗(yàn)7 d，正式試驗(yàn)60 d。基礎(chǔ)飼糧為正常的商業(yè)飼糧，營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)組和對(duì)照組的蛋雞飼養(yǎng)在相同環(huán)境內(nèi)，每日上午、下午喂料2次。所有試驗(yàn)蛋雞自由采食、飲水，每日恒定光照16 h，溫度平均21 ℃，相對(duì)濕度為40%～55%，自然通風(fēng)。每日觀察雞群健康狀況、記錄死淘數(shù)，每日清糞、撿蛋各1次，保持雞舍內(nèi)的溫度和濕度，每日對(duì)雞舍通風(fēng)，按常規(guī)程序進(jìn)行雞只免疫和欄舍消毒。

1.4 血清指標(biāo)測(cè)定

試驗(yàn)第60天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取3只體質(zhì)量接近的健康蛋雞，自由飲水但空腹12 h，翅靜脈采血4 mL，其中2 mL血液加抗凝劑用于血常規(guī)指標(biāo)測(cè)定；另外2 mL血液靜置后，3 500 r·min-1離心10 min，分離血清樣品用于血清生化指標(biāo)測(cè)定。

抗凝血樣品使用全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行血常規(guī)指標(biāo)檢測(cè)，檢測(cè)指標(biāo)為：白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、血小板數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)。

血清樣品使用全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)測(cè)定，檢測(cè)指標(biāo)為：丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、膽固醇（CHO）。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

本研究數(shù)據(jù)采用Excel 2013軟件進(jìn)行整理，使用SPSS 24.0中單因素方差分析（one-way ANOVA）分析數(shù)據(jù)顯著性，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 浮萍對(duì)產(chǎn)蛋中后期蛋雞血常規(guī)的影響

如表2所述，與對(duì)照組相比，3%浮萍組白細(xì)胞數(shù)、血小板和淋巴細(xì)胞數(shù)顯著降低（P<0.05）；5%浮萍組白細(xì)胞數(shù)顯著降低（P<0.05）； 3%浮萍組、5%浮萍組、7%浮萍紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量有升高趨勢(shì)，但無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.2 浮萍對(duì)產(chǎn)蛋中后期蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

如表3所述，與對(duì)照組相比，3%浮萍組T-AOC、 TP和CRE水平顯著升高（P<0.05），MDA、BUN、TG和CHO水平顯著降低（P<0.05）；5%浮萍組T-AOC和CRE水平顯著升高（P<0.05），MDA、BUN、 UA、TG和CHO水平顯著降低（P<0.05）；7%浮萍組TG和CHO水平顯著升高（P<0.05），BUN和UA水平顯著降低（P<0.05）。各組別間血清中SOD和GSH-Px水平均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。

3 討論與結(jié)論

3.1 浮萍對(duì)產(chǎn)蛋中后期蛋雞血常規(guī)的影響

血液在促進(jìn)新陳代謝和維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)方面起著重要作用，其成分和含量的變化都可在一定程度上反映器官或組織的病理學(xué)改變[12]，因此血常規(guī)成為評(píng)價(jià)動(dòng)物健康與否的重要依據(jù)。白細(xì)胞被稱(chēng)為機(jī)體第一道防線(xiàn)，當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌侵襲或發(fā)生炎癥會(huì)刺激白細(xì)胞數(shù)量急劇增多[13]。紅細(xì)胞的主要功能是運(yùn)輸O2和CO2，此外還在酸堿平衡中起一定的緩沖作用。這2項(xiàng)功能都是通過(guò)紅細(xì)胞中的血紅蛋白來(lái)實(shí)現(xiàn)的。血小板的作用機(jī)制在于能夠發(fā)揮較強(qiáng)的黏附血管內(nèi)皮細(xì)胞的能力，負(fù)責(zé)機(jī)體凝血功能。本研究結(jié)果表明，隨著飼糧中浮萍添加比例的升高，蛋雞血清中白細(xì)胞數(shù)下降，紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量和血小板數(shù)升高，提示浮萍可能提高產(chǎn)蛋中后期蛋雞代謝水平和免疫水平。原因可能是浮萍中包含的活性物質(zhì)芹菜素具有抗紅細(xì)胞溶血的特性，亦或者是葒草苷和木犀草素對(duì)紅細(xì)胞自然老化的保護(hù)作用，具體原因仍需要進(jìn)一步研究。

3.2 浮萍對(duì)產(chǎn)蛋中后期蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)的變化可以反映動(dòng)物機(jī)體的物質(zhì)代謝水平。超氧化物歧化酶（SOD）是體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的第一道防線(xiàn)，它可以催化清除超氧陰離子自由基，使其發(fā)生歧化反應(yīng)生成H2O2和O2，從而去除活性氧，維持氧代謝的平衡，然后在谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）的作用下，清除由SOD產(chǎn)生的H2O2，把其轉(zhuǎn)化為對(duì)機(jī)體無(wú)害的水和氫氣，這些酶的活性可以反映自由基的清除能力。丙二醛（MDA）是自由基攻擊多不飽和脂肪酸引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化形成的終產(chǎn)物[14]?？偪寡趸芰Γ═-AOC）代表體內(nèi)酶類(lèi)和非酶類(lèi)抗氧化物的總體水平，是反映機(jī)體抗氧化作用的重要指標(biāo)。研究表明，浮萍中的主要有效化學(xué)成分芹菜素可抑制對(duì)乙酰氨基酚誘導(dǎo)的大鼠肝毒性中的脂質(zhì)過(guò)氧化水平，并顯著增加酶抗氧化防御機(jī)制[15]。本研究結(jié)果也顯示，在飼糧中添加浮萍可使血清中MDA含量下降，T-AOC升高，能夠增強(qiáng)產(chǎn)蛋中后期蛋雞抗氧化能力。

血清中的白蛋白（ALB）和總蛋白（TP）以及尿素氮（BUN）是動(dòng)物機(jī)體氮代謝相關(guān)指標(biāo)，在機(jī)體蛋白質(zhì)的合成、運(yùn)輸與代謝過(guò)程中起著不可或缺的作用。白蛋白（ALB）主要參與動(dòng)物機(jī)體組織修復(fù)和能量代謝，由肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成?？偟鞍祝═P）由白蛋白和球蛋白組成，具有維持血管內(nèi)膠體滲透壓和酸堿平衡的作用，與機(jī)體免疫力也有關(guān)聯(lián)。一般來(lái)說(shuō)，血清總蛋白、白蛋白含量升高提示肝臟蛋白質(zhì)合成能力增強(qiáng)[16]。血清尿素氮（BUN）經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)排出體外，腎小球受損后，濾過(guò)作用降低，會(huì)引起血清中尿素氮濃度升高。肌酐（CRE）是動(dòng)物肌肉代謝過(guò)程中的小分子物質(zhì)，主要經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)排出體外，因此，血清尿素氮（BUN）和肌酐（CRE）含量都是臨床評(píng)價(jià)腎功能的重要指標(biāo)[17]。尿酸（UA）是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)氨基酸或蛋白質(zhì)的最終代謝產(chǎn)物，機(jī)體UA含量越低，表明蛋白質(zhì)利用率越高。本研究結(jié)果表明，在飼糧中添加浮萍可提高血清總蛋白含量，降低尿素氮水平，增強(qiáng)產(chǎn)蛋中后期蛋雞生產(chǎn)性能，增加經(jīng)濟(jì)效益。

血清中的膽固醇（CHO）和甘油三酯（TG）的含量與蛋雞體內(nèi)脂質(zhì)代謝息息相關(guān)。膽固醇（CHO）和甘油三酯（TG）的含量越低，代表機(jī)體對(duì)脂質(zhì)的吸收代謝越好，利用率越高。前人研究表明飼糧中添加10 mg·kg-1大豆黃酮有降低產(chǎn)蛋雞血漿總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的作用[18]。本試驗(yàn)結(jié)果與以上結(jié)論一致，飼糧中添加3%、5%浮萍后降低了蛋雞血清中膽固醇和甘油三酯的含量，說(shuō)明添加3%～5%浮萍可以降低蛋雞血清中膽固醇和甘油三酯含量，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝。

綜上所述，蛋雞飼糧中添加浮萍能改善產(chǎn)蛋中后期蛋雞血液指標(biāo)，促進(jìn)機(jī)體代謝，提高機(jī)體抗氧化能力，研究結(jié)果可為進(jìn)一步研發(fā)新型飼料添加劑提供參考依據(jù)。

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收稿日期：2023-03-25

作者簡(jiǎn)介：李澤青（1983—），女，天津人，獸醫(yī)師，碩士，主要從事畜禽健康養(yǎng)殖技術(shù)推廣研究。

通訊作者簡(jiǎn)介：王鴻英（1970—），女，湖南寧鄉(xiāng)人，推廣研究員，碩士，主要從事生態(tài)健康養(yǎng)殖研究;

閆峻（1984—），江蘇徐州人，副研究員，博士，主要從事飼料資源開(kāi)發(fā)與評(píng)價(jià)、畜禽高效生產(chǎn)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控與優(yōu)質(zhì)風(fēng)味豬肉開(kāi)發(fā)研究。