段元紅，張曉婉，袁敏，李向陽

甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽含量的兩種檢測(cè)方法

段元紅，張曉婉，袁敏，李向陽

（山東省農(nóng)藥檢定所，山東 濟(jì)南 250100）

采用兩種不同的高效液相色譜法對(duì)8種不同農(nóng)藥產(chǎn)品中的甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽含量進(jìn)行了分析測(cè)定，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行了比較分析，確定了各方法的優(yōu)缺點(diǎn)。兩種方法互為補(bǔ)充，可滿足實(shí)驗(yàn)室中絕大多數(shù)農(nóng)藥產(chǎn)品中甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽的含量測(cè)定。

甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽；高效液相色譜法；含量測(cè)定

甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（Emamectin benzoate，以下簡(jiǎn)稱甲維鹽）是基于阿維菌素衍生的一種新型半合成抗生素殺蟲劑，具有低毒、高效、廣譜等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于蔬果、糧食、經(jīng)濟(jì)作物等害蟲的防治［1］。

隨著人類環(huán)保意識(shí)的增強(qiáng)，低毒、低殘留的農(nóng)藥越來越受到市場(chǎng)的青睞。甲維鹽以其綠色環(huán)保的特點(diǎn)在市場(chǎng)的占有率越來越高。關(guān)于甲維鹽的配方研究也是層出不窮［2-4］。目前，絕大多數(shù)國(guó)內(nèi)農(nóng)藥生產(chǎn)廠家都有劑型不同、含量不同、配方不同的甲維鹽系列產(chǎn)品在生產(chǎn)。

為了能更好的監(jiān)督市場(chǎng)上的甲維鹽產(chǎn)品質(zhì)量，國(guó)家在2006年就制定了甲維鹽原藥及乳油的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)［5-6］，并在2019年、2020年又制定了新標(biāo)準(zhǔn)［7-8］。國(guó)內(nèi)外也有許多對(duì)不同劑型的甲維鹽單劑、復(fù)配制劑檢測(cè)方法的研究報(bào)道［9-14］。但每一種檢測(cè)方法都有其局限性，并不能適用于所有甲維鹽產(chǎn)品。通過多年來實(shí)驗(yàn)室對(duì)甲維鹽產(chǎn)品的分析檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)，本文選取介紹了2種甲維鹽高效液相色譜分析法，對(duì)8種農(nóng)藥產(chǎn)品中的甲維鹽含量進(jìn)行了測(cè)定，經(jīng)過對(duì)檢測(cè)結(jié)果的分析比較，發(fā)現(xiàn)此2種方法互為補(bǔ)充，可適用于絕大多數(shù)甲維鹽產(chǎn)品。

1 試驗(yàn)部分

1.1 主要試劑

甲醇；色譜純；乙腈：色譜純；水：高純水；氨水：分析純；三乙胺：分析純；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽標(biāo)樣≥98.0%；

5.7%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑（樣品a）；

12%甲維·蟲螨腈懸浮劑：甲維鹽含量2.0%（樣品b）。

1.1%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽乳油（樣品c）；

4.3%高氯·甲維鹽乳油：甲維鹽含量0.10%（樣品d）。

5.7%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑（樣品e）。

5%甲維·氟鈴脲水分散粒劑：甲維鹽含量1.0%（樣品f）。

0.57%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳劑（樣品g）。

30%甲維·殺蟲單微乳劑：甲維鹽含量0.50%（樣品h）。

1.2 主要儀器

島津LC-20AT高效液相色譜儀（日本島津公司）；分析天平（德國(guó)賽多利斯公司）；Durashell C18 250 mm×4.6 mm（i.d.）、5μm不銹鋼色譜柱（天津博納艾杰爾科技有限公司）；0.22μm濾膜（賽默飛世爾科技公司）；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.3 高效液相色譜操作條件

1.3.1 方法一

此方法參照的是，全國(guó)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)制定的甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽原藥的檢測(cè)方法（GB 20693-2020)。

流動(dòng)相：甲醇∶乙腈∶氨水溶液=35∶50∶15（體積比)(氨水溶液為水∶氨水=300∶1）；流速：1.0 mL/min；柱溫：35 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm；進(jìn)樣量：5μL。

1.3.2 方法二

此方法參照的是，國(guó)內(nèi)某農(nóng)藥企業(yè)制定的1%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽微乳劑的檢測(cè)方法。

流動(dòng)相：乙腈∶水∶甲醇∶三乙胺=479∶33.3∶2∶0.1(體積比); 流速：0.7 mL/min；柱溫：35 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm；進(jìn)樣量：5μL。

1.4 溶液的制備

稱取甲維鹽標(biāo)樣0.02 g（精確至0.000 2 g）及含有甲維鹽約0.02 g（精確至0.000 2 g）的試樣，分別置于兩個(gè)50 mL容量瓶中，加入5 mL甲醇溶解，超聲振蕩5 min，冷卻至室溫后，加入甲醇定容至刻度，用0.22μm濾膜過濾，備用。

1.5 測(cè)定與計(jì)算

在各自方法的操作條件下，待基線顯示平穩(wěn)后，接連注入多針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針響應(yīng)值的重復(fù)性，直至相鄰2針的響應(yīng)值相對(duì)變化＜1.2%后，依次對(duì)標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液進(jìn)行測(cè)定分析。

將測(cè)得的2針試樣溶液及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中甲維鹽的峰面積分別進(jìn)行平均，按下式計(jì)算其質(zhì)量分?jǐn)?shù)：

式中：1—標(biāo)樣溶液中甲維鹽的峰面積；

2—試樣溶液中甲維鹽的峰面積；

1—標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

2—試樣的質(zhì)量，g；

—標(biāo)樣中甲維鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 方法一對(duì)8種樣品的檢測(cè)結(jié)果

采用方法一對(duì)8種樣品中的甲維鹽含量進(jìn)行檢測(cè)，典型色譜圖見圖1、圖2，具體檢測(cè)結(jié)果見表1。

圖1 方法一中甲維鹽標(biāo)樣的典型液相色譜圖

從圖1、圖2與表1中可以看出，樣品a、b、c、d、e、f、h中甲維鹽的色譜峰與雜質(zhì)峰能很好地分離，且檢測(cè)結(jié)果與標(biāo)示值也基本一致；樣品g中甲維鹽B1b色譜峰與一雜質(zhì)峰相離較近，通過減小流動(dòng)相流速，兩峰可較好地分離，檢測(cè)結(jié)果與標(biāo)示值也無較大差別，但相應(yīng)的分析時(shí)間會(huì)延長(zhǎng)。

圖2 方法一中甲維鹽樣品的典型液相色譜圖

表1 方法一中甲維鹽含量測(cè)定結(jié)果表

2.2 方法二對(duì)8種樣品的檢測(cè)結(jié)果

采用方法二對(duì)8種樣品中的甲維鹽含量進(jìn)行檢測(cè)，典型色譜圖見圖3、圖4，具體檢測(cè)結(jié)果見表2。

圖3 方法二中甲維鹽標(biāo)樣的典型液相色譜圖

圖4 方法二中甲維鹽標(biāo)樣的典型液相色譜圖

表2 方法二中甲維鹽含量測(cè)定結(jié)果表

從圖3、圖4與表2中可以看出，樣品a、b、c、d、e、f、g、h中甲維鹽的色譜峰與雜質(zhì)峰均能較好地分離，且檢測(cè)結(jié)果與標(biāo)示值也基本一致。

3 結(jié) 論

兩種方法精密度均較高，都能滿足分析要求，且各有其優(yōu)缺點(diǎn)：氨水與三乙胺在甲維鹽的色譜分析中主要是用作改性劑，氨水易溶于水、易揮發(fā)，對(duì)色譜柱影響較小，而三乙胺微溶于水，容易在色譜柱中殘留、縮短色譜柱壽命，且三乙胺易燃、易爆；方法二中甲維鹽保留時(shí)間比方法一中甲維鹽保留時(shí)間相對(duì)較短，可提高分析效率；方法一中用到的溶劑主要是甲醇，方法二中用到的溶劑主要是乙腈，對(duì)于成本來說，方法一相對(duì)較低；方法一與方法二中雜質(zhì)峰的保留時(shí)間有很大差別，對(duì)于某些特殊樣品，尤其是甲維鹽含量較小的樣品，雜質(zhì)峰較多，當(dāng)一種方法行不通時(shí)，完全可考慮另一種方法，以便甲維鹽色譜峰與雜質(zhì)峰較好分離、提高含量分析的準(zhǔn)確率。

［1］張焱.三種甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽制劑配方的研制及應(yīng)用性能研究[D].揚(yáng)州大學(xué)，2021

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［4］張彥輝,馬超,趙宜君,等.12%甲維鹽·蟲螨腈懸浮劑的研制[J].農(nóng)藥,2021,60(7):1006-0413.

［5］全國(guó)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì). GB 20693—2006甲氨基阿維菌素原藥[S].

［6］全國(guó)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì). GB 20694—2006甲氨基阿維菌素乳油[S].

［7］全國(guó)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì). GB 20693—2020甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽原藥[S].

［8］全國(guó)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì). GB 20694—2019甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽乳油[S].

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Two Methods for Determination of Emamectin Benzoate

,

（Institute for the Control of Agrochemicals of Shandong, Jinan Shandong 250100, China）

The content of emamectin benzoate in 8 different pesticide products was determined by two different HPLC, and the results were compared to determine the advantages and disadvantages of each method. The results showed that the two methods were complementary to each other and could be used for the determination of emamectin benzoate in most pesticide products in laboratory.

Emamectin benzoate; HPLC; Content determination

TQ450.7

A

1004-0935（2023）09-1402-03

2023-02-08

段元紅（1986-），女，山東省濟(jì)南市人，工程師，碩士，2012年畢業(yè)于大連理工大學(xué)化學(xué)工程專業(yè)，研究方向：農(nóng)藥質(zhì)量分析檢測(cè)。