◎ 曹青文
(杭州市食品藥品檢驗(yàn)研究院,浙江 杭州 310017)
蜂蜜是一種帶有芳香味的甜的天然食品,是蜜蜂采集花蜜或者分泌物,帶回蜂巢后,經(jīng)蜜囊中的葡萄糖氧化酶發(fā)酵數(shù)天后得到。蜂蜜的主要成分是果糖和葡萄糖,并含有維生素和微量元素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),具有潤(rùn)燥、緩解疲勞等功效,深受大眾喜愛(ài)。
溫飽已經(jīng)無(wú)法滿足當(dāng)代人對(duì)食品的要求,人們?cè)絹?lái)越重視食品的質(zhì)量安全。以往的蜂蜜標(biāo)準(zhǔn)只是衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),僅規(guī)定理化、微生物指標(biāo)的要求和檢驗(yàn)方法,以及食品添加劑和生產(chǎn)衛(wèi)生的要求。我國(guó)衛(wèi)生部于2011 年4 月20 日發(fā)布了《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 蜂蜜》(GB 14963—2011)[1],新標(biāo)準(zhǔn)最大的不同之處在于首次單獨(dú)列出農(nóng)藥殘留限量、污染物限量(如重金屬)、獸藥殘留限量。
農(nóng)藥殘留物指使用農(nóng)藥后出現(xiàn)在食品、農(nóng)產(chǎn)品和飼料中的某些有毒的農(nóng)藥衍生物,如農(nóng)藥代謝產(chǎn)物、轉(zhuǎn)化產(chǎn)物和雜質(zhì)等[2]。這些農(nóng)藥殘留物可能通過(guò)食物鏈或者環(huán)境等途徑進(jìn)入人體內(nèi),進(jìn)而威脅人體健康。農(nóng)藥對(duì)人產(chǎn)生的危害不容忽視,食用含有高劑量農(nóng)藥的食物會(huì)引起急性中毒,甚至死亡,長(zhǎng)期食用農(nóng)藥超標(biāo)的食品會(huì)使農(nóng)藥在人體內(nèi)積聚,可能引起慢性中毒[3]?;诖耍疚臄M探討蜂蜜農(nóng)藥殘留問(wèn)題。
中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所[4]曾調(diào)查過(guò)蜂蜜中農(nóng)藥殘留情況,并對(duì)其進(jìn)行相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,結(jié)果表明蜂蜜中農(nóng)藥殘留檢出率為2.8%,殘留水平較低。王東等[5]對(duì)我國(guó)某大型超市的多批次蜂蜜進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)30%蜂蜜樣品檢出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留(六六六、滴滴涕),其殘留量為20.4 ~219.1 μg·kg-1。柳菡等[6]檢測(cè)了市售50 批蜂蜜,檢出34%樣品中有多菌靈殘留,殘留水平為10.0 ~120.0 μg·kg-1。牛春鈴等[7]檢測(cè)了承德地區(qū)市售的蜂蜜,農(nóng)藥殘留檢出率為6%,檢出3 大類農(nóng)藥殘留物,分別為有機(jī)氯(α-六六六、七氯)、菊酯類(氯氰菊酯)、有機(jī)磷(百菌清),但殘留量均很低,未超過(guò)規(guī)定的最大殘留限量值。王英等[8]列表統(tǒng)計(jì)了檢測(cè)到的不同國(guó)家蜂蜜中殘留農(nóng)藥的種類、含量以及陽(yáng)性率,發(fā)現(xiàn)許多國(guó)家的蜂蜜樣品檢出雙甲脒,且檢出率居高不下,具有一定的參考意義。
國(guó)外對(duì)蜂蜜農(nóng)藥殘留的檢測(cè)研究相對(duì)較多,監(jiān)測(cè)范圍和檢測(cè)種類廣泛,檢出率較高。NTIRUSHIZE 等[9]利用氣相色譜ECD 檢測(cè)器對(duì)烏干達(dá)蜂蜜中有機(jī)氯農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè),38%樣品檢出硫丹硫酸鹽,21%樣品檢出六氯苯,17%樣品檢出滴滴涕及其代謝產(chǎn)物。尼日利亞高原州城鎮(zhèn)[10]的蜂蜜樣品檢出農(nóng)藥殘留,且含量高于歐盟建議的最大殘留限量,其中阿特拉津含量為0.01 ~0.36 mg·kg-1、氯氰菊酯為0.11 ~0.26 mg·kg-1。DARKO 等[11]在加納主要產(chǎn)蜜林地帶蜂蜜中檢出有機(jī)磷(樂(lè)果、二嗪農(nóng))、菊酯類(氯氟氰菊酯、氯氰菊酯)等農(nóng)藥,有機(jī)磷和菊酯類的平均濃度為0.02 mg·kg-1和0.04 mg·kg-1,所有檢測(cè)到的農(nóng)藥殘留量均遠(yuǎn)低于歐盟規(guī)定的各自最大殘留限量。王歡等[12]分析了《全球蜂蜜樣本中新煙堿農(nóng)藥殘留調(diào)查》,在全球198 種蜂蜜中,大部分蜂蜜至少含有1 種新煙堿類殺蟲(chóng)劑,近一半蜂蜜含有2 種及以上新煙堿類農(nóng)藥殘留,10%蜂蜜含有4 ~5 種同類農(nóng)藥。LAZARUS 等[13]對(duì)克羅地亞的61 批次蜂蜜(16 批次有機(jī)蜂蜜和45 批次傳統(tǒng)蜂蜜)進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè),在2 批次有機(jī)蜂蜜和34 批次傳統(tǒng)蜂蜜中檢出含有一或兩種人工合成的殺螨劑(蠅毒磷居多)。
國(guó)外對(duì)于蜂蜜中農(nóng)藥殘留量的研究不僅僅局限于其殘留濃度,還擴(kuò)大了研究范圍,從根源上開(kāi)展分析。多年前,有專家調(diào)查發(fā)現(xiàn)菲律賓蜜蜂死亡源于農(nóng)藥中毒[14],隨后有學(xué)者研究了不同殺蟲(chóng)劑的毒性及其造成蜂蜜中毒的癥狀[15]。世界農(nóng)化網(wǎng)曾報(bào)道,歐洲食品安全局對(duì)蜂蜜農(nóng)藥殘留的研究對(duì)象延伸至花粉和花蜜,檢測(cè)蜜源中農(nóng)藥的殘留量,蜂產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的變化量很大,表明殺蟲(chóng)劑的使用會(huì)直接影響蜂蜜等產(chǎn)品的質(zhì)量。FRIEDLE[16]研究了德國(guó)南部集約農(nóng)業(yè)區(qū)蜂花粉樣品的農(nóng)藥殘留情況。由此可見(jiàn),對(duì)蜜蜂死亡原因和蜜源植物中農(nóng)藥殘留的研究也是極為重要的一部分。
食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[17]是指評(píng)估可能對(duì)人體健康造成不良影響的食品及食品添加劑的安全風(fēng)險(xiǎn)性,具體步驟有危害識(shí)別及特征描述、暴露評(píng)估等。其中,暴露評(píng)估[18]是對(duì)經(jīng)食品及其他途徑攝入的各類危害性因素進(jìn)行性質(zhì)或量化評(píng)估,是食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的重要環(huán)節(jié)。
YAQUB 等[19]通過(guò)計(jì)算蜂蜜中農(nóng)藥殘留的目標(biāo)危害商和健康風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)確定風(fēng)險(xiǎn)。WILMART 等[20]選擇了歐洲22 種檢測(cè)出農(nóng)獸藥殘留的蜂蠟進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)暴露評(píng)估,以確保蜜蜂健康。溫小琳[21]采用危害熵值和BeeRex 法,對(duì)油菜花粉和花蜜樣品中檢出的52 種農(nóng)藥殘留物進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,發(fā)現(xiàn)啶蟲(chóng)脒、毒死蜱、草甘膦3 種農(nóng)藥對(duì)意大利蜜蜂影響較大。譚陽(yáng)等[22]評(píng)估了我國(guó)西北地區(qū)油菜蜜、洋槐蜜等4 種蜂蜜中的啶蟲(chóng)脒、吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪、多菌靈和克螨特5 種農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)暴露情況,殘留風(fēng)險(xiǎn)較低,可以接受,但對(duì)于10 歲以下兒童的膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)較高。宋梓豪[23]對(duì)21 個(gè)省區(qū)190 份蜂蜜樣品和70 種蜂花粉樣品進(jìn)行農(nóng)藥殘留水平監(jiān)測(cè),并采用危害熵值(Hazard Quotient,HQ)法和風(fēng)險(xiǎn)熵值(Risk Quotient,RQ)法分別評(píng)估蜂蜜、蜂花粉中的農(nóng)藥殘留對(duì)蜜蜂和人體健康產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn),計(jì)算累積危害熵值,在檢出的8 種農(nóng)藥中,長(zhǎng)期膳食風(fēng)險(xiǎn)最高的是氧樂(lè)果,而短期膳食風(fēng)險(xiǎn)較高的是毒死蜱,長(zhǎng)、短期膳食風(fēng)險(xiǎn)均較高的是樂(lè)果和氟胺氰菊酯。
蜜源植物的污染是蜂蜜農(nóng)藥殘留的主要原因,以殺蟲(chóng)劑、殺螨劑居多。人們食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的蜂蜜會(huì)影響健康,殺蟲(chóng)劑具有相當(dāng)?shù)亩拘裕瑪z入后可能會(huì)對(duì)人體造成皮膚刺激、神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)、內(nèi)分泌紊亂和致癌等各種傷害。例如,有機(jī)氯類農(nóng)藥會(huì)抑制人體內(nèi)肌醇代謝,刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮,損傷器官。殺螨劑雖然毒性相對(duì)較低,且在一定時(shí)間后會(huì)降解,但它會(huì)使人出現(xiàn)頭暈頭痛、惡心嘔吐等癥狀。因此,有必要制定農(nóng)藥的最大殘留限量。
《蜂蜜農(nóng)藥殘留限量(一)》(NY/T 1243—2006)對(duì)氟胺氰菊酯、氟氯苯氰菊酯、溴螨酯3 種農(nóng)藥殘留限量進(jìn)行了規(guī)定;《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》(GB 31650—2019)規(guī)定了蜂蜜中雙甲脒及其代謝物的限量;《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告 第250 號(hào)》發(fā)布了《食品動(dòng)物中禁止使用的藥品及其他化合物清單》,規(guī)定了蜂蜜中汞制劑、毒殺芬、呋喃丹、林丹、殺蟲(chóng)脒和五氯酚酸鈉6 種農(nóng)藥的殘留限量均為不得檢出?!斗涿邸罚℅H/T 18796—2012)和《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》(GB 2763—2021)均暫無(wú)蜂蜜中農(nóng)藥殘留的限量規(guī)定。
不同國(guó)家的蜂蜜農(nóng)藥殘留限量要求各不相同。日本“肯定列表制度”中規(guī)定蜂蜜中敵百蟲(chóng)最大殘留限量為0.004 mg·kg-1,敵敵畏和蠅毒磷最大殘留限量為0.01 mg·kg-1,多菌靈為0.007 mg·kg-1。歐盟委員會(huì)在2022 年發(fā)布(EU)2022/93 號(hào)條例,修訂蜂蜜和其他養(yǎng)蜂產(chǎn)品中氟丙菊、氟胺氰菊酯、滅菌丹、異丙噻菌胺和乙基多殺菌素5 種農(nóng)藥的最大殘留限量為0.05 mg·kg-1, 螺 蟲(chóng) 乙 酯 為0.5 mg·kg-1;(EU)2022/1290 號(hào)條例修訂蜂產(chǎn)品中唑嘧菌胺的最大殘留限量由原來(lái)的0.05 mg·kg-1提高至5 mg·kg-1,還規(guī)定多菌靈[24]最大殘留限量為1.0 mg·kg-1,雙甲脒及其代謝物則為0.2 mg·kg-1。美國(guó)對(duì)蜂蜜中雙甲脒、蠅毒磷、氟胺氰菊酯的最大殘留量要求分別是1 mg·kg-1、0.1 mg·kg-1、0.05 mg·kg-1。加拿大規(guī)定蜂蜜中雙甲脒及其代謝物殘留量不得超過(guò)0.1 mg·kg-1。俄羅斯[25]只要求蜂蜜中六六六(α、β、γ-異構(gòu)體)、DDT 及其代謝物兩項(xiàng)農(nóng)藥殘留不得超過(guò)0.005 mg·kg-1。
比較國(guó)內(nèi)外蜂蜜農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)情況,可明顯看出差距,我國(guó)關(guān)于蜂蜜中農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)較少,存在較大空白區(qū)域,而日本、美國(guó)、歐盟一直在研究制定和更新相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),且歐洲食品安全局在2018 年9月發(fā)布了《田間監(jiān)督試驗(yàn)技術(shù)指南》(SANTE/11956/2016 rev.9),以確定農(nóng)藥殘留水平并設(shè)定蜂蜜中的最大殘留限量。
我國(guó)目前關(guān)于農(nóng)藥殘留檢測(cè)的相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)有GB 23200 系列、進(jìn)出口標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)等,適用范圍涵蓋食品(包括進(jìn)出口食品)、糧谷、飼料等,而蜂蜜中農(nóng)藥殘留的現(xiàn)行檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)并不多(見(jiàn)表1),其中國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)家推薦性標(biāo)準(zhǔn)數(shù)量相當(dāng),檢測(cè)類別主要覆蓋有機(jī)磷類、大環(huán)內(nèi)酯類、甲脒類和菊酯類,唯獨(dú)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 蜂蜜、果汁和果酒中497 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法》(GB 23200.7—2016)覆蓋范圍最廣,囊括了497 種農(nóng)藥。在現(xiàn)行檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中,使用的檢測(cè)方法有液相色譜法、氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法,各農(nóng)藥檢出限含量均在0.1 mg·kg-1以下,處于微量級(jí)別,且氟胺氰菊酯的檢測(cè)靈敏度在5 年內(nèi)提高了10 倍。NY/T 1243—2006 制定了限量標(biāo)準(zhǔn)并指定了檢驗(yàn)方法,但氟氯苯氰菊酯只有限量標(biāo)準(zhǔn),無(wú)現(xiàn)行有效的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。廖海燕[26]已對(duì)我國(guó)蜂蜜中農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)的現(xiàn)狀和存在的問(wèn)題進(jìn)行了探究分析,并提出了相關(guān)建議。由此可見(jiàn),我國(guó)關(guān)于蜂蜜農(nóng)藥殘留的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)在逐漸更新,限量標(biāo)準(zhǔn)的更新有待加速。
表1 我國(guó)現(xiàn)行蜂蜜中農(nóng)藥殘留相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及殘留限量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定表
農(nóng)藥殘留檢測(cè)常用氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法,檢測(cè)農(nóng)藥組分由原先的單一組分發(fā)展到多組分(有的可達(dá)到幾百種)。李燕妹[27]建立氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法測(cè)定蜂蜜中馬拉硫磷、毒死蜱等15 種農(nóng)藥殘留。樊艷等[28]采用氣相色譜-質(zhì)譜建立蜂蜜中殺硫磷等20 種農(nóng)藥殘留的多組分快速檢測(cè)方法。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用被應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)。王仁德等[29]采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀建立同時(shí)測(cè)定蜂蜜中多菌靈等10 種農(nóng)藥殘留的方法。為了進(jìn)一步提高檢測(cè)方法的靈敏度和準(zhǔn)確度,高分辨質(zhì)譜也應(yīng)用在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中。王思威等[30]利用高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜(High Performance Liquid Chromatography Quadrupole Time Of Flight Mass Spectrometry,HPLC-Q-TOF-MS)建立了蜂蜜中農(nóng)藥殘留的快速篩查方法。HPLC-QTOF-MS 不僅具有快速采集、高分辨率、高質(zhì)量精度的優(yōu)勢(shì),還能有效避免樣品假陽(yáng)性和假陰性情況的出現(xiàn)。何麗君等[31]采用超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜測(cè)定蜂蜜中三嗪類農(nóng)藥殘留。葛學(xué)峰等[32]利用腐霉利的熒光特性,采用熒光光譜法測(cè)定蜂蜜中殘留的腐霉利含量。綜上所述,蜂蜜中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法在不斷推陳出新,使相關(guān)人員具有更多的選擇。
QuEChERS 法[33]是農(nóng)藥殘留樣品前處理中最常見(jiàn)的方法,具有操作簡(jiǎn)便、快速、成本低等優(yōu)點(diǎn),被廣泛用于蜂蜜農(nóng)藥殘留檢測(cè)。酈殷浙等[34]介紹了蜂蜜農(nóng)藥殘留檢測(cè)中一滴溶劑萃取等6 種前處理方法。徐豪等[35]介紹了分析蜂蜜農(nóng)藥殘留情況的分散液液微萃取技術(shù),該技術(shù)不僅操作簡(jiǎn)便,而且具有高靈敏度和良好選擇性,適用于復(fù)雜基質(zhì)痕量物質(zhì)的提取和富集,目前已廣泛應(yīng)用。
近年來(lái),國(guó)內(nèi)外涌現(xiàn)了不少新方法。鄭劍峰等[36]通過(guò)優(yōu)化分散固相萃取凈化成分比例等前處理步驟,開(kāi)發(fā)出蜂蜜中上百種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法。孟冬等[37]采用可視化微陣列蛋白芯片技術(shù),利用抗體間接競(jìng)爭(zhēng)免疫,同時(shí)檢測(cè)蜂蜜中多菌靈、啶蟲(chóng)脒、蠅毒磷3 種農(nóng)藥殘留含量,不僅使檢測(cè)成本下降,而且檢測(cè)效率也得到提升。呂冰等[38]改進(jìn)QuEChERS 法,用鹽析輔助液液萃取-交聯(lián)聚維酮技術(shù)替代分散固相萃取技術(shù)進(jìn)行提取凈化,對(duì)蜂蜜中的新煙堿類農(nóng)藥進(jìn)行殘留量檢測(cè)。MOHEBBI 等[39]采用預(yù)濃縮技術(shù)測(cè)定蜂蜜樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留,先將目標(biāo)物吸附在C18上,用環(huán)己胺洗脫,再將洗脫液與0 ℃水混合,通過(guò)提高溫度收集蒸汽液滴進(jìn)行測(cè)定。劉宇楠[40]采用碳納米纖維液相納萃取技術(shù),主要根據(jù)不同物質(zhì)間理化性質(zhì)的差異,萃取特定的目標(biāo)物,短時(shí)間內(nèi)即可完成萃取過(guò)程,節(jié)省時(shí)間。
伴隨著大眾對(duì)食品安全的關(guān)注度越來(lái)越高,快速檢測(cè)技術(shù)備受矚目。郭艷國(guó)等[41]概述了目前農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)使用的方法,有光譜法、酶抑制法、質(zhì)譜快速檢測(cè)法和免疫分析法等。現(xiàn)有農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法的適用范圍較窄,以水果、蔬菜為主。聶新明等[42]采用銀納米棒SERS 陣列技術(shù),利用拉曼光譜儀,在20 min 內(nèi)便能出結(jié)果,這對(duì)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)很有意義。許晶冰等[43]提出將快檢技術(shù)中的酶抑制率法與微流控技術(shù)相結(jié)合,能大大提高酶抑制率法結(jié)果的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。
我國(guó)蜂蜜中農(nóng)藥殘留水平低,但并不意味蜂蜜的農(nóng)藥殘留沒(méi)有風(fēng)險(xiǎn)。農(nóng)藥殘留不可避免,需要認(rèn)真思考如何保證蜂蜜中農(nóng)藥殘留的安全性。國(guó)外對(duì)于蜂蜜中農(nóng)藥殘留的研究已不僅僅是監(jiān)測(cè)其殘留量和開(kāi)發(fā)新型檢測(cè)方法,而是從田間種植上建立風(fēng)險(xiǎn)暴露評(píng)估水平,據(jù)此制定最大殘留限量。我國(guó)蜂蜜產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)雖已更新,農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法應(yīng)用也比較多,但其限量標(biāo)準(zhǔn)及檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)還相對(duì)滯后,亟須更新,蜂蜜農(nóng)藥殘留的快檢技術(shù)亦有較大發(fā)展空間。蜂蜜農(nóng)藥殘留檢測(cè)類別可參考國(guó)外現(xiàn)有監(jiān)測(cè)指標(biāo),但也要根據(jù)實(shí)際養(yǎng)蜂情況,因地制宜,關(guān)注養(yǎng)蜂飼料、蜂病以及蜂蜜采花粉的花種植過(guò)程中可能用到的農(nóng)藥。同時(shí),需要構(gòu)建蜂蜜農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估體系,培養(yǎng)養(yǎng)蜂者的專業(yè)素養(yǎng),從源頭上確保不受污染,從而保證蜂蜜的安全性。