倪興維，馬衛(wèi)紅，張 霞，陳啟青，徐婷婷，李照偉，劉 霞*

(1.貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 貴陽 550000；2.惠水縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 黔南州 550600)

雞傳染性支氣管炎(avian infectious bronchitis，IB)是由冠狀病毒科、冠狀病毒屬雞傳染性支氣管炎病毒(avian infectious bronchitis virus，IBV)引起雞的一種急性、高度接觸性傳染病[1]。IBV 可感染不同品種、不同年齡的雞，尤其是雛雞和蛋雞，且癥狀較為明顯。IB 冬季發(fā)病率較高，感染后可侵害雞呼吸道、腎臟、生殖道等組織器官，主要發(fā)病特征為發(fā)病雞出現(xiàn)打噴嚏、啰音、流鼻涕等呼吸道癥狀。肉雞生長受阻，耗料增加，生產(chǎn)性能下降；蛋雞出現(xiàn)產(chǎn)蛋量降低、蛋品質(zhì)下降；雛雞出現(xiàn)死亡，但死亡率一般較低。IB 在我國甚至全世界廣泛流行，被我國列為三類動(dòng)物疫病，嚴(yán)重危害我國養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展。本次雞場流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，某肉雞場雞群有啰音、喘氣音等異常情況，采集該雞場部分雞的咽拭子和肛拭子進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷，以期為規(guī)模化雞場疫病防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 樣本來源

無菌采集貴州省某肉雞場(存欄肉雞1 500 羽) 本地土雜肉雞咽拭子和肛拭子共45 份，用冰盒運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，－20 ℃冰箱備用。

1.1.2 試驗(yàn)試劑

禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：20220501)、禽傳染性喉氣管炎病毒(AILTV)核酸檢測試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：20220601)、禽腺病毒(FADV)核酸檢測試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：20220601)、禽傳染性法氏囊炎病毒(IBDV)核酸檢測試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：20220601)均購于武漢科前生物股份有限公司；禽流感病毒H5 亞型檢測試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：2022021801)、禽流感病毒H7 亞型檢測試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：2022011602)、新城疫病毒檢測試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：2022012501)均購自深圳真瑞有限公司；核酸提取試劑盒購自西安天隆科技有限公司。

1.1.3 試驗(yàn)主要儀器

全自動(dòng)核酸提取儀NP968-C 購自西安天隆科技有限公司；熒光定量PCR 儀購自塞默飛世爾科技公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 流行病學(xué)調(diào)查

對該肉雞場的疫苗免疫情況、發(fā)病情況、臨床癥狀及藥物治療情況進(jìn)行調(diào)查，并記錄調(diào)查結(jié)果。

1.2.2 病理剖檢

選擇部分病死或臨床癥狀明顯的肉雞進(jìn)行剖檢觀察，并記錄剖檢結(jié)果。

1.2.3 熒光定量PCR 檢測

按照試劑盒說明書提取樣本核酸，并進(jìn)行禽傳染性支氣管炎病毒、禽傳染性喉氣管炎病毒、禽腺病毒、禽傳染性法氏囊炎病毒、禽流感病毒H5 亞型、禽流感病毒H7 亞型、新城疫病毒的病原檢測，并記錄檢測結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 疫苗接種及發(fā)病情況

該雞場在每年春季和秋季接種兩次重組禽流感病毒滅活疫苗和雞新城疫弱毒疫苗，常規(guī)驅(qū)蟲。雞群未有明顯發(fā)病情況，偶有數(shù)羽肉雞出現(xiàn)啰音、喘氣音、呼吸困難等情況。

2.2 臨床癥狀

疑似發(fā)病雞臨床癥狀為氣管啰音、喘氣音，偶有肉雞打噴嚏，呼吸困難，排白色稀糞。

2.3 解剖病理變化

對可疑發(fā)病雞進(jìn)行解剖，在鼻腔、氣管、支氣管內(nèi)可見淡黃色且半透明的漿液性或黏液性滲出物；腎臟變化不明顯。

2.4 熒光定量PCR 檢測

45 份棉拭子樣本中檢測出33 份禽傳染性支氣管炎病毒核酸陽性，陽性率為73%(圖1)，禽傳染性法氏囊炎病毒、禽腺病毒、禽傳染性喉氣管炎病毒、禽流感病毒H5 亞型、禽流感病毒H7 亞型、新城疫病毒熒光PCR 檢測結(jié)果均為核酸陰性，未檢測到相關(guān)病毒核酸。

3 小結(jié)

根據(jù)臨床癥狀和解剖病理變化觀察，以及熒光定量PCR 檢測結(jié)果，初步證實(shí)為禽傳染性支氣管炎病毒的感染。

4 討論

4.1 傳染性支氣管炎的分型及危害

雞傳染性支氣管炎僅發(fā)生于雞，不感染其他家禽，各種年齡的雞均可發(fā)病，但雛雞最為嚴(yán)重。該病的傳染源是發(fā)病雞和帶毒的雞，主要通過飛沫吸入呼吸道傳染，也可通過飼料、飲水經(jīng)消化道傳染。發(fā)病雞康復(fù)后35 d 內(nèi)仍具有傳染性。李彬等[2]對2019—2021年我國29 個(gè)省級行政區(qū)雞傳染性支氣管炎流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)其陽性率高達(dá)16.7%，說明IB 在我國雞場廣泛流行。

根據(jù)臨床癥狀和病理變化，雞傳染性支氣管炎分為呼吸型、輸卵管型、腎型、腺胃型4 種類型，其中呼吸型最為常見。呼吸型以鼻道或竇中有漿液性、卡他性或干酪樣滲出物，氣管后段或支氣管可見干酪樣栓子，呼吸時(shí)發(fā)出“咕?！币魹橹?；輸卵管型以蛋雞卵泡變形或出血，輸卵管發(fā)育不全，產(chǎn)蛋雞腹腔中有卵黃液為主；腎型以排白色糞便，雞冠發(fā)紺，腎蒼白、腫大，表面有石灰樣物質(zhì)為主；腺胃型表現(xiàn)為食欲下降，精神不佳，有些發(fā)病雞的腺胃腫脹、出血，腸道有炎癥或出血[3]。根據(jù)臨床癥狀和病理變化，該雞場發(fā)病雞符合呼吸型IB 特征。感染IB 后，病毒主要存在于發(fā)病雞呼吸道滲出物中，肝、脾、腎和法氏囊也能發(fā)現(xiàn)IBV[4]，IB 無法根治，發(fā)病雞、康復(fù)不久的雞、無癥狀的雞都會(huì)長期排毒，形成雞場持續(xù)性感染，這是該病防控的難點(diǎn)。肉雞感染IBV，導(dǎo)致其生長遲緩，生產(chǎn)性能下降；蛋雞感染后則卵泡發(fā)育異常，輸卵管病變，導(dǎo)致產(chǎn)蛋量和蛋品質(zhì)下降；雛雞感染后成活率降低。雞場一旦有雞群感染IBV，將是一場持續(xù)的疫病抗?fàn)幭膽?zhàn)，因此雞場檢測出陽性的雞應(yīng)立即進(jìn)行淘汰處理。

4.2 雞傳染性支氣管炎的診斷

根據(jù)IB 的4 種類型臨床癥狀和病理解剖特點(diǎn)進(jìn)行疑似判斷，確診需要實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步診斷。從臨床癥狀和病理解剖特點(diǎn)進(jìn)行疑似判斷容易與傳染性喉氣管炎、禽流感、新城疫、禽腺病毒病等混淆。根據(jù)雞傳染性支氣管炎診斷技術(shù)(GB/T 23197-2022) 可進(jìn)行病毒RT-PCR檢測、病毒實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR 檢測、病毒基因型鑒定，若有一種方法檢測為陽性，則判斷為IBV 陽性，血凝及血凝抑制試驗(yàn)、血清中和試驗(yàn)可作為補(bǔ)充試驗(yàn)。熒光定量PCR 等分子生物學(xué)檢測方法，具有方便、省時(shí)、特異性強(qiáng)和敏感性高等優(yōu)點(diǎn)。本試驗(yàn)采取了病毒實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR 檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雞群中傳染性支氣管炎病毒核酸陽性率高達(dá)73%，禽傳染性法氏囊炎病毒、禽腺病毒、禽傳染性喉氣管炎病毒、禽流感病毒H5 亞型、禽流感病毒H7 亞型、新城疫病毒熒光定量PCR 檢測均為核酸陰性，結(jié)合發(fā)病雞的臨床癥狀和病理變化最后確診該雞場感染IBV。

4.3 傳染性支氣管炎的防治及免疫

IB 目前尚無特效治療藥物，以預(yù)防為主。一是引進(jìn)無傳染性支氣管炎疫情雞場的雞苗，防止將IBV 帶入雞場內(nèi)。二是做好飼養(yǎng)管理工作，及時(shí)清掃雞糞，注意雞舍的通風(fēng)換氣，減少雞舍溫差、噪聲等應(yīng)激刺激，規(guī)劃合理的飼養(yǎng)密度，雛雞日糧中適當(dāng)添加維生素和礦物質(zhì)，提高雞的免疫力。該雞場飼養(yǎng)方式為平地散養(yǎng)，且未嚴(yán)格按照“全進(jìn)全出”制進(jìn)行飼養(yǎng)，大小雞飼養(yǎng)于同一雞舍，僅用木板隔開，飼養(yǎng)管理和環(huán)境衛(wèi)生比較差。三是制定合理的免疫接種程序。我國一直采用疫苗免疫為主。IBV 具有超過30 種的血清型，不同血清型之間僅有部分或沒有交叉免疫作用[5]。因IBV 變異快，所以在接種疫苗時(shí)要先了解當(dāng)?shù)亓餍械腎BV 血清型，避免使用其他疫苗而達(dá)不到免疫預(yù)防效果。

此外，隨著中藥在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用，該病可采取中西醫(yī)結(jié)合治療。馮靜波等[6]用麻杏石甘口服液防治雞傳染性支氣管炎，取得了97.22%的臨床療效。此外，李曉等[7]用板藍(lán)根多糖，閆延華等[8]用中藥復(fù)方板青可溶性粉也取得了對IB 較好的預(yù)防和治療作用。